检索结果-内蒙古大学图书馆

中华微生物学和免疫学杂志 2010年第6期30卷 576-580页

作者：姜丽娜李柏青姚春艳金齐力蚌埠医学院免疫学教研室感染与免疫安徽省重点实验室233030 蚌埠医学院病理生理学教研室

目的建立用流式细胞术检测人外周血中性粒细胞（PMNs）吞噬结核分枝杆菌（Mtb）的方法 ,并探讨Th1和Th2型细胞因子对PMNs吞噬Mtb活性的影响.方法运用抗酸染色、激光共聚焦显微镜观察人PMNs吞噬Mtb,并用流式细胞术检测人PMNs对FTTC标记... 详细信息

目的建立用流式细胞术检测人外周血中性粒细胞（PMNs）吞噬结核分枝杆菌（Mtb）的方法 ,并探讨Th1和Th2型细胞因子对PMNs吞噬Mtb活性的影响.方法运用抗酸染色、激光共聚焦显微镜观察人PMNs吞噬Mtb,并用流式细胞术检测人PMNs对FTTC标记Mtb的吞噬活性.外周血预先分别与IL-2、IFN-γ、GM-CSF和IL-4等细胞因子孵育,再加FTTC标记Mtb后,用流式细胞术检测PMNs对Mtb吞噬率,并与对照组比较吞噬率的变化.结果抗酸染色和激光共聚焦显微镜均能观测到人PMNs吞噬Mtb.用流式细胞术检测健康人外周血PMNs对Mtb的吞噬率在5 min时为47%,15～20 min达到平台期,为66%～72%.外周血预先加IL-2或IFN-γ作用后,PMNs对Mtb的吞噬率可分别增加76.7%和75.2%;而预先加IL-4作用后,吞噬率降低31.7%.结论 IL-2和IFN-γ对PMNs吞噬Mtb功能有增强作用,而IL-4有降低作用,表明Th1型和Th2型细胞因子参与调节PMNs抗结核杆菌感染的免疫作用.

关键词：中性粒细胞 IL-2 IL-4 IFN-γ 流式细胞术

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

肺结核患者CD3^+ CD56^+ NKT细胞对IL-2刺激的反应性研究

引用

细胞与分子免疫学杂志 2010年第9期26卷 884-886页

作者：姚春艳王兆华姜丽娜彭美玉王婧李柏青蚌埠医学院免疫学教研室安徽省感染与免疫重点实验室蚌埠市传染病医院呼吸科安徽蚌埠233000

目的:观察IL-2刺激后肺结核患者CD3+CD56+NKT细胞活化的规律和增殖情况。方法:结核病患者和健康人外周血单个核细胞用IL-2刺激和培养不同时间,采用多色荧光染色和流式细胞术检测NKT细胞的CD69的表达率以及培养前后NKT细胞数量的变化。结... 详细信息

目的:观察IL-2刺激后肺结核患者CD3+CD56+NKT细胞活化的规律和增殖情况。方法:结核病患者和健康人外周血单个核细胞用IL-2刺激和培养不同时间,采用多色荧光染色和流式细胞术检测NKT细胞的CD69的表达率以及培养前后NKT细胞数量的变化。结果:肺结核患者外周血NKT细胞的比率在刺激培养前与正常人比较无明显差异;经IL-2刺激0、8、16、40和64 h后,患者组和正常组NKT细胞表面CD69的表达量均显著增加,但患者组NKT细胞的CD69表达水平高于正常组(P<0.05);培养14 d后,患者组NKT细胞的数量扩增(108.69±59.22)倍,正常组NKT细胞的数量扩增(246.26±134.06)倍,明显高于患者组(P<0.05)。结论:肺结核患者外周血NKT细胞在IL-2刺激后表现为高度活化和低增殖的特点。

关键词：肺结核 NKT细胞 IL-2

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

金黄色葡萄球菌α溶血素诱导脐静脉内皮细胞凋亡机制的研究

引用

中国人兽共患病学报 2010年第6期26卷 569-571页

作者：刘婷婷刘从森管俊昌闵宏林李凤云夏佩莹蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室蚌埠233000

目的了解金黄色葡萄球菌(金葡菌)α溶血素诱导脐静脉内皮细胞凋亡机制。方法将不同浓度金葡菌α溶血素感染脐静脉内皮细胞8h后,检测TNF-α、caspase-3及caspase-8的产生量,同时检测加入TNF-α抗体、caspase-3和caspase-8抑制剂后的细胞... 详细信息

目的了解金黄色葡萄球菌(金葡菌)α溶血素诱导脐静脉内皮细胞凋亡机制。方法将不同浓度金葡菌α溶血素感染脐静脉内皮细胞8h后,检测TNF-α、caspase-3及caspase-8的产生量,同时检测加入TNF-α抗体、caspase-3和caspase-8抑制剂后的细胞凋亡率。结果金葡菌α溶血素感染脐静脉内皮细胞8h后,TNF-α、caspase-3、caspase-8的产生量与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01);而加入TNF-α抗体、caspase-3和caspase-8抑制剂后凋亡率明显降低(P<0.01)。结论金葡菌α溶血素诱导脐静脉内皮细胞凋亡的机制可能是通过TNF-α介导的caspase-8及caspase-3激活的外源性死亡因子受体途径,这为我们进一步研究金葡菌L型垂直感染与治疗提供了新的思路。

关键词：金黄色葡萄球菌 α溶血素脐静脉内皮细胞凋亡机制

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

结核分枝杆菌P19对巨噬细胞功能及表型影响的研究

引用

中国人兽共患病学报 2010年第3期26卷 197-200页

作者：韦莉金齐力刘勇夏佩莹蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室蚌埠233030

目的探讨结核分枝杆菌19kD脂蛋白(MtbP19)对单核巨噬细胞功能及表型的影响。方法以10μg/mLMtbP19作用于拂波醇酯(PMA)分化的THP-1细胞,CO2孵箱孵育,酶联免疫吸附法(ELISA)检测不同时间巨噬细胞TNF-α和IL-6的分泌水平;对巨噬细胞表型分... 详细信息

目的探讨结核分枝杆菌19kD脂蛋白(MtbP19)对单核巨噬细胞功能及表型的影响。方法以10μg/mLMtbP19作用于拂波醇酯(PMA)分化的THP-1细胞,CO2孵箱孵育,酶联免疫吸附法(ELISA)检测不同时间巨噬细胞TNF-α和IL-6的分泌水平;对巨噬细胞表型分子HLA-DR进行荧光抗体染色,流式细胞术分析P19对巨噬细胞表型的影响;流式细胞术及光学显微镜研究MtbP19对巨噬细胞吞噬活性的影响。结果P19能够诱导巨噬细胞TNF-α和IL-6分泌水平的增加,呈时间依赖关系;经P19刺激的巨噬细胞HLA-DR表达增强,平均荧光强度(MFI)为(54.3±3.4)%,与BSA对照组(34.3±3.6)%比较P<0.05;P19能增强巨噬细胞的吞噬活性。结论MtbP19能诱导巨噬细胞活化,在感染过程中可能具有一定的抗结核保护作用。

关键词：结核分枝杆菌P19 THP-1细胞细胞因子表型分子吞噬

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

siRNA对γδT细胞Eomes基因表达的抑制功能研究

引用

现代免疫学 2010年第1期30卷 51-55页

作者：汪洪涛葛晓松李柏青蚌埠医学院免疫学教研室安徽省感染与免疫重点实验室蚌埠233030

本文旨在探讨RNA干扰对人外周血γδT细胞Eomes基因的表达和产生IFN-γ的抑制效应。化学合成3对EomessiRNA,脂质体转染试剂介导siRNA转染到用结核杆菌(Mtb)抗原刺激的人外周血单个核细胞中(主要是γδT细胞),通过转染条件优化后,对转染... 详细信息

本文旨在探讨RNA干扰对人外周血γδT细胞Eomes基因的表达和产生IFN-γ的抑制效应。化学合成3对EomessiRNA,脂质体转染试剂介导siRNA转染到用结核杆菌(Mtb)抗原刺激的人外周血单个核细胞中(主要是γδT细胞),通过转染条件优化后,对转染了siRNA的γδT细胞采用流式细胞术(FCM)进行分选,利用RT-PCR检测转染细胞EomesmRNA表达抑制率,以FCM检测转染前后γδT细胞IFN-γ产生的情况。结果显示,有2对siRNA能有效抑制Eomes的mRNA表达,并对γδT细胞IFN-γ的产生起抑制作用。提示Eomes siRNA可特异地抑制γδT细胞Eomes基因表达,Eomes可能是调控γδT细胞产生IFN-γ的重要转录因子。

关键词： siRNA γδT细胞 Eomes基因

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

猪囊尾蚴期特异性抗原cC1的克隆与高效可溶性原核表达

引用

南方医科大学学报 2010年第2期30卷 206-209页

作者：方强骆江坤崔琢齐文娟胡元生沈继龙蚌埠医学院病原生物学教研室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院免疫学教研室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院第一附属医院安蚌埠233004 安徽医科大学病原生物学教研室安徽合肥230032

目的克隆猪囊尾蚴期特异性抗原cC1基因,并进行高效可溶性原核表达。方法利用PT-PCR从猪囊尾蚴中获得cC1编码基因,T-A克隆后,将cC1插入原核表达载体pET28a中,经酶切、测序鉴定后将其转入宿主菌*** BL21(DE3)中,通过IPTG诱导表达并优化表... 详细信息

目的克隆猪囊尾蚴期特异性抗原cC1基因,并进行高效可溶性原核表达。方法利用PT-PCR从猪囊尾蚴中获得cC1编码基因,T-A克隆后,将cC1插入原核表达载体pET28a中,经酶切、测序鉴定后将其转入宿主菌*** BL21(DE3)中,通过IPTG诱导表达并优化表达条件,表达的融合蛋白Ni+-亲和层析柱纯化后经快速液相蛋白层析分离系统检测其纯度。采用SDS-PAGE和Western-blotting对目的蛋白进行分析和鉴定。结果RT-PCR扩增出的片段长度为1056bp,构建的重组表达质粒经PCR、酶切验证,和预期的结果一致,测序鉴定与Genbank中cC1基因相比于423位存在1个同义突变。转化有重组质粒的E. coli BL21(DE3)经过0.05mmol/LIPTG 37℃诱导6h高效表达了占菌体蛋白总量60%的可为囊虫病患者血清识别的相对分子质量约为40000的可溶性融合蛋白,经Ni+-亲和层析柱纯化后纯度达94%。结论成功克隆并高效可溶性原核表达了猪囊尾蚴期特异性抗原cC1,为其进一步研究和应用奠定了基础。

关键词：猪囊尾蚴,抗原cC1 克隆原核表达条件优化

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

IL-15对人γδT细胞杀伤结核杆菌感染THP-1细胞的影响

引用

中国人兽共患病学报 2010年第10期26卷 926-930页

作者：金齐力韦莉姜丽娜姚春艳李柏青蚌埠医学院免疫学教研室蚌埠233030 安徽省感染与免疫重点实验室蚌埠233030 蚌埠医学院病原生物学教研室蚌埠233030 蚌埠医学院病理生理学教研室蚌埠233030

目的建立结核杆菌(Mtb)感染单核细胞THP-1细胞系模型;用流式细胞术检测人γδT细胞对Mtb感染THP-1细胞的细胞毒活性;并观察IL-15对人γδT细胞杀伤Mtb感染THP-1细胞的细胞毒活性的影响。方法 Mtb以10∶1的比例感染佛波醇酯(PMA)分化的TH... 详细信息

目的建立结核杆菌(Mtb)感染单核细胞THP-1细胞系模型;用流式细胞术检测人γδT细胞对Mtb感染THP-1细胞的细胞毒活性;并观察IL-15对人γδT细胞杀伤Mtb感染THP-1细胞的细胞毒活性的影响。方法 Mtb以10∶1的比例感染佛波醇酯(PMA)分化的THP-1细胞,建立Mtb感染细胞模型。人外周血单个核细胞用Mtb耐热性低分子多肽类抗原刺激优势扩增γδT细胞,作为效应细胞用于细胞毒活性实验。用羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE)标记Mtb感染THP-1细胞,作为靶细胞。效应细胞和靶细胞以不同比例孵育4 h,用碘化丙啶(PI)染色后在流式细胞仪上检测,CSFE和PI双阳性细胞为被杀伤靶细胞。IL-15作用于γδT细胞24 h后,再检测γδT细胞对Mtb感染THP-1细胞的细胞毒活性。结果人γδT细胞与Mtb感染THP-1细胞以1∶1至50∶1的比例作用4 h后,人γδT细胞对结核杆菌感染的THP-1细胞的细胞毒活性从22.5%增加至80.7%;而γδT细胞与未感染Mtb的THP-1细胞的细胞毒活性为16.1%至47.2%。IL-15作用γδT细胞后的细胞毒活性(64.06%)与对照组(46.81%)相比明显增加(P<0.05)。结论人γδT细胞对Mtb感染THP-1细胞的杀伤活性明显高于对未感染Mtb的THP-1细胞的作用,杀伤活性随效靶比的增加而增加。IL-15可以增强人γδT细胞对Mtb感染巨噬细胞的细胞毒活性。

关键词： IL-15 结核杆菌 γδT细胞 THP-1细胞细胞毒活性

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

基于529bp高度重复序列的弓形虫PCR诊断方法的建立

引用

中国生物制品学杂志 2010年第7期23卷 767-769页

作者：方强夏惠陈兴智徐家森王雪梅齐文娟孙新沈继龙蚌埠医学院病原生物学教研室安徽蚌埠233030 安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院免疫学教研室安徽蚌埠233030 安徽医科大学病原生物学教研室合肥230032

目的建立基于529bp高度重复序列的弓形虫PCR诊断方法。方法以弓形虫基因组中529bp的高度重复序列为诊断靶基因设计引物,并以其为模板经PCR扩增该基因,与pMD18-T载体连接,构建pMD18/Tox529bp重组质粒,测序鉴定正确后,经稀释标定作为标准... 详细信息

目的建立基于529bp高度重复序列的弓形虫PCR诊断方法。方法以弓形虫基因组中529bp的高度重复序列为诊断靶基因设计引物,并以其为模板经PCR扩增该基因,与pMD18-T载体连接,构建pMD18/Tox529bp重组质粒,测序鉴定正确后,经稀释标定作为标准品。优化PCR反应体系及条件,并验证该方法的灵敏度及特异性。结果所构建的pMD18/Tox529bp重组质粒经测序正确,建立的PCR方法最低可检出10个拷贝的目的基因,除对弓形虫基因组DNA扩增出特异性条带外,用该方法对健康志愿者全血、正常小鼠全血、间日疟原虫、恶性疟原虫及结核杆菌基因组DNA均未扩增出特异性条带。结论已建立了一种具有较高灵敏度和特异性的弓形虫PCR诊断方法 ,有望应用于人和动物弓形虫感染的筛查、临床诊断及流行病学调查。

关键词：弓形虫病重复序列,核酸聚合酶链反应

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

构建间日疟原虫红内期全长cDNA文库

引用

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2010年第3期28卷 239-240,F0003页

作者：方强夏惠袁远英曹俊王雪梅齐文娟高琪蚌埠医学院病原生物学教研室安徽省感染与免疫重点实验室蚌埠233030 江苏省寄生虫病防治研究所卫生部寄生虫病预防与控制技术重点实验室无锡214064

采集未经治疗的间日疟患者血样,滤去白细胞后浓集含虫红细胞,提取总RNA,用SMARTcDNA文库构建试剂盒构建间日疟原虫红内期全长cDNA文库。测定cDNA文库库容,蓝白斑筛选,计算重组率。随机挑选48个菌落,用M13+/-引物进行PCR鉴定插入片段大... 详细信息

采集未经治疗的间日疟患者血样,滤去白细胞后浓集含虫红细胞,提取总RNA,用SMARTcDNA文库构建试剂盒构建间日疟原虫红内期全长cDNA文库。测定cDNA文库库容,蓝白斑筛选,计算重组率。随机挑选48个菌落,用M13+/-引物进行PCR鉴定插入片段大小。构建的间日疟原虫红内期全长cDNA文库原始库容为1.14×106,重组率为97.2%,重组子插入cDNA片段大小为900～2500bp。

关键词：间日疟原虫红内期 cDNA文库

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

基因扫描技术检测人TCR δ2链CDR3多态性的方法

引用

蚌埠医学院学报 2010年第5期35卷 433-436页

作者：马飞郭术俊李柏青蚌埠医学院免疫学教研室安徽省感染与免疫重点实验室安徽蚌埠233030

目的:建立利用基因扫描技术检测和分析人TCR δ2亚家族CDR3多态性的方法。方法:从健康成人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs),或从PBMCs经IL-2或结核杆菌耐热抗原(Mtb-HAg)刺激培养7天的扩增细胞中提取RNA,用... 详细信息

目的:建立利用基因扫描技术检测和分析人TCR δ2亚家族CDR3多态性的方法。方法:从健康成人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs),或从PBMCs经IL-2或结核杆菌耐热抗原(Mtb-HAg)刺激培养7天的扩增细胞中提取RNA,用RT-PCR方法扩增TCRδ2链基因中CDR3片段,分别用聚丙烯酰胺凝胶电泳和基因扫描观察CDR3长度并分析其多态性。结果:聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示,从三组细胞扩增的RT-PCR产物均显示较宽、模糊的条带,而基因扫描结果显示三组RT-PCR产物均可出现清晰可辨的扫描峰,并发现三组中Mtb-HAg组优势峰CDR3片段,较PBMC组和IL-2组长(P<0.01),后两者之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:基因扫描分析技术能方便、快速检测和分析人外周血γδT细胞TCRδ2链基因CDR3片段长度的多态性。

关键词：结核杆菌抗原 γδT细胞基因

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：