检索结果-内蒙古大学图书馆

西北农业学报 2003年第3期12卷 24-28页

作者：利光辉靳亚平林炜明陈秀荔王赟西北农林科技大学家畜生殖内分泌与胚胎工程农业部重点开放实验室陕西杨凌712100

奶牛妊娠失败主要发生在配种后的40d,染色体异常和激素失调等内源性因素和热应激、营养等环境因子,均是引起胚胎死亡的原因。激素治疗,提高P4的浓度或补充bTP—1,在一定程度上可以提高奶牛的妊娠率,改善公母畜的饲养管理条件,满足家畜... 详细信息

奶牛妊娠失败主要发生在配种后的40d,染色体异常和激素失调等内源性因素和热应激、营养等环境因子,均是引起胚胎死亡的原因。激素治疗,提高P4的浓度或补充bTP—1,在一定程度上可以提高奶牛的妊娠率,改善公母畜的饲养管理条件,满足家畜对维生素及微量元素的需要,并保证优良条件,以提高配子的质量,使早期胚胎得到正常的发育。本文从早期胚胎发育、母胎识别、影响胚胎死亡率的因素及预防、治疗等方面进行综述。

关键词：奶牛早期胚胎防制措施胚胎死亡

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牛卵泡卵母细胞的体外成熟培养

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西北农林科技大学学报（自然科学版） 2002年第4期30卷 95-97页

作者：雷安民高志敏杨春荣窦忠英西北农林科技大学家畜生殖内分泌与胚胎工程农业部重点开放实验室陕西杨陵712100

1997- 12～ 2 0 0 1- 0 8共进行了 97批牛卵母细胞体外成熟试验 ,总成熟率为 70 .75 % (35 6 1/ 5 0 33)。其中培养液为 TCM199+0 .12 g/ L 丙酮酸钠 +10 mm ol/ L Hepes+体积分数 8% NCS+10 mg/ L FSH+10 mg/ LL H+1mg/ L E2 (培养液 1... 详细信息

1997- 12～ 2 0 0 1- 0 8共进行了 97批牛卵母细胞体外成熟试验 ,总成熟率为 70 .75 % (35 6 1/ 5 0 33)。其中培养液为 TCM199+0 .12 g/ L 丙酮酸钠 +10 mm ol/ L Hepes+体积分数 8% NCS+10 mg/ L FSH+10 mg/ LL H+1mg/ L E2 (培养液 1组 )组进行 5 0批试验 ,成熟率为 6 5 .75 % (14 15 / 2 15 2 )。培养液 1组有 5批次未添加 Hep-es 盐 ,其成熟率为 75 .2 1% (88/ 117) ;另 4 5批次添加 Hepes盐 ,成熟率为 6 5 .2 1% (132 7/ 2 0 35 )。培养液为TCM199+体积分数 8%发情牛血清 +0 .12 g/ L 丙酮酸 (培养液 2组 )组进行 4 7批次试验 ,成熟率为 74 .4 9%(2 14 6 / 2 881)。培养液 2组中有 9批次添加了 4 0 m g/ L 的庆大霉素 ,其成熟率为 72 .15 % (342 / 4 74 ) ;另 38批次未添加庆大霉素 ,其成熟率为 74 .95 % (180 4 / 2 4 0 7)。试验同时表明。

关键词：牛卵泡卵母细胞体外成熟培养

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LIF和IGF-1对牛胚胎干细胞分离的影响

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西北农林科技大学学报（自然科学版） 2002年第3期30卷 13-16页

作者：杨奇窦忠英西北农林科技大学家畜生殖内分泌与胚胎工程农业部重点开放实验室陕西杨陵712100

比较了添加 L IF,IGF- 1和 L IF+IGF对牛胚胎干细胞 (ES)分离的影响。结果表明 :1添加10 ng/m L L IF能提高胚胎贴壁率 ,促进内细胞团 (ICM)和 ES细胞的增殖并抑制其分化 ;2添加 10 ng/m L IGF- 1既能提高胚胎贴壁率 ,又能使 ICM明显增... 详细信息

比较了添加 L IF,IGF- 1和 L IF+IGF对牛胚胎干细胞 (ES)分离的影响。结果表明 :1添加10 ng/m L L IF能提高胚胎贴壁率 ,促进内细胞团 (ICM)和 ES细胞的增殖并抑制其分化 ;2添加 10 ng/m L IGF- 1既能提高胚胎贴壁率 ,又能使 ICM明显增殖的时间和传代后集落出现的时间提前 ;3添加 10 ng/m L L IF+10 ng/m L IGF- 1,可以同时发挥两种生长因子的作用效果 ,更有利于牛胚胎干细胞的分离。

关键词： LIF IGF-1 牛胚胎干细胞分离

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原始生殖细胞的人类ES细胞的分离克隆

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农业生物技术学报 2002年第1期10卷 64-66+104页

作者：华进联窦忠英李松李相运雷安民杨春荣高志敏张若平西北农林科技大学家畜生殖内分泌与胚胎工程农业部重点开放性实验室

本研究收集47例4～13周龄人流产胎儿分离PGCs,采用与其生殖嵴/腺或类似物胎儿成纤维细胞共培养的方式,获得了具小鼠ES细胞或EG细胞特征的人类ES细胞。该类细胞在体外可自发分化为类胚体、成纤维细胞样细胞、神经胶质细胞样细胞及心脏跳... 详细信息

本研究收集47例4～13周龄人流产胎儿分离PGCs,采用与其生殖嵴/腺或类似物胎儿成纤维细胞共培养的方式,获得了具小鼠ES细胞或EG细胞特征的人类ES细胞。该类细胞在体外可自发分化为类胚体、成纤维细胞样细胞、神经胶质细胞样细胞及心脏跳动样细胞团等。同样方法自4例大于17周龄胎儿未观察到人类ES细胞。研究表明,采用共培养法可以从4～13周龄流产儿的PGCs分离克隆到人类ES细胞,最适宜胎龄为7～10周龄。

关键词：人原始生殖细胞（PGCs）胚胎干细胞（ES细胞）胚胎生殖细胞（EG细胞）

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成体干细胞研究进展

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中国生物工程杂志 2002年第6期22卷 41-44,64页

作者：杨学义华进联马勇江窦忠英西北农林科技大学农业部家畜生殖内分泌与胚胎工程重点开放实验室杨凌712100

近年来由于成体干细胞研究技术的突破 ,成体干细胞的多向分化潜能日益为人们所关注。尤其“横向分化”的发现 ,不仅更新了对成体干细胞的传统认识 ,而且为其临床疾病治疗奠定了基础。介绍了成体干细胞的特点及分化潜能 ,并对其临床应用... 详细信息

近年来由于成体干细胞研究技术的突破 ,成体干细胞的多向分化潜能日益为人们所关注。尤其“横向分化”的发现 ,不仅更新了对成体干细胞的传统认识 ,而且为其临床疾病治疗奠定了基础。介绍了成体干细胞的特点及分化潜能 ,并对其临床应用作了概括性讨论。

关键词：成体干细胞研究进展胚胎干细胞横向分化

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某些因素对牛和小鼠类胚胎干细胞分离与培养的影响

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中国兽医学报 2002年第2期22卷 187-190页

作者：安立龙杨奇窦忠英高志敏雷安民杨春荣邱怀湛江海洋大学农学院广东湛江524088 西北农林科技大学家畜生殖内分泌与胚胎工程农业部重点开放实验室陕西杨凌712100

以荷斯坦牛胚胎和小鼠胚胎为材料 ,研究了犊牛血清、饲养层、培养液、添加物和消化液对牛胚胎干细胞和小鼠胚胎干细胞克隆效率的影响。结果表明 ,在 2 4h内使小鼠胚胎贴壁率达 86 %以上的犊牛血清可用于小鼠和牛胚胎干细胞的分离 ;在 E... 详细信息

以荷斯坦牛胚胎和小鼠胚胎为材料 ,研究了犊牛血清、饲养层、培养液、添加物和消化液对牛胚胎干细胞和小鼠胚胎干细胞克隆效率的影响。结果表明 ,在 2 4h内使小鼠胚胎贴壁率达 86 %以上的犊牛血清可用于小鼠和牛胚胎干细胞的分离 ;在 ES细胞分离与克隆中 ,以 15 %～ 2 0 %犊牛血清为宜 ,在 DMEM(L)培养基中添加 0 .1μmol/LNa2 Se O3 +0 .1mmol/Lβ-巯基乙醇 +10 μg/L IGF+10 0 0 IU/m L L IF,能显著提高牛 ES细胞分离与克隆效率 ;在TCM199、DMEM(高糖 )和 DMEM(低糖 ) 3种培养基中 ,低糖 DMEM更适宜于牛 ES细胞的分离 ;优秀胚胎形成的团状 ICM更适宜于分离与克隆 ES细胞 ,在 37℃用低浓度消化液处理 ICM或 ES细胞集落 ,再以机械将其离散为细胞小块 ,ES细胞克隆效率最高。

关键词：牛小鼠胚胎干细胞内细胞团分离克隆

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干细胞及其应用前景分析

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动物医学进展 2002年第1期23卷 91-93页

作者：宋晓平窦忠英西北农林科技大学家畜生殖内分泌与胚胎工程农业部重点开放实验室陕西杨陵712100

人多能干细胞系的成功分离和培养,已引起世界范围的广泛关注和巨大反响.1999年美国《Science》杂志将其列为当年世界十大科学进展之首.干细胞在基础研究、基因治疗、器官修复等方面意义重大,但对人多能干细胞系还应进行严密的科学检验,... 详细信息

人多能干细胞系的成功分离和培养,已引起世界范围的广泛关注和巨大反响.1999年美国《Science》杂志将其列为当年世界十大科学进展之首.干细胞在基础研究、基因治疗、器官修复等方面意义重大,但对人多能干细胞系还应进行严密的科学检验,与其相关的新疗法和预防战略的前景应进行评估,所引发的伦理问题应进行公开讨论.

关键词：干细胞多能干细胞系成体干细胞应用前景

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影响牛胚胎干细胞分离克隆因素的研究

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生物技术通报 2002年第3期18卷 34-39页

作者：李松窦忠英华进联李相运宋文刚曲迅西北农林科技大学家畜生殖内分泌与胚胎工程农业部重点开放实验室泰山医学院免疫学教研室泰安271000 泰山医学院免疫学教研室

采用与同源胎儿成纤维细胞共同培养及传统饲养层培养方式 ,以高糖DMEM ,添加 0 .1mM2 -巯基乙醇、犊牛血清、细胞因子为培养基 ,以 4～ 13周龄屠宰牛胎儿为实验材料 ,探讨影响牛原始生殖细胞分离克隆胚胎干细胞的相关因素。结果发现 :... 详细信息

采用与同源胎儿成纤维细胞共同培养及传统饲养层培养方式 ,以高糖DMEM ,添加 0 .1mM2 -巯基乙醇、犊牛血清、细胞因子为培养基 ,以 4～ 13周龄屠宰牛胎儿为实验材料 ,探讨影响牛原始生殖细胞分离克隆胚胎干细胞的相关因素。结果发现 :当犊牛血清为 15 %时效果最好 ;细胞因子添加与否对胚胎干细胞的分离及同源牛胎儿成纤维细胞的贴壁与生长影响并不显著 ,而在传代过程中有一定影响 ;以 0 .2 %胰酶 +0 .0 4 %EDTA为细胞消化液效果最佳 ;以同源胎儿成纤维细胞共培养的方式分离克隆牛胚胎干细胞。

关键词：牛胚胎干细胞分离克隆原始生殖细胞

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添加物和消化液对牛和小鼠类胚胎干细胞克隆效率的影响

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西北农林科技大学学报（自然科学版） 2001年第5期29卷 5-10页

作者：安立龙高志敏杨奇冯秀亮窦忠英雷安民杨春荣邱怀西北农林科技大学家畜生殖内分泌与胚胎工程农业部重点开放实验室

研究了犊牛血清、饲养层、培养液、添加物和消化液对牛和小鼠类胚胎干细胞克隆效率的影响。结果表明 ,在 2 4h内使小鼠胚胎贴壁率达 86 %以上的犊牛血清可用于小鼠和牛胚胎干细胞的分离和克隆 ;在 ES细胞培养液中 ,犊牛血清体积分数以 1... 详细信息

研究了犊牛血清、饲养层、培养液、添加物和消化液对牛和小鼠类胚胎干细胞克隆效率的影响。结果表明 ,在 2 4h内使小鼠胚胎贴壁率达 86 %以上的犊牛血清可用于小鼠和牛胚胎干细胞的分离和克隆 ;在 ES细胞培养液中 ,犊牛血清体积分数以 15 %～ 2 0 %为宜 ,在 DMEM(L )培养液中添加 0 .1μm ol/ L Na2 Se O3+0 .1mm ol/ Lβ-巯基乙醇 +10 ng/ m L IGF+10 0 0 ng/ m L L IF,能显著提高牛 ES细胞分离与克隆效率 ;低糖 DMEM比TCM199和高糖 DMEM更适宜于牛 ES细胞的分离。优秀胚胎形成的团状 ICM更适宜于分离与克隆 ES细胞 ,在37℃用低体积分数消化液处理 ICM或 ES细胞集落 ,再以机械将其离散为细胞小块。

关键词：牛小鼠胚胎干细胞内细胞团克隆效率添加物消化液

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牛类胚胎干细胞的分离与克隆

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中国农业科学 2001年第5期34卷 550-555页

作者：安立龙杨奇冯秀亮杨春荣雷安民高志民窦忠英邱怀西北农林科技大学家畜生殖内分泌与胚胎工程农业部重点开放实验室

选用荷斯坦牛胚胎和小鼠胚胎 ,以 PMOL/ L EF细胞为饲养层 ,以 DMEM+ 15 ml/ 10 0 m l NBS+ 0 .1μm ol/L Na2 Se O3+ 0 .1mm ol/ Lβ-巯基乙醇 + 10 ng/ ml IGF+ 10 0 0 IU/ m l L IF为培养液 ,用消化法 ( ICM用 0 .2 5 g/ 10 0 ml胰... 详细信息

选用荷斯坦牛胚胎和小鼠胚胎 ,以 PMOL/ L EF细胞为饲养层 ,以 DMEM+ 15 ml/ 10 0 m l NBS+ 0 .1μm ol/L Na2 Se O3+ 0 .1mm ol/ Lβ-巯基乙醇 + 10 ng/ ml IGF+ 10 0 0 IU/ m l L IF为培养液 ,用消化法 ( ICM用 0 .2 5 g/ 10 0 ml胰蛋白酶 + 0 .0 4 g/ 10 0 ml EDTA) ,ES细胞集落用 ( 0 .12 5 g/ 10 0 ml胰蛋白酶 + 0 .0 2 g/ 10 0 m l EDTA)和机械剥离法离散ICM细胞集落和隆起明显的 ES细胞集落为细胞小块 ,获得了 9个传至 6代的牛类 ES细胞系和 2 2个传至 9代的小鼠类 ES细胞系。从形态特征、组织化学染色、核型分析和 ES细胞分化能力等方面对所分离与克隆的细胞进行鉴定 ,证明其具有 ES细胞的诸多特性

关键词：牛小鼠胚胎干细胞内细胞团分离克隆

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