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LY294002靶向抑制PI3K/Akt信号通路干预K562细胞增殖的研究

安徽医科大学学报 2014年第3期49卷 295-299页

作者：耿英华武文娟于北凯夏瑞祥安徽医科大学第一附属医院血液内科合肥230022 蚌埠医学院第一附属医院血液内科蚌埠233004 蚌埠医学院生物化学与分子生物学教研室蚌埠233030 蚌埠医学院临床检验诊断学实验中心蚌埠233030

目的探讨PI3K/Akt抑制剂LY294002对慢性髓系白血病细胞株K562的增殖抑制作用及相关机制。方法 MTT法检测LY294002对K562细胞增殖的抑制作用;10、20μmol/L LY294002作用K562细胞36 h,流式细胞术观察细胞周期的变化,RT-PCR法测定LY294002... 详细信息

目的探讨PI3K/Akt抑制剂LY294002对慢性髓系白血病细胞株K562的增殖抑制作用及相关机制。方法 MTT法检测LY294002对K562细胞增殖的抑制作用;10、20μmol/L LY294002作用K562细胞36 h,流式细胞术观察细胞周期的变化,RT-PCR法测定LY294002对K562细胞Skp2基因表达的影响,Western blot法检测Skp2蛋白表达的变化。结果 LY294002能够抑制K562细胞的生长,该抑制作用具有浓度及时间依赖性(P<0.05)。LY294002作用K562细胞36 h,随着浓度的增加,G0/G1期阻滞增强,S期细胞减少(P<0.05),Skp2的mRNA表达量减少,Skp2蛋白的表达量显著降低。结论 LY294002能够抑制K562细胞的生长,诱导细胞发生G0/G1期阻滞,这可能是通过LY294002影响了Skp2表达而实现的。

关键词： LY294002 PI3K Akt Skp2 K562

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核酸检测技术进展及其在SARS-CoV-2核酸检测中的应用

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生物化学与生物物理进展 2021年第11期48卷 1290-1300页

作者：孟德豪张艳芬孙玉淼高旭马宁哈尔滨医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室哈尔滨150081 哈尔滨医科大学附属第二医院检验科哈尔滨150000 黑龙江省基础医学研究所哈尔滨150086 哈尔滨医科大学北方转化医学研究合作中心哈尔滨150081 教育部中国遗传资源保护与疾病防控重点实验室哈尔滨150081 黑龙江省遗传改变模式动物重点实验室哈尔滨150081

2020年初至今,新型冠状病毒肺炎(COVID-19)疫情仍在全球多个国家流行,给全球公共卫生安全造成了严重威胁.中国在应对COVID-19的实践中,最先完成病毒核酸测序并共享序列信息,最早有效控制疫情蔓延、恢复生产,并在病毒作用人体机制研究、... 详细信息

2020年初至今,新型冠状病毒肺炎(COVID-19)疫情仍在全球多个国家流行,给全球公共卫生安全造成了严重威胁.中国在应对COVID-19的实践中,最先完成病毒核酸测序并共享序列信息,最早有效控制疫情蔓延、恢复生产,并在病毒作用人体机制研究、疫苗研发、中和性抗体发现等环节均处于世界前沿.其中,针对病毒核酸的检测工作——试剂盒研发、检测配套设备研制、10合1混检策略及相关政策制订,有效提高了疫情防控效率、保障了百姓健康.本文就严重急性呼吸系统综合症冠状病毒2(SARS-CoV-2)核酸检测多种方法的原理、优劣势及其配套设备等进行综述.

关键词：新型冠状病毒核酸检测 CRISPR

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大鼠失神经支配表情肌NT-3基因转染的实验研究

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蚌埠医学院学报 2004年第2期29卷 104-105,F004页

作者：陈传好韩卉陈昌杰安徽医科大学解剖学教研室蚌埠医学院生物化学与分子生物学教研室安徽蚌埠233003

目的 :观察神经营养素 3(neurotrophin 3,NT 3)基因转染大鼠失神经支配表情肌的情况及对其功能恢复的影响。方法 :离断大鼠面神经的下颌缘支和颊支后无张力外膜吻合制备面神经损伤模型 ,以直接注射法将脂质体DC Chol和重组质粒pcDNA3.1 ... 详细信息

目的 :观察神经营养素 3(neurotrophin 3,NT 3)基因转染大鼠失神经支配表情肌的情况及对其功能恢复的影响。方法 :离断大鼠面神经的下颌缘支和颊支后无张力外膜吻合制备面神经损伤模型 ,以直接注射法将脂质体DC Chol和重组质粒pcDNA3.1 (+) NT 3混匀后注入受损神经处的神经所支配的肌肉内。采用PT PCR技术检测转基因处肌肉的NT 3表达 ,并观察NT 3基因转染后大鼠触须活动情况。结果 :经脂质体DC Chol介导NT 3基因可有效地转染组织并得到表达 ,大鼠转基因实验侧的触须拂动比对照侧提前开始恢复。结论 :经脂质体介导的外源性NT

关键词：面神经神经营养素3 基因转染大鼠

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重组人成骨生长肽治疗去卵巢大鼠骨质疏松的实验观察

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中国地方病学杂志 2004年第4期23卷 318-320页

作者：余琼周凌云刘兴汉徐建永王淑静周宏博林雪松哈尔滨医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室 150086 黑龙江省生物医药重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地哈尔滨医科大学分校检验系

目的探讨重组人成骨生长肽(recombinanthumanosteogenicgrowthpeptide,rhOGP)对去卵巢大鼠骨质疏松的治疗作用。方法通过切除大鼠卵巢建立骨质疏松模型,经rhOGP治疗12周后,测定骨密度(BMD)、血清中的酸性磷酸酶(TRAP)、碱性磷酸酶(ALP)... 详细信息

目的探讨重组人成骨生长肽(recombinanthumanosteogenicgrowthpeptide,rhOGP)对去卵巢大鼠骨质疏松的治疗作用。方法通过切除大鼠卵巢建立骨质疏松模型,经rhOGP治疗12周后,测定骨密度(BMD)、血清中的酸性磷酸酶(TRAP)、碱性磷酸酶(ALP)和骨钙素(BGP)。结果rhOGP治疗组碱性磷酸酶(233.77±42.07)U/L、骨钙素(1.95±0.15)μg/L和骨密度明显高于骨质疏松模型组(156.23±23.38)U/L、(1.33±0.24)μg/L(P<0.01),而酸性磷酸酶(19.27±4.24)U/L,明显低于骨质疏松模型组(29.98±3.08)U/L(P<0.05)。结论rhOGP能刺激成骨细胞的活性,增加骨密度,提高骨量,对去卵巢大鼠所引起的骨质疏松有效,有可能成为治疗骨质疏松症的有效药物。

关键词：重组人成骨生长肽治疗去卵巢大鼠骨质疏松实验

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长链非编码RNA SPATA31D5P吸附微小RNA-320a促进乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭

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解剖学报 2021年第6期52卷 925-932页

作者：危敏余海浪王涵多郜蕊雷洁深圳市南山区妇幼保健院科教科广东深圳518054 深圳市南山区妇幼保健院检验科遗传室广东深圳518054 南方医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室广州510515

目的乳腺癌(BC)中存在多种长链非编码RNA(lncRNA)的异常表达,并且与生存预后密切相关。本研究旨在探讨lncRNA SPATA31D5P在乳腺癌中的表达并通过吸附miR-320a影响乳腺癌细胞增殖、侵袭和迁移能力。方法收集乳腺癌组织及癌旁组织各30例,... 详细信息

目的乳腺癌(BC)中存在多种长链非编码RNA(lncRNA)的异常表达,并且与生存预后密切相关。本研究旨在探讨lncRNA SPATA31D5P在乳腺癌中的表达并通过吸附miR-320a影响乳腺癌细胞增殖、侵袭和迁移能力。方法收集乳腺癌组织及癌旁组织各30例,采用Real-time PCR检测SPATA31D5P在乳腺癌组织及乳腺癌细胞系中的表达水平。选择乳腺癌MDA-MB-231细胞转染针对SPATA31D5P siRNA干扰载体,采用CCK-8法、5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(Ed U)法、Transwell小室实验和细胞划痕实验测定细胞增殖、侵袭和迁移能力,流式细胞术检测细胞周期和凋亡的改变。采用生物信息学方法筛选可与SPATA31D5P互补结合的miRNAs,Real-time PCR及双荧光素酶报告实验验证SPATA31D5P对miR-320a的调控作用。结果乳腺癌组织中SPATA31D5P水平显著高于邻近正常乳腺组织,各乳腺癌细胞系中SPATA31D5P表达都高于正常乳腺上皮细胞MCF10 A。siRNA干扰组的SPATA31D5P水平为0.288±0.052,低于空白对照组的1.114±0.096和阴性对照(NC)组的1.079±0.128(P<0.01)。与NC组和空白对照组相比,干扰组MDA-MB-231细胞的增殖活力明显下降并出现G_(1)期阻滞,凋亡率明显增加(P<0.01);干扰组的划痕愈合率和穿膜细胞数目分别为(14.36±1.75)%和(26±1.52)个,低于NC组的(52.25±1.87)%和(67.33±2.91)个(P<0.01)。双荧光素酶实验证实,SPATA31D5P能够直接调控miR-320a的表达及荧光素酶活性。结论 SPATA31D5P在乳腺癌中高表达,干扰其表达能有效抑制MDA-MB-231细胞增殖、迁移和侵袭,其作用机制可能与靶向调控miR-320a有关。

关键词：乳腺癌长链非编码RNA SPATA31D5P 微小RNA-320a 侵袭实时定量聚合酶链反应人

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研究生蛋白质组学教学内容优化的探索

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基础医学教育 2013年第5期15卷 481-483页

作者：易发平张雪梅邱宗荫周兰重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室重庆400016 重庆医科大学检验医学院

在最近三年的教学实践中,蛋白质组学课程教学团队在跟踪蛋白质组学研究动向和思考本课程教学内容与研究生的实际需求之间的契合程度后,对课程内容进行了适当调整,在课时总数不变的情况下,压缩一部分内容,增加了候选蛋白质验证技术和蛋... 详细信息

在最近三年的教学实践中,蛋白质组学课程教学团队在跟踪蛋白质组学研究动向和思考本课程教学内容与研究生的实际需求之间的契合程度后,对课程内容进行了适当调整,在课时总数不变的情况下,压缩一部分内容,增加了候选蛋白质验证技术和蛋白质相互作用研究技术两个章节,既让本课程对组学研究技术的介绍更系统和完整,又让学生对经典的蛋白质研究技术有了较全面的了解;既有利于将来直接应用组学技术从事医学研究的学生,也满足了将来应用蛋白质经典研究技术从事医学研究的学生的需要。

关键词：蛋白质组学教学方法教学内容

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核糖核酸酶抑制因子与人乳腺癌细胞恶性增殖的相关性研究

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蚌埠医学院学报 2008年第6期33卷 731-735页

作者：唐晓燕章菊夏俊陈俊霞崔秀云蚌埠医学院临床检验诊断学实验中心安徽蚌埠233030 蚌埠医学院生物化学与分子生物学教研室安徽蚌埠233030 重庆医科大学生物教研室重庆400016 大连医科大学生物化学与分子生物学教研室辽宁大连116027

目的：探讨核糖核酸酶抑制因子（ribonuclesae inhibitor,RI）的表达与人乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231、SKBR-3恶性增殖之间的关系。方法：四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞周期分布,RT-PCR检测RI基因表达水... 详细信息

目的：探讨核糖核酸酶抑制因子（ribonuclesae inhibitor,RI）的表达与人乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231、SKBR-3恶性增殖之间的关系。方法：四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞周期分布,RT-PCR检测RI基因表达水平,细胞免疫化学技术检测RI蛋白表达情况。结果：人乳腺癌细胞MCF-7细胞增殖速度、S期所占比例均小于人乳腺癌细胞MDA-MB-231、SKBR-3（P〈0.05~P〈0.01）,且MCF-7细胞中RI基因表达水平、蛋白表达水平明显高于MDA-MB-231、SKBR-3细胞（P〈0.01）。结论：RI与人乳腺癌细胞恶性增殖生长有一定的相关性。

关键词：乳腺肿瘤肿瘤,核糖核酸核糖核酸酶抑制因子细胞株细胞增殖

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互联网时代医学生物化学教学模式的创新

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基础医学教育 2021年第8期23卷 578-580页

作者：周妍毕晓郁吴巍首都医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室北京100069 首都医科大学燕京医学院检验学教研室

生物化学是医学的基础学科,由于生化代谢过程繁杂,不便于学生理解,讲授难度大。在网络及计算机多媒体发展的新形势下,如何将生物化学的教学与互联网科技更好地结合,呈现给学生一堂集真切的视听感受、多样化的内容编排、灵活的师生互动... 详细信息

生物化学是医学的基础学科,由于生化代谢过程繁杂,不便于学生理解,讲授难度大。在网络及计算机多媒体发展的新形势下,如何将生物化学的教学与互联网科技更好地结合,呈现给学生一堂集真切的视听感受、多样化的内容编排、灵活的师生互动等效果为一体的“三维立体”生物化学课程,是教学研究的课题。文章简要回顾生物化学教学模式的发展历程,对全新立体化教学模式的特点及实施进行了探讨,目的是为生物化学教学模式的改革积累经验,提高教学质量。

关键词：生物化学多媒体教学教学改革

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医学本科生科研创新培养模式探讨

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基础医学教育 2020年第10期22卷 770-772页

作者：周妍毕晓郁吴巍首都医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室北京100069 首都医科大学燕京医学院检验学教研室

医学基础科学研究与临床医学实践相辅相成,互相促进。因此,培养医学本科生的科研兴趣有利于培养高素质的临床医生。然而,医学本科新生对科研的理解多半比较模糊。所以,如何激发学生对科研的兴趣是一个课题。文章旨在通过分析目前医学本... 详细信息

医学基础科学研究与临床医学实践相辅相成,互相促进。因此,培养医学本科生的科研兴趣有利于培养高素质的临床医生。然而,医学本科新生对科研的理解多半比较模糊。所以,如何激发学生对科研的兴趣是一个课题。文章旨在通过分析目前医学本科生科研创新培养现状,对医学院校本科学生在科研创新培养中的误区提出改进建议,有利于引导学生热爱科研、不忘初心、融入科研实践。

关键词：高等教育科研创新培养模式

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分子佐剂TBhsp和MT在肝细胞再生磷酸酶-3(PRL-3)单克隆抗体制备中的作用

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细胞与分子免疫学杂志 2014年第6期30卷 614-617,626页

作者：曹燕飞吕娟孟麟曲立科寿成超北京大学肿瘤医院暨北京市肿瘤防治研究所生物化学与分子生物学研究室恶性肿瘤发病机制及转化研究教育部重点实验室长治医学院生物化学教研室北京100142 首都医科大学附属北京朝阳医院检验科山西长治046000

目的探讨结核分枝杆菌热休克蛋白(TBhsp)和结核分枝杆菌T细胞刺激表位(MT)在肝细胞再生磷酸酶-3(PRL-3)单克隆抗体(mAb)制备过程中的佐剂作用。方法构建对照质粒pET28a-PRL-3和佐剂-PRL-3融合蛋白表达质粒pET28a-PRL-3-MT、pET28a-TBhsp... 详细信息

目的探讨结核分枝杆菌热休克蛋白(TBhsp)和结核分枝杆菌T细胞刺激表位(MT)在肝细胞再生磷酸酶-3(PRL-3)单克隆抗体(mAb)制备过程中的佐剂作用。方法构建对照质粒pET28a-PRL-3和佐剂-PRL-3融合蛋白表达质粒pET28a-PRL-3-MT、pET28a-TBhsp-PRL-3和pET28a-TBhsp-PRL-3-MT,并纯化其表达蛋白,分别免疫BALB/c小鼠,ELISA检测并比较各组的抗血清效价,选取效价最高的小鼠,采用杂交瘤技术制备PRL-3 mAb,并进行类和亚类鉴定。结果成功构建了上述4种PRL-3相关的重组表达质粒,并表达纯化出相应的融合蛋白,其中PRL-3-MT融合蛋白免疫组抗体效价高于其他组;用该组小鼠进行细胞融合并筛选获得均为IgG类的10株分泌PRL-3 mAb的细胞株。结论 MT在PRL-3 mAb制备中可以发挥较为明显的免疫佐剂作用。

关键词：肝细胞再生磷酸酶-3 结核分枝杆菌热休克蛋白结核分枝杆菌T细胞刺激表位

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