检索结果-内蒙古大学图书馆

中南医学科学杂志 2024年第2期52卷 295-299页

作者：马湘宜柴嘉音孟艳王雯首都医科大学基础医学院北京100069 代谢紊乱相关心血管疾病北京市重点实验室北京100069

硝基化应激是指由一氧化氮或由其衍生的活性氮(RNS)与活性氧(ROS)联合发生的生物化学反应。在应激状态下,机体产生高浓度的超氧阴离子(O 2-)与一氧化氮,二者反应可生成过氧亚硝酸盐,使蛋白质酪氨酸残基发生硝基化修饰,生成3-硝基酪氨酸(... 详细信息

硝基化应激是指由一氧化氮或由其衍生的活性氮(RNS)与活性氧(ROS)联合发生的生物化学反应。在应激状态下,机体产生高浓度的超氧阴离子(O 2-)与一氧化氮,二者反应可生成过氧亚硝酸盐,使蛋白质酪氨酸残基发生硝基化修饰,生成3-硝基酪氨酸(3-NT)。3-NT通常用来反映蛋白质硝基化修饰的水平。蓄积的3-NT导致DNA损伤,引起细胞死亡,损害心脏结构,进而造成心脏功能障碍。心力衰竭是心血管疾病终末阶段出现的临床综合征,发病原因多样,具有发病率高、预后差的特点,是全世界范围内重要的公共卫生问题之一。在心力衰竭病理过程中,心脏的硝基化应激水平明显升高,大量蛋白质发生硝基化修饰,3-NT生成随之增加。本文对蛋白质硝基化修饰在心力衰竭发生发展中的作用做一综述。

关键词：蛋白质硝基化心力衰竭 3-硝基酪氨酸硝基化应激

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烟酰胺磷酸核糖转移酶在小鼠心肌梗死后修复中的表达变化与功能研究

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中国循环杂志 2023年第4期38卷 456-463页

作者：钟嘉俊黄成珍聂宇林爱玲王珏温州医科大学附属第一医院心脏外科温州325000 中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院北京100005 中国医学科学院北京协和医学院国家心血管病中心阜外医院心血管疾病国家重点实验室北京100037现为温州医科

目的:探讨心肌梗死后烟酰胺磷酸核糖转移酶(NAMPT)表达变化及其对小鼠心肌细胞增殖的影响,为治疗心肌梗死探索新的理论依据与干预靶点。方法:分离原代乳鼠心肌细胞,给予NAMPT重组蛋白100 ng/ml,利用免疫荧光染色检测心肌细胞的磷酸化组... 详细信息

目的:探讨心肌梗死后烟酰胺磷酸核糖转移酶(NAMPT)表达变化及其对小鼠心肌细胞增殖的影响,为治疗心肌梗死探索新的理论依据与干预靶点。方法:分离原代乳鼠心肌细胞,给予NAMPT重组蛋白100 ng/ml,利用免疫荧光染色检测心肌细胞的磷酸化组蛋白H3(pH3)、增殖抗原Ki67表达。将成年C57BL/6j雄性小鼠40只随机分成2组:NAMPT治疗组,磷酸盐缓冲液(PBS)对照组,每组20只,同时取10只作为假手术组。通过结扎小鼠冠状动脉左前降支建立小鼠心肌梗死模型,NAMPT治疗组于结扎线以下通过显微心肌内注射NAMPT重组蛋白0.5μg,PBS对照组以同样方法注射PBS溶液,假手术组仅开胸不结扎冠状动脉。通过M型超声检测小鼠术后心功能,取出心脏后Masson染色在光学显微镜下观察并测定心肌梗死面积。结果:左前降支结扎构建心肌梗死模型的小鼠在术后第2、3天NAMPT的信使RNA(mRNA)均显著下调(P均<0.05)。NAMPT处理原代心肌细胞后,与PBS对照组相比,pH3、Ki67阳性心肌细胞比例差异均无统计学意义(P均>0.05),心肌内注射NAMPT的乳鼠心脏中pH3阳性的心肌细胞较PBS对照组也无明显增多(P>0.05)。心肌梗死小鼠NAMPT给药后,与PBS对照组相比,NAMPT治疗组的左心室射血分数和左心室缩短分数差异均无统计学意义(P均>0.05),NAMPT治疗组的心重、体重、心重/体重比值差异均无统计学意义(P均>0.05);两组间梗死面积差异无统计学意义(P>0.05)。结论:心肌梗死损伤会导致心肌组织中NAMPT表达水平下调;但外源性补给NAMPT不能改善小鼠心肌梗死后的心功能,不能减小梗死面积,NAMPT在心肌梗死损伤修复中的作用有待进一步探究。

关键词：心肌梗死心肌增殖烟酰胺磷酸核糖转移酶心肌内注射

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运动康复疗法治疗肺动脉高压的研究进展

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中国心血管病研究 2024年第2期22卷 102-107页

作者：卓倩刘伟肖晔卢祥婷戴海龙云南省心血管疾病重点实验室、云南省心脏疾病临床医学中心、昆明医科大学附属延安医院心血管内科云南省昆明市650051

肺动脉高压(pulmonary arterial hypertension,PAH)是一种典型的慢性进行性加重的心肺血管疾病,生存率较低,目前的基础治疗及靶向药物治疗可以改善PAH患者的生存质量,但远期疗效及预后不佳,研究表明,在现有治疗的基础上进行运动康复疗... 详细信息

肺动脉高压(pulmonary arterial hypertension,PAH)是一种典型的慢性进行性加重的心肺血管疾病,生存率较低,目前的基础治疗及靶向药物治疗可以改善PAH患者的生存质量,但远期疗效及预后不佳,研究表明,在现有治疗的基础上进行运动康复疗法可以改善心肺功能储备、增强骨骼肌力量、减轻炎症反应、改善血管及心室重塑、提高患者远期生活质量和改善心理状态。本文将对PAH患者中运动康复疗法的作用及安全性等方面研究进展进行综述。

关键词：运动康复疗法肺动脉高压研究进展

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应用连续动态左心功能指标的变化辅助CPET评价个体化精准运动整体方案管控慢病疗效的临床研究Ⅰ--组群间分析

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中国应用生理学杂志 2022年第6期38卷 595-603页

作者：张艳芳孙兴国王继楠台文琦周晴晴宋雅陈嘉豪黄疆颉奔徐凡石超刘方张也李浩谢友红重庆医科大学附属康复医院重庆400050 国家心血管病中心中国医学科学院阜外医院北京协和医学院心血管疾病国家重点实验室心血管疾病国家临床医学研究中心北京100037 北京大学第三医院北京100191

目的:探讨研究连续动态左心功能指标变化评价个体化精准运动整体方案强化管控3个月后的长期慢病患者心血管功能的改善情况。方法:选取2018年至2021年由我们团队强化管控的长期心脑血管代谢慢病为主的患者21例,签署知情同意书后完成症状... 详细信息

目的:探讨研究连续动态左心功能指标变化评价个体化精准运动整体方案强化管控3个月后的长期慢病患者心血管功能的改善情况。方法:选取2018年至2021年由我们团队强化管控的长期心脑血管代谢慢病为主的患者21例,签署知情同意书后完成症状限制性极限心肺运动试验(CPET)和无创左右心功能同步检测仪(N-ISCFD)连续记录50 s心电图、桡动脉脉搏波、颈静脉脉搏波和心音图数据,根据CPET及连续功能学监测下滴定结果制定以个体化适度运动强度为核心的整体方案进行3个月强化管控后再重复N-ISVCD数据收集。所有N-ISCFD的50 s数据按阜外医院优化报告模式进行分析计算52项左心功能学指标;强化管控前后的数据比较采用配对t检验统计学分析组群变化情况。结果:21例长期慢病患者(16男5女),年龄为(54.05±12.77,29~75)岁,BMI为(25.53±4.04,16.62~31.7)kg/m^(2)。与强化管控前基础值比较,患者3个月强化管控后①一般指标:体重、BMI、收缩压和舒张压均显著降低(P<0.01);②CPET核心指标Peak VO_(2)从(64.93±24.22,26.96~103.48)%Pred提高为(85.22±30.31,43.95~140.48)%Pred(P<0.01),显著平均提升(35.09±27.87,0.12~129.35)%;其他AT、Peak VO_(2)/HR、Peak Work Rate、OUEP、FVC、FEV_(1)、FEV_(3)/FVC%和MVV也均较管控前显著升高(P<0.01);而Lowest VE/VCO_(2)和VE/VCO_(2)Slope则显著降低(P<0.01);③左右心功能核心指标:射血分数(EF)从(0.60±0.12,0.40~0.88)%显著提高为(0.66±0.09,0.53~0.87)%(P<0.01),平均提升(12.39±14.90,-12.32~41.11)%;总阻力(TPR)从(1579.52±425.45,779.46~2409.61)G/(cm^(4)·s)显著降低为(1340.44±261.49,756.05~1827.01)G/(cm^(4)·s)(P<0.01),平均降低(12.00±17.27,-37.79~28.61)%;其他左心搏指数(LSI),心脏总功率(CTP),射流压力(EP),左室舒张末期血量(LVEDV)等指标也均显著改善(P<0.05)。结论:CPET和连续功能学监测可安全有效制定慢病患者个体化运动整体方案,长期强化管控可安全有效地显著改善患者组群的整体功能状态,而连续动态记录左心功能指标的改变可以辅助CPET简便评价心血管功能变化。

关键词：整体整合生理学医学心肺运动试验个体化精准运动强化管控方案心血管功能慢性病管控

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LncRNA SNHG1在同型半胱氨酸致足细胞焦亡中的作用

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实用医学杂志 2024年第4期40卷 476-482页

作者：张正皓马芳张晴夏童童刘虹麟白志刚卢冠军张竞文彭红建姜怡邓马胜超宁夏医科大学基础医学院银川750004 国家卫生健康委员会代谢性心血管疾病研究重点实验室银川750004 宁夏医科大学检验学院银川750004 宁夏回族自治区人民医院银川750004 宁夏医科大学总医院银川750004 中南大学化学化工学院长沙410083

目的探讨lncRNA SNHG1在同型半胱氨酸诱导足细胞焦亡中的作用。方法选取Cbs^(+/-)小鼠随机分成2组,设置正常饮食组(ND)和高蛋氨酸饮食组(HMD),Western blot检测Caspase-1、Cleaved Caspase-1和NLRP3的蛋白表达水平。体外培养小鼠肾小球... 详细信息

目的探讨lncRNA SNHG1在同型半胱氨酸诱导足细胞焦亡中的作用。方法选取Cbs^(+/-)小鼠随机分成2组,设置正常饮食组(ND)和高蛋氨酸饮食组(HMD),Western blot检测Caspase-1、Cleaved Caspase-1和NLRP3的蛋白表达水平。体外培养小鼠肾小球足细胞,设置对照组(Control,0μmol/L Hcy)和同型半胱氨酸干预组(Hcy,80μmol/L Hcy);足细胞转染慢病毒后设置lncSNHG1过表达阴性对照组(OE-NC)和lncSNHG1过表达组(OE-SNHG1);lncSNHG1过表达阴性对照+同型半胱氨酸干预组(OE-NC+Hcy)和lncSNHG1过表达+同型半胱氨酸干预组(OE-SNHG1+Hcy),干预细胞48 h后,实时荧光定量PCR检测Hcy干预的足细胞中lncSNHG1表达水平;Western blot和免疫荧光技术检测足细胞中焦亡相关蛋白Caspase-1、Cleaved Caspase-1、NLRP3及GSDMD和GSDMD-N表达水平;ELISA检测足细胞中焦亡介导的炎症相关因子IL-1β和IL-18含量。结果(1)动物实验中:与正常饮食组(ND)相比,高蛋氨酸饮食组(HMD)中焦亡相关蛋白Caspase-1、Cleaved Caspase-1和NLRP3及GSDMD、GSDMD-N表达水平增高;(2)细胞实验中:与对照组(Control)相比,同型半胱氨酸干预组(Hcy)中焦亡相关蛋白Caspase-1、Cleaved Caspase-1和NLRP3及GSDMD、GSDMD-N表达水平增高,焦亡介导炎症因子IL-1β和IL-18含量增高;(3)细胞实验中:与对照组(Control)相比,同型半胱氨酸干预组(Hcy)中lncSNHG1表达水平增高;足细胞转染lncSNHG1慢病毒后,与Control组及OE-NC组相比,OE-SNHG1组lncSNHG1表达水平增高;(4)细胞实验中:与OE-NC+Hcy组相比,OE-SNHG1+Hcy组中焦亡相关蛋白Caspase-1、Cleaved Caspase-1和NLRP3及GSDMD、GSDMD-N表达水平增高,焦亡介导炎症因子IL-1β和IL-18含量增高。结论lncRNA SNHG1在Hcy诱导的足细胞焦亡过程中起到促进作用。

关键词：同型半胱氨酸足细胞核仁小RNA宿主基因1 焦亡

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环状RNA circ＿BRAF＿2在子痫前期胎盘滋养细胞自噬中的作用

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中国临床药理学杂志 2022年第23期38卷 2860-2864页

作者：朱亚飞张玉月谢琳殷荷王艳华吴凯姜怡邓张慧萍宁夏医科大学护理学院宁夏医科大学基础医学院宁夏医科大学国家卫生健康委代谢性心血管疾病研究重点实验室宁夏医科大学宁夏血管损伤与修复研究重点实验室宁夏医科大学临床医学院宁夏医科大学总医院妇科湖南省妇幼保健院医学遗传科

目的研究子痫前期（PE）患者胎盘组织中环状RNA circ＿BRAF＿2的表达及其对胎盘滋养细胞自噬的影响。方法选取妊娠对照组与PE组胎盘组织各22例；将HTR-8/SVneo细胞分为对照组（常规培养）、pLV-NC组（转染空载体）、pLV-circ＿BRAF＿... 详细信息

目的研究子痫前期（PE）患者胎盘组织中环状RNA circ＿BRAF＿2的表达及其对胎盘滋养细胞自噬的影响。方法选取妊娠对照组与PE组胎盘组织各22例；将HTR-8/SVneo细胞分为对照组（常规培养）、pLV-NC组（转染空载体）、pLV-circ＿BRAF＿2组（转染circ＿BRAF＿2）、缺氧组（缺氧处理）、pLV-NC+缺氧组（转染空载并进行缺氧处理）、pLV-circ＿BRAF＿2+缺氧组（转染circ＿BRAF＿2并进行缺氧处理）。用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测胎盘组织及HTR-8/SVneo细胞中circ＿BRAF＿2的表达，用PCR及Sanger测序对HTR-8/SVneo细胞中circ＿BRAF＿2进行鉴定，用核质分离法检测circ＿BRAF＿2在HTR-8/SVneo细胞胞质和细胞核中的表达，用透射电镜观察细胞自噬体的形成，用蛋白质印迹法检测自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3（LC3）、P62的表达。用qRT-PCR检测miR-15a-5p的表达水平。结果妊娠对照组、PE组、对照组及缺氧组circ＿BRAF＿2的相对表达水平分别为0.89±0.05,0.32±0.03,0.04±0.05×10-1和0.02±0.03×10-1,PE组与妊娠对照组相比，缺氧组与对照组相比，差异均有统计学意义（均P<0.01）;通过外扩型引物只能在cDNA中扩增出circ＿BRAF＿2,而采用内扩型引物能同时在cDNA和gDNA中扩增出其线性转录本BRAF;circ＿BRAF＿2在HTR-8/SVneo细胞胞质中的表达(0.02±0.02×10-1)显著高于在胞核中的表达(0.02×10-2±0.03×10-3,P<0.01);对照组、pLV-NC组、pLV-circ＿BRAF＿2组、缺氧组、pLV-NC+缺氧组、pLV-circ＿BRAF＿2+缺氧组LC3-Ⅱ蛋白相对表达水平分别为0.75±0.25,0.73±0.23,0.75±0.23,1.17±0.30,1.19±0.32和0.42±0.06,P62蛋白相对表达水平分别为0.72±0.07,0.75±0.09,0.72±0.08,0.45±0.11,0.44±0.10和0.62±0.07,缺氧组的上述指标与对照组相比，pLV-circ＿BRAF＿2+缺氧组的上述指标与pLV-NC+缺氧组相比，差异均有统计学意义（P<0.01,P<0.05）;这6组的单个细胞内自噬体数量变化及miR-15a-5p的相对表达水平变化与LC3-Ⅱ蛋白表达变化水平相同。结论过表达circ＿BRAF＿2可抑制缺氧诱导的HTR-8/Svneo细胞自噬，其作用可能与竞争性结合miR-15a-5p有关。

关键词：子痫前期环状RNA circ＿BRAF＿2 滋养细胞微小RNA-15a-5p 自噬

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环状RNA hsa-circ-0001360在同型半胱氨酸诱导人脐静脉内皮细胞凋亡中的作用

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中国组织工程研究 2024年第25期28卷 4060-4064页

作者：况园军于素美钟颖怡章旭红马胜超杨安宁郝银菊熊建团焦运姜怡邓宁夏医科大学检验学院宁夏回族自治区银川市750004 宁夏医科大学国家卫生健康委代谢性心血管疾病研究重点实验室宁夏回族自治区银川市750004 宁夏医科大学临床医学院宁夏回族自治区银川市750004 宁夏医科大学基础医学院宁夏回族自治区银川市750004 宁夏医科大学总医院宁夏回族自治区银川市750004

背景:同型半胱氨酸水平上升会诱导人脐静脉内皮细胞发生凋亡,但机制尚不清楚。目的:探讨hsa-circ-0001360在同型半胱氨酸诱导人脐静脉内皮细胞发生凋亡中的作用。方法:体外培养人脐静脉内皮细胞,将其分为对照组、同型半胱氨酸组、干扰... 详细信息

背景:同型半胱氨酸水平上升会诱导人脐静脉内皮细胞发生凋亡,但机制尚不清楚。目的:探讨hsa-circ-0001360在同型半胱氨酸诱导人脐静脉内皮细胞发生凋亡中的作用。方法:体外培养人脐静脉内皮细胞,将其分为对照组、同型半胱氨酸组、干扰对照组、干扰对照+同型半胱氨酸组、干扰hsa-circ-0001360组、干扰hsa-circ-0001360+同型半胱氨酸组、过表达对照组、过表达对照+同型半胱氨酸组、过表达hsa-circ-0001360组和过表达hsa-circ-0001360+同型半胱氨酸组,同型半胱氨酸的干预浓度均为100μmol/L。干预细胞72 h后,应用Western blot检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和Caspase-3的表达;流式细胞仪检测细胞的凋亡率;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测hsa-circ-0001360的表达水平。结果与结论:①与对照组相比,同型半胱氨酸组人脐静脉内皮细胞中Caspase-3和Bax的表达明显升高(P<0.01),Bcl-2的表达明显降低(P<0.01),细胞凋亡率明显增高(P<0.01);②与对照组相比,同型半胱氨酸组人脐静脉内皮细胞中hsa-circ-0001360的表达明显升高(P<0.01);③hsa-circ-0001360在人脐静脉内皮细胞的细胞质中表达显著高于细胞核(P<0.01);④与干扰对照组或干扰对照+同型半胱氨酸组相比,干扰hsa-circ-0001360组和干扰hsa-circ-0001360+同型半胱氨酸组人脐静脉内皮细胞中Caspase-3、Bax的表达明显降低(P<0.01),Bcl-2的表达明显升高(P<0.01),细胞凋亡率明显降低(P<0.01);⑤与过表达对照组或过表达对照+同型半胱氨酸组相比,过表达hsa-circ-0001360组和过表达hsa-circ-0001360+同型半胱氨酸组人脐静脉内皮细胞中Caspase-3、Bax的表达明显升高(P<0.01),Bcl-2的表达明显降低(P<0.01),细胞凋亡率明显升高(P<0.01);⑥以上结果表明,hsa-circ-0001360可以促进同型半胱氨酸诱导人脐静脉内皮细胞发生凋亡。

关键词：同型半胱氨酸 hsa-circ-0001360 人脐静脉内皮细胞细胞凋亡环状RNA

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PTEN介导紫草素抑制人增生性瘢痕成纤维细胞的胶原沉积

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实用医学杂志 2023年第11期39卷 1382-1388页

作者：唐玉婷马芳贺茜王建军杨安宁吴凯焦运白志刚姜怡邓沈江涌宁夏医科大学临床医学院银川750004 宁夏医科大学国家卫生健康委员会代谢性心血管疾病研究重点实验室银川750004 宁夏医科大学总医院烧伤整形外科银川750004 宁夏医科大学基础医学院银川750004 宁夏医科大学总医院感染科银川750004 宁夏回族自治区人民医院骨科银川750004

目的从PTEN角度探讨紫草素对人增生性瘢痕成纤维细胞胶原沉积的影响。方法苏木精-伊红染色(HE染色)和马松染色(Masson染色)鉴定增生性瘢痕组织,免疫荧光鉴定人增生性瘢痕成纤维细胞(HSFBs);Western blot检测人增生性瘢痕(HS)和同一个体... 详细信息

目的从PTEN角度探讨紫草素对人增生性瘢痕成纤维细胞胶原沉积的影响。方法苏木精-伊红染色(HE染色)和马松染色(Masson染色)鉴定增生性瘢痕组织,免疫荧光鉴定人增生性瘢痕成纤维细胞(HSFBs);Western blot检测人增生性瘢痕(HS)和同一个体正常皮肤(NS)组织中PTEN表达水平;将HSFBs随机分组为:DMSO组、shikonin组、control组、si-NC组、si-PTEN组、shikonin+si-NC组和shikonin+si-PTEN组;Western blot检测各组中PTEN和胶原相关蛋白(Col1、Col3、α-SMA)的表达。结果与正常皮肤组织相比,PTEN在增生性瘢痕组织中呈低表达(P<0.05);用IC50浓度(13.46μmol/L)的紫草素干预人增生性瘢痕成纤维细胞24 h后,人增生性瘢痕成纤维细胞中Col1、Col3和α-SMA的表达降低(P<0.05),而PTEN的表达升高(P<0.05);转染si-PTEN后,与si-NC组相比,人增生性瘢痕成纤维细胞中Col1,Col3和α-SMA的表达升高(P<0.05);共转染shikonin+si-PTEN后,与shikonin+si-NC组相比,人增生性瘢痕成纤维细胞中Col1、Col3和α-SMA的表达升高(P<0.05)。结论紫草素可通过上调PTEN的表达抑制增生性瘢痕成纤维细胞的胶原沉积。

关键词：紫草素 PTEN 增生性瘢痕成纤维细胞胶原沉积

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SLC7A11/xCT在肝脏疾病中的研究进展

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江苏大学学报（医学版） 2023年第5期33卷 404-411页

作者：兰玥严文静王雯首都医科大学基础医学院北京100069 代谢紊乱相关心血管疾病北京市重点实验室北京100069

肝脏作为人体内最大的消化器官,参与物质代谢、蛋白合成、解毒、凝血和免疫等各种与生命活动密切相关的生物学功能。溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7 member 11,SLC7A11/xCT)是一种介导氨基酸转运的跨膜蛋白。随着相关研... 详细信息

肝脏作为人体内最大的消化器官,参与物质代谢、蛋白合成、解毒、凝血和免疫等各种与生命活动密切相关的生物学功能。溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7 member 11,SLC7A11/xCT)是一种介导氨基酸转运的跨膜蛋白。随着相关研究的逐步深入,越来越多的证据表明SLC7A11参与多种肝脏疾病的病理生理过程。SLC7A11可以调节氨基酸代谢、氧化还原稳态及铁死亡等病理过程,同时近期研究发现其在一种全新的细胞死亡类型——双硫死亡(disulfidptosis)中发挥重要的作用。本文针对近年来SLC7A11的相关研究进行综述,阐述SLC7A11在肝脏疾病中的作用及调节机制,为以SLC7A11为靶点的肝脏疾病的治疗策略提供新的参考和依据。

关键词：溶质载体家族7成员11(SLC7A11) xCT 双硫死亡铁死亡肝脏疾病急性肝损伤表观遗传

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LncRNA H19调控肾小球足细胞焦亡中作用

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实用医学杂志 2023年第1期39卷 12-20页

作者：汪乐新刘超马天龙杨安宁熊建团吴凯焦运白志刚姜怡邓马胜超张旭卢冠军无宁夏医科大学临床医学院银川750004 宁夏医科大学基础医学院银川750004 国家卫生健康委员会代谢性心血管疾病研究重点实验室银川750004 宁夏医科大学总医院泌尿外科银川750004 中国人民解放军总医院泌尿外科北京10000

目的探讨lncRNA H19在高糖调控肾小球足细胞焦亡中的作用。方法qRT-PCR方法检测高糖中lncRNA H19本底表达;Western blot检测高糖中肾足细胞结构性相关蛋白Nephrin、Podocin表达;Western blot及免疫荧光方法检测细胞焦亡相关蛋白NLRP3、C... 详细信息

目的探讨lncRNA H19在高糖调控肾小球足细胞焦亡中的作用。方法qRT-PCR方法检测高糖中lncRNA H19本底表达;Western blot检测高糖中肾足细胞结构性相关蛋白Nephrin、Podocin表达;Western blot及免疫荧光方法检测细胞焦亡相关蛋白NLRP3、Caspase-1、IL-1β表达水平;qRT-PCR检测转染Ad lncRNA H19及si lncRNA H19后lncRNA H19的mRNA表达,细胞转染分别设置:(1)对照组(不做处理)、lncRNA H19过表达阴性对照组、lncRNA H19过表达组;(2)对照组(不做处理)、lncRNA H19干扰阴性对照组和lncRNA H19干扰组(si-lncRNA H19-1、si-lncRNA H19-2、si-lncRNA H19-3);Western blot检测转染Ad lncRNA H19及si lncRNA H19后NLRP3、Caspase-1、IL-1β蛋白表达水平,细胞转染分别设置:(1)对照组(不做处理)、高糖组、lncRNA H19过表达对照+高糖组、lncRNA H19过表达+高糖组;(2)对照组(不做处理)、高糖组、lncRNA H19干扰对照+高糖组、lncRNA H19干扰+高糖组。结果(1)与对照组(不做处理)相比,lncRNA H19在高糖诱导肾足细胞损伤过程中呈低表达(P<0.05),而lncRNA H19低表达可调控细胞焦亡相关蛋白NLRP3、Caspase-1、IL-1β表达增高(P<0.05),lncRNA H19表达与细胞焦亡相关蛋白表达两者呈负相关;(2)与对照组(不做处理)相比,在高糖诱导肾足细胞损伤过程中,肾足细胞结构蛋白Nephrin、Podocin表达水平降低(P<0.05);(3)与lncRNA H19过表达对照+高糖组相比,过表达lncRNA H19后,缓解高糖诱导肾足细胞焦亡,细胞焦亡相关蛋白NLRP3、Caspase-1、IL-1β呈低表达(P<0.05);(4)与lncRNA H19干扰对照+高糖组相比,干扰lncRNA H19后,促进高糖诱导足细胞焦亡,而焦亡相关蛋白NLRP3、Caspase-1、IL-1β呈高表达(P<0.05)。结论在高糖诱导足细胞焦亡过程中lncRNA H19具有可调控细胞焦亡相关蛋白表达,为未来治疗糖尿病肾病提供一定的理论依据。

关键词： LncRNAH19 糖尿病肾病肾足细胞损伤细胞焦亡

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