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T=题名（书名、题名），A=作者（责任者），K=主题词，P=出版物名称，PU=出版社名称，O=机构（作者单位、学位授予单位、专利申请人），L=中图分类号，C=学科分类号，U=全部字段，Y=年（出版发行年、学位年度、标准发布年）

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AND代表“并且”；OR代表“或者”；NOT代表“不包含”；(注意必须大写,运算符两边需空一格)

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范例一：(K=图书馆学 OR K=情报学) AND A=范并思 AND Y=1982-2016
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文献类型

25 篇 会议

馆藏范围

25 篇 电子文献
0 种 纸本馆藏

日期分布

学科分类号

24 篇 农学
- 24 篇 兽医学

主题

6 篇 猪繁殖与呼吸综合...
5 篇 hev
5 篇 prrsv
5 篇 禽戊型肝炎病毒
3 篇 结构蛋白
3 篇 宿主细胞
3 篇 鸡传染病
2 篇 戊型肝炎病毒衣壳...
2 篇 抗体检测
2 篇 非结构蛋白
2 篇 猪繁殖与呼吸综合...
2 篇 加氧酶
2 篇 开放阅读框蛋白
2 篇 鸡肝脏
1 篇 靶向治疗
1 篇 癌症
1 篇 猪戊型肝炎病毒
1 篇 抗病毒功能
1 篇 宿主因子
1 篇 戊型肝炎病毒

机构

25 篇 西北农林科技大学
2 篇 农业部兽用药物与...
1 篇 department of pa...
1 篇 department of pa...
1 篇 农业部兽用药物与...
1 篇 中国农业科学院哈...
1 篇 大连医科大学

作者

25 篇 周恩民
10 篇 赵钦
10 篇 王鑫杰
9 篇 刘宝元
7 篇 孙亚妮
6 篇 肖书奇
5 篇 陈宜阳
5 篇 张昂克
5 篇 李慧霞
4 篇 黄柏成
4 篇 张冲
4 篇 李琼毅
4 篇 李娜
4 篇 刘红亮
4 篇 王承宝
3 篇 李治军
3 篇 王妍
3 篇 赵冀楠
2 篇 张茂东
2 篇 姬鹏超

语言

25 篇 中文

检索条件"机构=西北农林科技大学动物医学院兽医免疫研究所农业部兽用药物与兽医生物技术陕西科学观测实验站"

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排序：

猪繁殖与呼吸综合症病毒Nsp9单域抗体库的构建

猪繁殖与呼吸综合症病毒Nsp9单域抗体库的构建

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十次学术研讨会

作者：刘红亮王妍肖书奇徐乐周恩民西北农林科技大学动物医学院兽医免疫研究所农业部兽用药物与兽医生物技术陕西科学观测实验站陕西杨凌712100

为了制备特异性针对PRRSV Nap9的并且可以抑制病毒感染的纳米抗体，构建了针对Nsp9的双峰驼重链抗体可变区抗体文库。首先利用pET28a载体构建了Nsp9全长的原核表达载体，并将其导入BL21表达菌中。表达并纯化Nsp9重组蛋白，利用His... 详细信息

为了制备特异性针对PRRSV Nap9的并且可以抑制病毒感染的纳米抗体，构建了针对Nsp9的双峰驼重链抗体可变区抗体文库。首先利用pET28a载体构建了Nsp9全长的原核表达载体，并将其导入BL21表达菌中。表达并纯化Nsp9重组蛋白，利用His单抗和PRRSV阳性猪血清鉴定重组蛋白免疫反应性。将重组蛋白与弗氏佐剂充分混匀免疫4岁健康雄性阿拉善双峰驼，经过5轮免疫后采集实验动物血液，分离外周血淋巴细胞，提取总RNA并反转录cDNA，根据骆驼重链抗体可变区上下游保守序列设计引物，利用PCR扩增VHH基因，将其连入pCANTAB SE噬菌体载体，转化TG1感受态细胞制备双峰驼重链抗体可变区抗体文库。表达并纯化了具有较强免疫反应性的可溶性Nsp9重组蛋白，ELISA结果显示猪体在攻毒后14d左右可以检测到Nsp9的抗体，抗体滴度在功毒后28 d可以达到较高的水平。双峰驼经过5轮免疫后抗体效价达到1:50 000，采集血液后，从350 mL全血中分离得到3×108个外周血淋巴细胞。提取RNA并反转录后，利用PCR扩增得到400 by左右的VHH条带，将其连入pCANTAB 5E噬菌体展示载体中，电转化TGI感受态细胞，得到了库容量为2×108的双峰驼重链抗体文库。猪体感染PRRSV后可产生针对Nsp9的抗体。可溶性Nsp9重组蛋白有望用于针对PRRS的血清学检测。本文构建的抗体库库容大且丰度较高，可用于Nsp9纳米抗体的筛选。

关键词：猪繁殖与呼吸综合症病毒单域抗体库非结构蛋白血清学检测

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重组表达GM-CSF/IL-4的PRRSV感染性克隆的构建

重组表达GM-CSF/IL-4的PRRSV感染性克隆的构建

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十次学术研讨会

作者：李治军王承宝黄柏成李琼毅陈怡阳丁培阳周恩民西北农林科技大学动物医学院兽医免疫研究所农业部兽用药物与兽医生物技术陕西科学观测实验站陕西杨凌712100

在高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)SD16感染性克隆的基础上,在SD16基因组N基因和3'UTR之间插入PRRSV ORF6的转录调控序列(TRS6)和猪源GM-CSF或者IL-4,以及用甘氨酸和FMDV 2ALinker串联的猪源GM-CSF和IL-4,通过转染Marc-14... 详细信息

在高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)SD16感染性克隆的基础上,在SD16基因组N基因和3'UTR之间插入PRRSV ORF6的转录调控序列(TRS6)和猪源GM-CSF或者IL-4,以及用甘氨酸和FMDV 2ALinker串联的猪源GM-CSF和IL-4,通过转染Marc-145细胞进行病毒拯救,将拯救的重组病毒在Marc-145细胞上连续代分析其生物学特性和遗传稳定性.结果显示,将不同重组全长质粒分别转染Marc-145细胞后可以观察到典型的细胞病变,IFA和western blot检测结果显示,引入的猪源GM-CSF和IL-4成功得到了表达,且拯救的重组病毒可以被PRRSV N蛋白特异性单抗识别,初步表明4株重组病毒被成功拯救,且重组病毒与亲本毒株具有基本一致复制动力学曲线,外源猪GM-CSF以及IL-4的插入并未影响病毒复制.遗传稳定性分析结果证明,重组病毒传代至第6代时,仍旧可以检测到猪源GM-CSF以及IL-4的表达.

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒感染性克隆重组表达免疫学

来源：评论

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Garcinol诱导p300/FOXP3溶酶体依赖性的降解及限制Treg的功能和增强抗肿瘤的靶向治疗

Garcinol诱导p300/FOXP3溶酶体依赖性的降解及限制Treg的功能和增...

引用

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十次学术研讨会

作者：杜涛峰 Yasuhiro Nagai 肖琰 Mark I.Greene 张洪周恩民西北农林科技大学动物医学院兽医免疫研究所农业部兽用药物与兽医生物技术陕西科学观测实验站陕西杨凌712100 Department of Pathology and Lab Medicine Un Department of Pathology and Lab Medicine University of Pennsylvania Perelman School of Medicine Ph 西北农林科技大学动物医学院兽医免疫研究所农业部兽用药物与兽医生物技术陕西科学观测实验站陕西杨凌712100

P300是调节FOXP3乙酰化和功能的重要乙酰化转移酶之一.最近的研究表明,一系列乙酰化转移酶相互作用的复合物可增强或抑制FOXP3功能.Garcinol,一种分离于印度藤黄果皮的聚异戊二烯二苯甲酮,是组蛋白乙酰化转移酶p300的天然抑制剂.本研究... 详细信息

P300是调节FOXP3乙酰化和功能的重要乙酰化转移酶之一.最近的研究表明,一系列乙酰化转移酶相互作用的复合物可增强或抑制FOXP3功能.Garcinol,一种分离于印度藤黄果皮的聚异戊二烯二苯甲酮,是组蛋白乙酰化转移酶p300的天然抑制剂.本研究用Garcinol作为一种工具,分析了p300调节FOXP3乙酰化的机制.结果表明,Garcinol抑制了p300和FOXP3复合物的形成,并促进p300溶酶体降解途径,从而降低了FOXP3乙酰化的水平和最终的降解,蛋白酶体抑制剂MG132并不能抑制Garcinol诱导的降解.在FOXP3乙酰化方面,相比于其它的乙酰化转移酶,p300对FOXP3的乙酰化影响较为显著,可以通过影响4个赖氨酸残基影响FOXP3总体乙酰化水平和稳定性.Garcinol做为降解工具减弱了Treg的抑制功能,并增强了靶向治疗抗体7.16.4在用neu转化的乳腺癌细胞(H2N113)植入MMTV-neu转基因小鼠皮下所建立的肿瘤模型中的抗肿瘤活性.本研究为在癌症治疗中通过用小分子破坏p300的稳定性限制Treg的功能提供了理论依据.

关键词：动物医学癌症靶向治疗聚异戊二烯二苯甲酮溶酶体调节T细胞

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表达猪白细胞介素-4的重组PRRSV在猪体内的免疫效果评价

表达猪白细胞介素-4的重组PRRSV在猪体内的免疫效果评价

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十六次学术研讨会

作者：李治军王刚王妍张冲黄柏成李琼毅李亮亮薛碧云丁培阳蔡学辉王承宝周恩民西北农林科技大学动物医学院兽医免疫学研究所农业部兽用药物与兽医生物技术陕西科学观测实验站中国农业科学院哈尔滨兽医研究所

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)仍旧是危害世界养猪业的重要传染病之一,现有的疫苗不能够提供完全的免疫保护。研究报道称猪白细胞介素-4可以作为免疫佐剂提高PRRSV疫苗的免疫效果。本研究的目的是构建在PRRSV致弱毒株(CH-1R株)基因组N基因和... 详细信息

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)仍旧是危害世界养猪业的重要传染病之一,现有的疫苗不能够提供完全的免疫保护。研究报道称猪白细胞介素-4可以作为免疫佐剂提高PRRSV疫苗的免疫效果。本研究的目的是构建在PRRSV致弱毒株(CH-1R株)基因组N基因和3·-UTR之间表达猪白细胞介素-4(pIL-4)的重组病毒,同时评价该重组病毒在猪体内的免疫效果。运用RT-PCR、IFA和Western Blotting检测手段表明,在PRRSV基因组N基因和3′-UTR之间插入转录调控序列(TRS6)启动的pIL-4后,可以拯救出病毒。测定病毒的生长动力学曲线表明,病毒生物学特性与亲本毒株也基本一致。在Marc-145细胞连续传15代后,重组病毒仍保持遗传稳定性。这表明我们获得了稳定表达(pIL-4)重组PRRS病毒株。猪体内实验表明,重组病毒组免疫组具有与亲本毒株相似的体液免疫水平。细胞免疫方面,在免疫28天刺激PBMC分泌的上清中,重组病毒组产生的IL-4显著高于亲本毒株。同时重组病毒组在攻毒后第7天,血液中CD4+CD8+T细胞数量和IL-4的水平明显高于亲本毒株。临床症状,病理变化,病毒血症等结果显示,免疫组之间没有明显差别。综上所述,重组表达pIL-4的PRRSV并不能显著提高CH-1R的免疫效果。

关键词： PRRSV 基因组免疫效果评价白细胞介素

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Toll样受体7激动剂T7在PRRSV感染PAMs中的抗病毒作用

Toll样受体7激动剂T7在PRRSV感染PAMs中的抗病毒作用

引用

中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十六次学术研讨会

作者：杜永坤杜涛峰刁昱文靳广毅周恩民西北农林科技大学动物医学院兽医免疫研究所农业部兽用药物与兽医生物技术陕西科学观测实验站大连医科大学高等医学研究院

目的Toll样受体（TLRs）在宿主抵抗病原入侵的天然免疫应答中扮演着重要的角色。其中处于胞内体的TLRs,如TLR3,TLR7/8和TLR9的激活可以通过促进抗病毒因子的产生（如干扰素）而参与机体的抗病毒应答。TLRs激动剂能够激活TLRs信号通路起... 详细信息

目的Toll样受体（TLRs）在宿主抵抗病原入侵的天然免疫应答中扮演着重要的角色。其中处于胞内体的TLRs,如TLR3,TLR7/8和TLR9的激活可以通过促进抗病毒因子的产生（如干扰素）而参与机体的抗病毒应答。TLRs激动剂能够激活TLRs信号通路起始机体的天然免疫应答作为机体抗病毒的第一道重要防线。猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）是引起猪繁殖与呼吸障碍综合症（PRRS）的病原体,它是一种单股正链RNA病毒,能引起严重的母猪繁殖障碍和仔猪的呼吸障碍。PRRSV感染猪体能够引起微弱的免疫应答,但这不足以机体清除病毒,同时PRRSV诱导机体产生大量的IL-10等免疫抑制因子,负调控机体的天然免疫应答与适应性免疫应答,从而得以在猪体内持续性感染。目前针对PRRS的防控措施都不能给猪体提供百分之百的持续性保护作用。猪肺泡巨噬细胞（PAM）是PRRSV在机体内的主要靶细胞,常被体外分离用于病毒的增殖和感染机制的研究。研究报道,TLR7的激动剂imiquimod等可以激活NF-κB,诱导IL-1β、IL-12等多种细胞因子的产生。PAM上表达有具有生物学功能的TLR7。我们的前期研究发现,TLR7的激动剂T7能够显著诱导小鼠PBMC产生IFN-γ和IL-12。本研究的目的就是评价T7在PRRSV感染PAMs中的抗病毒作用。材料方法从4周龄的健康仔猪肺脏中分离PAMs体外培养。用不同浓度的T7（0,1,10,100μg/mL）孵育PAMs后,接种0.01MOI高致病性PRRSV毒株SD16,分别于12h、24h和36h收集细胞上清及细胞,用于IFA、Westem Blot、qPCR及TCID测定。结果与讨论蛋白水平（N蛋白）和基因水平（ORF7基因）的检测结果表明T7刺激PAMs后接种病毒,能够显著抑制SD16在PAMs中的复制,并且这种抑制作用呈现浓度梯度依赖性。细胞上清中子代病毒的TCID测定结果与前边结果一致,T7呈现浓度梯度性抑制子代病毒的产生。进一步研究发现,细胞中磷酸化的NF-κB p65水平随着T7浓度的升高而升高,证明T7激活了细胞中的NF-κB信号通路。另外,通过qPCR检测发现,T7刺激PAMs后能够显著诱导IFN-γ和IL-12的mRNA的水平,同时IFIT1和ISG15的mRNA水平也显著升高,并且这些基因mRNA水平的升高以及对SD16的抑制作用能够被NF-κB的抑制剂BAY 11-7082以及TLR7的抑制剂Chlorquine所反转,说明NF-κB在T7抑制SD16的感染过程中发挥关键作用。结论 TLR7激动剂T7能够以浓度梯度依赖的方式抑制PRRSV感染PAMs,这种抑制作用可能是通过激活NF-κB诱导IFN-γ和IL-12,进而诱导抗病毒因子IFIT1和ISG15等而实现的。进一步的抗病毒机制以及猪体动物实验的体内抗病毒作用需要进一步的研究。

关键词： PRRSV 激动剂抗病毒作用样受体

来源：评论

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