检索结果-内蒙古大学图书馆

目的:探讨SD大鼠脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)前后外周血T淋巴细胞亚群的动态变化。方法:取22只健康SD大鼠(雌雄各半),采用NYU脊髓损伤仪制作重物坠落SCI模型。于SCI前、SCI后1、3、5、7和14 d采外周血,用流式细胞术检测外周血淋巴细胞中CD3+T、CD3+CD4+T和CD3+CD8+T细胞比例的变化。结果:SCI前与SCI后1、7和14 d CD3+CD8+T细胞比例均无明显变化(P>0.05),而SCI后第3、5 d均高于SCI前14 d(P<0.01)。SCI后1、3、5 d及7 d的CD3+T细胞、CD3+CD4+T细胞比例,以及CD3+CD4+/CD3+CD8+比值均明显低于SCI前(P<0.01)。在SCI后14 d,上述各T细胞亚群的比例均恢复到术前水平,两时间点之间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:SCI后,SD大鼠总T细胞和CD4+T细胞明显降低,CD3+CD4+/CD3+CD8+下降。提示SCI后的早期阶段,可能存在T细胞功能的异常。

关键词：脊髓损伤淋巴细胞亚群流式细胞术 SD大鼠

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LPS促进结核杆菌感染的THP-1细胞 ROS产生的机制研究

LPS促进结核杆菌感染的THP-1细胞 ROS产生的机制研究

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第八届全国免疫学学术大会

作者：何小燕钱中清蚌埠医学院免疫学教研室安徽省感染与免疫重点实验室

研究背景:结核分枝杆菌(Mtb)是结核病的病原体,可能通过TLR信号通路干扰或阻断巨噬细胞的激活,从而逃逸免疫系统的识别和杀伤。寻找纠正Mtb阻断巨噬细胞激活的调控措施,对结核病的治疗和防控具有重要价值。目的:探讨TLR激动剂LPS促进Mt... 详细信息

研究背景:结核分枝杆菌(Mtb)是结核病的病原体,可能通过TLR信号通路干扰或阻断巨噬细胞的激活,从而逃逸免疫系统的识别和杀伤。寻找纠正Mtb阻断巨噬细胞激活的调控措施,对结核病的治疗和防控具有重要价值。目的:探讨TLR激动剂LPS促进Mtb感染的巨噬细胞产生活性氧( ROS)及其调控机制。方法:用Mtb菌株H37 Ra感染经PMA刺激诱导分化的巨噬细胞的THP-1细胞(Mtb:THP-1=10:1),建立Mtb感染巨噬细胞模型。Mtb感染的巨噬细胞先加TLR4阻断性抗体(HTA125)或NADPH氧化酶抑制剂DPI(20μM),再以LPS(100ng/ml)刺激90min,经 ROS探针罗丹明123染色后,在流式细胞仪上检测THP-1细胞胞内 ROS产生的水平。结果:Mtb感染组巨噬细胞胞内 ROS的水平(16.62±2.86)较未感染组(19.77±3.55)明显降低(P<0.05,n=3);LPS刺激Mtb感染巨噬细胞组胞内 ROS水平(38.10±2.93),与无LPS刺激Mtb感染巨噬细胞组(16.62±2.86)比较明显升高(P<0.05,n=3);HTA125封闭TLR4受体后,再加LPS刺激Mtb感染巨噬细胞组,其 ROS水平(30.07±5.19),明显低于未加HTA125组(38.10±2.93)(P<0.05,n=3);DPI阻断NOX2 NADPH氧化酶后,再加LPS刺激的Mtb感染巨噬细胞组胞内 ROS水平(20.86±4.17),也明显低于未加DPI组(38.10±2.93)(P<0.05,n=3)。结论:TLR激动剂LPS可激活TLR4信号途径,经NOX2 NADPH氧化酶通路促进Mtb感染巨噬细胞产生 ROS。

关键词： THP-1 结核分枝杆菌 LPS 活性氧 NADPH氧化酶

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结核分枝杆菌抗原刺激人γδT细胞的活性单位的计算方法

结核分枝杆菌抗原刺激人γδT细胞的活性单位的计算方法

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第八届全国免疫学学术大会

作者：孙悝陈勇李柏青蚌埠医学院免疫学教研室安徽省感染与免疫重点实验室

研究背景:结核分枝杆菌(Mtb)抗原(Mtb-Ag)具有优势激活人γδT细胞增殖的作用。本实验室发现不同培养条件和不同制备方法所制备的不同批次的Mtb-Ag,在激活人γδT细胞增殖的活性方面有明显差异。目的:为了检测不同批次Mtb-Ag在激活人γ... 详细信息

研究背景:结核分枝杆菌(Mtb)抗原(Mtb-Ag)具有优势激活人γδT细胞增殖的作用。本实验室发现不同培养条件和不同制备方法所制备的不同批次的Mtb-Ag,在激活人γδT细胞增殖的活性方面有明显差异。目的:为了检测不同批次Mtb-Ag在激活人γδT细胞增殖活性的有效成分的浓度,本研究拟参照细胞因子活性单位的方法建立检测和计算Mtb-Ag制剂中激活人γδT细胞增殖的活性单位的方法。方法:培养Mtb-H37 Ra菌株4至6周后收集菌体,用高温和超声处理分别获取Mtb耐热抗原(Mtb-HAg)和超声处理抗原(Mtb-So Ag),并继而采用超滤离心管(3k和10K)和FPLC分组和分离,获取不同分子量组分的Mtb-HAg和Mtb-So Ag。采集健康成年人外周血分离获取PBMC,加入不同浓度梯度的Mtb-Ag或及其分离组分,并加IL-2培养12天后收集扩增细胞,加抗人TCRγδ荧光抗体染色,流式细胞仪检测和分析γδT细胞增殖后比例,以扩增γδT细胞最高比例的50%所对应的浓度计算为一个活性单位。结果:通过计算和比较不同浓度梯度的Mtb-HAg和Mtb-So Ag及其低分子组分的刺激人外周血γδT细胞的活性,发现Mtb-HAg和低分子Mtb-HAg(3-10K)对γδT细胞的活化差异无显著性,但在Mtb-So Ag中的低分子组分对γδT细胞的活化远远大于未分离的全菌体混合抗原。用活性单位计算法分析,某批次的Mtb-HAg(总蛋白590μg/ml)刺激扩增γδT细胞最高比例的50%对应浓度为2.8μg/ml,活性单位为210U/ml;某批次低分子Mtb-So Ag(3-10K)(221μg/ml)扩增γδT细胞最高比例的50%的浓度为1.7μg/ml、其活性单位为130U/ml。结论:通过比较Mtb-Ag不同批次及其不同组分在不同浓度下刺激γδT细胞扩增数量的活性,可以计算获得刺激γδT细胞扩增的一个活性单位,为检测Mtb-Ag制剂刺激γδT细胞增殖活性建立了标准化程序。

关键词：结核分枝杆菌 γδT细胞耐热抗原超声抗原,活性单位

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Tγδ17和Tγδ22细胞在健康成人外周血中的比例

Tγδ17和Tγδ22细胞在健康成人外周血中的比例

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第八届全国免疫学学术大会

作者：徐丹梁华丁艳邱晓静盛玲玲李柏青蚌埠医学院免疫学教研室安徽省感染与免疫重点实验室

研究背景:已知小鼠γδT细胞是产生IL-17的主要细胞,人外周血γδT细胞中也有少量可分泌IL-17。最近研究发现人γδT细胞经IL-23和TGF-β等体外诱导培养后,可以分化为分泌IL-17的Tγδ17细胞,和仅分泌IL-22的Tγδ22细胞。但健康人新鲜... 详细信息

研究背景:已知小鼠γδT细胞是产生IL-17的主要细胞,人外周血γδT细胞中也有少量可分泌IL-17。最近研究发现人γδT细胞经IL-23和TGF-β等体外诱导培养后,可以分化为分泌IL-17的Tγδ17细胞,和仅分泌IL-22的Tγδ22细胞。但健康人新鲜外周血中是否也有Tγδ22细胞,以及数量有多少尚不明了。目的:观察健康成人外周血αβT细胞中Th17和Th22细胞,以及γδT细胞中Tγδ17和Tγδ22细胞的比例。方法:采集18名正常人外周血用PMA和Ionomycin刺激2小时后加monensin再培养4小时,然后加荧光抗体进行表面分子染色,溶血透膜处理,再加抗IFN-γ,抗IL17和抗IL-22的荧光标记抗体作胞内细胞因子染色。最后在流式细胞仪上检测和分析αβT细胞和γδT细胞中表达IFN-γ,IL-17和IL-22的细胞比例,并将仅表达IFN-γ的作为Th1和Tγδ1细胞,仅表达IL-17作为Th17和Tγδ17细胞,仅表达IL-22的作为Th22和Tγδ22细胞,分辨计算在αβT细胞和γδT细胞中所占比例。结果:将正常人外周新鲜全血中CD3+T细胞分成γδT细胞和αβT细胞两群。Th1细胞在αβT细胞中的比例为14.31%,明显低于Tγδ1细胞在γδT细胞中的61.07%(P<0.01),而Th17细胞在αβT细胞中的比例为1.16%,明显高于Tγδ17细胞在γδT细胞中的0.27%(P<0.01),Th22细胞在αβT细胞中的比例和Tγδ22细胞在γδT细胞中的比例分别为1.06%和0.91%,差异无统计学意义(P>0.05)。另外,在γδT细胞和αβT细胞中均存在共分泌IL-17和IL-22的T细胞亚群。结论:在γδT细胞中仅分泌IL-17的Tγδ17细胞比例明显低于αβT细胞中的Th17细胞,而仅分泌IL-22的Tγδ22细胞在γδT细胞中的比例和仅产生IL-22的Th22细胞在αβT细胞中的比例均很低,且无明显差异。

关键词：外周血 γδT细胞 αβT细胞 Th17 Th22

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不同巨噬细胞亚群在SD大鼠脊髓损伤后的变化规律

不同巨噬细胞亚群在SD大鼠脊髓损伤后的变化规律

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第八届全国免疫学学术大会

作者：朱海吕合作江政松蚌埠医学院免疫学教研室安徽省感染与免疫重点实验室

研究背景:脊髓损伤属于中枢神经退行性疾病,是人类致残性疾病之一;SD鼠大脊髓损伤模型和人类神经系统脊髓损伤相似,可用来分析脊髓损伤后的病理生理变化;巨噬细胞在脊髓损伤后的一系列变化中处于最上游的位置,了解巨噬细胞及其亚型的变... 详细信息

研究背景:脊髓损伤属于中枢神经退行性疾病,是人类致残性疾病之一;SD鼠大脊髓损伤模型和人类神经系统脊髓损伤相似,可用来分析脊髓损伤后的病理生理变化;巨噬细胞在脊髓损伤后的一系列变化中处于最上游的位置,了解巨噬细胞及其亚型的变化有利于更深入了解脊髓损伤的免疫机制。目的:了解脊髓损伤大鼠外周血及损伤局部免疫微环境中巨噬细胞不同亚群的变化规律,进一步探讨和阐明脊髓损伤后涉及免疫学因素参与的损伤机制。方法:将体重为300克左右的SD大鼠用2%戊巴比妥钠(1ml/400g)麻醉后,用NYU重物坠落装置按物重10g、高度25mm的参数,在暴露的脊髓处制造中等损伤程度的脊髓重物坠落伤模型;在损伤后1d、3d、5d、7d和21d取外周血或取损伤脊髓局部组织制备细胞悬液,用流式细胞术测定M1型巨噬细胞的特异性标志CD68和CD86和M2型巨噬细胞的特异性标志CD68和CD163;通过统计分析计算出不同巨噬细胞亚群在SD大鼠脊髓损伤后的1d至21d的时间动力学变化情况。结果:脊髓损伤SD大鼠外周血单核细胞的CD86表达比例(%)为14.86到54.55,但变化没有统计学意义;而在损伤局部巨噬细胞总比例在损伤后第1d到第3d出现明显的增加,并且持续到第7d左右;M1和M2两型巨噬细胞在损伤后的1d、3d、5d、7d、21d占CD68阳性细胞的比例(%)则分别为20.34±3.31和23.34±5.01、3.67±2.76和40.67±4.57、10.58±2.98和35.26±3.43、4.23±1.45和57.28±7.12及14.50±3.14和9.68±3.57。结论:外周血单核细胞在SD大鼠脊髓损伤后没有表现出明显的变化规律;在损伤局部巨噬细胞则在损伤后第一周持续增加,损伤前三天的增加尤为明显;同时在损伤局部,对损伤后修复有利的M2型巨噬细胞占总的巨噬细胞比例,在损伤后第3d和第7d出现两次明显的高峰。强烈提示在SD大鼠脊髓损伤后修复过程中,损伤后的这两个时间点可能会是最为重要的时间点。

关键词： SD大鼠脊髓损伤巨噬细胞流式细胞术

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然免疫细胞在抗结核分枝杆菌感染免疫中的作用机制

然免疫细胞在抗结核分枝杆菌感染免疫中的作用机制

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第八届全国免疫学学术大会

作者：李柏青蚌埠医学院免疫学教研室安徽省感染与免疫重点实验室

结核分枝杆菌(Mtb)感染引起的结核病(TB)仍是发病率和病死率最高的传染病之一。Mtb感染人群仅5～10%可发展为TB,提示对Mtb感染发病有明显个体差异。虽然以往研究已证明抗Mtb感染的免疫主要依赖于T细胞介导的特异性细胞免疫,但TB患者可... 详细信息

结核分枝杆菌(Mtb)感染引起的结核病(TB)仍是发病率和病死率最高的传染病之一。Mtb感染人群仅5～10%可发展为TB,提示对Mtb感染发病有明显个体差异。虽然以往研究已证明抗Mtb感染的免疫主要依赖于T细胞介导的特异性细胞免疫,但TB患者可再次发病的现象,提示针对Mtb的特异性T细胞免疫应答并不能产生有效的终生保护性免疫。这也提示Mtb潜伏感染者不发生TB的机制还可能涉及非特异性的天然免疫的作用。因此,有必要探讨天然免疫细胞如中性粒细胞(PMN),树突状细胞(DC),NK细胞,NKT细胞以及γδT细胞在抗Mtb感染免疫中的作用及调控机制。PMN是最早达到细菌侵入局部的吞噬细胞,实验研究已发现Mtb感染局部有PMN聚集或浸润。PMN可吞噬并有效杀伤Mtb,其杀伤机制可涉及氧依赖和非氧依赖途径。PMN吞噬和杀伤Mtb的活性也可受细胞因子的调控。DC是最重要的抗原提呈细胞,可分为p DC和m DC两个主要亚群。TB患者外周血中p DC数量明显降低。体外实验发现Mtb及其抗原对DC的成熟及其功能有调控作用。NK细胞及其不同亚群不仅直接发挥天然免疫作用,还参与对其他免疫细胞的调控作用。已发现TB患者外周血的NK细胞数量减少,虽然胞内杀伤分子的表达没有明显变化,但是产生细胞因子(IL-17,Il-22等)的NK细胞明显增加。NKT细胞包括CD3+56+NKT细胞和i NK(Vα24)T细胞。实验发现在TB患者外周血CD3+56+NKT细胞在IL-2刺激下表现为高活化低增殖;而i NK(Vα24)T细胞在TB患者外周血明显减少,但是其表面的活化分子(CD69,CD25,HLA-DR)明显高于正常对照,提示iNKT可能涉及Mtb导致TB的过程。γδT细胞具有连接天然免疫和特异性免疫的桥梁作用,其本身也兼具两类免疫的功能特征。Mtb感染宿主后γδT细胞及其不同亚群可通过天然免疫和特异性免疫的作用发挥抗Mtb感染的免疫作用。

关键词：结核分枝杆菌中性粒细胞树突状细胞,NK细胞,NKT细胞,γδT细胞

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胃癌组织中幽门螺杆菌L型感染与淋巴管形成关系的研究

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中国组织化学与细胞化学杂志 2012年第2期21卷 166-170页

作者：蔡兆根于东红田甜吴海波赵艳冯振中蚌埠医学院第一附属医院临床病理科蚌埠医学院病理学教研室安徽省感染与免疫重点实验室南京金陵司法鉴定所安徽233003 安徽医科大学附属省立医院临床病理科江苏210000

目的研究胃癌组织中D2-40、LYVE-1标记的微淋巴管密度(LVD)、血管内皮生长因子受体(VEGFR-3)表达与幽门螺杆菌L型(helicobacter pylori L-form,Hp-L型)感染之间的关系。方法应用革兰染色和免疫组化SP法检测80例胃癌组织和25例对照组的H... 详细信息

目的研究胃癌组织中D2-40、LYVE-1标记的微淋巴管密度(LVD)、血管内皮生长因子受体(VEGFR-3)表达与幽门螺杆菌L型(helicobacter pylori L-form,Hp-L型)感染之间的关系。方法应用革兰染色和免疫组化SP法检测80例胃癌组织和25例对照组的Hp-L型感染,同时用免疫组化SP法检测上述组织的LVD值和VEGFR-3的表达,分析Hp-L型与LVD以及VEGFR-3表达的关系结果胃癌组织中革兰染色L型检出阳性率为67.5%;免疫组化Hp-L型抗原表达阳性率为65%,两种方法检测同时阳性的病例50例,占62.5%。胃癌组的Hp-L型阳性率、LVD及VEGFR-3表达阳性率均高于对照组(P<0.01);胃癌组中Hp-L阳性组的LVD值和VEGFR-3表达阳性率高于Hp-L阴性组。LVD与胃癌淋巴结转移具有一定关系。结论 Hp-L型感染与胃癌的发生、发展密切相关,Hp-L型可能是肿瘤淋巴管生成的重要促进因子,影响胃癌的侵袭和转移。

关键词：胃癌幽门螺杆菌L型微淋巴管密度 VEGFR-3

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妊娠期母鼠给予葡萄球菌肠毒素B对成年子代CD3+TCR Vβ8+T细胞的影响

妊娠期母鼠给予葡萄球菌肠毒素B对成年子代CD3+TCR Vβ8+T细胞的...

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纪念中国微生物学会成立六十周年大会暨2012年中国微生物学会学术年会

作者：管俊昌刘勇孔晓明朱翔余峰玲林娜刘从森张涛蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠 233030 蚌埠医学院安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠 233030

目的：观察妊娠期母鼠给予葡萄球菌肠毒B(SEB)对成年子代CD3+TCR Vβ8+T细胞的影响。方法：在妊娠16d时给予SD大鼠尾静脉注射15μg SEB,同时设立PBS对照组。利用流式细胞仪检测成年子代鼠胸腺及外周血中CD3+TCR Vβ8+T细胞;并观察成年... 详细信息

目的：观察妊娠期母鼠给予葡萄球菌肠毒B(SEB)对成年子代CD3+TCR Vβ8+T细胞的影响。方法：在妊娠16d时给予SD大鼠尾静脉注射15μg SEB,同时设立PBS对照组。利用流式细胞仪检测成年子代鼠胸腺及外周血中CD3+TCR Vβ8+T细胞;并观察成年子代鼠再次给予SEB时胸腺及外周血中CD3+TCR Vβ8+T细胞的应答变化。结果：妊娠期母鼠给予SEB可导致雌、雄性成年子代鼠胸腺CD3+TCR Vβ8+T细胞比例，较对照组的明显减少。PBS组的雌雄性成年子代鼠给予SEB后其胸腺及外周血中CD3+TCR Vβ8+T细较同窝对照组明显减少。结论：妊娠期母鼠给予SEB改变其成年子代大鼠CD3+TCR Vβ8+T细胞对再次SEB刺激的应答方式。

关键词：葡萄球菌肠毒素妊娠期动物模型细胞发育应答方式

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