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OGT在甲烷减轻大鼠脊髓神经元氧糖缺失-复氧复糖损伤中的作用:与Nrf2表达的关系

中华麻醉学杂志 2020年第3期40卷 355-361页

作者：王丽萍薛海燕郭晓明陈国忠徐皓福建医科大学福总临床医学院联勤保障部队第九〇〇医院厦门大学附属东方医院福建中医药大学福总教学医院蚌埠医学院福总教学医院麻醉与围术期医学科福州350025 福建医科大学福总临床医学院联勤保障部队第九〇〇医院厦门大学附属东方医院福建中医药大学福总教学医院蚌埠医学院福总教学医院骨一科福州350025

目的评价氧连氮-乙酰葡萄糖胺(O-GlcNAc)转移酶(OGT)在甲烷减轻大鼠脊髓神经元氧糖缺失-复氧复糖损伤中的作用及其与Nrf2表达的关系。方法原代培养的大鼠脊髓神经元,以1×105个/ml密度接种于6孔板,采用随机数字表法分为4组(n=60):... 详细信息

目的评价氧连氮-乙酰葡萄糖胺(O-GlcNAc)转移酶(OGT)在甲烷减轻大鼠脊髓神经元氧糖缺失-复氧复糖损伤中的作用及其与Nrf2表达的关系。方法原代培养的大鼠脊髓神经元,以1×105个/ml密度接种于6孔板,采用随机数字表法分为4组(n=60):对照组(C组)、氧糖缺失-复氧复糖组(OGD/R组)、甲烷组(M组)和甲烷+OGT抑制剂四氧嘧啶组(MA组)。采用无糖-无血清Earle平衡盐液,在37℃、5%CO2-95%N2缺氧培养箱中孵育2 h,然后正常培养的方法制备脊髓神经元氧糖缺失-复氧复糖损伤模型。M组于复氧复糖时在培养液中加入200μl甲烷饱和生理盐水(甲烷终浓度1.8 mmol/L);MA组于M组复氧复糖后10 min在培养液中加入8 mmol/L四氧嘧啶。复氧复糖12 h时,测定神经元存活率、LDH漏出率和凋亡率;采用染色质免疫沉淀和实时荧光定量PCR(qPCR)法检测Nrf2基因启动子区OGT和H3K4me3表达水平;提取核蛋白,采用免疫沉淀和Western blot法测定H3K4甲基转移酶复合物调节亚基RBBP5的O-GlcNAc糖基化水平;采用邻位连接法检测H3K4甲基转移酶复合物催化亚基MLL1与组蛋白H3空间邻近水平;采用Western blot和qPCR法测定Nrf2及其mRNA的表达;采用ELISA法测定上清液SOD、过氧化氢酶(CAT)活性和MDA浓度。结果与C组比较,OGD/R组和M组神经元存活率降低,LDH漏出率、凋亡率和上清液MDA浓度升高(P<0.01);与OGD/R组比较,M组神经元存活率升高,LDH漏出率、凋亡率和上清液MDA浓度降低,Nrf2启动子区OGT和H3K4me3表达上调,RBBP5亚基O-GlcNAc糖基化、MLL1亚基与组蛋白H3空间邻近水平增高,Nrf2及其mRNA表达上调,上清液SOD和CAT活性升高(P<0.01);与M组比较,MA组神经元存活率降低,LDH漏出率、凋亡率和上清液MDA浓度升高,Nrf2启动子区OGT和H3K4me3表达下调,RBBP5亚基O-GlcNAc糖基化、MLL1亚基与组蛋白H3空间邻近水平降低,Nrf2及其mRNA表达下调,SOD和CAT活性下降(P<0.05或0.01)。结论OGT参与了甲烷减轻大鼠脊髓神经元氧糖缺失-复氧复糖损伤的过程,与上调Nrf2表达有关。

关键词：乳糖合酶甲烷脊髓神经元细胞低氧 NF-E2相关因子2

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一种新型后路寰枢椎固定系统的设计及有限元分析

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中国脊柱脊髓杂志 2020年第4期30卷 353-359页

作者：潘保顺唐焕章陈金水张李宝徐皓林松庆蚌埠医学院福总教学医院骨一科福州市350025 联勤保障部队第九○○医院骨一科福州市350025 厦门大学附属东方医院骨一科福州市350025 福建医科大学福总临床医学院骨一科福州市350025

目的:基于影像学参数设计一种新型后路寰枢椎固定系统,运用有限元方法评价该系统固定的生物力学稳定性。方法:运用医学影像存档与通信系统测量工具对后弓发育正常且结构完整的成人寰椎CT进行解剖学参数测量,依据寰椎影像学测量参数设计... 详细信息

目的:基于影像学参数设计一种新型后路寰枢椎固定系统,运用有限元方法评价该系统固定的生物力学稳定性。方法:运用医学影像存档与通信系统测量工具对后弓发育正常且结构完整的成人寰椎CT进行解剖学参数测量,依据寰椎影像学测量参数设计出一种符合寰椎解剖结构的新型后路寰枢椎固定系统。对1例健康志愿者上颈椎进行薄层CT扫描,对其CT图片数字图像处理,进行网格划分、设置材料属性及载荷与边界条件,建立正常上颈椎有限元模型(正常模型),并与已发表文献对比验证其有效性;在正常模型基础上通过修改材料属性及去除横韧带构建寰枢椎失稳有限元模型(失稳模型),加载新型后路寰枢椎内固定系统至失稳模型上建立新型后路寰枢椎固定系统固定有限元模型(新型模型);运用Abaqus 2019对新型模型施加扭矩为1.5N·m,对该模型C0-C3节段屈伸、侧屈、旋转活动度进行计算分析,并与寰枢椎椎弓根螺钉固定有限元模型(椎弓根螺钉模型)对比。结果:设计出的新型后路寰枢椎固定系统符合寰椎的解剖结构,此系统由新型寰椎后弓钢板、连接棒及枢椎椎弓根螺钉组成。与以往文献对比,建立的正常模型验证有效。新型模型与正常模型相比减少了屈伸95.3%、侧屈92.6%、旋转99.0%的活动度,在各状态明显减少置入节段(C1-2)的活动度。有限元分析得出新型模型在屈伸、侧屈、旋转状态下C1-2节段活动度分别为1.10°、0.49°、0.59°,与椎弓根螺钉模型活动度相近;新型模型C2/3椎间盘最大应力在前屈、后伸、左侧屈、右侧屈、左旋转、右旋转状态下分别为3.71MPa、5.84MPa、3.09MPa、3.43MPa、2.65MPa、3.59MPa,与正常模型最大应力一致;新型后路寰枢椎固定系统固定的应力主要集中于枢椎椎弓根螺钉根部及连接棒。结论:新型后路寰枢椎固定系统固定具有良好的生物力学稳定性,可作为寰枢椎失稳内固定的补充方式。

关键词：寰枢椎失稳内固定有限元分析生物力学

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寰椎后弓影像学的测量与新型寰椎后弓内固定器的设计

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中国骨与关节损伤杂志 2020年第5期35卷 449-452页

作者：潘保顺唐焕章陈金水王本海董亮赵晓明蚌埠医学院福总教学医院骨一科福建福州350025 解放军联勤保障部队第900医院骨一科厦门大学附属东方医院骨一科

目的测量寰椎后弓CT影像学资料相关数据,并设计新型寰椎后弓内固定器。方法根据CT影像学资料测量,矢状面测量寰椎后弓高度,水平面测量寰椎后弓厚度、后弓弦长及后结节处至弦长的距离、后结节处到左右两侧椎动脉沟距离(内侧、外侧)、左... 详细信息

目的测量寰椎后弓CT影像学资料相关数据,并设计新型寰椎后弓内固定器。方法根据CT影像学资料测量,矢状面测量寰椎后弓高度,水平面测量寰椎后弓厚度、后弓弦长及后结节处至弦长的距离、后结节处到左右两侧椎动脉沟距离(内侧、外侧)、左右后弓夹角(内侧、外侧),分析寰椎后弓的解剖学特点并根据数据设计新型寰椎后弓内固定器。结果寰椎后弓外侧缘半径平均26.77(22.03~31.53)mm,后结节处高度平均10.45(7.13~14.83)mm,后结节处厚度平均8.12(4.80~12.57)mm,内侧后结节处至椎动脉沟距离平均13.60(10.86~19.38)mm,外侧后结节处至椎动脉沟距离平均20.48(15.81~25.90)mm,寰椎后弓内侧夹角平均141.23(116.15~157.49)°,寰椎后弓外侧夹角平均135.47(103.58~155.51)°。左侧与右侧距后结节5 mm、10 mm、15 mm处寰椎后弓高度、厚度,以及内外侧后结节处到两侧椎动脉沟距离差异无统计学意义(P>0.05)。结论经寰椎后弓CT测量数据设计的新型寰椎后弓内固定器适合寰椎后弓的解剖特点,置钉点安全,操作简单,固定坚强,提供了新的寰椎后路内固定方式。

关键词：影像学测量新型寰椎后弓内固定器寰枢椎不稳

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大鼠脊髓神经元氧糖缺失-复氧复糖损伤时TET3诱导DNA去甲基化在甲烷上调Nrf2表达中的作用

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中华麻醉学杂志 2019年第4期39卷 430-435页

作者：王丽萍郭晓明陈国忠吴晓智陈东生徐皓福建医科大学福总临床医学院联勤保障部队第九〇〇医院厦门大学附属东方医院福建中医药大学福总教学医院蚌埠医学院福总教学医院麻醉与围术期医学科福州350025 福建医科大学福总临床医学院联勤保障部队第九〇〇医院厦门大学附属东方医院福建中医药大学福总教学医院蚌埠医学院福总教学医院骨一科福州350025

目的评价大鼠脊髓神经元氧糖缺失-复氧复糖损伤时10-11易位蛋白3(TET3)诱导DNA去甲基化在甲烷上调核转录因子E2相关因子2(Nrf2)表达中的作用。方法原代培养大鼠脊髓神经元,以1×10^5个/ml密度接种于6孔板,采用随机数字表法分为5组(n... 详细信息

目的评价大鼠脊髓神经元氧糖缺失-复氧复糖损伤时10-11易位蛋白3(TET3)诱导DNA去甲基化在甲烷上调核转录因子E2相关因子2(Nrf2)表达中的作用。方法原代培养大鼠脊髓神经元,以1×10^5个/ml密度接种于6孔板,采用随机数字表法分为5组(n=48):正常对照组(C组)、氧糖缺失-复氧复糖组(OGD/R组)、甲烷组(M组)、甲烷+TET3-siRNA组(M+siTET3组)和甲烷+阴性siRNA组(M+siCon组)。采用无糖-无血清Earle平衡盐液,在5%CO2-95%N2缺氧培养箱中孵育2 h ,然后正常培养的方法制备氧糖缺失-复氧复糖损伤模型。M组于复氧复糖时在培养液中加入200 μl甲烷饱和生理盐水(甲烷终浓度1.8 mmol/L);M+siTET3组和M+siCon组于复氧复糖前24 h时分别加入100 pmol/L TET3-siRNA和100 pmol/L阴性siRNA进行转染。复氧复糖12 h时,测定神经元存活率、LDH漏出率、神经元凋亡率,采用实时荧光定量PCR法检测TET3和Nrf2的mRNA表达,采用Western blot法测定核蛋白Nrf2和TET3表达水平;采用ELISA法测定神经元SOD、过氧化氢酶(CAT)和MDA含量。提取神经元DNA,采用ELISA法确定DNA甲基化率、羟甲基化率,采用实时荧光甲基化特异性PCR法检测Nrf2基因启动子CpG岛甲基化水平。结果与C组比较,OGD/R组神经元存活率降低,LDH释放率和凋亡率升高(P<0.01);与OGD/R组比较,M组神经元存活率升高,LDH释放率和凋亡率降低,TET3及其mRNA、Nrf2及其mRNA表达上调,DNA羟甲基化率、SOD和CAT含量升高,DNA及Nrf2启动子甲基化率、MDA含量降低(P<0.05或0.01);与M组比较,M+siTET3组神经元存活率降低,LDH释放率和凋亡率升高,TET3及其mRNA、Nrf2及其mRNA表达下调,DNA羟甲基化率、SOD和CAT含量降低,DNA及Nrf2启动子甲基化率、MDA含量升高(P<0.05或0.01),M+siCon组上述指标比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论大鼠脊髓神经元氧糖缺失-复氧复糖损伤时甲烷上调Nrf2表达的机制与激活TET3,促进Nrf2启动子区DNA去甲基化有关。

关键词：甲烷 NF-E2相关因子2 脊髓再灌注损伤 10-11易位蛋白 DNA去甲基化

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穿支蒂足背中间皮神经营养血管皮瓣修复前足软组织缺损

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中华创伤杂志 2017年第10期33卷 878-882页

作者：卫旭东林涧黄磊胡德庆钮朋洪旭戚瑞林郑和平蚌埠医学院福总教学医院(解放军福州总医院)骨科研究所福州350025 上海交通大学医学院附属新华医院(崇明)骨、显微外科福建医科大学附属第一医院骨科

目的探讨穿支蒂足背中间皮神经营养血管皮瓣修复前足软组织缺损的可行性。方法采用回顾性病例系列研究分析2013年2月～2017年1月收治的7例前足软组织缺损患者。其中男5例，女2例；年龄18～73岁，平均38岁。损伤部位：前足底外侧皮肤缺损... 详细信息

目的探讨穿支蒂足背中间皮神经营养血管皮瓣修复前足软组织缺损的可行性。方法采用回顾性病例系列研究分析2013年2月～2017年1月收治的7例前足软组织缺损患者。其中男5例，女2例；年龄18～73岁，平均38岁。损伤部位：前足底外侧皮肤缺损3例，第3趾蹼背侧皮肤缺损2例，第4足趾近节背侧皮肤缺损2例。缺损面积2．5cm×1．5cm～4．5cm×2．0cm。根据术式解剖学基础，在足背外侧设计并切取穿支蒂足背中间皮神经营养血管皮瓣转位修复前足创面。记录手术时间及术中出血量。术后常规观察皮瓣感觉、外观、质地、术区血供、皮瓣成活情况及皮瓣是否存在臃肿、增生性瘢痕、瘙痒、皮肤移植区麻痹等。术后运动功能恢复情况采用美国足踝外科协会（AOFAS）评分。结果手术时间1．0～1．5h，平均1h；术中出血量30～100ml，平均50ml。7例穿支蒂足背中间皮神经营养血管皮瓣全部成活，创面Ⅰ期愈合。经过2～15个月随访，皮瓣两点辨别觉为9～15mm，平均12．5mm。皮瓣质地优良，不臃肿，色泽接近正常，外观较好，术后足部未发生骨质吸收、创面感染、肌腱粘连、局部留有线条或片状瘢痕等并发症，下肢行走功能无障碍，供、受区未发现穿鞋不适。患足AOFAS评分95～98分，患者对供、受区功能和外形满意。结论穿支蒂足背中间皮神经营养血管皮瓣具有术后皮瓣成活率高、外形满意、术区恢复快等特点，且无明显足部疼痛、关节活动受限等并发症，是修复前足软组织缺损创面的可靠方法。

关键词：足损伤显微外科手术皮神经营养血管皮瓣

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