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胃癌中FKBP1A高表达的预后价值及其靶向PI3K/AKT对糖代谢的调控作用

中国癌症杂志 2023年第8期33卷 726-739页

作者：孙洋王炼赵萌张小凤耿志军王月月宋雪左芦根李静胡建国蚌埠医学院第一附属医院康复科安徽蚌埠233030 蚌埠医学院第一附属医院胃肠外科安徽蚌埠233030 炎症相关性疾病基础与转化研究安徽省重点实验室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院第一附属医院检验科安徽蚌埠233030

背景与目的:胃癌是常见的消化道恶性肿瘤之一,FKBP脯氨酸异构酶1A(FKBP prolyl isomerase 1A,FKBP1A)参与多种肿瘤的发生、发展,但在胃癌中的生物学作用及机制尚未明确。本研究旨在探讨FKBP1A在胃癌组织中的表达水平及预后价值,分析其... 详细信息

背景与目的:胃癌是常见的消化道恶性肿瘤之一,FKBP脯氨酸异构酶1A(FKBP prolyl isomerase 1A,FKBP1A)参与多种肿瘤的发生、发展,但在胃癌中的生物学作用及机制尚未明确。本研究旨在探讨FKBP1A在胃癌组织中的表达水平及预后价值,分析其调控胃癌进展的可能途径和机制。方法:免疫组织化学观察FKBP1A在胃癌中的表达情况并结合生物信息学与临床病理学参数分析其与预后不良的相关性;采用Kaplan-Meier生存曲线描述FKBP1A对胃癌患者术后5年生存率的影响,采用COX多因素回归分析探讨影响胃癌患者术后生存率的独立预后因素;通过受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析FKBP1A表达在胃癌患者中的诊断价值;基因本体(Gene Ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)富集分析FKBP1A的生物学功能及可能参与的信号转导通路,体外构建慢病毒转染的MGC803细胞模型,探究FKBP1A对MGC803细胞糖代谢和恶性生物学行为的影响以及可能的分子机制,并构建裸鼠移植瘤模型加以验证。结果:免疫组织化学检测结果显示,FKBP1A在胃癌中呈高表达(P<0.01),生物信息学与临床参数分析结果显示,其与患者预后不良相关;Kaplan-Meier生存分析和COX回归分析显示,FKBP1A表达量与患者5年生存率呈负相关,且其与外周血癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)≥5μg/L、糖类抗原19-9(carbohydrate antigen 19-9,CA19-9)≥37 kU/L、T分期(T3~T4期)和N分期(N2~N3期)是影响胃癌患者术后5年生存率的独立预后因素(P<0.05);ROC曲线分析表明,FKBP1A高表达具有较好的预后诊断价值(P<0.01);GO和KEGG富集分析推测FKBP1A可能参与调节胃癌细胞糖代谢。体外实验显示,过表达FKBP1A促进MGC803细胞糖代谢、增殖、侵袭和迁移,沉默FKBP1A则相反(P<0.05)。在体实验显示,胃癌细胞过表达FKBP1A促进裸鼠移植瘤的生长,而沉默则抑制之(P<0.05)。机制分析表明,过表达FKBP1A上调胃癌细胞中磷酸化的磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)和磷酸化的蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)的表达,而沉默则下调之(P<0.05)。结论:FKBP1A在胃癌组织中高表达且与患者预后不良相关,可能是通过激活PI3K/AKT促进胃癌细胞的糖代谢和恶性生物学行为。

关键词：胃癌 FKBP脯氨酸异构酶1A 预后糖代谢磷酰脂肌醇3激酶/蛋白激酶B

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BZW1高表达促进胃癌细胞的侵袭和转移:基于调控Wnt//β-catenin通路和促进上皮间质转化

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南方医科大学学报 2024年第2期44卷 354-362页

作者：张文静张诺杨子张小凤孙奥飞王炼宋雪耿志军李静胡建国蚌埠医学院第一附属医院检验科安徽蚌埠233004 蚌埠医学院第一附属医院胃肠外科安徽蚌埠233004 蚌埠医学院第一附属医院中心实验室安徽蚌埠233004 炎症相关性疾病基础与转化研究安徽省重点实验室安徽蚌埠233004

目的明确碱性亮氨酸拉链蛋白1(BZW1)在胃癌中的表达情况,并探讨其对胃癌患者预后的影响及其可能的作用机制。方法分别采用TIMER、UALCAN和Kaplan-Meier Plotter数据库分析BZW1在胃癌组织中的表达情况,与肿瘤分级、分期之间的相关性及对... 详细信息

目的明确碱性亮氨酸拉链蛋白1(BZW1)在胃癌中的表达情况,并探讨其对胃癌患者预后的影响及其可能的作用机制。方法分别采用TIMER、UALCAN和Kaplan-Meier Plotter数据库分析BZW1在胃癌组织中的表达情况,与肿瘤分级、分期之间的相关性及对患者预后的影响。纳入2014年1月~2016年12月在我院行胃癌根治术的102例患者,分析BZW1在胃癌组织中的表达水平、对胃癌疾病进展和患者术后5年生存率的影响。体外采用慢病毒转染的方式构建上调和下调BZW1表达的胃癌细胞系(MGC803),分析BZW1对MGC803细胞迁移、侵袭及上皮-间质转化(EMT)的作用。采用KEGG富集分析预测BZW1在胃癌中的可能作用机制,并进一步采用Western blot实验进行体外验证。结果生物信息学分析结果显示,BZW1在胃癌和癌旁组织中的表达量差异有统计学意义(P<0.01),免疫组化和RT-qPCR结果显示,BZW1在胃癌组织中的蛋白和mRNA表达水平分别是癌旁组织的3.30倍和6.54倍(P<0.01);胃癌组织中BZW1的表达水平与外周血CEA和CA199水平呈正相关(P<0.01);单因素结合Cox多元回归模型分析证实BZW1高表达(P<0.05,HR=2.070,95%CI:1.021~4.196)是影响胃癌患者根治术后5年生存率的独立危险因素;以BZW1相对表达量3.61为截点值,预判术后5年死亡的敏感性为75.56%,特异性为71.93%(P<0.01)。Transwell实验显示,上调BZW1可促进MGC803细胞的迁移和侵袭(P<0.05),下调则相反(P<0.05)。Western blot实验发现,上调BZW1可促进MGC803细胞N-cadherin与Vimentin的表达(P<0.05),并抑制E-cadherin的表达(P<0.05),下调则反之(P<0.05)。富集分析显示,BZW1生物功能可能与Wnt//β-catenin信号相关。Western blot实验进一步证实,上调BZW1可促进Wnt3a、β-Catenin及C-myc的表达(P<0.05),而下调则相反(P<0.05);使用Wnt通路抑制剂XAV-939可显著削弱上调BZW1对MGC803细胞中EMT关键分子的蛋白N-cadherin、Vimentin及E-cadherin的调控作用(P<0.05)。结论BZW1在胃癌组织中高表达并影响患者预后,可能与调控Wnt/β-catenin信号促进胃癌细胞EMT进程相关。

关键词：胃癌碱性亮氨酸拉链蛋白1 预后上皮-间质转化 Wnt/β-catenin

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高表达MRPL13促进胃癌细胞增殖并影响患者预后:基于抑制p53信号

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南方医科大学学报 2023年第9期43卷 1558-1566页

作者：王炼夏勇生张震刘馨悦施金冉王月月李静张小凤耿志军宋雪左芦根蚌埠医学院第一附属医院胃肠外科安徽蚌埠233004 蚌埠医学院安徽蚌埠233030 蚌埠医学院第一附属医院检验科安徽蚌埠233004 蚌埠医学院第一附属医院中心实验室安徽蚌埠233004 组织移植安徽省重点实验室安徽蚌埠233030 炎症相关性疾病基础与转化研究安徽省重点实验室安徽蚌埠233030

目的明确线粒体核糖体蛋白L13(MRPL13)在胃癌中的表达情况及对预后的影响,并分析其可能的作用机制。方法利用公共肿瘤数据库,对胃癌中MRPL13的表达及对预后的作用及发生机理进行初步分析。进一步纳入我院2014年1月~2017年10月开展胃癌... 详细信息

目的明确线粒体核糖体蛋白L13(MRPL13)在胃癌中的表达情况及对预后的影响,并分析其可能的作用机制。方法利用公共肿瘤数据库,对胃癌中MRPL13的表达及对预后的作用及发生机理进行初步分析。进一步纳入我院2014年1月~2017年10月开展胃癌根治术的100例患者,分析MRPL13表达量对肿瘤进展及术后5年生存期的影响。体外采用慢病毒转染的方式调控胃癌细胞系(MGC-803和SGC-7901)中MRPL13的表达,分析其对细胞增殖和周期的影响。通过裸鼠皮下移植瘤模型进一步验证MRPL13在体内对肿瘤生长的影响。结合体内外研究分析MRPL13影响胃癌细胞的分子机理。结果生物信息学和本机构的病例分析发现,胃癌组织中MRPL13的水平均显著高于癌旁组织(P<0.05)。相关性分析表明,MRPL13的表达与Ki67、外周血CEA和CA19-9均呈正相关(P<0.05)。单因素结合Cox多因素分析,证实MRPL13高表达是影响胃癌5年生存率的独立危险因素(HR:3.284;95%CI:1.537~7.016)。富集分析提示MRPL13的功能可能和细胞周期、p53信号有关。体外CCK-8、克隆形成、流式细胞术和免疫印迹检测显示:上调MRPL13促进胃癌细胞增殖、G1/S期转化和细胞周期蛋白(CyclinD1和CDK6)表达(P<0.05),下调MRPL13的结果则与之相反(P<0.05)。在体研究显示:上调胃癌细胞MRPL13表达显著促进裸鼠移植瘤的生长(P<0.05),而下调则抑制(P<0.05)。机制分析显示,上调MRPL13抑制胃癌细胞和裸鼠移植瘤中p53和p21的表达(P<0.05),而下调则反之(P<0.05)。结论MRPL13在胃癌中表达升高且影响长期预后,其可能通过抑制p53信号促进胃癌细胞增殖和细胞周期进程。

关键词：胃癌线粒体核糖体蛋白L13 预后细胞周期 p53

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胃癌中PCMT1表达的预后价值及其对纺锤体组装检查点的调控作用

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四川大学学报（医学版） 2023年第6期54卷 1167-1175页

作者：王月月张敏张震李博涵黄菊李静耿志军张小凤宋雪王炼左芦根胡建国蚌埠医学院第一附属医院检验科蚌埠233004 炎症相关性疾病基础与转化研究安徽省重点实验室蚌埠233030 蚌埠医学院第一附属医院胃肠外科蚌埠233004 蚌埠医学院蚌埠233030 蚌埠医学院第一附属医院中心实验室蚌埠233004

目的探讨蛋白质-L-异天冬氨酸(D-天冬氨酸)-甲基转移酶(PCMT1)在胃癌中的表达及对预后的影响,并分析其潜在的作用机制。方法 UALCAN数据库在线分析PCMT1在胃癌组织的表达情况,通过DAVID数据库进行基因本体注释(GO)及京都基因和基因组... 详细信息

目的探讨蛋白质-L-异天冬氨酸(D-天冬氨酸)-甲基转移酶(PCMT1)在胃癌中的表达及对预后的影响,并分析其潜在的作用机制。方法 UALCAN数据库在线分析PCMT1在胃癌组织的表达情况,通过DAVID数据库进行基因本体注释(GO)及京都基因和基因组百科全书(KEGG)信号通路富集分析其可能的功能与信号通路。纳入2014年1月–2017年12月于我院接受胃癌根治术的120例患者,免疫组织化学染色检测PCMT1、Ki67在胃癌组织中的表达;Cox回归、Kaplan-Meier曲线和受试者工作特征(ROC)曲线用于胃癌患者术后5年生存率的预后分析。采用慢病毒构建干扰或过表达PCMT1载体,转染人胃癌细胞系MGC-803与HGC-27细胞,设置干扰空载体(sh-NC)组与干扰PCMT1载体(sh-PCMT1)组,过表达空载体(LV-Vec)组与过表达PCMT1载体(LV-PCMT1)组;Western blot检测各组细胞中PCMT1、CyclinB1、CDC20蛋白表达,CCK-8法检测胃癌细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞周期。注射4组MGC-803细胞构建裸鼠皮下移植瘤模型,每组3只,测量体质量,14 d后处死裸鼠,测量肿瘤体积,Western blot法检测肿瘤组织中CyclinB1与CDC20蛋白表达水平。结果 UALCAN数据库分析示PCMT1在胃癌组织中高表达且在不同病理分期、分级与淋巴结转移的胃癌组织中均表达升高(P<0.05)。GO与KEGG富集示PCMT1主要参与有丝分裂、纺锤体组装检查点与细胞周期等信号。免疫组化结果显示PCMT1与Ki67在患者胃癌组织中呈高表达且二者呈正相关关系(P<0.05)。Cox多因素分析示PCMT1高表达[风险比(HR)=2.921,95%置信区间(CI):1.628~5.239]是影响胃癌患者术后5年生存率的独立危险因素之一。Kaplan-Meier曲线分析示高表达PCMT1的患者术后5年生存率(16.7%,HR=4.651,95%CI=2.846~7.601)低于低表达PCMT1患者(70.0%,HR=0.215,95%CI=0.132~0.351)。ROC曲线表明,PCMT1预测患者术后5年生存率的曲线下面积为0.764(95%CI:0.674~0.854)。Western blot对PCMT1的检测结果表明慢病毒干扰或过表达PCMT1细胞系构建成功。CCK-8结果表明下调PCMT1表达MGC-803与HGC-27细胞增殖能力减弱,过表达PCMT1则促进细胞增殖(P<0.05)。干扰PCMT1后CDC20蛋白表达下调,CyclinB1蛋白表达上升,细胞周期阻滞于G2/M期,而过表达则呈现相反趋势(P<0.05)。sh-PCMT1组裸鼠肿瘤的体积与质量减小,肿瘤组织CDC20蛋白表达降低,CyclinB1蛋白表达升高(P<0.05,与sh-NC组相比),LV-PCMT1组则呈相反趋势(P<0.05,与LV-Vec组相比)。结论 PCMT1在胃癌组织中呈高表达,与患者不良预后相关,可能通过调控细胞有丝分裂进程中纺锤体检查点影响肿瘤细胞恶性增殖。

关键词：胃癌 PCMT1 预后纺锤体组装检查点

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丝氨酸/苏氨酸磷酸蛋白磷酸酶4C在胃癌中的表达水平及其与预后的相关性

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中国医学科学院学报 2023年第5期45卷 721-729页

作者：耿志军黄菊李晴晴周芷萱李静张小凤王炼王月月宋雪左芦根蚌埠医学院第一附属医院、安徽省炎症相关性疾病基础与转化研究重点实验室安徽蚌埠233000 蚌埠医学院第一附属医院中心实验室安徽蚌埠233000 蚌埠医学院第一附属医院检验科安徽蚌埠233000 蚌埠医学院第一附属医院胃肠外科安徽蚌埠233000

目的分析丝氨酸/苏氨酸磷酸蛋白磷酸酶4C(PPP4C)在胃癌中的表达水平及与预后的相关性,并探究其可能的作用途径和机制。方法收集2012年1月至2016年8月蚌埠医学院第一附属医院收治的104例胃癌患者的临床资料,采用免疫组织化学染色技术检... 详细信息

目的分析丝氨酸/苏氨酸磷酸蛋白磷酸酶4C(PPP4C)在胃癌中的表达水平及与预后的相关性,并探究其可能的作用途径和机制。方法收集2012年1月至2016年8月蚌埠医学院第一附属医院收治的104例胃癌患者的临床资料,采用免疫组织化学染色技术检测胃癌组织中PPP4C和Ki-67的表达水平。培养BGC823和HGC27胃癌细胞,分别转染PPP4C敲减、过表达和对照慢病毒载体,分析PPP4C对细胞周期和增殖的影响及可能的调控机制。结果PPP4C在胃癌组织中呈高表达(P<0.001),且与肿瘤的恶性进展呈正相关(P均<0.01)。单因素和Cox回归模型分析显示,PPP4C高表达是影响胃癌患者术后5年生存率的独立危险因素(P=0.003)。基因功能注释和京都基因与基因组组百科全书富集分析提示PPP4C生物学功能可能与细胞周期有关。相关性分析显示胃癌组织中PPP4C与Ki-67的表达量呈正相关(P<0.001)。上调PPP4C增加S期胃癌细胞比例和减缓G2/M期阻滞,并促进细胞增殖以及Cyclin D1和细胞分裂蛋白激酶6(CDK6)、p53的表达(P均<0.05);下调PPP4C减少S期胃癌细胞比例和促进G2/M期阻滞,抑制细胞增殖以及Cyclin D1、CDK6和p53的表达(P均<0.05)。p53抑制剂促进PPP4C敲减组BGC823和HGC27胃癌细胞的增殖(P<0.001,P<0.001),p53激活剂抑制PPP4C过表达组BGC823和HGC27胃癌细胞的增殖(P<0.001,P=0.002)。结论PPP4C在胃癌中高表达且影响患者预后,其可能通过抑制p53信号通路增加S期胃癌细胞比例和减缓G2/M期阻滞,进而促进细胞增殖。

关键词：胃癌丝氨酸/苏氨酸磷酸蛋白磷酸酶4C 预后细胞周期 p53

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乙酰紫堇灵通过抑制肠上皮细胞凋亡改善三硝基苯磺酸诱导的小鼠克罗恩病样结肠炎

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南方医科大学学报 2023年第8期43卷 1306-1314页

作者：李晴晴黄菊孙洋徐赟辉王炼张小凤王月月耿志军宋雪左芦根李静胡建国蚌埠医学院第一附属医院检验科安徽蚌埠233004 蚌埠医学院检验医学院安徽蚌埠233030 蚌埠医学院第一附属医院中心实验室安徽蚌埠233004 蚌埠医学院第一附属医院胃肠外科安徽蚌埠233004 炎症相关性疾病基础与转化研究安徽省重点实验室安徽蚌埠233004

目的探究乙酰紫堇灵(Ace)对2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的小鼠克罗恩病(CD)样结肠炎的作用及机制。方法将40只雄性C57BL/6小鼠随机分为5组:WT组、TNBS组和Ace干预组(Ace-10组、Ace-20组和Ace-40组),每组8只。TNBS组和Ace干预组小鼠均... 详细信息

目的探究乙酰紫堇灵(Ace)对2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的小鼠克罗恩病(CD)样结肠炎的作用及机制。方法将40只雄性C57BL/6小鼠随机分为5组:WT组、TNBS组和Ace干预组(Ace-10组、Ace-20组和Ace-40组),每组8只。TNBS组和Ace干预组小鼠均采用TNBS诱导建立结肠炎模型,Ace干预组分别给予10、20、40 mg/kg的Ace灌胃治疗,而TNBS组均给予等量生理盐水。通过监测体质量变化、疾病活动评分(DAI)、结肠长度测量、HE染色和组织学评分评估Ace对TNBS结肠炎小鼠的保护作用。小鼠结肠组织经免疫荧光检测Claudin-1、Western blot检测紧密连接蛋白(Claudin-1和ZO-1)和凋亡相关蛋白(C-caspase3、Bax和Bcl-2)以及Tunel染色检测肠上皮细胞凋亡的数量。采用结肠类器官经脂多糖诱导建立凋亡模型,分为Control组、脂多糖组及Ace组,采用免疫荧光检测Claudin-1以及Western blot检测Claudin-1、ZO-1、C-caspase3、Bax和Bcl-2的表达。利用网络药理学预测Ace抑制肠上皮细胞凋亡的分子机制可能与PI3K-AKT通路相关,采用Western blot验证小鼠结肠组织和结肠类器官中pPI3K和p-AKT的表达。体外凋亡模型中加入PI3K-AKT信号通路激活剂(740Y-P),Western blot验证结肠类器官中p-PI3K、pAKT、C-caspase3、Bax及Bcl-2的表达。结果与TNBS组相比,Ace治疗可显著缓解TNBS小鼠的体质量下降、结肠长度缩短、DAI评分和炎症评分升高(P<0.05)。在Ace组小鼠结肠组织中,免疫荧光结果显示:Claudin-1的表达上调(P<0.05);Western blot结果显示:Claudin-1、ZO-1和Bcl-2的蛋白水平升高,而C-caspase3和Bax的表达降低(P<0.05);Tunel染色结果显示:肠上皮细胞凋亡数量减少(P<0.05)。在体外凋亡模型中,经Ace干预后,免疫荧光和Western blot结果显示,结肠类器官组织中ZO-1和Claudin-1的表达升高(P<0.05)、C-caspase3和Bax表达降低,而Bcl-2表达升高(P<0.05)。KEGG通路富集预测发现PI3K-AKT信号通路与Ace治疗CD具有相关性,且Western blot结果表明,在体内外模型中经Ace干预后p-AKT和p-PI3K的表达显著降低(P<0.05)。另外,PI3K-AKT激活剂(740Y-P)促进p-PI3K、p-AKT、C-caspase3和Bax的表达,而抑制Bcl-2的表达(P<0.05)。结论Ace可能通过干扰PI3K/AKT信号的激活抑制肠上皮细胞凋亡,进而发挥对TNBS诱导的小鼠CD样结肠炎的保护作用。

关键词：克罗恩病乙酰紫堇灵肠上皮细胞凋亡 PI3K/AKT

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CPNE3在胃癌中高表达并与患者的预后不良相关

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南方医科大学学报 2024年第1期44卷 129-137页

作者：段婷张震施金冉肖林雨杨晶晶殷丽霞张小凤耿志军陆国玉蚌埠医学院第一附属医院急诊内科安徽蚌埠233000 蚌埠医学院第一附属医院胃肠外科安徽蚌埠233000 蚌埠医学院第一附属医院中心实验室安徽蚌埠233000 蚌埠医学院第一附属医院康复科安徽蚌埠233000 蚌埠医学院第一附属医院检验科安徽蚌埠233000 炎症相关性疾病基础与转化研究安徽省重点实验室安徽蚌埠233000

目的明确CPNE3在胃癌组织中表达情况与患者远期预后的关系,探究其调控胃癌细胞凋亡的作用和分子机制。方法纳入2013年2月~2017年10月104例于我院行胃癌根治术的患者,通过癌症和肿瘤基因图谱(TCGA)的公共数据和免疫组织化学染色分析CPNE... 详细信息

目的明确CPNE3在胃癌组织中表达情况与患者远期预后的关系,探究其调控胃癌细胞凋亡的作用和分子机制。方法纳入2013年2月~2017年10月104例于我院行胃癌根治术的患者,通过癌症和肿瘤基因图谱(TCGA)的公共数据和免疫组织化学染色分析CPNE3在胃癌中的表达和对患者肿瘤进展与远期预后的影响。GO富集分析预测CPNE3在胃癌中的生物学功能。采用干扰和过表达CPNE3以及对照慢病毒载体转染MGC803细胞,获取对照组(NC)、敲低组(si-CPNE3)、过表达组(LV-CPNE3)细胞,采用PI3K/AKT抑制剂(LY294002)干预LV-CPNE3组细胞获取LY294002组。流式细胞术分析细胞凋亡,Westernblot检测Bax、CleavedCaspase-3、Bcl-2、p-PI3K和p-AKT表达。结果TCGA预测分析和免疫组化结果显示CPNE3在胃癌中高表达(P<0.05)。Kaplan-Meier生存分析显示CPNE3高表达组患者5年生存率显著降低(P<0.01)。单因素及Cox回归分析显示CPNE3高表达、CEA≥5μg/L、CA19-9≥37kU/L、T3-T4期和N2-N3期是影响胃癌根治术后5年生存率的独立危险因素。ROC曲线分析显示CPNE3预判术后5年死亡的敏感度为79.59%,特异性为74.55%(P<0.05)。GO富集分析预测显示CPNE3可能与负向调控胃癌细胞凋亡有关。体外实验显示,si-CPNE3组的细胞凋亡率以及Bax、Cleaved Caspase-3表达的增多,而Bcl-2表达减少;LV-CPNE3组则结果相反(P<0.05)。机制分析显示,si-CPNE3组p-PI3K、p-AKT表达降低,LV-CPNE3组则增多(P<0.05);另外,LY294002减弱了CPNE3过表达对胃癌细胞凋亡的抑制作用(P<0.05)。结论CPNE3在胃癌组织中高表达且对患者的远期预后具有预测价值,可能与其通过激活PI3K/AKT信号通路抑制胃癌细胞的凋亡有关。

关键词：胃癌 CPNE3 细胞凋亡预后 PI3K/AKT

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紫菀酮对小鼠脊髓损伤后神经元凋亡的影响

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中国医学科学院学报 2023年第5期45卷 703-712页

作者：许轶博孙洋肖林雨朱国庆宋雪胡建国齐琦蚌埠医学院基础医学院组织与胚胎学教研室安徽蚌埠233030 蚌埠医学院第一附属医院炎症相关性疾病基础与转化研究安徽省重点实验室安徽蚌埠233000 蚌埠医学院第一附属医院康复科安徽蚌埠233000 蚌埠医学院第一附属医院检验科安徽蚌埠233000 蚌埠医学院第一附属医院中心实验室安徽蚌埠233000

目的探讨紫菀酮(SHI)对脊髓损伤(SCI)小鼠运动功能的影响及可能的分子机制。方法采用C57BL/6小鼠构建SCI模型,分为模型组(SCI组)和SHI药物治疗组(SCI+SHI组),假手术小鼠为对照组。采用Basso小鼠量表(BMS)评分评估SCI小鼠运动功能恢复... 详细信息

目的探讨紫菀酮(SHI)对脊髓损伤(SCI)小鼠运动功能的影响及可能的分子机制。方法采用C57BL/6小鼠构建SCI模型,分为模型组(SCI组)和SHI药物治疗组(SCI+SHI组),假手术小鼠为对照组。采用Basso小鼠量表(BMS)评分评估SCI小鼠运动功能恢复情况,采用HE染色和Nissl染色观察SCI小鼠脊髓组织纤维化和神经元的形态学变化,采用免疫荧光染色分析脊髓组织中神经元凋亡情况。体外培养小鼠海马神经元HT22细胞,分为肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导组和SHI药物治疗组,采用Western blot检测各组细胞凋亡相关蛋白的表达。利用网络药理学、基因本体和京都基因与基因组百科全书富集分析预测SHI促进SCI功能恢复的可能分子靶点和信号通路,并通过体内外实验对其分子机制进行验证。结果与SCI组比较,SCI+SHI组小鼠BMS评分在第21、28、35、42天显著升高(P=0.003、P=0.004、P=0.023、P=0.007),脊髓组织纤维化面积显著降低(P=0.021),神经元存活数量显著增加(P=0.001),活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cleaved-Caspase3)表达显著降低(P=0.017)。与TNF-α组比较,SHI组cleaved-Caspase3、Bax蛋白表达水平显著降低(P=0.010、P=0.001),而Bcl-2蛋白表达水平显著升高(P=0.001)。生物信息学分析结果显示SHI改善SCI小鼠运动功能可能与磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路相关。体内和体外实验检测结果显示,SHI可抑制SCI小鼠或TNF-α诱导的HT22细胞中PI3K和Akt的磷酸化水平(P均<0.05),而胰岛素样生长因子-1干预后HT22细胞凋亡数量显著高于SHI组(P=0.003)。结论 SHI可能通过PI3K/Akt信号通路抑制神经元凋亡,从而促进SCI小鼠运动功能恢复。

关键词：脊髓损伤紫菀酮神经元凋亡磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B

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高表达CAMSAP2通过上调TGF-β信号促进胃癌细胞的侵袭和转移

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南方医科大学学报 2023年第9期43卷 1460-1468页

作者：左芦根王炼杨子李骏杰王文锋李静王月月宋雪张小凤耿志军蚌埠医学院第一附属医院胃肠外科安徽蚌埠233004 蚌埠医学院临床医学院安徽蚌埠233030 蚌埠医学院第一附属医院检验科安徽蚌埠233004 蚌埠医学院第一附属医院中心实验室安徽蚌埠233004 组织移植安徽省重点实验室安徽蚌埠233030 炎症相关性疾病基础与转化研究安徽省重点实验室安徽蚌埠233030

目的阐明钙调蛋白调控的光谱相关蛋白2(CAMSAP2)在胃癌中的表达及其对疾病进展和预后的影响,并分析可能的机制。方法利用公共癌症数据初步分析CAMSAP2的表达和胃癌进展及预后的关系,另纳入2013年10月~2017年10月在我院完成胃癌根治术的... 详细信息

目的阐明钙调蛋白调控的光谱相关蛋白2(CAMSAP2)在胃癌中的表达及其对疾病进展和预后的影响,并分析可能的机制。方法利用公共癌症数据初步分析CAMSAP2的表达和胃癌进展及预后的关系,另纳入2013年10月~2017年10月在我院完成胃癌根治术的106例患者进行验证。利用生物信息学预测CAMSAP2的生物学功能。采用CAMSAP2过表达质粒、特异性干扰分别处理胃癌细胞系(MGC803)分为CAMSAP2上调组、CAMSAP2下调组,将未经处理的MGC803设为空白对照组,体外观察CAMSAP2对胃癌细胞上皮-间质转化(EMT)和侵袭的影响,并建立裸鼠胃原位种植瘤模型进行在体验证,同时分析CAMSAP2调控胃癌的分子机制。结果CAMSAP2在胃癌组织中的表达显著高于癌旁组织(P<0.05),并和外周血CEA、CA19-9水平正相关(P<0.001)。Cox回归分析显示CAMSAP2高表达是影响胃癌患者术后5年生存率的独立危险因素(HR:2.969;95%CI:1.031-8.548)。富集分析提示CAMSAP2的作用可能与EMT和TGF-β信号有关。免疫印迹、划痕和Transwell实验发现:体外上调CAMSAP2可促进胃癌细胞表达Vimentin和N-cadherin,同时抑制E-cadherin的表达,并促进胃癌细胞迁移和侵袭(P<0.05);下调CAMSAP2则结果相反(P<0.05)。在体上调CAMSAP2可促进裸鼠胃原位种植瘤的转移(P<0.05),促进胃癌组织中Vimentin和N-cadherin的表达,同时抑制E-cadherin的表达(P<0.05);下调CAMSAP2则结果相反(P<0.05)。体内外实验中,上调CAMSAP2可升高胃癌组织或胃癌细胞中TGF-β和p-Smad2/3的水平(P<0.05),而下调CAMSAP2则结果相反(P<0.05)。结论CAMSAP2在胃癌中高表达并和肿瘤恶性进展以及预后不良相关,其可能通过上调TGF-β信号参与了胃癌的EMT过程。

关键词：胃癌 CAMSAP2 TGF-β 预后上皮-间质转化

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无纺布和滤纸“三明治”固定法在防止小鼠结肠病理切片黏膜层和肌层分离中的应用

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中华病理学杂志 2023年第10期52卷 1040-1043页

作者：沈力李岳彤徐梦宇刘光勇张夏婉程阳朱国庆张敏王炼张小凤左芦根耿志军李静王月月宋雪蚌埠医学院第一附属医院中心实验室蚌埠233004 蚌埠医学院蚌埠233000 蚌埠医学院第一附属医院胃肠外科蚌埠233004 蚌埠医学院第一附属医院检验科蚌埠233004 炎症相关性疾病基础与转化研究安徽省重点实验室蚌埠233004

目的:探讨无纺布和滤纸“三明治”固定法对小鼠结直肠病理切片质量和黏膜下层结构完整性的影响。方法:分别采用“三明治”法和常规方法固定脱水包埋小鼠结直肠样本,并制作病理切片进行比较。HE染色评估病理切片的肌层分离情况并统计不... 详细信息

目的:探讨无纺布和滤纸“三明治”固定法对小鼠结直肠病理切片质量和黏膜下层结构完整性的影响。方法:分别采用“三明治”法和常规方法固定脱水包埋小鼠结直肠样本,并制作病理切片进行比较。HE染色评估病理切片的肌层分离情况并统计不分离率;通过免疫组织化学法标记淋巴管(LYVE-1)和血管(CD31),分析两组病理切片黏膜下层结构的完整性。结果:HE染色显示“三明治”组的小鼠结直肠病理切片少见肌层分离情况,而常规方法组切片普遍存在肌层分离;不分离率统计分析发现,“三明治”组不分离率(85.3%)高于常规方法组(21.1%, P<0.01);免疫组织化学结果显示,“三明治”组切片黏膜下层多见完整的淋巴管和血管结构,而常规方法组较为少见;统计分析发现“三明治”组的黏膜下层完整淋巴管和血管的数量分别为(99.3±10.1)和(72.7±8.1);高于常规方法组淋巴管(12.7±2.5, P<0.01)和血管数量(15.9±3.2, P<0.01)。结论:“三明治”固定法脱水包埋可显著提升小鼠结直肠病理切片的不分离率,有效改善肌层分离问题并保护黏膜下层结构的完整性。

关键词：黏膜下层血管结构病理切片分离率血管数量肌层无纺布免疫组织化学

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