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猪囊尾蚴病重组DNA疫苗pcDNA3．1-TSO45W在小鼠体内诱导的体液免疫效应

中国病原生物学杂志 2014年第3期9卷 242-244,248页

作者：王媛媛杨小迪孙新陶志勇常雪莲王小莉方强夏惠蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233030

目的观察基于六钩蚴期的猪囊尾蚴病基因疫苗TS045W诱导的小鼠体液免疫应答。方法碱裂解法大量制备重组质粒pcDNA3．1TS045W及对照质粒pcDNA3．1。将45只雌性昆明小鼠（4～6周）随机分为3组，每组15只。A组（生理盐水组）：每只小鼠肌肉... 详细信息

目的观察基于六钩蚴期的猪囊尾蚴病基因疫苗TS045W诱导的小鼠体液免疫应答。方法碱裂解法大量制备重组质粒pcDNA3．1TS045W及对照质粒pcDNA3．1。将45只雌性昆明小鼠（4～6周）随机分为3组，每组15只。A组（生理盐水组）：每只小鼠肌肉注射生理盐水100ul；B组（空质粒pcDNA3．1对照组）：每只小鼠肌肉注射空质粒l。0扯g；C组（重组质粒pcDNA3．1-TSO45W组）：每只小鼠肌肉注射重组质粒100肛g。分别于免疫后2、4、6、8、10周以ELISA方法检测小鼠血清免疫球蛋白IgG，IgM及IgA含量。结果pcDNA3．1-TSO45—4B免疫组小鼠血清IgG、IgM、IgA均于第4周开始升高，分别为（17．36±1．85）μg／ml、（9．25±1．78）μg／ml和（9．41±0．88）μg／ml，并分别于第8、第6、第8周达到最高，含量分别为（24．26±2．52）μg／ml、（10．69±0．52）μg／ml和（11．22±1．23）μg／ml，与空质粒对照组（B组）和生理盐水对照组（A组）比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论猪囊尾蚴保护性抗原TSO45WDNA疫苗能在小鼠体内诱导体液免疫效应。

关键词：猪囊尾蚴 pcDNA 3 1-TS045W 疫苗体液免疫

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金丝桃素对急性弓形虫感染小鼠脾脏CD4^+和CD8^+T淋巴细胞亚群的影响

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中国病原生物学杂志 2014年第12期9卷 1091-1093,1097页

作者：王旗杨小迪薛洪宝陈兴智崔洁陶莉李倩苏胖胖李江艳胡守锋孙新蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233030

目的观察金丝桃素对急性弓形虫感染小鼠脾脏CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群的影响。方法将40只昆明种雌性小鼠随机分为4组:空白对照组(A组)、弓形虫感染组(B组)、金丝桃素对照组(C组)和金丝桃素治疗组(D组),每组各10只小鼠。除A组和C组外,B、... 详细信息

目的观察金丝桃素对急性弓形虫感染小鼠脾脏CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群的影响。方法将40只昆明种雌性小鼠随机分为4组:空白对照组(A组)、弓形虫感染组(B组)、金丝桃素对照组(C组)和金丝桃素治疗组(D组),每组各10只小鼠。除A组和C组外,B、D两组每组小鼠腹腔接种RH株弓形虫速殖子1×103个,建立急性弓形虫感染动物模型。C、D组于感染12h后腹腔注射给药,A、B组同时进行生理盐水腹腔注射,连续7d后,用流式细胞仪检测小鼠脾脏中CD4+、CD8+T淋巴细胞水平。结果C组和D组CD4+T细胞百分率分别为20.57±1.76和23.33±1.82,CD4+与CD8+T细胞比值分别为2.04±0.40和2.29±0.65,A、B组CD4+T百分率及CD4+/CD8+值分别为12.13±2.35、15.96±2.71和1.35±0.30、0.77±0.92,差异有统计学意义(P<0.01);A、B、C、D组CD8+T细胞百分率分别为8.95±0.40、20.74±1.50、10.42±2.43和10.86±3.18,差异有统计学意义(P<0.01)。结论金丝桃素可显著改善急性弓形虫感染小鼠的细胞免疫功能,增强小鼠抗弓形虫感染的能力。

关键词：金丝桃素弓形虫淋巴细胞

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The decreased Vβ8.2T-cells in neonatal rats exposed prenatally to Staphylococcal enterotoxin B are further deleted by restimulation in in vitro cultured thymus

The decreased Vβ8.2T-cells in neonatal rats exposed prenata...

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2015年中国微生物学会学术年会

作者：管俊昌朱翔张涛杨文选蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室

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结核杆菌全菌裂解物和全脂质抗原对人外周血单个核细胞的作用

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免疫学杂志 2014年第6期30卷 483-487页

作者：张茜金亮李柏青沙泉安徽医科大学免疫教研室及过敏与免疫研究中心合肥230032 蚌埠医学院免疫学教研室安徽省感染与免疫重点实验室 233030

目的观察结核杆菌全菌裂解物和全脂质抗原对人外周血单个核细胞(PBMC)活化和增殖的作用。方法健康成人PBMC(1×106/ml)分别加结核杆菌全菌裂解物(10μg/ml)或全脂质(10μg/ml)进行刺激,同时给予重组人白介素-2(rhIL-2,50 U/ml)维持... 详细信息

目的观察结核杆菌全菌裂解物和全脂质抗原对人外周血单个核细胞(PBMC)活化和增殖的作用。方法健康成人PBMC(1×106/ml)分别加结核杆菌全菌裂解物(10μg/ml)或全脂质(10μg/ml)进行刺激,同时给予重组人白介素-2(rhIL-2,50 U/ml)维持细胞增殖,另外设仅加rhIL-2的对照组,培养至第6、9、12天,收集培养扩增细胞,流式细胞术检测T细胞以及不同亚群的增殖情况和IFN-γ的产生。结果 2组抗原均能刺激PBMC中T细胞的增殖和活化,第9天时反应最为明显,与对照组相比,全菌裂解物组CD8+T细胞比例降低而CD4-CD8-T细胞比例明显增高;全脂质组CD4+T细胞以及CD4+CD8+T细胞比例增高,差异有统计学意义(P<0.05)。培养至第12天,对分泌IFN-γ的细胞亚群分析,全菌裂解物组与全脂质CD8+T细胞所占比例均高于其相应的rhIL-2对照组(P<0.05);全菌裂解物组CD8-T细胞所占比例低于其相应对照组(P<0.05),而全脂质组高于其相应对照组(P<0.05)。结论结核杆菌全脂质抗原与全菌裂解物一样,能激活特异性免疫反应,具有潜在的疫苗组分可能性。

关键词：结核分枝杆菌 T淋巴细胞亚群脂类

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乙醛脱氢酶1在胃癌组织中的表达及与幽门螺杆菌L型感染的关系

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华中科技大学学报（医学版） 2014年第6期43卷 648-652页

作者：赵艳金鑫于东红钱军蚌埠医学院第一附属医院临床病理科蚌埠医学院病理学教研室安徽省感染与免疫重点实验室蚌埠233004 蚌埠医学院第一附属医院肿瘤外三科蚌埠233004

目的探讨乙醛脱氢酶1(ALDH1)在人胃癌组织中的表达与幽门螺杆菌L型(Hp-L型)感染的关系。方法应用免疫组化Elivision法和原位杂交方法检测126例胃癌及30例正常对照胃组织ALDH1的表达,应用革兰染色和免疫组化法检测上述组织的Hp-L型感染... 详细信息

目的探讨乙醛脱氢酶1(ALDH1)在人胃癌组织中的表达与幽门螺杆菌L型(Hp-L型)感染的关系。方法应用免疫组化Elivision法和原位杂交方法检测126例胃癌及30例正常对照胃组织ALDH1的表达,应用革兰染色和免疫组化法检测上述组织的Hp-L型感染情况。结果胃癌组织中ALDH1蛋白和mRNA的表达阳性率分别为53.2%和56.3%,与对照组之间差异具有统计学意义(均P<0.01),ALDH1蛋白的表达与肿瘤的临床TNM分期和淋巴结转移密切相关(均P<0.01)。胃癌及对照组中Hp-L型的阳性率分别为67.5%和23.3%,差异具有统计学意义(P<0.01)。胃癌组Hp-L型感染阳性者的ALDH1蛋白表达阳性率高于Hp-L型感染阴性组(P<0.05)。ALDH1蛋白的表达与Hp-L型感染呈正相关(rs=0.220,P<0.05)。ALDH1阳性患者5年生存率明显低于ALDH1阴性患者(P<0.05)。结论 ALDH1在胃癌组织中高表达,可作为评价胃癌预后的指标,Hp-L型感染可促进其表达。

关键词：胃肿瘤乙醛脱氢酶1 幽门螺杆菌L型肿瘤干细胞

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胃癌中幽门螺杆菌L型感染和淋巴管生成因子与淋巴结转移的关系

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华中科技大学学报（医学版） 2014年第1期43卷 32-38页

作者：蔡兆根于东红吴海波冯振中赵艳蚌埠医学院第一附属医院临床病理科蚌埠医学院病理学教研室安徽省感染与免疫重点实验室蚌埠233003 安徽医科大学附属省立医院临床病理科合肥230001

目的研究胃癌组织中血管内皮生长因子-C、-D、-A(VEGF-C、-D、-A)及成纤维细胞生长因子-2(FGF-2)的表达和幽门螺杆菌L型(helicobacter pylori L-form,Hp-L型)感染与淋巴结转移的关系。方法应用革兰染色和免疫组化SP法检测112例胃癌组织... 详细信息

目的研究胃癌组织中血管内皮生长因子-C、-D、-A(VEGF-C、-D、-A)及成纤维细胞生长因子-2(FGF-2)的表达和幽门螺杆菌L型(helicobacter pylori L-form,Hp-L型)感染与淋巴结转移的关系。方法应用革兰染色和免疫组化SP法检测112例胃癌组织和30例对照组中的Hp-L型感染情况,同时免疫组化SP法检测上述组织中VEGF-C、-D、-A及FGF-2的表达情况及D2-40标记的微淋巴管密度值(LVD值),分析Hp-L型和淋巴管生成因子表达的关系及与LVD值的关系。结果胃癌组织中革兰染色Hp-L型检出率为65%,免疫组化Hp-L型抗原表达率为62%。胃癌组的Hp-L型阳性率、淋巴管生成因子阳性率及LVD值均高于对照组(均P<0.01);胃癌组中Hp-L阳性组的LVD值和VEGF-C、-D的表达阳性率均高于Hp-L阴性组(均P<0.05);VEGF-C、-D阳性组的LVD值高于阴性组(均P<0.05)。多因素分析发现,TNM分期和LVD值与胃癌淋巴结转移密切相关(均P<0.05)。结论 Hp-L型感染和淋巴管生成因子与胃癌的发生、发展相关,VEGF-C、-D与胃癌淋巴管生成关系密切,Hp-L型感染在肿瘤淋巴管生成和淋巴结转移方面具有一定作用,两方面因素共同促进胃癌的侵袭和转移。

关键词：胃癌幽门螺杆菌L型微淋巴管密度淋巴管生成因子

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COX-2选择性抑制剂塞来昔布联合PPAR-γ配体罗格列酮治疗子宫内膜癌的实验研究

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华中科技大学学报（医学版） 2014年第6期43卷 619-625页

作者：冯振中武世伍李楠蔡兆根吕秀红陈嘉薇蚌埠医学院第一附属医院病理科蚌埠医学院病理学教研室安徽省感染与免疫重点实验室上海交通大学附属上海市第一人民医院病理科蚌埠233004

目的研究环氧合酶-2(COX-2)和过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)蛋白在子宫内膜癌中的表达和临床意义,探讨COX-2选择性抑制剂塞来昔布联合PPAR-γ配体罗格列酮共同应用对于肿瘤细胞的干预效果。方法采用免疫组化方法,结合组织芯... 详细信息

目的研究环氧合酶-2(COX-2)和过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)蛋白在子宫内膜癌中的表达和临床意义,探讨COX-2选择性抑制剂塞来昔布联合PPAR-γ配体罗格列酮共同应用对于肿瘤细胞的干预效果。方法采用免疫组化方法,结合组织芯片技术,检测124例子宫内膜样腺癌、35例正常子宫内膜中COX-2和PPAR-γ蛋白的表达水平,结合临床病理因素进行分析。联合应用塞来昔布和罗格列酮处理RL95-2子宫内膜癌细胞,观察其对于肿瘤细胞生物学行为的影响和协同抑瘤作用。结果在子宫内膜样腺癌中,COX-2蛋白表达明显升高,PPAR-γ蛋白表达相对降低,两者具有负性相关关系。塞来昔布和罗格列酮可以有效抑制RL95-2子宫内膜癌细胞的增殖、侵袭、转移能力,联合应用抑制肿瘤的效果明显高于单独药物组。结论 COX-2的高表达和PPAR-γ的低表达与子宫内膜癌的发生、发展有密切关系,以COX-2和PPAR-γ为共同靶点,有望成为临床子宫内膜癌预防和治疗的重要手段和有效途径。

关键词：子宫内膜癌环氧合酶-2 过氧化物酶体增殖物激活受体-γ 塞来昔布罗格列酮

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幽门螺杆菌对胃黏膜上皮细胞自噬和凋亡的影响

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蚌埠医学院学报 2014年第6期39卷 705-710页

作者：吕杰李柏青刘勇马丽娜刘婷婷刘丛森蚌埠医学院微生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院免疫学教研室安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233030

目的：探讨幽门螺杆菌（Hp）对胃黏膜上皮细胞（GES-1）自噬和凋亡的影响。方法：Hp与GES-1体外共培养，同时设立雷帕霉素（RAPA）、3-甲基腺嘌呤（3-MA）干预组及空白对照组，于2、4、6、12及24 h终止感染，通过免疫蛋白印迹、荧光染... 详细信息

目的：探讨幽门螺杆菌（Hp）对胃黏膜上皮细胞（GES-1）自噬和凋亡的影响。方法：Hp与GES-1体外共培养，同时设立雷帕霉素（RAPA）、3-甲基腺嘌呤（3-MA）干预组及空白对照组，于2、4、6、12及24 h终止感染，通过免疫蛋白印迹、荧光染色、透射电镜、流式细胞术及细胞内活菌计数等方法观察Hp对GES-1自噬和凋亡的影响。结果：Hp＋GES-1组在2 h出现自噬标志蛋白LC3-Ⅱ表达及细胞内荧光自噬颗粒，透射电镜观察到细胞内出现双层或多层膜包裹的自噬小体样结构，细胞自噬在4 h达高峰，感染中后期逐渐减弱并消失；RAPA＋Hp＋GES-1组细胞自噬程度进一步增强，细胞凋亡率及细胞内活菌数均降低（P〈0.05-P〈0.01）；3-MA＋Hp＋GES-1组细胞自噬强度显著降低，而其细胞凋亡率和细胞内活菌数均明显升高（P 〈0.01）。结论：Hp可在感染早期诱导GES-1自噬；RAPA和3-MA可增强或降低自噬发生程度，从而减轻或促进细胞损伤。

关键词：幽门螺杆菌自噬细胞凋亡雷帕霉素 3-甲基腺嘌呤

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结核分枝杆菌H37Ra株fbpC基因的克隆与表达

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蚌埠医学院学报 2014年第2期39卷 145-147页

作者：马志刚钱中清蚌埠医学院免疫学教研室感染与免疫安徽省重点实验室安徽蚌埠233030

目的:探讨克隆结核杆菌H37Ra菌株抗原fbpC基因及在大肠埃希菌BL21(DE3)中的表达。方法:通过聚合酶链反应扩增人结核杆菌弱毒性菌株H37Ra的编码基因fbpC,并定向克隆到原核表达载体pET-28a,通过酶切、聚合酶链反应和测序鉴定重组质粒,转... 详细信息

目的:探讨克隆结核杆菌H37Ra菌株抗原fbpC基因及在大肠埃希菌BL21(DE3)中的表达。方法:通过聚合酶链反应扩增人结核杆菌弱毒性菌株H37Ra的编码基因fbpC,并定向克隆到原核表达载体pET-28a,通过酶切、聚合酶链反应和测序鉴定重组质粒,转化大肠埃希菌BL21(DE3)中,由异丙基硫代半乳糖苷诱导表达,十二烷基磺酸纳-聚丙烯酰胺和Western blot鉴定表达的重组蛋白。结果:成功构建了pET28a-fbpC重组质粒;在大肠埃希菌中表达了相对分子量约33 000的重组蛋白。结论:重组质粒pET28a-fbpC成功构建和表达,为fbpc反应原性、免疫诊断价值的研究提供参考。

关键词：结核分枝杆菌克隆表达诱导

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肥大细胞在免疫反应中的调节作用

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安徽医药 2014年第7期18卷 1201-1205页

作者：陶象男宋传旺蚌埠医学院免疫学教研室安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233030

肥大细胞(MC)起源于造血干细胞,包括黏膜MC和结缔组织MC两个亚群。机体中MC不仅可作为效应细胞,也可作为免疫调节细胞起作用。它可通过MHC分子对抗原进行加工、递呈,也可产生化学因子募集T细胞。在免疫反应中,MC一方面通过直接接触或产... 详细信息

肥大细胞(MC)起源于造血干细胞,包括黏膜MC和结缔组织MC两个亚群。机体中MC不仅可作为效应细胞,也可作为免疫调节细胞起作用。它可通过MHC分子对抗原进行加工、递呈,也可产生化学因子募集T细胞。在免疫反应中,MC一方面通过直接接触或产生的TNF-α、蛋白酶类正向调节免疫应答,另一方面也可通过分泌IL-10等分子负向调节免疫应答。

关键词：肥大细胞免疫调节 TNF-α IL-10

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