检索结果-内蒙古大学图书馆

中国草食动物 2001年第S1期3卷 115-118页

作者：高志敏雷安民窦忠英樊敬庄张万民魏志杰王改兰尹海科尹万林王忠林何朝林马拴林西北农林科技大学家畜生殖内分泌与胚胎工程农业部重点开放实验室陕西杨凌712100 陕西省布尔山羊良种繁殖中心

1999年 10～ 11月份 ,分三批使用阴道栓 +FSH超数排卵供体布尔山羊 (Boergoat,下同 ) 13只。在放入阴道栓的第 8～ 10天 ,连续三天递减量肌肉注射FSH (澳大利亚 ) 32 0mg。 9只供体羊发情、配种、采胚 (有效率 6 9 2 3% ,9/ 13) ,平均... 详细信息

1999年 10～ 11月份 ,分三批使用阴道栓 +FSH超数排卵供体布尔山羊 (Boergoat,下同 ) 13只。在放入阴道栓的第 8～ 10天 ,连续三天递减量肌肉注射FSH (澳大利亚 ) 32 0mg。 9只供体羊发情、配种、采胚 (有效率 6 9 2 3% ,9/ 13) ,平均采胚数 18 11枚± 5 18枚 ,其中可用胚平均数 15 4 4枚± 6 31枚 (可用胚率 85 2 8% ,139/ 16 3)。将 139枚 7日龄可用胚移植受体关中奶山羊 89只 ,妊娠 5 0只 ,妊娠率 5 6 18%。其中鲜胚移植妊娠率 6 1 11% (4 4/ 72 ) ,冻胚移植妊娠率 4 1 6 7% (5 /12 ) ,二分割胚移植妊娠率 2 0 % (1/ 5 )。 5 0只妊娠受体羊共产羔 6 8只 ,每只供体羊平均获羔羊 7 5 6只。供体羊采胚后 ,平均 39 9天发情 ,配种 ,全部妊娠产羔 ,平均产羔 2只。胚胎移植羔羊性别、初生重、发病率和布尔羊自繁羔羊无显著差异 ,P >0 0 5。本次布尔山羊胚胎移植产生明显的经济效益 ,技术成熟 ,可推广应用 ,逐步产业化。

关键词：胚胎移植胚胎冷冻胚胎分割布尔山羊

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牛卵母细胞体外成熟的研究

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草食家畜 2001年第S2期 127-130页

作者：雷安民杨春荣高志敏窦忠英西北农林科技大学畜牧兽医学院农业部家畜生殖内分泌与胚胎工程重点开放实验室陕西杨凌712100

为了给牛细胞核移植提供卵母细胞 ,1 997年 3月至 2 0 0 1年 3月共进行了 86次卵母细胞体外成熟的实验研究 ,核成熟率 (以出现第一极体为成熟标志 )为 6 5.1 2 %( 2 332 /372 1 )。其中 ,基础培养液为TCM1 99+ 0 .1 2mg/ml丙酮酸钠 + 1 ... 详细信息

为了给牛细胞核移植提供卵母细胞 ,1 997年 3月至 2 0 0 1年 3月共进行了 86次卵母细胞体外成熟的实验研究 ,核成熟率 (以出现第一极体为成熟标志 )为 6 5.1 2 %( 2 332 /372 1 )。其中 ,基础培养液为TCM1 99+ 0 .1 2mg/ml丙酮酸钠 + 1 0mMHepes+ 8%NCS + 1 0 μg/mlFSH + 1 0 μg/mlLH + 1 μg/mlE2 (培养液 1 )组进行 6 8批次实验 ,核成熟率为 57.97% ( 1 6 80 /2 898)。基础培养液为TCM 1 99+ 0 .1 2mg/ml丙酮酸+ 8%的发情牛血清 (为 4头发情牛的混合血清 ,培养液 2 )组进行 1 8次实验 ,核成熟率为 79.2 2 % ( 6 52 /82 3)。培养液 1组与培养液 2组之间卵母细胞成熟率差异显著(P <0 .0 5)。培养液 2的组中有 9次添加了 40IU/ml的庆大霉素 ,其核成熟率为72 .1 5% ( 342 /4 74) ;另 9次未添加庆大霉素 ,其核成熟率为 88.83% ( 31 0 /349) ,两者之间无明显差异 (P >0 .0 5)。

关键词：牛卵母细胞体外成熟核成熟质成熟

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影响小鼠胎儿成纤维细胞饲养层的因素

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动物医学进展 2001年第4期22卷 45-47页

作者：杨奇史远刚窦忠英西北农林科技大学家畜生殖内分泌与胚胎工程农业部重点开放实验室陕西杨陵712100 宁夏四正生物工程研究中心银川750000

本研究从丝裂霉素 - C处理时间、消化时间及细胞浓度等方面比较了诸因素对小鼠胎儿成纤维细胞饲养层的影响。结果表明 ,1 0 μg/m L 丝裂霉素 - C处理以 1 .5～ 2 h为宜 ,0 .2 %胰酶 + 0 .0 4% EDTA消化时间以 2～ 3min( 37℃ )为宜 ,... 详细信息

本研究从丝裂霉素 - C处理时间、消化时间及细胞浓度等方面比较了诸因素对小鼠胎儿成纤维细胞饲养层的影响。结果表明 ,1 0 μg/m L 丝裂霉素 - C处理以 1 .5～ 2 h为宜 ,0 .2 %胰酶 + 0 .0 4% EDTA消化时间以 2～ 3min( 37℃ )为宜 ,接种浓度以 3～ 3.5×1 0 5m L- 1为宜。在成纤维细胞的分离过程中 ,接种后 30 min换液 ,能达到纯化成纤维细胞的效果。

关键词：小鼠饲养层影响因素 ES细胞胎儿成纤维细胞

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LIF和IGF-1对牛胚胎干细胞分离的影响

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草食家畜 2001年第S2期 215-219页

作者：杨奇史远刚窦忠英西北农林科技大学家畜生殖内分泌与胚胎工程农业部重点开放实验室陕西杨凌712100 宁夏四正生物研究工程研究中心宁夏银川750000

本文研究比较了添加LIF、IGF - 1和LIF +IGF - 1对牛ES细胞分离的影响。结果表明 :①添加 1 0ng/mlLIF能提高胚胎贴壁率 ,促进ICM和ES细胞和增殖并抑制其分化 ;②添加 1 0ng/mlIGF - 1既能提高胚胎贴壁率 ,又能使ICM明显增殖的时间和传... 详细信息

本文研究比较了添加LIF、IGF - 1和LIF +IGF - 1对牛ES细胞分离的影响。结果表明 :①添加 1 0ng/mlLIF能提高胚胎贴壁率 ,促进ICM和ES细胞和增殖并抑制其分化 ;②添加 1 0ng/mlIGF - 1既能提高胚胎贴壁率 ,又能使ICM明显增殖的时间和传代后集落出现的时间提前 ;③添加 1 0ng/mlLIF + 1 0ng/mlIGF - 1 ,可以同时发挥两种生长因子的作用效果 ,更有利用牛胚胎干细胞的分离。因此 ,我们认为 ,在牛ES细胞的分离过程中 ,添加适量LIF和IGF -

关键词： LIF IGF-1 胚胎干细胞影响

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干细胞的研究与应用

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草食家畜 2001年第S2期 4-4页

作者：窦忠英西北农林科技大学家畜生殖内分泌与胚胎工程农业部重点开放实验室陕西杨凌712100

来源：评论

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从原始生殖细胞分离克隆牛胚胎干细胞的研究

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农业生物技术学报 2000年第4期8卷 349-352+410页

作者：李松窦忠英华进联屈雷杨春荣西北农林科技大学家畜生殖内分泌与胚胎工程农业部重点开放实验室!陕西杨凌　712100

从５～１３周龄的牛胎儿生殖嵴及其周围组织采用与其胎儿成纤维细胞共培养的方式分离得到大量原始生殖细胞（ＰＧＣｓ）集落。这些集落的细胞经多次克隆传代具有胚胎干（ＥＳ）细胞的诸多特征，如有连续传代的能力（有两个胎儿分别传至... 详细信息

从５～１３周龄的牛胎儿生殖嵴及其周围组织采用与其胎儿成纤维细胞共培养的方式分离得到大量原始生殖细胞（ＰＧＣｓ）集落。这些集落的细胞经多次克隆传代具有胚胎干（ＥＳ）细胞的诸多特征，如有连续传代的能力（有两个胎儿分别传至６代和８代），细胞集落有典型鸟巢状结构，ＡＫＰ染色阳性，体外分化实验具有形成类胚体的能力。上述表明该细胞具有多能性，类似ＥＳ细胞。

关键词：原始生殖细胞胚胎干细胞牛

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牛卵母细胞去核方法的研究

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农业生物技术学报 2000年第4期8卷 320-344页

作者：雷安民高志敏杨春荣窦忠英西北农林科技大学家畜生殖内分泌与胚胎工程农业部重点开放实验室!陕西杨凌712100

哺乳动物胚胎细胞核移植是willadsen 1986年在绵羊上首次采用成熟的卵母细胞做核受体并获得突破性成功.这一研究结果,奠定了哺乳动物核移植的基本技术路线.此后,哺乳动物细胞核移植的研究更加深入和细致.

关键词：卵母细胞去核透明带第一极体卵黄周隙核移植细胞工程胚胎克隆核方法

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影响哺乳动物细胞核移植效率的因素

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黄牛杂志 2000年第3期26卷 43-46页

作者：杨春荣窦忠英西北农林科技大学家畜生殖内分泌与胚胎工程农业部重点开放实验室陕西杨凌712100

本文对哺乳动物胚胎细胞体细胞核移植克隆技术中显微操作的基本环节。

关键词：哺乳动物细胞核移植细胞周期阶段移植效率

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小鼠胎儿和牛睾丸成纤维细胞的冷冻保存

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西北农业学报 2000年第3期9卷 5-8页

作者：安立龙杨奇窦忠英雷安民杨春荣邱怀高志敏西北农林科技大学家畜生殖内分泌与胚胎工程农业部重点开放实验室陕西杨陵712100

研究了冷冻保护液、平衡时间、降温速度、解冻液以及解冻方式对冷冻小鼠胎儿成纤维细胞和牛睾丸成纤维细胞活力的影响。结果表明 ,对小鼠胎儿成纤维细胞和犊牛睾丸成纤维细胞进行冷冻 ,冷冻液 ( 0 .4 %BSA) +1 .5mol/ L乙二醇 +0 .1 mo... 详细信息

研究了冷冻保护液、平衡时间、降温速度、解冻液以及解冻方式对冷冻小鼠胎儿成纤维细胞和牛睾丸成纤维细胞活力的影响。结果表明 ,对小鼠胎儿成纤维细胞和犊牛睾丸成纤维细胞进行冷冻 ,冷冻液 ( 0 .4 %BSA) +1 .5mol/ L乙二醇 +0 .1 mol/ L蔗糖的 PBS液 )的冷冻效果优于冷冻液 ( 1 0 %的 NBS+1 0 %DMSO的 DMEM液 )。用冷冻液对小鼠胎儿成纤维细胞和犊牛睾丸成纤维细胞进行冷冻 ,平衡时间可从 2 .5h缩短到 0 .5h;冷冻细管降温速度 ( -6.8～ -3 7℃ )可以从 0 .6℃ / min提高到 1 .2℃ / min;诱发结晶可以省略。 3种解冻液解冻细胞活力排序为 :解冻液 ( 0 .4 %BSA+0 .1 mol/ L蔗糖的 PBS) >解冻液 ( 1 0 %NBS的 DMEM) >解冻液 ( PBS)。用冷冻液对 MEF和 BTF细胞冷冻过程中。

关键词：成纤维细胞冷冻保存小鼠胎儿牛睾丸

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小鼠胚胎干细胞的分离与克隆

小鼠胚胎干细胞的分离与克隆

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第五届海内外生命科学论坛

作者：徐军杨春荣高志敏雷安民窦忠英樊敬庄西北农林科技大学家畜生殖内分泌与胚胎工程农业部重点开放实验室

采用昆白小鼠原代胎儿成纤维细胞饲养层,以高糖DMEM+10％NBS+0.1 mM 2-巯基乙醇+双抗为培养基,抑制分化培养89枚昆白小鼠囊胚,其中有3枚类ES细胞传5代.经体外培养分化实验,该类ES细胞形成简单胚体.部分分化为典型的神经细胞和有节律性... 详细信息

采用昆白小鼠原代胎儿成纤维细胞饲养层,以高糖DMEM+10％NBS+0.1 mM 2-巯基乙醇+双抗为培养基,抑制分化培养89枚昆白小鼠囊胚,其中有3枚类ES细胞传5代.经体外培养分化实验,该类ES细胞形成简单胚体.部分分化为典型的神经细胞和有节律性收缩的心肌细胞.同时,观察了ES细胞的生长行为.小鼠ES细胞向上生长,集落形似鸟巢状、山丘状和卵圆柱状等.细胞小,核大,细胞排列紧密,界限不清.ES细胞集落推开饲养层细胞.培养4-5 d初次传代.传代后除类ES细胞集落出现外,还观察到滋养层细胞集落、上皮样细胞集落和内皮样细胞集落等.

关键词：胚胎干细胞细胞分离细胞克隆

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