检索结果-内蒙古大学图书馆

微生物与感染 2014年第1期9卷 61-64页

作者：林娜刘勇蚌埠医学院微生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室蚌埠233030

自然杀伤T细胞(NKT细胞)是一类与自然杀伤细胞具有共同表面标记的T细胞,可识别由CD1d呈递的糖脂类抗原。活化后的NKT细胞通过分泌多种细胞因子和趋化因子,增强树突细胞(DC)、T细胞、B细胞等多种免疫细胞的功能,在非特异与特异性免疫之... 详细信息

自然杀伤T细胞(NKT细胞)是一类与自然杀伤细胞具有共同表面标记的T细胞,可识别由CD1d呈递的糖脂类抗原。活化后的NKT细胞通过分泌多种细胞因子和趋化因子,增强树突细胞(DC)、T细胞、B细胞等多种免疫细胞的功能,在非特异与特异性免疫之间起桥梁作用。近年来研究发现,NKT细胞不仅在抗细菌感染中发挥重要作用,在抗病毒及抗寄生虫感染中也发挥一定作用。

关键词：自然杀伤T细胞 CD1d 抗感染免疫

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基于蛋白重复序列及线性B细胞表位预测筛选间日疟原虫特异性抗原肽

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中国血吸虫病防治杂志 2014年第3期26卷 292-295,310页

作者：陶志勇徐岁王媛媛方强夏惠高琪蚌埠医学院病原生物学教研室蚌埠233030 安徽省感染与免疫重点实验室江苏省血吸虫病防治研究所卫生部寄生虫病预防与控制技术重点实验室江苏省寄生虫分子生物学重点实验室

目的建立一种基于蛋白重复序列及线性B细胞表位预测筛选间日疟原虫(Plasmodium vivax,***)特异性抗原肽的方法。方法以PlasmoDB数据为基础,建立间日疟原虫蛋白序列数据库。编写重复序列查找软件,逐一检索16 aa多肽在全部蛋白序列中的重... 详细信息

目的建立一种基于蛋白重复序列及线性B细胞表位预测筛选间日疟原虫(Plasmodium vivax,***)特异性抗原肽的方法。方法以PlasmoDB数据为基础,建立间日疟原虫蛋白序列数据库。编写重复序列查找软件,逐一检索16 aa多肽在全部蛋白序列中的重复次数,统计出重复较高者进行连续B细胞表位预测,优选具有间日疟原虫特异性的肽进行合成,偶联钥孔戚血蓝蛋白(Keyhole limpet hemocyanin,KLH)后免疫小鼠,并检测抗体滴度。结果通过软件分析间日疟原虫全部5 432个蛋白序列中的16肽的重复次数,利用BcePred网站预测其中重复较高的1 000个序列,获得22个候选肽,经聚类分析和相似性比较,优选到5个潜在特异性肽,人工合成并偶联KLH后免疫小鼠诱生的抗体滴度均超过1:9 000。结论建立了一种基于蛋白重复序列联合线性B细胞表位预测筛选间日疟原虫特异性抗原肽的方法,得到的5个肽均能诱导小鼠产生高滴度抗体。

关键词：间日疟原虫疟疾重复蛋白序列抗原表位

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旋毛虫感染诱导的Th免疫偏移对小鼠胶原性关节炎的影响

旋毛虫感染诱导的Th免疫偏移对小鼠胶原性关节炎的影响

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第九届全国免疫学学术大会

作者：朱伟李江艳李倩王小莉夏惠方强蚌埠医学院病原生物学教研室感染与免疫安徽省重点实验室

研究背景:类风湿关节炎（Rheumatoid Arthritis,RA）是一种常见的慢性自身免疫性疾病,具有高发病率和高致残率。目前认为RA是由于Th1/Th2和Th17/Treg免疫失衡导致自身免疫系统紊乱所致,纠正免疫失衡可以治疗或预防RA。近年发现旋毛虫感... 详细信息

研究背景:类风湿关节炎（Rheumatoid Arthritis,RA）是一种常见的慢性自身免疫性疾病,具有高发病率和高致残率。目前认为RA是由于Th1/Th2和Th17/Treg免疫失衡导致自身免疫系统紊乱所致,纠正免疫失衡可以治疗或预防RA。近年发现旋毛虫感染能激发宿主强烈的Th2优势应答,从而降低部分自身免疫性疾病的发生、发展。我们拟探讨旋毛虫感染是否可能通过免疫调节对RA发挥影响。目的:观察旋毛虫感染对CIA模型小鼠的疾病发生、病情的影响并探讨旋毛虫感染对CIA模型小鼠可能的免疫调控机制。方法:建立小鼠胶原性关节炎（CIA）模型,以旋毛虫肌幼虫分别于CIA造模前2W、造模同时、造模后2W感染小鼠。观察小鼠关节炎的发病情况,判断旋毛虫不同时期感染对CIA小鼠的影响。首次CⅡ免疫6W后处死小鼠,取小鼠足爪和膝关节部位进行病理切片,观察其不同组间病理变化。ELISA法检测小鼠血清CⅡ胶原特异IgG及其亚类抗体IgG1、IgG2a水平。H-TdR掺人法检测脾淋巴细胞增殖反应。流式细胞术检测小鼠脾淋巴细胞中Th1、Th2、Th17、Terg细胞亚群比例。结果:与CIA模型对照组相比较,CIA造模前2W感染旋毛虫组,能显著减轻CIA小鼠关节炎的病情,减轻病理损伤;血清中CⅡ胶原特异性tgG、IgG2a水平显著降低,IgG1水平升高。脾淋巴细胞对ConA多克隆刺激及CⅡ抗原特异性刺激诱发的增值反应明显降低。CIA造模同时感染旋毛虫组对病情和发病率,脾淋巴细胞增殖以及血清CⅡ胶原IgG及其亚类未有明显影响。CIA造模后2W感染旋毛虫组则加重了关节炎病情及病理损伤,但对脾淋巴细胞增殖和血清CⅡ胶原IgG及其亚类未有明显影响。与CIA模型对照组相比,CIA造模前2W感染旋毛虫组IFN-γCD4T和IL-17CD4T细胞亚群比例显著降低,IL-4CD4T和Treg细胞亚群比例显著升高。CIA造模同时感染旋毛虫组及CIA造模后2W感染旋毛虫组的IFN-γCD4T、IL-17CD4T、IL-4CD4T和Treg细胞亚群比例较CIA模型对照组无显著性差异。结论:预先感染旋毛虫能够减轻CIA小鼠的临床症状及病理损伤,这有赖于造模前预先感染旋毛虫启动Th2、Treg优势应答来抑制异种Ⅱ型胶原诱发的致病性Th1和Th17应答。

关键词：旋毛虫免疫调节 Th细胞胶原性关节炎

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旋毛虫感染诱导的Th免疫偏移对小鼠胶原性关节炎的影响

旋毛虫感染诱导的Th免疫偏移对小鼠胶原性关节炎的影响

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中国免疫学会第九届全国免疫学学术大会

作者：朱伟李江艳李倩王小莉夏惠方强蚌埠医学院病原生物学教研室感染与免疫安徽省重点实验室

研究背景:类风湿关节炎(Rheumatoid Arthritis,RA)是一种常见的慢性自身免疫性疾病,具有高发病率和高致残率.目前认为RA是由于Th1/Th2和Th17/Treg免疫失衡导致自身免疫系统紊乱所致,纠正免疫失衡可以治疗或预防RA.近年发现旋毛虫感染能... 详细信息

研究背景:类风湿关节炎(Rheumatoid Arthritis,RA)是一种常见的慢性自身免疫性疾病,具有高发病率和高致残率.目前认为RA是由于Th1/Th2和Th17/Treg免疫失衡导致自身免疫系统紊乱所致,纠正免疫失衡可以治疗或预防RA.近年发现旋毛虫感染能激发宿主强烈的Th2优势应答,从而降低部分自身免疫性疾病的发生、发展.我们拟探讨旋毛虫感染是否可能通过免疫调节对RA发挥影响.目的:观察旋毛虫感染对CIA模型小鼠的疾病发生、病情的影响并探讨旋毛虫感染对CIA模型小鼠可能的免疫调控机制.

关键词：旋毛虫免疫调节 Th细胞胶原性关节炎

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结核病DNA疫苗pVAX1/ESAT-6的构建、鉴定及免疫效应评价

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南方医科大学学报 2013年第7期33卷 945-950页

作者：王雪梅王英薛玉芹陈勇陶志勇夏惠唐洁方强蚌埠医学院病原生物学教研室蚌埠医学院安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院蚌埠医学院免疫学教研室安徽蚌埠233030

目的构建结核病DNA疫苗pVAX1/ESAT-6并探讨其诱导的免疫效应。方法将扩增自结核杆菌基因组的ESAT-6基因装入pVAX1载体构建pVAX1/ESAT-6重组质粒;经酶切、测序鉴定后,利用阳离子聚合物介导将重组质粒pVAX1/ESAT-6转染Hela细胞,分别以RT-... 详细信息

目的构建结核病DNA疫苗pVAX1/ESAT-6并探讨其诱导的免疫效应。方法将扩增自结核杆菌基因组的ESAT-6基因装入pVAX1载体构建pVAX1/ESAT-6重组质粒;经酶切、测序鉴定后,利用阳离子聚合物介导将重组质粒pVAX1/ESAT-6转染Hela细胞,分别以RT-PCR法检测ESAT-6 mRNA的表达、间接免疫荧光法检测ESAT-6蛋白表达。重组质粒经体内电转染免疫小鼠后,采用ELISA法测定小鼠血清中IFN-γ及抗ESAT-6特异性抗体IgG的水平;流式细胞术检测小鼠淋巴细胞增殖水平;ELISPOT检测产生IFN-γ的淋巴细胞频数。结果构建的重组质粒pVAX1/ESAT-6经双酶切于3000 bp和300 bp处各见1条带,测序结果显示插入序列与ESAT-6基因序列无差异。重组质粒转染Hela细胞后,RT-PCR产物经琼脂糖凝胶电泳于约300 bp处见目的条带,间接免疫荧光检测显示特异性绿色荧光。重组质粒免疫小鼠后,血清中抗ESAT-6特异性抗体IgG水平较对照组(空质粒组和生理盐水对照组)明显升高;血清中IFN-γ水平、小鼠脾淋巴细胞增殖水平及产生IFN-γ的淋巴细胞数明显均高于对照组(空质粒组和生理盐水对照组)。结论成功构建了结核病DNA疫苗pVAX1/ESAT-6,该疫苗可有效诱导小鼠产生特异性细胞免疫和体液免疫效应。

关键词：结核分枝杆菌 ESAT-6 DNA疫苗细胞免疫体液免疫

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活动性肺结核病人外周血中分泌IL-22和IL-17的γ δ T细胞亚群变化的探讨

活动性肺结核病人外周血中分泌IL-22和IL-17的γ δ T细胞亚群变...

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第一次全国中西医结合检验医学学术会议暨中国中西医结合学会检验医学专业委员会成立大会

作者：梁华杨军平李柏青江西中医药大学附属医院检验科蚌埠医学院免疫学教研室安徽省感染与免疫重点实验室

目的:检测结核病患者和健康人外周血中分泌IL-22和IL-17的γδT细胞亚群比例的变化,以探讨分泌不同细胞因子的γδT细胞亚群在抗结核感染免疫反应中的作用;方法:取肝素抗凝全血,加RPMI1640培养液等体积混匀,依次加入佛波醇酯和离子霉素... 详细信息

目的:检测结核病患者和健康人外周血中分泌IL-22和IL-17的γδT细胞亚群比例的变化,以探讨分泌不同细胞因子的γδT细胞亚群在抗结核感染免疫反应中的作用;方法:取肝素抗凝全血,加RPMI1640培养液等体积混匀,依次加入佛波醇酯和离子霉素,37℃,5%C02培养2h,再加入蛋白转运抑制剂莫能菌素继续培养4h,收集细胞后先加抗人CD3-APC,和TCR-γδ-TC荧光抗体进行表染,4℃避光反应20分钟,经溶血、洗涤、固定后,0.1%皂素透膜10分钟,最后加入抗人IL-22-PE和IL-17-FITC荧光抗体进行胞染,4℃30分钟,洗涤后2%PFA重悬细胞,应用流式细胞仪和CellQuest软件检测和分析结果,同时设置同型对照;结果:健康对照组(n=δ)分泌IL-22和IL-17的γδT细胞在所有γδT细胞中的比例分别为(1.50±0.56)%和(0.25±0.19)%,结核病患者组(n=15)分泌IL-22和IL-17的γδT细胞在所有γδT细胞中的比例分别为(3.09±1.74)%和(0.72±0.51)%,后者均明显高于前者(p<0.05);.而共分泌IL-22和IL-17的γδT细胞比例在健康对照组为(0.31±0.20)%,在结核病患者组为(0.44±0.33)%,二者比较差异无统计学意义(p>0.05);结论:γδT细胞中存在单独分泌IL-22、IL-17和共分泌IL-22和IL-17的不同细胞亚群,活动性肺结核病患者外周血中分泌IL-22的γδT细胞比例增高,其增高并非与分泌IL-17的γδT细胞比例增高引起有关。

关键词： γ δ T细胞 IL-22 IL-17 肺结核流式细胞术

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α-毒素诱导的脐静脉内皮细胞凋亡在金葡菌L型垂直感染中的作用(英文)

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南方医科大学学报 2013年第5期33卷 619-624页

作者：管俊昌朱翔余峰玲杨文选刘婷婷张涛林娜刘勇刘从森蚌埠医学院安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院病原生物学教研室安徽蚌埠233030

目的确定α-毒素诱导脐静脉内皮细胞(HUV-EC-C)的凋亡在金葡菌L型垂直感染中的作用。方法在培养的HUV-EC-C细胞中加入不同浓度(0、10、30、90、270 ng/ml)的金葡菌α-毒素,处理不同时间(0、2、4、6、8 h)后经Annexin V-PI染色,流式细胞... 详细信息

目的确定α-毒素诱导脐静脉内皮细胞(HUV-EC-C)的凋亡在金葡菌L型垂直感染中的作用。方法在培养的HUV-EC-C细胞中加入不同浓度(0、10、30、90、270 ng/ml)的金葡菌α-毒素,处理不同时间(0、2、4、6、8 h)后经Annexin V-PI染色,流式细胞仪检测HUV-ECC细胞的凋亡率。通过ELISA检测α肿瘤坏死因子(TNF-α)、caspase-3与caspase-8的表达量,并观察加入TNF-α中和抗体、caspases-3抑制剂zDEVD-FMK、caspase-8抑制剂zIETD-fmk对α-毒素诱导HUV-EC-C细胞凋亡的影响。结果α-毒素能够诱导HUV-EC-C细胞凋亡并表现为时间、剂量依赖性,明显增加HUV-EC-C细胞中TNF-α、caspase-3与caspase-8的表达;在加入TNF-α中和抗体、zDEVD-FMK、zIETD-fmk后可部分阻断α-毒素能够诱导的HUV-EC-C细胞凋亡。结论α-毒素通过TNF-α及caspase-8介导的外源性死亡途径诱导HUV-EC-C细胞凋亡,表明α-毒素诱导内皮细胞凋亡是金葡菌L型垂直感染影响胎儿发育的主要机制之一。

关键词：脐静脉内皮细胞 α-毒素垂直感染金葡菌 L型

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膀胱尿路上皮癌中CD133、CD82/KAI1的表达及其与血管生成拟态的关系

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南方医科大学学报 2013年第9期33卷 1336-1340页

作者：俞岚武世伍周蕾宋文庆王丹娜蚌埠医学院第一附属医院临床病理科//蚌埠医学院病理学教研室//安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233030

目的研究膀胱尿路上皮癌中CD133、CD82/KAI1蛋白与膀胱尿路上皮癌患者各临床病理因素之间的关系。方法采用免疫组织化学ElivisionTMplus法和特殊组织化学法检测90例膀胱尿路上皮癌和20例正常膀胱粘膜中CD133、CD82/KAI1的表达和血管生... 详细信息

目的研究膀胱尿路上皮癌中CD133、CD82/KAI1蛋白与膀胱尿路上皮癌患者各临床病理因素之间的关系。方法采用免疫组织化学ElivisionTMplus法和特殊组织化学法检测90例膀胱尿路上皮癌和20例正常膀胱粘膜中CD133、CD82/KAI1的表达和血管生成拟态(VM)的形成情况。结果在正常膀胱粘膜组织中CD133、CD82/KAI1蛋白的表达阳性率和VM检出率分别为0%、90.0%和0%,在尿路上皮癌组织中三者表达分别为65.6%、31.1%和31.1%,差异均有显著性(P<0.01)。膀胱尿路上皮癌中,CD133、CD82/KAI1蛋白阳性表达以及VM的形成与患者的性别、年龄、肿瘤的数量均无相关性(P>0.05);而与肿瘤分化程度、临床病理分期以及复发与否具有相关性(P<0.01)。癌组织中,CD82/KAI1的表达与VM的形成及CD133的表达成负相关性(r=-0.452,-0.776,P<0.01-0.05),CD133的表达与VM的形成呈正相关(r=0.487,P<0.05)。结论 CD133、CD82/KAI1参与膀胱尿路上皮癌中VM形成,并且CD133、CD82/KAI1以及VM共同参与尿路上皮癌的侵袭及复发。

关键词：膀胱尿路上皮癌 CD133 CD82/KAI1 血管生成拟态免疫组织化学

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结核分枝杆菌蛋白抗原刺激人γδT细胞的活性单位的计算方法

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免疫学杂志 2013年第4期29卷 341-345页

作者：孙悝陈勇徐志庆陈立李柏青蚌埠医学院免疫学教研室安徽省感染与免疫重点实验室 233030

目的以检测和计算结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)蛋白抗原激活人γδT细胞增殖的活性单位为指标,比较不同提取分离方法制备的Mtb抗原制剂激活人γδT细胞的活性效价。方法培养的Mtb-H37Ra菌株通过高温和超声方法处理,分... 详细信息

目的以检测和计算结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)蛋白抗原激活人γδT细胞增殖的活性单位为指标,比较不同提取分离方法制备的Mtb抗原制剂激活人γδT细胞的活性效价。方法培养的Mtb-H37Ra菌株通过高温和超声方法处理,分别获取Mtb耐热抗原(Mtb-HAg)和超声处理抗原(Mtb-SoAg),采用超滤离心管(3 K,10 K,30 K)和快速液相蛋白层析(FPLC)分组和分离,获取不同相对分子质量组分的抗原。采集健康成年人外周血分离获取PBMC,加入不同质量浓度梯度的Mtb蛋白抗原或其分离组分,并加IL-2培养12 d后荧光抗体染色,流式细胞仪检测和分析扩增T细胞中γδT细胞的比例,以扩增γδT细胞最高比例的50%(EC50)所对应的质量浓度计算为1个活性单位。结果用活性单位计算法分析发现,某批次的Mtb-HAg(591μg/ml)刺激γδT细胞扩增的EC50为1.4μg/ml,计算其活性单位为0.71 U/μg;某批次低分子Mtb-SoAg(3 K～10 K)(221μg/ml)的EC50为0.8μg/ml,其活性单位为1.25 U/μg。结论通过比较Mtb蛋白抗原不同批次及其不同组分在不同质量浓度下刺激γδT细胞扩增数量的活性,可以计算获得相应的活性单位,为检测Mtb蛋白抗原制剂刺激γδT细胞增殖活性建立了标准化的计算方法。

关键词：结核分枝杆菌 γδT细胞耐热抗原超声抗原活性单位

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间日疟原虫安徽地域株乳酸脱氢酶基因序列同源性分析

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2013年第2期31卷 148-150页

作者：胡明洁方强吴守伟汤必奎张静焦玉萌夏惠沈继龙蚌埠医学院遗传学教研室蚌埠233030 蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室蚌埠233030 安徽医科大学病原生物学教研室合肥230032

采集安徽省蚌埠市区、五河县、怀远县、蒙城县和利辛县2009-2010年的39例间日疟患者血样,分别提取DNA,PCR扩增间日疟原虫乳酸脱氢酶(PvLDH)基因,并克隆测序,以及Blast序列分析。结果显示,克隆的PvLDH基因片段为951 bp。序列分析发现,采... 详细信息

采集安徽省蚌埠市区、五河县、怀远县、蒙城县和利辛县2009-2010年的39例间日疟患者血样,分别提取DNA,PCR扩增间日疟原虫乳酸脱氢酶(PvLDH)基因,并克隆测序,以及Blast序列分析。结果显示,克隆的PvLDH基因片段为951 bp。序列分析发现,采自安徽地区的39例间日疟患者血样的PvLDH基因序列之间无差异(登录号为GU078391),与GenBank中其他地域株的PvLDH基因序列同源性均>99%,氨基酸序列仅分别与EJEU60134株和MIA061251株存在1个氨基酸的差异。

关键词：间日疟原虫乳酸脱氢酶同源性分析

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