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2019年中华口腔医学会口腔病理学专业委员会第十三次全国口腔病理学术会议

作者：刘旭倩聂敏海周敏月西南医科大学附属口腔医院口腔基础医学教研室牙周黏膜病科西南医科大学口颌面修复重建和再生实验室

目的:探讨脱细胞血管基质(ACVM)联合类人型I胶原(HLC-I)制备的ACVM-0.25%HLC-I复合支架与人牙龈成纤维细胞(HGFs)、人牙龈上皮细胞(HGECs)和在前期研究基础上,诱导HGFs转分化形成的血管内皮样细胞(VEC-like cells)体内外构建组织工程血... 详细信息

目的:探讨脱细胞血管基质(ACVM)联合类人型I胶原(HLC-I)制备的ACVM-0.25%HLC-I复合支架与人牙龈成纤维细胞(HGFs)、人牙龈上皮细胞(HGECs)和在前期研究基础上,诱导HGFs转分化形成的血管内皮样细胞(VEC-like cells)体内外构建组织工程血管化口腔黏膜样结构的可行性。方法:1.体外构建HGECs-HGFs-VECs-ACVM-0.25%HLC-I复合体:①分离、培养和鉴定HGFs、HGECs。②在前期研究基础上诱导HGFs转分化为VEC-like cells,并检测VEC-like cells成管性能。③在前期研究的基础上,制备ACVM-0.25%HLC-I支架,将HGFs种植于ACVM-0.25%HLC-I支架上构建HGFs-ACVM-0.25%HLC-I复合体;VEC-like cells种植于环形ACVM-0.25%HLC-I支架上构建VECs-ACVM-0.25%HLC-I复合体;将VECs-ACVM-0.25%HLC-I复合体种植于HGFs-ACVM-0.25%HLC-I复合体上构建HGFs-VECs-ACVM-0.25%HLC-I复合体,最后将HGECs种植于HGFs-VECs-ACVM-0.25%HLC-I复合体上构建HGECs-HGFs-VECs-ACVM-0.25%HLC-I复合体并进行HE染色、免疫组化、免疫荧光染色、SEM观察。2.体内构建组织工程血管化口腔黏膜样结构:将HGFs、VEC-like cells示踪培养并体外种植至ACVM-0.25%HLC-I支架,构建HGFs-VECs-ACVM-0.25%HLC-I复合体,植入裸鼠背部缺损(10mm×10mm全层切口),聚酯胺薄膜覆盖,14天后移除聚酯胺薄膜,创口涂布生物胶,将预先示踪培养好的HGECs种植于生物胶上,构建组织工程血管化口腔黏膜样结构,同时设置对照组和空白支架组,14天后取材,三组分别行HE染色、EdU示踪染色、免疫荧光染色,生物力学测定实验,以评价构建的组织工程血管化口腔黏膜样结构的稳定性和可修复性。结果:① HGFs免疫组化、免疫荧光显示胞浆vimentin、S100A4表达阳性;HGECs免疫组化、免疫荧光显示胞浆CK表达阳性。②成管能力测试实验显示VEC-like cells具有成小管样结构能力。③将3种细胞分层种植于ACVM-0.25%HLC-I支架上构建的HGECs-HGFs-VECs-ACVM-0.25%HLC-I复合体,HE染色结果显示细胞与ACVM-0.25%HLC-I支架组织相容性好,能够分层生长在于支架中。免疫荧光染色结果显示HGECs-HGFs-VECs-ACVM-0.25%HLC-I复合体中,HGFs胞浆vimentin表达阳性,VEC-like cells胞浆Tie-2表达阳性,HGECs胞浆CK表达阳性。SEM观察结果显示,HGECs-HGFs-VECs-ACVM-0.25%HLC-I复合体中,HGFs、HGECs、VEC-like cells 3种细胞分层生长于ACVM-0.25%HLC-I支架上。④HGECs-HGFs-VECs-ACVM-0.25%HLC-I复合体植入裸鼠背部缺损后,裸鼠无免疫排斥,体表基本无明显瘢痕修复;HE结果表明实验组形成了类上皮全层样结构,组织较薄,有新生血管腔样结构形成,部分裸鼠毛细血管长入;EdU示踪染色显示,实验组类上皮全层样结构中可示踪到HGFs,HGECs,VEC-like cells,其中以HGECs为种子细胞参与形成类上皮层样结构,以HGFs为种子细胞形成类固有层样结构,以VEC-like cells为种子细胞形成类血管腔样结构;免疫荧光多重标记法显示,构建的组织工程血管化口腔黏膜样结构中,HGECs胞浆CK表达阳性,HGFs胞浆vimentin表达阳性,VEC-like cells胞浆Tie-2表达阳性。生物力学测试实验表明,实验组拉应力强度高于空支架组,但低于对照组,差异有统计学意义。结论:HGFs,HGECs,VEC-like cells体外种植于ACVM-0.25%HLC-I支架上,与ACVM-0.25%HLC-I相容性良好,能够体外构建组织工程血管化复合体。HGECs-HGFs-VECs-ACVM-0.25%HLC-I复合体能够在一定程度上引导组织修复再生,所构建组织工程血管化口腔黏膜样结构形态完好。

关键词：组织工程血管 VEC 复合体 ACVM-0.25%HLC-I 种子细胞口腔黏膜体内外

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雌激素介导下Wnt/β-catenin信号通路调控人牙周膜干细胞的成骨分化

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中国组织工程研究 2018年第13期22卷 2087-2092页

作者：毛杰周翊飞吴晓玲余京泓党海霞徐晓梅西南医科大学附属口腔医院正畸科四川省泸州市646000 西南医科大学口颌面修复重建和再生实验室四川省泸州市646000

背景:已有实验发现,雌激素能促进人牙周膜干细胞骨向分化,但雌激素调控人牙周膜干细胞成骨分化的具体机制目前尚未明确。目的:探讨雌激素通过Wnt/β-catenin信号通路对人牙周膜干细胞骨向分化的调控作用。方法:采用消化组织块法联合有... 详细信息

背景:已有实验发现,雌激素能促进人牙周膜干细胞骨向分化,但雌激素调控人牙周膜干细胞成骨分化的具体机制目前尚未明确。目的:探讨雌激素通过Wnt/β-catenin信号通路对人牙周膜干细胞骨向分化的调控作用。方法:采用消化组织块法联合有限稀释克隆法分离培养并纯化得到人牙周膜干细胞,取第3代人牙周膜干细胞随机分为3组:单纯成骨诱导液组(对照组);含1×10^(-7)mol/L雌激素成骨诱导液组(雌激素组);含100μg/L Wnt3a成骨诱导液组(Wnt3a组)。各组在成骨诱导1,3,5,7 d时检测碱性磷酸酶活性,成骨诱导7 d时采用Western blot检测Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白β-catenin、GSK-3β、P-GSK-3β、CyclinD1以及成骨相关蛋白Runx-2、OCN的表达水平。结果与结论:(1)各组碱性磷酸酶活性随时间推移均呈上升趋势。雌激素组和Wnt3a组在诱导1,3,5,7 d各时间点碱性磷酸酶表达水平均高于对照组(P<0.05);而雌激素组和Wnt3a组表达水平差异无显著性意义(P>0.05);(2)雌激素组和Wnt3a组β-catenin、P-GSK-3β、CyclinD1的表达水平高于对照组(P<0.05),而GSK-3β表达水平低于对照组(P<0.05),同时雌激素组和Wnt3a组的成骨中晚期标志物Runx2、OCN表达水平均高于对照组(P<0.05)。雌激素组和Wnt3a组间Wnt/β-catenin信号通路相关因子和成骨中晚期相关蛋白的表达差异无显著性意义(P>0.05);(3)结果表明,雌激素可促进人牙周膜干细胞的成骨分化,这种促进作用的实现可能与雌激素微环境下活化人牙周膜干细胞中的Wnt/β-catenin信号通路有关。

关键词：人牙周膜干细胞雌激素 Wnt3a蛋白 Wnt/β-catenin信号通路成骨分化干细胞

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RADA16-I载氯化锂对MC3T3-E1细胞成骨能力的影响研究

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西南医科大学学报 2019年第2期42卷 134-138页

作者：廖媛媛李濠吉刘敏西南医科大学口腔颌面修复重建和再生实验室四川泸州646000 西南医科大学附属口腔医院口腔修复科四川泸州646000 金堂县第一人民医院口腔科

目的:体外研究氯化锂与多肽水凝胶RADA16-I联合使用对MC3T3-E1细胞成骨向分化能力的影响。方法:通过CCK-8法确定无水氯化锂(LiCl)适宜浓度,将MC3T3-E1细胞分为采用RADA16-I载最适浓度LiCl培养基处理的实验组,单纯加入最适浓度LiCl培养... 详细信息

目的:体外研究氯化锂与多肽水凝胶RADA16-I联合使用对MC3T3-E1细胞成骨向分化能力的影响。方法:通过CCK-8法确定无水氯化锂(LiCl)适宜浓度,将MC3T3-E1细胞分为采用RADA16-I载最适浓度LiCl培养基处理的实验组,单纯加入最适浓度LiCl培养基处理的LiCl组和空白培养基处理的对照组,RT-PCR测定3组中Runx2和OSX基因表达情况。结果:CCK-8法显示5 mmol/L LiCl促增殖能力强于其他组,差异有统计学意义(P <0.05),ALP活性检测显示5 mmol/L活性最高,差异有统计学意义(P <0.05),RT-PCR结果显示Ryunx2和OSX的基因表达水平实验组> LiCl组>对照组。结论:LiCl及载LiCl的RADA16-I均能提高OSX、Runx2表达水平,促进细胞成骨。但载LiCl的RADA16-I较单独使用LiCl成骨相关基因的表达更显著,成骨效果更佳。

关键词：成骨氯化锂 RADA16-I 多肽水凝胶

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HtrA对乳牙变异链球菌产酸、黏附的体外研究

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西南医科大学学报 2019年第6期42卷 507-511页

作者：王玲刘瑶韩林秀刘兴容西南医科大学口颌面修复重建与再生实验室四川泸州646000 西南医科大学附属口腔医院儿童口腔科四川泸州646000 四川省交通运输厅公路局医院口腔科

目的:探讨HtrA对乳牙变异链球菌产酸、黏附的影响。方法:选用课题组前期筛选并鉴定的乳牙变异链球菌HtrA高毒力株和构建的HtrA基因缺陷株,测定这两组菌株分别在不同pH值的BHI液体培养基中培养48 h后pH值的变化;由荧光标记的乳牙变异链球... 详细信息

目的:探讨HtrA对乳牙变异链球菌产酸、黏附的影响。方法:选用课题组前期筛选并鉴定的乳牙变异链球菌HtrA高毒力株和构建的HtrA基因缺陷株,测定这两组菌株分别在不同pH值的BHI液体培养基中培养48 h后pH值的变化;由荧光标记的乳牙变异链球菌HtrA高毒力株和HtrA基因缺陷株,与被唾液包被的羟基磷灰石共同孵育,测定羟基磷灰石沉淀的荧光值,比较黏附率的差异。结果:在pH值为6.5、7.0时,两组菌株产酸能力的差异无统计学意义(P>0.05);在pH值为5.0、5.5、6.0时,HtrA高毒力株产酸能力强于HtrA缺陷株,差异具有统计学意义(P<0.05);在pH值4.5时,两组菌株产酸能力均受到明显抑制,几乎不产酸,差异无统计学意义(P>0.05)。HtrA缺陷株在唾液包被的羟基磷灰石表面的黏附率[(39.33±1.61)%]低于HtrA高毒力株[(54.67±1.38)%],差异有统计学意义(P<0.05)。结论:HtrA基因的缺陷影响了乳牙变异链球菌非应激状态下的生长能力,并且降低了它的产酸、黏附能力。

关键词：乳牙变异链球菌 HtrA 产酸黏附

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硬腭带蒂结缔组织移植在上颌前牙即刻种植的临床应用

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口腔医学研究 2018年第6期34卷 671-674页

作者：孙黎波黄海霞兰玉燕黄婷李汪阳西南医科大学附属口腔医院口腔颌面外科四川泸州646000 西南医科大学口颌面修复重建和再生实验室四川泸州646000

目的:评价硬腭带蒂结缔组织移植在上颌前牙区单牙无法保留行即刻种植的临床效果。方法:2014年6月~2016年5月,对15名上颌前牙区单牙无法保留牙龈生物型为薄龈型的患者,行不翻瓣即刻种植,在硬腭部制备带蒂结缔组织行种植体周围软组织增量... 详细信息

目的:评价硬腭带蒂结缔组织移植在上颌前牙区单牙无法保留行即刻种植的临床效果。方法:2014年6月~2016年5月,对15名上颌前牙区单牙无法保留牙龈生物型为薄龈型的患者,行不翻瓣即刻种植,在硬腭部制备带蒂结缔组织行种植体周围软组织增量,术后观察结缔组织移植的成活情况及术后种植体周围软组织重建情况。结果:硬腭带蒂结缔组织移植愈合良好,临床成活率100%,修复完成后当天﹑术后6个月及术后12个月红色美学评分(pink esthetic score,PES)分别为(11.69±0.84)﹑(11.94±0.70)和(11.97±0.68)分,软组织重建达到了美学效果。结论:对于上颌前牙区单牙无法保留牙龈生物型为薄龈型的患者,采用不翻瓣即刻种植同期行硬腭带蒂结缔组织移植,可以获得较好的美学效果。

关键词：上颌前牙区即刻种植结缔组织软组织增量

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折叠游离前臂皮瓣修复颊癌术后洞穿性缺损的临床研究

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临床耳鼻咽喉头颈外科杂志 2018年第13期32卷 1002-1005页

作者：马治超孙黎波周航宇吴双江王雷肖金刚西南医科大学附属口腔医院口腔颌面外科四川泸州646000 口腔颌面修复重建和再生实验室西南医科大学附属医院口腔颌面外科

目的:探讨折叠游离前臂皮瓣在颊癌术后软组织洞穿性缺损修复中的治疗效果。方法:对17例颊癌患者行颊颌颈联合根治术并同期使用折叠游离前臂皮瓣修复颊部软组织洞穿性缺损。术前Allen实验及超声多普勒血流测量仪检查或CT血管造影确定前... 详细信息

目的:探讨折叠游离前臂皮瓣在颊癌术后软组织洞穿性缺损修复中的治疗效果。方法:对17例颊癌患者行颊颌颈联合根治术并同期使用折叠游离前臂皮瓣修复颊部软组织洞穿性缺损。术前Allen实验及超声多普勒血流测量仪检查或CT血管造影确定前臂血管状况良好。结果:17例患者前臂皮瓣制备和折叠游离前臂皮瓣移植修复颊部洞穿性缺损均成功。随访6~36个月,患者颊部内外侧形态恢复良好,开口度正常,语言、吞咽功能恢复好,无流涎、咬颊症状,供区手部无明显并发症,局部无癌症复发,1例患者(T3N1M0)术后1年因癌症转移至肺而死亡。结论:折叠游离前臂皮瓣重建颊部洞穿性缺损成功率高,形态功能恢复好,是一种修复颊癌术后软组织洞穿性缺损的可靠方法。

关键词：颊癌颊洞穿性缺损折叠前臂皮瓣修复重建

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真空搅拌机调拌不同浓度含氯消毒液制备石膏模型的消毒效果观察

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世界最新医学信息文摘 2018年第4期18卷 15-16+19页

作者：刘奠忠黄跃郭玲郭世莉黄小芳西南医科大学附属口腔医院检验科/西南医科大学口颌面修复重建和再生实验室西南医科大学附属口腔医院正畸科/西南医科大学口颌面修复重建和再生实验室西南医科大学附属口腔医院修复科/西南医科大学口颌面修复重建和再生实验室西南医科大学附属口腔医院护理部/西南医科大学口颌面修复重建和再生实验室西南医科大学附属口腔医院消毒供应室/西南医科大学口颌面修复重建和再生实验室

目的探讨不同浓度含氯消毒液用于口腔模型制备的消毒杀菌效果,提供含氯消毒液消毒浓度配制依据。方法用含氯消毒片配制成由低至高的三组不同浓度的消毒液(三组的浓度分别为250 mg/l,500mg/l,1000mg/l),将这三组作为观察组,采用真空搅拌... 详细信息

目的探讨不同浓度含氯消毒液用于口腔模型制备的消毒杀菌效果,提供含氯消毒液消毒浓度配制依据。方法用含氯消毒片配制成由低至高的三组不同浓度的消毒液(三组的浓度分别为250 mg/l,500mg/l,1000mg/l),将这三组作为观察组,采用真空搅拌机对消毒液和石膏粉充分调拌混匀制作石膏模型灌制,以水作对照组,对不同浓度消毒液制作的模型进行细菌采样培养后菌落计数和可疑致病菌菌落数的鉴定分析。结果不同浓度(水,250mg/l,500mg/l,1000mg/l)消毒模型的细菌菌落总数和致病菌菌落数依次为(12.504±0.124)cf U/件,(2.441±0.542)cf U/件;(2.904±0.624)cf U/件,(0.501±0.412)cf U/件;(2.764±0.434)cf U/件,(0.481±0.511)cf U/件;(2.601±0.734)cf U/件,(0.451±0.424)cf U/件。经统计学分析,对照组与观察组细菌菌落总数和可疑致病菌菌落数计数比较均有统计学差异(P<0.01),观察组细菌菌落总数和可疑致病菌菌落数计数比较无统计学差异(P>0.05)。结论采用真空搅拌机调拌不同浓度消毒液和石膏粉制作石膏模型灌制对细菌杀灭的最适浓度可选择250mg/l即可,这样既降低了含氯消毒片使用量,又减少刺激的不适。

关键词：真空搅拌机石膏模型含氯消毒片细菌总数

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CRP和白细胞计数结合检验在感染诊断中的应用分析

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科学养生 2020年第3期23卷 266-266页

作者：黄璨杨莉刘奠忠西南医科大学附属口腔医院检验科四川泸州646000 西南医科大学口颌面修复重建和再生实验室四川泸州646000

目的探讨CRP和白细胞计数结合检验在感染诊断中的应用效果.方法选定本院于2018年7月～2019年7月收诊的口腔感染患者与健康洁牙者,共180例.按照有无口腔感染分为观察组(口腔感染患者,90例)与对照组(健康洁牙者,90例)两组,比较两组检测... 详细信息

目的探讨CRP和白细胞计数结合检验在感染诊断中的应用效果.方法选定本院于2018年7月～2019年7月收诊的口腔感染患者与健康洁牙者,共180例.按照有无口腔感染分为观察组(口腔感染患者,90例)与对照组(健康洁牙者,90例)两组,比较两组检测对象的CRP水平、白细胞计数.结果观察组检测对象的CRP水平(105.52±16.32)mg/L,白细胞计数(13.75±2.12)×109/L均高于对照组(P＜0.05).结论感染诊断期间应用白细胞计数结合CRP检验法,可提升对疑似口腔感染患者的诊断效果,值得使用推广.

关键词：感染诊断白细胞计数 CRP

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黏着斑激酶抑制剂TAE226对人口腔鳞癌细胞增殖的影响

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重庆医学 2019年第5期48卷 760-764页

作者：廖鹏程刘萍曾琴邹湘渝聂敏海西安交通大学医学院附属三二〇一医院口腔科门诊陕西汉中723000 西南医科大学附属口腔医院/口颌面修复重建和再生实验室四川泸州646000

目的研究黏着斑激酶抑制剂TAE226对口腔鳞癌HSC-3细胞增殖能力的影响,为临床治疗提供参考。方法 (1)采用CCK-8法检测不同浓度的TAE226(1、5、10、20μmol/L)作用细胞12、24、36、48、60、72h后的光密度(OD)值,计算不同浓度的TAE226在不... 详细信息

目的研究黏着斑激酶抑制剂TAE226对口腔鳞癌HSC-3细胞增殖能力的影响,为临床治疗提供参考。方法 (1)采用CCK-8法检测不同浓度的TAE226(1、5、10、20μmol/L)作用细胞12、24、36、48、60、72h后的光密度(OD)值,计算不同浓度的TAE226在不同时间对该细胞增殖的抑制率;(2)采用流式细胞术检测不同浓度的TAE226对口腔鳞癌细胞周期和凋亡的影响;(3)采用SPSS17.0软件对数据进行统计学分析。结果 (1)CCK-8法增殖实验结果:与对照组相比,不同浓度的TAE226作用于人口腔鳞癌HSC-3细胞株后,均对细胞增殖有抑制作用(P<0.05)。当TAE226的浓度为1、5μmol/L时,在12h时细胞增殖抑制率与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),但是随着时间的延长,差异有统计学意义(P<0.05)。随着TAE226浓度的逐渐升高,其对口腔鳞癌HSC-3细胞增殖的抑制作用逐渐增强(P<0.05)。(2)流式细胞术结果:TAE226可以促进口腔鳞癌细胞的凋亡,且与细胞的浓度呈正相关。TAE226可以将HSC-3细胞周期阻滞于G2期。结论TAE226可以有效地抑制HSC-3细胞增殖,促进细胞的凋亡,阻滞细胞周期于G2期。

关键词：人口腔鳞状细胞癌黏着斑激酶 TAE226 增殖凋亡细胞周期

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慢性牙周炎患者种植修复后种植体牙周指数及龈沟液炎性因子水平的变化研究

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国际口腔医学杂志 2018年第4期45卷 396-402页

作者：黄海霞兰玉燕张昊潘兰兰郭玲刘敏西南医科大学附属口腔医院修复科口颌面修复重建与再生实验室泸州646000 重庆医科大学附属口腔医院牙周科重庆401120

目的研究慢性牙周炎患者种植修复后种植体牙周指数及龈沟液炎性因子水平的变化。方法分别选取40例2015年6月—2017年6月于西南医科大学附属口腔医院修复科行种植修复的慢性牙周炎及牙周健康牙缺失患者为研究组及对照组,比较2组患者种植... 详细信息

目的研究慢性牙周炎患者种植修复后种植体牙周指数及龈沟液炎性因子水平的变化。方法分别选取40例2015年6月—2017年6月于西南医科大学附属口腔医院修复科行种植修复的慢性牙周炎及牙周健康牙缺失患者为研究组及对照组,比较2组患者种植修复1、3、6个月种植体探诊深度(PD)、改良菌斑指数(m PLI)、牙龈乳头指数(PIS)、改良龈沟出血指数(m SBI)、边缘骨吸收量,并检测2组种植体周围龈沟液中白细胞介素(IL)-1β、IL-6及IL-8水平。结果 2组种植体存留率均为100%,研究组种植修复后3个月开始,种植体周围龈沟液中IL-1β、IL-6及IL-8水平较治疗后1个月明显升高并高于对照组种植修复后3个月水平(P<0.05,P<0.01);种植修复后6个月,研究组PD、m PLI、m SBI及边缘骨吸收量较治疗后1个月明显升高且高于对照组种植修复后6个月水平(P<0.05,P<0.01),2组患者PIS比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论慢性牙周炎患者种植修复后近期疗效理想,但较牙周健康者有更高的种植体周围炎的患病风险。

关键词：慢性牙周炎种植修复牙周指数炎性因子种植体周围炎

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