检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：于萌廉智敏华进联西北农林科技大学动物医学院陕西省干细胞工程技术研究中心农业部动物生殖发育与胚胎工程重点开放性实验室陕西省农业分子生物学重点实验室

小鼠Nanos3基因是果蝇Nanos同源基因,是Nanos基因家族的一员。Nanos3是一种RNA结合蛋白,靠近其C端含有两个非常保守且连续的(Cys-Cys-His-Cys)2特异锌指结构域。Northern Blot结果显示,Nanos3在小鼠生殖细胞中表达,并在原始生殖细胞(PG... 详细信息

小鼠Nanos3基因是果蝇Nanos同源基因,是Nanos基因家族的一员。Nanos3是一种RNA结合蛋白,靠近其C端含有两个非常保守且连续的(Cys-Cys-His-Cys)2特异锌指结构域。Northern Blot结果显示,Nanos3在小鼠生殖细胞中表达,并在原始生殖细胞(PGCs)的定型和维持等方面起重要作用。其在精子发生中的重要作用引起了越来越多的关注。我们从小鼠的睾丸组织中克隆得到了Nanos3 CDS全长序列,并将其连接到pMD18-T载体上,酶切鉴定并测序,测序结果显示其与GenBank上公布的序列BC119514.1相同。将Nanos3 CDS序列定向亚克隆到pEGFP-C1载体的多克隆位点上,构建成pEGFP-C1-Nanos3重组载体。将Nanos3真核表达载体转染GC-1细胞系、小鼠精原干细胞系(SSCs),24小时后Nanos3蛋白开始表达。通过半定量及定量RT-PCR检测发现,pEGFP-C1-Nanos3转入GC-1、SSCs后,生殖细胞特异的多能性标记基因Oct4、Sox2表达量较对照组均有上调。讨论:Nanos3的常规作用机制主要有两方面,一方面通过Nanos-Pumilio蛋白复合体结合靶mRNA的3'UTR区的Nanos-响应元件(NRE),降解靶mRNA或调控其翻译活性;另一方面通过抑制依赖或不依赖Bax的凋亡通路来维持小鼠生殖细胞。以往Nanos3的研究借助Nanos3 Knockout小鼠,表现为性腺发育失常、雄性雌性小鼠不育。但由于在个体水平上难于实时动态地研究其作用机制。因此我们通过转染体外培养雄性生殖干细胞的方法,从细胞水平上探究Nanos3超表达对雄性小鼠体外生殖干细胞发育的影响,并从细胞和分子水平上揭示Nanos3可能参与的调控机制。

关键词： Nanos3基因生殖细胞精子发生小鼠

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表观遗传学与生殖细胞发育分化研究发展

引用

西北农林科技大学学报（自然科学版） 2010年第3期38卷 28-34页

作者：孙军伟华进联西北农林科技大学动物医学院陕西省干细胞工程技术研究中心农业部动物生殖生理与胚胎工程重点开放性实验室陕西省农业分子生物学重点实验室陕西杨凌712100

从DNA甲基化修饰、组蛋白甲基化和乙酰化修饰、基因印记和RNA干扰等几个方面,综述了表观遗传学的基本机制及其对哺乳动物生殖细胞发育分化的影响。表观遗传学对于动物机体生长、代谢及功能的正常维持具有重要作用,其中任何方面的异常都... 详细信息

从DNA甲基化修饰、组蛋白甲基化和乙酰化修饰、基因印记和RNA干扰等几个方面,综述了表观遗传学的基本机制及其对哺乳动物生殖细胞发育分化的影响。表观遗传学对于动物机体生长、代谢及功能的正常维持具有重要作用,其中任何方面的异常都会导致体细胞和生殖细胞的生长分化调控失常,甚至引发疾病。

关键词：表观遗传学甲基化组蛋白生殖细胞

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奶山羊骨髓间质干细胞的分离培养及生物学特性研究

引用

西北农林科技大学学报（自然科学版） 2010年第10期38卷 19-26页

作者：王芳朱海鲸李伟华进联西北农林科技大学动物医学院陕西省干细胞工程技术研究中心农业部动物生殖发育与胚胎工程重点开放性实验室陕西省农业分子生物学重点实验室陕西杨凌712100 江苏省北科生物科技有限公司江苏泰州225300

【目的】分离、培养奶山羊骨髓间质干细胞(MSCs),探讨其生物学特性,为心血管、神经退化,尤其是不育症患者的细胞移植治疗及相关细胞发育分化研究奠定基础。【方法】采用贴壁培养法进行MSCs的分离和培养,通过形态学观察、生长曲线测定、... 详细信息

【目的】分离、培养奶山羊骨髓间质干细胞(MSCs),探讨其生物学特性,为心血管、神经退化,尤其是不育症患者的细胞移植治疗及相关细胞发育分化研究奠定基础。【方法】采用贴壁培养法进行MSCs的分离和培养,通过形态学观察、生长曲线测定、免疫细胞化学染色和RT-PCR技术等进行检测;并采用免疫细胞化学法对自发分化的细胞及定向诱导分化的神经样细胞、心肌样细胞、生殖样细胞进行检测,计算生殖样细胞的阳性率。【结果】分离得到的MSCs为成纤维样细胞,其增殖能力强,无致瘤性,已连续传代至22代;其表达胚胎干细胞(ESCs)的表面标记Oct4、Nanog、C-myc和TERT;MSCs形成类胚体自发分化的细胞表达3胚层特异标志基因AFP、β-ⅢTubulin和心肌α-actin;MSCs经β-巯基乙醇诱导,定向分化为表达Nestin和β-ⅢTubulin的早期神经样细胞,经5-氮胞苷(5-Aza)诱导,可定向分化为表达CT3及心肌α-actin的心肌样细胞,并出现肌管样结构,经维甲酸(RA)诱导,分化的细胞表达生殖细胞减数分裂前期的蛋白Vasa、Scp3和CD49f(α6整合素)等生殖细胞标记,其阳性率分别达到35.7%,24.0%和14.0%。【结论】自奶山羊骨髓分离得到MSCs,其具备间质干细胞的基本特性,并具有向神经细胞、心肌细胞、生殖细胞分化的潜能。

关键词：奶山羊骨髓间质干细胞神经细胞心肌细胞生殖细胞

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奶山羊骨髓间质干细胞异体移植对生精缺陷模型小鼠睾丸发育的影响

奶山羊骨髓间质干细胞异体移植对生精缺陷模型小鼠睾丸发育的影响

引用

第五次全国动物生物技术学术研讨会

作者：王芳刘超张珊珊董武子华进联西北农林科技大学动物医学院，陕西省干细胞工程技术研究中心，农业部动物生殖发育与胚胎工程重点开放性实验室，陕西省农业分子生物学重点实验室，陕西杨凌，712100

骨髓源间质干细胞(MSCs)是一种具有多向分化潜能的成体干细胞，其具有取材方便、增殖快和免疫原性低等优点，在临床治疗应用方面具有重要的应用前景。本研究旨在应用奶山羊MSCs异体移植技术观察对不育模型小鼠睾丸发育的影响。

关键词：奶山羊异体移植骨髓间质干细胞生精缺陷睾丸发育

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