检索结果-内蒙古大学图书馆

农业生物技术学报 2002年第1期10卷 64-66+104页

作者：华进联窦忠英李松李相运雷安民杨春荣高志敏张若平西北农林科技大学家畜生殖内分泌与胚胎工程农业部重点开放性实验室

本研究收集47例4～13周龄人流产胎儿分离PGCs,采用与其生殖嵴/腺或类似物胎儿成纤维细胞共培养的方式,获得了具小鼠ES细胞或EG细胞特征的人类ES细胞。该类细胞在体外可自发分化为类胚体、成纤维细胞样细胞、神经胶质细胞样细胞及心脏跳... 详细信息

本研究收集47例4～13周龄人流产胎儿分离PGCs,采用与其生殖嵴/腺或类似物胎儿成纤维细胞共培养的方式,获得了具小鼠ES细胞或EG细胞特征的人类ES细胞。该类细胞在体外可自发分化为类胚体、成纤维细胞样细胞、神经胶质细胞样细胞及心脏跳动样细胞团等。同样方法自4例大于17周龄胎儿未观察到人类ES细胞。研究表明,采用共培养法可以从4～13周龄流产儿的PGCs分离克隆到人类ES细胞,最适宜胎龄为7～10周龄。

关键词：人原始生殖细胞（PGCs）胚胎干细胞（ES细胞）胚胎生殖细胞（EG细胞）

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某些因素对牛和小鼠类胚胎干细胞分离与培养的影响

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中国兽医学报 2002年第2期22卷 187-190页

作者：安立龙杨奇窦忠英高志敏雷安民杨春荣邱怀湛江海洋大学农学院广东湛江524088 西北农林科技大学家畜生殖内分泌与胚胎工程农业部重点开放实验室陕西杨凌712100

以荷斯坦牛胚胎和小鼠胚胎为材料 ,研究了犊牛血清、饲养层、培养液、添加物和消化液对牛胚胎干细胞和小鼠胚胎干细胞克隆效率的影响。结果表明 ,在 2 4h内使小鼠胚胎贴壁率达 86 %以上的犊牛血清可用于小鼠和牛胚胎干细胞的分离 ;在 E... 详细信息

以荷斯坦牛胚胎和小鼠胚胎为材料 ,研究了犊牛血清、饲养层、培养液、添加物和消化液对牛胚胎干细胞和小鼠胚胎干细胞克隆效率的影响。结果表明 ,在 2 4h内使小鼠胚胎贴壁率达 86 %以上的犊牛血清可用于小鼠和牛胚胎干细胞的分离 ;在 ES细胞分离与克隆中 ,以 15 %～ 2 0 %犊牛血清为宜 ,在 DMEM(L)培养基中添加 0 .1μmol/LNa2 Se O3 +0 .1mmol/Lβ-巯基乙醇 +10 μg/L IGF+10 0 0 IU/m L L IF,能显著提高牛 ES细胞分离与克隆效率 ;在TCM199、DMEM(高糖 )和 DMEM(低糖 ) 3种培养基中 ,低糖 DMEM更适宜于牛 ES细胞的分离 ;优秀胚胎形成的团状 ICM更适宜于分离与克隆 ES细胞 ,在 37℃用低浓度消化液处理 ICM或 ES细胞集落 ,再以机械将其离散为细胞小块 ,ES细胞克隆效率最高。

关键词：牛小鼠胚胎干细胞内细胞团分离克隆

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干细胞及其应用前景分析

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动物医学进展 2002年第1期23卷 91-93页

作者：宋晓平窦忠英西北农林科技大学家畜生殖内分泌与胚胎工程农业部重点开放实验室陕西杨陵712100

人多能干细胞系的成功分离和培养,已引起世界范围的广泛关注和巨大反响.1999年美国《Science》杂志将其列为当年世界十大科学进展之首.干细胞在基础研究、基因治疗、器官修复等方面意义重大,但对人多能干细胞系还应进行严密的科学检验,... 详细信息

人多能干细胞系的成功分离和培养,已引起世界范围的广泛关注和巨大反响.1999年美国《Science》杂志将其列为当年世界十大科学进展之首.干细胞在基础研究、基因治疗、器官修复等方面意义重大,但对人多能干细胞系还应进行严密的科学检验,与其相关的新疗法和预防战略的前景应进行评估,所引发的伦理问题应进行公开讨论.

关键词：干细胞多能干细胞系成体干细胞应用前景

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影响牛胚胎干细胞分离克隆因素的研究

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生物技术通报 2002年第3期18卷 34-39页

作者：李松窦忠英华进联李相运宋文刚曲迅西北农林科技大学家畜生殖内分泌与胚胎工程农业部重点开放实验室泰山医学院免疫学教研室泰安271000 泰山医学院免疫学教研室

采用与同源胎儿成纤维细胞共同培养及传统饲养层培养方式 ,以高糖DMEM ,添加 0 .1mM2 -巯基乙醇、犊牛血清、细胞因子为培养基 ,以 4～ 13周龄屠宰牛胎儿为实验材料 ,探讨影响牛原始生殖细胞分离克隆胚胎干细胞的相关因素。结果发现 :... 详细信息

采用与同源胎儿成纤维细胞共同培养及传统饲养层培养方式 ,以高糖DMEM ,添加 0 .1mM2 -巯基乙醇、犊牛血清、细胞因子为培养基 ,以 4～ 13周龄屠宰牛胎儿为实验材料 ,探讨影响牛原始生殖细胞分离克隆胚胎干细胞的相关因素。结果发现 :当犊牛血清为 15 %时效果最好 ;细胞因子添加与否对胚胎干细胞的分离及同源牛胎儿成纤维细胞的贴壁与生长影响并不显著 ,而在传代过程中有一定影响 ;以 0 .2 %胰酶 +0 .0 4 %EDTA为细胞消化液效果最佳 ;以同源胎儿成纤维细胞共培养的方式分离克隆牛胚胎干细胞。

关键词：牛胚胎干细胞分离克隆原始生殖细胞

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添加物和消化液对牛和小鼠类胚胎干细胞克隆效率的影响

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西北农林科技大学学报（自然科学版） 2001年第5期29卷 5-10页

作者：安立龙高志敏杨奇冯秀亮窦忠英雷安民杨春荣邱怀西北农林科技大学家畜生殖内分泌与胚胎工程农业部重点开放实验室

研究了犊牛血清、饲养层、培养液、添加物和消化液对牛和小鼠类胚胎干细胞克隆效率的影响。结果表明 ,在 2 4h内使小鼠胚胎贴壁率达 86 %以上的犊牛血清可用于小鼠和牛胚胎干细胞的分离和克隆 ;在 ES细胞培养液中 ,犊牛血清体积分数以 1... 详细信息

研究了犊牛血清、饲养层、培养液、添加物和消化液对牛和小鼠类胚胎干细胞克隆效率的影响。结果表明 ,在 2 4h内使小鼠胚胎贴壁率达 86 %以上的犊牛血清可用于小鼠和牛胚胎干细胞的分离和克隆 ;在 ES细胞培养液中 ,犊牛血清体积分数以 15 %～ 2 0 %为宜 ,在 DMEM(L )培养液中添加 0 .1μm ol/ L Na2 Se O3+0 .1mm ol/ Lβ-巯基乙醇 +10 ng/ m L IGF+10 0 0 ng/ m L L IF,能显著提高牛 ES细胞分离与克隆效率 ;低糖 DMEM比TCM199和高糖 DMEM更适宜于牛 ES细胞的分离。优秀胚胎形成的团状 ICM更适宜于分离与克隆 ES细胞 ,在37℃用低体积分数消化液处理 ICM或 ES细胞集落 ,再以机械将其离散为细胞小块。

关键词：牛小鼠胚胎干细胞内细胞团克隆效率添加物消化液

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牛类胚胎干细胞的分离与克隆

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中国农业科学 2001年第5期34卷 550-555页

作者：安立龙杨奇冯秀亮杨春荣雷安民高志民窦忠英邱怀西北农林科技大学家畜生殖内分泌与胚胎工程农业部重点开放实验室

选用荷斯坦牛胚胎和小鼠胚胎 ,以 PMOL/ L EF细胞为饲养层 ,以 DMEM+ 15 ml/ 10 0 m l NBS+ 0 .1μm ol/L Na2 Se O3+ 0 .1mm ol/ Lβ-巯基乙醇 + 10 ng/ ml IGF+ 10 0 0 IU/ m l L IF为培养液 ,用消化法 ( ICM用 0 .2 5 g/ 10 0 ml胰... 详细信息

选用荷斯坦牛胚胎和小鼠胚胎 ,以 PMOL/ L EF细胞为饲养层 ,以 DMEM+ 15 ml/ 10 0 m l NBS+ 0 .1μm ol/L Na2 Se O3+ 0 .1mm ol/ Lβ-巯基乙醇 + 10 ng/ ml IGF+ 10 0 0 IU/ m l L IF为培养液 ,用消化法 ( ICM用 0 .2 5 g/ 10 0 ml胰蛋白酶 + 0 .0 4 g/ 10 0 ml EDTA) ,ES细胞集落用 ( 0 .12 5 g/ 10 0 ml胰蛋白酶 + 0 .0 2 g/ 10 0 m l EDTA)和机械剥离法离散ICM细胞集落和隆起明显的 ES细胞集落为细胞小块 ,获得了 9个传至 6代的牛类 ES细胞系和 2 2个传至 9代的小鼠类 ES细胞系。从形态特征、组织化学染色、核型分析和 ES细胞分化能力等方面对所分离与克隆的细胞进行鉴定 ,证明其具有 ES细胞的诸多特性

关键词：牛小鼠胚胎干细胞内细胞团分离克隆

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牛胚胎在小鼠胎儿成纤维细胞饲养层的生长行为

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中国农业科学 2001年第6期34卷 667-671页

作者：安立龙杨奇窦忠英雷安民杨春荣高志敏西北农林科技大学家畜生殖内分泌与胚胎工程农业部重点开放实验室

比较了牛胚胎与小鼠胚胎在体外培养过程中的生长行为，结果表明，牛滋养层细胞与内细胞团（ｉｎｎｅｒｃｅｌｌｍａｓｓ，简称ＩＣＭ）连接不紧密，其迅速增殖，形成半透明囊腔结构；小鼠胚胎滋养层与ＩＣＭ密切相连，形成盘状结构，... 详细信息

比较了牛胚胎与小鼠胚胎在体外培养过程中的生长行为，结果表明，牛滋养层细胞与内细胞团（ｉｎｎｅｒｃｅｌｌｍａｓｓ，简称ＩＣＭ）连接不紧密，其迅速增殖，形成半透明囊腔结构；小鼠胚胎滋养层与ＩＣＭ密切相连，形成盘状结构，并推移原代小鼠胎儿成纤维细胞（Ｐｒｉｍａｒｙｍｕｒｉｎｅｅｍｂｒｙｏｓｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ，ＰＭＥＦ）饲养层。牛ＩＣＭ形态呈现多样性，表现为团状、条状、网状和混合型；小鼠ＩＣＭ形态单一，多呈圆盘状。体外培养的牛胚胎发育速度比小鼠胚胎迟缓，牛ＩＣＭ初次传代时间为胚胎体外培养开始后５～６ｄ，小鼠ＩＣＭ初次传代时间为胚胎体外培养后３～４ｄ。牛ＩＣＭ分化程度由小到大依次为团状ＩＣＭ、条状ＩＣＭ、混合型正和网状ＩＣＭ。牛和小鼠胚胎附着率及ＩＣＭ克隆率由大到小均依次为孵化胚、囊胚和桑褡胚，但桑褡胚和囊胚附着率和ＩＣＭ克隆率均无显著差异（Ｐ＞０．０５）。与全胚相比较，牛和小鼠裸胚（无透明带或透明带不完整的胚胎）贴壁时间提前，但ＩＣＭ形成率和ＩＣＭ的生长行为均无显著差异；小鼠和牛桑椹胚卵裂球（中、晚期）体外分化抑制培养，形成亚囊胚而不能获得ＥＳ细胞；剥离牛胚胎滋胚层细胞，ＩＣＭ细胞更易分化。

关键词：小鼠牛内细胞团培养生长行为

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自原始生殖细胞分离克隆小鼠ES细胞研究初报

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西北农业大学学报 2001年第1期29卷 22-24,29页

作者：华进联窦忠英李松雷安民杨春荣西北农林科技大学家畜生殖内分泌与胚胎工程农业部重点开放实验室陕西杨陵712100

自交配后 9.5～ 13.5 d小鼠胎儿生殖嵴 /腺或其类似物及周围组织 ,采用与其同源胎儿成纤维细胞共培养的方式分离克隆到具小鼠 ES细胞诸多特征的胚胎生殖细胞 ( EG细胞 )系。即具有连续传代的能力 ( 1例来自交配后 11.5 d胎儿类 ES细胞传... 详细信息

自交配后 9.5～ 13.5 d小鼠胎儿生殖嵴 /腺或其类似物及周围组织 ,采用与其同源胎儿成纤维细胞共培养的方式分离克隆到具小鼠 ES细胞诸多特征的胚胎生殖细胞 ( EG细胞 )系。即具有连续传代的能力 ( 1例来自交配后 11.5 d胎儿类 ES细胞传至 10代 ) ,部分细胞集落呈典型鸟巢状结构 ,AP染色呈阳性 ,体外分化或延迟传代、堆叠培养具有分化形成类胚体、上皮细胞、成纤维细胞或神经细胞等的能力。同样培养交配后 7.5～ 8.5 d和14.5～ 15 .5 d的小鼠胎儿 ,原代观察到类 ES细胞集落 ,继代培养未观察到类 ES细胞集落 ,16 .5～ 18.5 d小鼠胎儿原代培养未观察到

关键词：原始生殖细胞胚胎生殖细胞 ES细胞小鼠哺乳动物

来源：评论

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哺乳动物胚胎干细胞的研究历史和现状

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西北农业大学学报 2001年第1期29卷 118-121页

作者：李谱华杨奇窦忠英西北农林科技大学家畜生殖内分泌与胚胎工程农业部重点开放实验室陕西杨陵712100

与胚胎细胞相比 ,胚胎干细胞占有数量优势 ,与体细胞相比 ,则有低分化的优势。本研究在综述哺乳动物胚胎干细胞研究历史的基础上 ,概述了胚胎干细胞的分离方法和存在的问题。

关键词：胚胎干细胞生物工程哺乳动物分离方法

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由牛体外受精胚胎分离胚胎干细胞

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中国兽医学报 2001年第3期21卷 263-265页

作者：杨奇窦忠英西北农林科技大学家畜生殖内分泌与胚胎工程农业部重点开放实验室陕西杨凌712100

以 DMEM+1 5% NBS+0 .1 mmol/ Lβ-巯基乙醇 +0 .1μmol/ L亚硒酸钠 +1 0μg/ L LIF+1 0μg/ LIGF-1作为培养液 ,以原代小鼠胎儿成纤维细胞为饲养层 ,利用 8日龄牛体外受精胚胎获得了传 3代的牛类胚胎干细胞 (类 ES细胞 )。通过体外分... 详细信息

以 DMEM+1 5% NBS+0 .1 mmol/ Lβ-巯基乙醇 +0 .1μmol/ L亚硒酸钠 +1 0μg/ L LIF+1 0μg/ LIGF-1作为培养液 ,以原代小鼠胎儿成纤维细胞为饲养层 ,利用 8日龄牛体外受精胚胎获得了传 3代的牛类胚胎干细胞 (类 ES细胞 )。通过体外分化试验 ,对所得类 ES细胞的多能性进行了鉴定。结果在培养 2 d后 ,牛类 ES细胞分化形成了类似于扩张囊胚的结构 ,悬浮于培养液中。

关键词：牛体外受精胚胎胚胎干细胞分离培养体系

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