检索结果-内蒙古大学图书馆

蚌埠医学院学报 2011年第4期36卷 421-426页

作者：彭美玉李柏青山东万杰医学院医学检验教研室山东淄博255213 蚌埠医学院免疫学教研室感染与免疫安徽省重点实验室安徽蚌埠233030

结核分枝杆菌（Mtb）的蛋白抗原根据所处细胞位置的不同,可分为分泌性蛋白、胞质内蛋白和膜脂蛋白三类。其中Mtb分泌性蛋白对抗结核菌感染的免疫作用最为重要。因此,目前研究较深入的Mtb抗原均集中在Mtb的分泌性蛋白,如ESAT-6、CFP-10、... 详细信息

结核分枝杆菌（Mtb）的蛋白抗原根据所处细胞位置的不同,可分为分泌性蛋白、胞质内蛋白和膜脂蛋白三类。其中Mtb分泌性蛋白对抗结核菌感染的免疫作用最为重要。因此,目前研究较深入的Mtb抗原均集中在Mtb的分泌性蛋白,如ESAT-6、CFP-10、MPT64、38kDa和Ag85复合物等。

关键词：结核分枝杆菌抗原 T细胞表位综述

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***-L型感染及OPN表达与胃癌浸润转移的相关性研究

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中国微生态学杂志 2011年第9期23卷 802-805,809页

作者：俞岚周蕾于东红甘怀勇唐素兰蚌埠医学院第一附属医院病理科蚌埠医学院病理学教研室安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院病原生物学教研室安徽蚌埠233030

目的通过检测胃癌中幽门螺杆菌L型(Helicobacter pylori L-form,***-L型)感染以及骨桥蛋白(osteopontin,OPN)的表达情况,探讨***-L型在胃癌侵袭、转移中的作用。方法将胃癌BGC-823细胞与***-L型按不同比例共培养,细胞爬片进行免疫组化(S... 详细信息

目的通过检测胃癌中幽门螺杆菌L型(Helicobacter pylori L-form,***-L型)感染以及骨桥蛋白(osteopontin,OPN)的表达情况,探讨***-L型在胃癌侵袭、转移中的作用。方法将胃癌BGC-823细胞与***-L型按不同比例共培养,细胞爬片进行免疫组化(SP法)检测BGC-823细胞OPN的表达情况。革兰染色及免疫组化检测120例胃癌组织中***-L型的感染情况。免疫组化检测胃癌组织中的OPN的表达。结果 (1)随着细菌比例增大,细胞爬片OPN阳性的胃癌BGC-823细胞数逐渐增加,各组之间差异有统计学意义(F=137.5,P<0.01)。(2)胃癌组织***-L型阳性组的OPN表达阳性率为70.73%,显著高于***-L型阴性组OPN表达阳性率42.1%(P<0.005)。胃癌中***-L型阳性率与肿瘤的大小、癌细胞的血管侵袭、浸润深度及淋巴结转移具有相关性(P<0.001～P<0.05)。(3)胃癌组织中***-L型阳性率与OPN的阳性表达呈正相关性(r=0.27,P<0.001)。结论 ***-L型感染增强了胃癌细胞的侵袭和转移能力,其机制可能与胃癌细胞的OPN表达量增加有关。

关键词：幽门螺杆菌L型胃癌侵袭转移 OPN 免疫组织化学

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IL-12增强结核病患者中性粒细胞吞噬和杀伤结核杆菌的活性

IL-12增强结核病患者中性粒细胞吞噬和杀伤结核杆菌的活性

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“细胞活动生命活力”——中国细胞生物学学会全体会员代表大会暨第十二次学术大会

作者：姜丽娜姚春艳金齐力贺文欣李柏青蚌埠医学院免疫学教研室蚌埠医学院病理生理学教研室感染与免疫安徽省重点实验室

目的:观察IL-12对结核病患者外周血中性粒细胞(PMN)对结核分枝杆菌(***)吞噬和杀伤功能的影响。方法:结核病患者和正常人外周血与异硫氰酸荧光素(FITC)标记的***共同孵育不同时间后,用流式细胞术(FCM)检测PMN对***的吞噬率;结核病患者... 详细信息

目的:观察IL-12对结核病患者外周血中性粒细胞(PMN)对结核分枝杆菌(***)吞噬和杀伤功能的影响。方法:结核病患者和正常人外周血与异硫氰酸荧光素(FITC)标记的***共同孵育不同时间后,用流式细胞术(FCM)检测PMN对***的吞噬率;结核病患者和正常人外周血均加入2′7′二氯二氢荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)作用,l时加或者不加***共同孵育不同时间后,用FCM检测PMN的活化率并计算活性氧(ROS)产生量:不同浓度IL-12预先作用外周血后,再用上述方法检测PMN对***吞噬率,活化率及产生ROS的变化。结果:结核病患者和正常人PMN对***吞噬率,PMN活化率和ROS产生均随时间延长而增加,但结核病患者5 mill吞噬率(51.82±6.93)%高于正常人(47.20±4.26)%(P<0.05);IL-12预先作用后,结核病患者和正常人PMN吞噬率、PMN活化率和ROS的产生均随浓度增大而显著增加,两者之间无显著性差异。结论:结核病患者外周血PMN对Mtb的吞噬功能以及ROS产生与正常人无显著性差异,仅早期吞噬率较高。IL-12略增强PMN吞噬和产生ROS的反应能力。

关键词：结核中性粒细胞吞噬活性氧 IL-12

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自然杀伤T细胞抗胞内菌感染的研究进展

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微生物与感染 2011年第4期6卷 248-251页

作者：孔晓明刘勇蚌埠医学院微生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室蚌埠233030

自然杀伤T细胞(NKT细胞)是免疫细胞中一类具有特定标记的T细胞亚群,能特异性识别由抗原呈递细胞表面CD1d分子所呈递的糖脂类抗原。活化后的NKT细胞能分泌多种细胞因子,参与机体的天然免疫和获得性免疫反应,还能直接杀伤靶细胞,具有效应... 详细信息

自然杀伤T细胞(NKT细胞)是免疫细胞中一类具有特定标记的T细胞亚群,能特异性识别由抗原呈递细胞表面CD1d分子所呈递的糖脂类抗原。活化后的NKT细胞能分泌多种细胞因子,参与机体的天然免疫和获得性免疫反应,还能直接杀伤靶细胞,具有效应细胞的功能。研究发现,NKT细胞在抗胞内菌感染中发挥着重要作用。

关键词：自然杀伤T细胞 CD1d 胞内菌抗感染免疫

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囊尾蚴病多期复合基因疫苗的构建及免疫效应评价

囊尾蚴病多期复合基因疫苗的构建及免疫效应评价

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中国动物学会寄生虫学专业委员会第十三次全国学术会议暨第四次国际寄生虫学学术研讨会

作者：齐文娟王媛媛常雪莲焦玉萌陈勇王雪梅夏惠方强蚌埠医学院病原生物学教研室感染与免疫安徽省重点实验室

背景:囊尾蚴病一种严重人兽共患寄生虫病,有效的囊尾蚴病疫苗,将可以有效的保护易感者,对于有效的控制甚至最终消灭囊尾蚴病具有极其重要的作用。现有的囊尾蚴病疫苗尚不令人十分满意。而本研究针对寄生虫生活史多阶段的特点,研制囊尾... 详细信息

背景:囊尾蚴病一种严重人兽共患寄生虫病,有效的囊尾蚴病疫苗,将可以有效的保护易感者,对于有效的控制甚至最终消灭囊尾蚴病具有极其重要的作用。现有的囊尾蚴病疫苗尚不令人十分满意。而本研究针对寄生虫生活史多阶段的特点,研制囊尾蚴病多期复合基因疫苗,以期获得更佳的效果。目的:(1)构建包含猪带绦虫六钩蚴期和囊尾蚴期特异性疫苗候选分子的囊尾蚴病多期复合基因疫苗。(2)评价该复合基因疫苗诱导的免疫效应。方法:(1)扩增六钩蚴期特异性抗原TSOL18和囊尾蚴期特异性抗原c C1编码基因,通过柔性接头(linker)(Gly4Ser)3串联这两个基因(简写为TSOL18/L/c C1),并装载入p VAX1,构建p VAX1-TSOL18/L/c C1重组质粒,同时构建p VAX1-TSOL18,p VAX1-c C1。将所构建的重组质粒转染293T细胞,通过RT-PCR、间接免疫荧光、Western-blot鉴定融合基因在真核细胞中的表达状态;以构建的重组质粒肌肉注射小鼠,以免疫组化检测融合基因在小鼠骨骼肌的真核表达效果。(2)以p VAX1-TSOL18/L/c C1经肌肉注射途径免疫BALB/c小鼠,以流式细胞术检测免疫后小鼠脾淋巴细胞胞内细胞因子等细胞免疫指标,并以间接ELISA法检测相应的特异性抗体。结果:(1)构建的p VAX1-TSOL18/L/c C1重组质粒经酶切电泳和测序结果与预期设计的基因序列一致。RT-PCR、间接免疫荧光、Western-blot、免疫组化显示目的基因可在转染的细胞和组织内有效表达。(2)p VAX1-TSOL18/L/c C1组小鼠血清中检测出高滴度TSOL18Ig G抗体和c C1组抗体。p VAX1-TSOL18/L/c C1组分泌IFN-γ和分泌IL-4的CD4+T细胞亚群比例及分泌IFN-γ的CD8+T细胞亚群比例均较空质粒对照组显著升高。结论:(1)成功构建包含猪带绦虫六钩蚴和囊尾蚴期特异性疫苗候选分子的囊尾蚴病多期复合基因疫苗p VAX1-TSOL18/L/c C1。(2)囊尾蚴病多期复合基因疫苗p VAX1-TSOL18/L/c C1基因疫苗有效地诱导了特异性体液免疫和细胞免疫效应。

关键词：囊尾蚴病六钩蚴囊尾蚴复合基因疫苗免疫效应

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猪带绦虫六钩蚴TSOL18基因密码子优化真核载体的构建及其在体内、外表达的实验研究

猪带绦虫六钩蚴TSOL18基因密码子优化真核载体的构建及其在体内、...

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第三届北京热带医学与寄生虫学论坛

作者：常雪莲王媛媛方强齐文娟焦玉萌王小莉王雪梅夏惠沈继龙蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室

目的构建含有优化的TSOL18基因(TSOL18o)的重组核酸疫苗优化PVAX1/TSOL18o,观察其在体外CHO-K1细胞中的表达以及体内转染后在小鼠骨骼肌内的表达.方法:按照哺乳动物的密码子偏好,使用软件对TSOL18编码基因进行优化,但不改变氨基酸序列... 详细信息

目的构建含有优化的TSOL18基因(TSOL18o)的重组核酸疫苗优化PVAX1/TSOL18o,观察其在体外CHO-K1细胞中的表达以及体内转染后在小鼠骨骼肌内的表达.方法:按照哺乳动物的密码子偏好,使用软件对TSOL18编码基因进行优化,但不改变氨基酸序列.全基因合成优化后的基因序列TSOL18o,PCR扩增后插入真核表达载体pVAX1,经酶切,测序鉴定.大量提取重组质粒PVAX1/TSOL18o,体外转染CHO-K1细胞,通过RT-PCR、SDS-PAGE电泳及Western-blotting分析检测其在细胞内是否表达,再将pVAX1/TSOL18o和含有未优化TSOL18基因重组质粒pVAX1/TSOL18分别进行体内转染,继以免疫组化法观察其在肌肉组织内的表达效果并作比较.

关键词：猪囊尾蚴病六钩蚴密码子优化 TSOL18DNA疫苗

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铜绿假单胞菌L型诱导血管内皮细胞凋亡机制的探讨

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中国微生态学杂志 2011年第4期23卷 313-315页

作者：刘从森陈登宇李凤云蚌埠医学院显微形态实验中心病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233030

目的探讨铜绿假单胞菌L型诱导血管内皮细胞凋亡机制。方法 Annexin V-FITC/PI双染荧光法和流式细胞术法检测铜绿假单胞菌L型感染血管内皮细胞8 h时的凋亡率,分光光度法检测细胞Caspase-9活化情况。结果铜绿假单胞菌L型和血管内皮细胞共... 详细信息

目的探讨铜绿假单胞菌L型诱导血管内皮细胞凋亡机制。方法 Annexin V-FITC/PI双染荧光法和流式细胞术法检测铜绿假单胞菌L型感染血管内皮细胞8 h时的凋亡率,分光光度法检测细胞Caspase-9活化情况。结果铜绿假单胞菌L型和血管内皮细胞共培养8 h时细胞凋亡率、Caspase-9活化程度较对照组增高(P<0.05)。结论铜绿假单胞菌L型可通过活化Caspase-9的线粒体途径诱导血管内皮细胞凋亡。

关键词：铜绿假单胞菌细菌L型内皮细胞凋亡 Caspase-9

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间日疟原虫谷氨酸脱氢酶基因的克隆表达

间日疟原虫谷氨酸脱氢酶基因的克隆表达

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第三届北京热带医学与寄生虫学论坛

作者：方强夏惠王雪梅齐文娟曹俊顾亚萍高琪蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室安徽省感染与免疫重点实验室蚌埠医学院免疫学教研室江苏省血吸虫病防治研究所

目的克隆表达间日疟原虫谷氨酸脱氢酶.方法:根据推测的PvGDH编码基因设计特异性引物,采用PCR自构建的中国红内期间日疟原虫全长cDNA文库扩增PvGDH编码基因,将其克隆至pMD 18-T载体,经PCR和双酶切鉴定后进行序列测定后,亚克隆至pCOLD ... 详细信息

目的克隆表达间日疟原虫谷氨酸脱氢酶.方法:根据推测的PvGDH编码基因设计特异性引物,采用PCR自构建的中国红内期间日疟原虫全长cDNA文库扩增PvGDH编码基因,将其克隆至pMD 18-T载体,经PCR和双酶切鉴定后进行序列测定后,亚克隆至pCOLD Ⅱ载体进行表达.通过ELISA和Western-blot检测正常人血清、间日疟患者血清、恶性疟患者血清与rPvGDH的免疫反应性;以表达的rPvGDH免疫小鼠制备抗血清,通过ELISA检测抗血清与rPvGDH的免疫反应性;并以Western-blot检测抗血清与间日疟原虫抗原、恶性疟原虫抗原、正常红红细胞抗原的免疫反应性.

关键词：间日疟原虫谷氨酸脱氢酶克隆表达抗血清免疫反应性

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白介素-9产生细胞在不同淋巴细胞亚群中的比例

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蚌埠医学院学报 2011年第5期36卷 437-440页

作者：梁友宝梁华李柏青蚌埠医学院免疫学教研室感染与免疫安徽省重点实验室安徽蚌埠233030 安徽省蚌埠市第一人民医院检验科 233000

目的：应用流式细胞术测定胞内细胞因子,检测不同T淋巴细胞亚群和其他淋巴细胞亚群中白介素-9（IL-9）产生细胞的比例。方法：23名健康成年人外周抗凝血加等量1640培养液后,加佛波酯、离子霉素及莫能霉素培养6 h。收集细胞后,先用不同... 详细信息

目的：应用流式细胞术测定胞内细胞因子,检测不同T淋巴细胞亚群和其他淋巴细胞亚群中白介素-9（IL-9）产生细胞的比例。方法：23名健康成年人外周抗凝血加等量1640培养液后,加佛波酯、离子霉素及莫能霉素培养6 h。收集细胞后,先用不同荧光素标记的抗人CD3、抗人CD8和抗人T细胞抗原受体γδ（TCRγδ）单抗,或抗人CD19和抗CD56单抗作细胞表面染色,再经过溶血,固定和透膜处理后,加抗胞内细胞因子的抗IL-9和IL-17的荧光抗体作胞内染色,用流式细胞仪检测和分析IL-9产生细胞在不同T淋巴细胞亚群和其他淋巴细胞亚群中的分布频率。结果：IL-9产生细胞在总T细胞（CD3＋T）、CD4＋T细胞、CD8＋T细胞和γδT细胞中的百分比分别为0.35±0.31、0.22±0.13、0.31±0.29和1.07±1.05。γδT细胞中的IL-9产生细胞明显高于其他淋巴细胞亚群（P〈0.01）。同时也发现自然杀伤细胞（NK细胞）中也有少量IL-9产生细胞。另外还发现,共表达IL-9和IL-17的细胞在CD3＋T及其亚群CD4＋T和CD8＋T细胞中的比例很低（0.03%~0.06%）,但在γδT细胞中的比例可达（0.28±0.34）%,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论：用流式细胞术测定单细胞水平胞内细胞因子的技术发现,不仅CD4＋T细胞中,而且CD8＋T细胞和γδT细胞以及NK细胞中均存在产生IL-9的细胞。

关键词：流式细胞术白介素-9 细胞因子 T淋巴细胞亚群

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MMP-2、MMP-7在卵巢癌中的表达及其临床意义

MMP-2、MMP-7在卵巢癌中的表达及其临床意义

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第十二届全国组织学与胚胎学青年学术会议

作者：俞岚汪万英甘怀勇武世伍宋文庆郭冰沁蚌埠医学院第一附属医院病理科，蚌埠医学院病理学教研室，安徽省感染与免疫重点实验室，安徽 233030 蚌埠医学院第一附属医院中心实验室，安徽 233004

目的：探讨MMP-2、MMP-7的表达与卵巢癌临床病理生物学行为的关系以及对患者预后的影响。方法：应用核酸原位杂交和免疫组化对97例卵巢上皮性癌和23例卵巢上皮性良性肿瘤组织进行MMP-2、MMP-7mRNA及蛋白的检测。结果：MMP-2、MMP-7 mRN... 详细信息

目的：探讨MMP-2、MMP-7的表达与卵巢癌临床病理生物学行为的关系以及对患者预后的影响。方法：应用核酸原位杂交和免疫组化对97例卵巢上皮性癌和23例卵巢上皮性良性肿瘤组织进行MMP-2、MMP-7mRNA及蛋白的检测。结果：MMP-2、MMP-7 mRNA及蛋白的表达阳性率在卵巢癌组均显著高于良性肿瘤组(P<0.05)。多因素分析，PT-NM分期、MMP-2及MMP-7的表达是影响卵巢癌根治术后患者预后的独立因素(P<0.05);MMP-2阳性组与阴性组5年生存率分别为30.6％和76.o％，MMP-7阳性组与阴性组5年生存率分别为19.7％和80.6％，差异均有统计学意义(P<0.05)。结论：MMP-2、MMP-7的过表达促进卵巢癌的浸润和转移，联合检测MMP-2和MMP-7可能作为预测和评价患者预后的生物学指标。

关键词：卵巢肿瘤蛋白水解酶生物学指标早期诊断

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