检索结果-内蒙古大学图书馆

中国病理生理杂志 2021年第11期37卷 1980-1985页

作者：李东梅杨雅雯党喜同左东川西南医科大学心血管医学研究所医学电生理学教育部重点实验室四川泸州646000

目的:探讨在细胞外低钾条件下TWIK-1双孔钾通道对小鼠HL-1心肌细胞膜电位的影响及其分子机制。方法:构建载有人TWIK-1或TWIK-1-T118i突变体基因序列的慢病毒载体。通过病毒转染的方法使中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)或HL-1小鼠心肌细胞表达... 详细信息

目的:探讨在细胞外低钾条件下TWIK-1双孔钾通道对小鼠HL-1心肌细胞膜电位的影响及其分子机制。方法:构建载有人TWIK-1或TWIK-1-T118i突变体基因序列的慢病毒载体。通过病毒转染的方法使中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)或HL-1小鼠心肌细胞表达TWIK-1或TWIK-1-T118i突变体。通过膜片钳记录在细胞外正常钾(5.4 mmol/L)及低钾(2.7 mmol/L)条件下的膜电位及全细胞电流。结果:电流钳结果显示,在2.7 mmol/L钾条件下,表达人TWIK-1通道的CHO细胞及HL-1小鼠心肌细胞膜电位呈现去极化,当细胞外液的钠离子被替换为N-甲基-D-葡萄糖胺(NMDG)时,膜电位去极化现象消失;而表达人TWIK-1-T118i突变体通道的CHO细胞及HL-1小鼠心肌细胞膜电位呈现超极化。电压钳结果显示,在2.7 mmol/L钾条件下,在表达人TWIK-1通道的CHO细胞及HL-1小鼠心肌细胞可记录到内向阳离子电流,当细胞外液的钠离子替换为NMDG时,该内向阳离子电流消失。结论:在细胞外低钾条件下,TWIK-1通道介导的内向钠离子电流能够引起HL-1小鼠心肌细胞膜电位发生去极化。

关键词：低钾血症心肌细胞膜电位去极化 TWIK-1双孔钾通道

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重组小鼠白细胞介素11致小鼠心肌纤维化的实验探究

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中国病理生理杂志 2020年第8期36卷 1531-1536页

作者：陈雨露汪新宇郑舒展杜延飞叶强李家富范忠才李光西南医科大学附属医院心内科医学电生理学教育部重点实验室四川泸州646000 西南医科大学心血管医学研究所医学电生理学教育部重点实验室四川泸州646000

目的:观察皮下注射重组小鼠白细胞介素11(rmIL-11)对小鼠心脏结构功能的影响并明确其促进心肌纤维化的作用。方法:将C57BL/6小鼠随机分为实验组和溶媒对照组,实验组小鼠背部皮下注射rmIL-11,100μg·kg-1·d-1,连续注射3周;而... 详细信息

目的:观察皮下注射重组小鼠白细胞介素11(rmIL-11)对小鼠心脏结构功能的影响并明确其促进心肌纤维化的作用。方法:将C57BL/6小鼠随机分为实验组和溶媒对照组,实验组小鼠背部皮下注射rmIL-11,100μg·kg-1·d-1,连续注射3周;而对照组同法皮下注射等量的生理盐水。实验结束后,超声心动图测定小鼠心功能参数;取心脏称重,计算心重指数(CWI);HE染色和Masson染色分别观察小鼠心肌组织病理变化及纤维化程度,并计算心肌胶原容积分数(CVF);Western blot技术检测2组小鼠心肌组织中细胞外基质组分Ⅰ型、Ⅲ型胶原及纤连蛋白等蛋白表达的变化。结果:超声心电图结果显示实验组小鼠左室射血分数和短轴缩短率均明显降低(P<0.01),而左室舒张末期内径和收缩末期内径均明显增大(P<0.05)。与对照组比较,实验组小鼠CWI明显增大(P<0.01),心肌排列紊乱,肌细胞坏死增多,且细胞间可见大量胶原纤维沉积,相应地,CVF和左室Ⅰ型、Ⅲ型胶原及纤连蛋白表达水平明显增加(P<0.05)。结论:皮下注射rmIL-11能诱导小鼠心肌纤维化发生,揭示IL-11可能是一种新的促纤维化因子。

关键词：白细胞介素11 心肌纤维化心功能细胞外基质

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转化生长因子-β1受体依赖的心肌纤维化伴随大电导钙激活钾通道的表达和功能下调

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中国循环杂志 2021年第6期36卷 612-618页

作者：李磊董亚辉杨探李秋芳聂永梅李光于风旭西南医科大学附属医院心脏大血管外科四川省泸州市646000 西南医科大学心血管医学研究所医学电生理学教育部重点实验室医学电生理四川省重点实验室

目的:探讨大电导钙激活钾通道(BKCa)是否参与转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的心肌纤维化过程,以及在这一过程中的作用机制。方法:分离培养乳大鼠心室成纤维细胞,并根据TGF-β1的不同浓度(5 ng/ml组、10 ng/ml组),以及在10 ng/ml TGF-β... 详细信息

目的:探讨大电导钙激活钾通道(BKCa)是否参与转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的心肌纤维化过程,以及在这一过程中的作用机制。方法:分离培养乳大鼠心室成纤维细胞,并根据TGF-β1的不同浓度(5 ng/ml组、10 ng/ml组),以及在10 ng/ml TGF-β1基础上加入不同浓度TGF-β1受体特异阻断剂SB431542(0.1μmol/L组、1μmol/L组、10μmol/L组)进行分组,处理后提取蛋白及RNA,应用蛋白免疫印迹(Western blot)和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组TGF-β1受体蛋白,α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)、Ⅲ型胶原(CollagenⅢ)、BKCa蛋白和信使RNA(mRNA)的表达情况。单通道及全细胞膜片钳技术记录TGF-β1作用24 h前后的BKCa电流特点及其变化情况。结果:TGF-β15 ng/ml组和10 ng/ml组均上调TGF-β1受体蛋白,α-SMA、CollagenⅠ、CollagenⅢ蛋白和mRNA的表达,10 ng/ml组TGF-β1下调BKCa蛋白和mRNA的表达。与TGF-β110 ng/ml组相比,在10 ng/ml TGF-β1基础上加入SB4315421μmol/L组、10μmol/L组下调TGF-β1受体蛋白,α-SMA、CollagenⅠ、CollagenⅢ蛋白和mRNA的表达,加入SB43154210μmol/L组上调BKCa蛋白和mRNA的表达,差异均具有统计学意义。此外,单通道及全细胞膜片钳技术记录结果表明TGF-β1预处理24 h后可明显抑制成纤维细胞上BKCa电流。结论:BKCa可能参与了TGF-β1诱导乳大鼠心室成纤维细胞纤维化通路,其机制可能是TGF-β1抑制了成纤维细胞上BKCa的电流。这提示BKCa可能是防治心肌纤维化的潜在靶点。

关键词：心肌纤维化转化生长因子β1 转化生长因子β1受体阻断剂SB431542 大电导钙激活钾通道乳大鼠心室成纤维细胞

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儿茶酚胺检测技术的研究进展

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中国现代应用药学 2022年第2期39卷 253-260页

作者：叶珂君周小琳欧贤红医学电生理学教育部重点实验室医学电生理四川省重点实验室四川省心血管疾病防治协同创新中心西南医科大学心血管医学研究所四川泸州646000

儿茶酚胺(catecholamines,CAs)是一类生物源性化合物,它们作为神经递质和激素在人和动物体内发挥着重要的生理作用。它们是诊断疾病和功能障碍的重要标志物,也是拟交感神经药物制剂的成分。因此生物样品、活细胞中CAs的测定方法,以及它... 详细信息

儿茶酚胺(catecholamines,CAs)是一类生物源性化合物,它们作为神经递质和激素在人和动物体内发挥着重要的生理作用。它们是诊断疾病和功能障碍的重要标志物,也是拟交感神经药物制剂的成分。因此生物样品、活细胞中CAs的测定方法,以及它们的精确度、灵敏度、选择性及实时性,对疾病的诊断及病理生理机制的研究具有重要意义。本文从临床生物样品、活体细胞、活体等不同层次综述近5年来CAs的检测方法,描述包括荧光成像法、电化学法、质谱法、光度分析法、非损伤成像技术等检测方法的性能特征及应用。

关键词：儿茶酚胺荧光成像法质谱法电化学法非损伤成像技术

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机械敏感性离子通道Piezo对干细胞增殖、迁移、分化的影响

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中国病理生理杂志 2023年第6期39卷 1095-1102页

作者：谢诚李鹏云程俊西南医科大学心血管医学研究所医学电生理学教育部重点实验室医学电生理四川省重点实验室四川省心血管疾病防治协同创新中心四川泸州646000

在细胞外的物理刺激如声、光、温度和机械力等转化为胞内生物信号反应的过程中,例如听力、疼痛、触摸、本体感觉、血压调节等,机械敏感性离子通道都在其中发挥了关键性作用。近年来,瞬时受体电位通道家族、机械活化双孔钾通道家族、上... 详细信息

在细胞外的物理刺激如声、光、温度和机械力等转化为胞内生物信号反应的过程中,例如听力、疼痛、触摸、本体感觉、血压调节等,机械敏感性离子通道都在其中发挥了关键性作用。近年来,瞬时受体电位通道家族、机械活化双孔钾通道家族、上皮钠通道家族。

关键词： Piezo蛋白机械转导钙离子干细胞

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Synaptotagmin 1基因敲除对小鼠行为的影响

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中国应用生理学杂志 2022年第2期38卷 97-101页

作者：武南南封芮芮张宇李光曹济民殷丽天山西医科大学生理学系细胞生理学教育部重点实验室细胞生理学山西省重点实验室太原030001 西南医科大学心血管医学研究所医学电生理学教育部重点实验室四川泸州646000

目的:研究Synaptotagmin 1基因敲除(Syt1^(+/-))对小鼠情绪行为的影响并初步探讨其可能机制。方法:选取8周龄雄性Syt1^(+/-)小鼠及同窝野生型(WT)小鼠各5只,采用免疫荧光染色方法观察小鼠前额叶皮层、海马、杏仁核、伏隔核、纹状体和腹... 详细信息

目的:研究Synaptotagmin 1基因敲除(Syt1^(+/-))对小鼠情绪行为的影响并初步探讨其可能机制。方法:选取8周龄雄性Syt1^(+/-)小鼠及同窝野生型(WT)小鼠各5只,采用免疫荧光染色方法观察小鼠前额叶皮层、海马、杏仁核、伏隔核、纹状体和腹侧被盖区等6个脑区中Syt1的表达;选用8周龄雄性Syt1^(+/-)小鼠9只,以及WT小鼠10只为对照,通过旷场实验、高架十字迷宫实验和强迫游泳实验检测比较成年Syt1^(+/-)小鼠和WT小鼠的焦虑样行为;另选用8周龄雄性Syt1^(+/-)小鼠及WT小鼠各5只,检测小鼠前额叶皮层、海马和杏仁核的谷氨酸含量。结果:与WT小鼠相比,Syt1^(+/-)小鼠在前额叶皮层、海马、杏仁核、伏隔核、纹状体和腹侧被盖区Syt1阳性细胞数目显著减少(P<0.01);Syt1^(+/-)小鼠在旷场中总移动距离显著减少(P<0.01),并更偏爱在外周区域活动(P<0.01),对中心区域的探索欲望显著下降(P<0.01);Syt1^(+/-)小鼠更偏好待在封闭安全环境中(P<0.01),开臂探索次数(P<0.05)和在其中运动的时间显著减少(P<0.01);Syt1^(+/-)小鼠在强迫游泳实验中不动时间明显增加(P<0.01);同时,Syt1^(+/-)小鼠杏仁核中谷氨酸的含量显著增加(P<0.01)。结论:Syt1基因敲除可以引起小鼠显著的焦虑样行为,推测与杏仁核中谷氨酸含量增加有关。

关键词： Synaptotagmin 1 焦虑谷氨酸小鼠

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小鼠血管壁CD34^(+)干细胞的分离、培养及鉴定

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生理学报 2023年第2期75卷 205-215页

作者：杨礼菊马颖李源党青亚程俊杨艳李鹏云西南医科大学心血管医学研究所医学电生理学教育部重点实验室医学电生理四川省重点实验室四川省心血管疾病防治协同创新中心泸州646000 西南医科大学附属医院心内科泸州646000

血管壁干细胞(vascular wall-resident stem cells,VW-SCs)在维持血管正常功能以及损伤血管的修复过程中发挥着关键性的作用,对其功能特性的研究将有助于干细胞的调控及应用。本文旨在建立稳定的VW-SCs分离、培养及分选鉴定技术,为进一... 详细信息

血管壁干细胞(vascular wall-resident stem cells,VW-SCs)在维持血管正常功能以及损伤血管的修复过程中发挥着关键性的作用,对其功能特性的研究将有助于干细胞的调控及应用。本文旨在建立稳定的VW-SCs分离、培养及分选鉴定技术,为进一步深入研究VW-SCs在生理和疾病状态下的增殖、迁移和分化等机制提供丰富、可靠的细胞来源。首先利用组织块贴壁法获取小鼠主动脉外膜以及肠系膜动脉血管壁细胞,传代培养到细胞数量至少达到1×10^(7)后经磁珠分选和流式细胞术鉴定CD34^(+)的VW-SCs;其次采用细胞免疫荧光染色检测干细胞标志物(CD34、Flk-1、c-kit、Sca-1)以及平滑肌标志物(SM22、SM MHC)、内皮标志物(CD31)和细胞核内分裂增殖相关蛋白(Ki-67);血管壁CD34^(+)干细胞的定向分化采用EBM-2内皮分化诱导培养基和FM-2成纤维细胞培养基分别培养7天和3天;利用细胞免疫荧光染色和q-PCR检测内皮细胞标志物(CD31,VWF)和成纤维细胞标志物(Vimentin,PDGFRα)的表达。此外,采用TILLvisION胞内钙信号检测系统结合Ca^(2+)荧光探针Fura-2/AM观察CD34^(+)干细胞胞内钙库Ca^(2+)释放和胞外Ca^(2+)内流特性。结果显示,血管组织块贴壁法和磁珠分选可获取较高纯度(>90%)的小鼠主动脉外膜以及肠系膜动脉血管壁CD34^(+)干细胞。体外培养的血管壁CD34^(+)干细胞可诱导分化为内皮细胞和成纤维细胞。咖啡因和ATP可显著激活CD34^(+)干细胞胞内钙库Ca^(2+)释放,毒胡萝卜素(thapsigargin,TG)耗竭内质网钙库Ca^(2+)后触发钙库操纵的外钙内流(store-operated Ca^(2+)entry,SOCE)。该方法建立了稳定、高效的血管壁CD34^(+)干细胞分离、培养和鉴定技术,为体外深入研究VW-SCs的调控机制以及靶向药物的筛选提供了保障。

关键词：血管壁干细胞细胞分离细胞鉴定磁珠分选

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利用光遗传学技术构建小鼠光控心脏起搏模型

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四川动物 2021年第1期40卷 39-45页

作者：葛焰王伟刘洁玉曾博西南医科大学心血管医学研究所医学电生理学教育部重点实验室四川泸州646000

电刺激是人工控制心脏搏动频率的标准技术,但在实验研究中,这种方法有较大的局限性,如局部电解效应、刺激频率和时长受限、只能对目标范围内的所有细胞进行刺激、不能选择性作用于心肌细胞等。基于光遗传学技术,本研究构建了心肌细胞特... 详细信息

电刺激是人工控制心脏搏动频率的标准技术,但在实验研究中,这种方法有较大的局限性,如局部电解效应、刺激频率和时长受限、只能对目标范围内的所有细胞进行刺激、不能选择性作用于心肌细胞等。基于光遗传学技术,本研究构建了心肌细胞特异性表达光激活阳离子通道channelrhodopsin-2(ChR2)的转基因小鼠,采用特定频率的蓝光刺激使心肌细胞膜电位去极化,从而引发动作电位并控制心脏起搏。当蓝光刺激频率低于小鼠自发心脏搏动频率时,蓝光刺激造成暂时性的心律失常,去除蓝光照射后小鼠心跳恢复正常;当蓝光刺激频率高于小鼠自发心跳频率时,小鼠的心脏搏动完全由蓝光刺激支配,去除蓝光照射后恢复到自发搏动状态;失去自主搏动能力的小鼠心脏也可由蓝光刺激进行起搏;不表达ChR2的对照小鼠对蓝光刺激没有响应。本研究对基于光遗传学的光控心脏起搏技术进行了实验论证,在心肌电生理学特别是心律失常研究中有着非常重要的应用价值。

关键词：光遗传学光控心脏起搏视紫红质通道蛋白2 心律失常

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通过足细胞Cdc50a基因敲除构建一种全新的肾小球硬化症小鼠模型

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四川动物 2022年第5期41卷 509-516页

作者：赵月张倩李静怡陈桂兰曾博西南医科大学心血管医学研究所医学电生理学教育部重点实验室四川泸州646000

细胞膜内外层磷脂分布的不对称性是由磷脂翻转酶维持的,当磷脂翻转酶功能缺失时,细胞膜内侧的磷脂酰丝氨酸会暴露至细胞表面,引发细胞凋亡。CDC50A是磷脂翻转酶的重要组成亚基。本研究敲除小鼠足细胞Cdc50a基因后,发现足细胞变形受损,... 详细信息

细胞膜内外层磷脂分布的不对称性是由磷脂翻转酶维持的,当磷脂翻转酶功能缺失时,细胞膜内侧的磷脂酰丝氨酸会暴露至细胞表面,引发细胞凋亡。CDC50A是磷脂翻转酶的重要组成亚基。本研究敲除小鼠足细胞Cdc50a基因后,发现足细胞变形受损,产生慢性肾病的早期症状,即产生蛋白尿;随着月龄的增加,基因敲除鼠足细胞损伤及丢失加剧、肾小球的滤过屏障功能严重受损,出现肾小球滤过率降低、肾小球系膜细胞增殖、细胞外基质堆积、局灶性节段性肾小球硬化等一系列病理表型改变。结果证实了细胞膜磷脂分布的不对称性对足细胞的存活和肾小球滤过屏障的完整性至关重要,并由此构建了一种全新的自发性肾小球硬化症小鼠模型。

关键词： Cdc50a基因足细胞蛋白尿肾小球硬化

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阿司匹林用于心血管疾病一级预防的Meta分析

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中国循证医学杂志 2019年第10期19卷 1187-1194页

作者：李婷婷聂志超田甜李爱玲贾红西南医科大学公共卫生学院四川泸州646000 西南医科大学心血管医学研究所医学电生理学教育部重点实验室四川省心血管疾病防治协同创新中心四川泸州646000

目的系统评价阿司匹林在心血管疾病一级预防中的有效性和安全性。方法计算机检索PubMed、EMbase、Web of Science、The Cochrane Library、CBM、WanFang Data、CNKI和VIP数据库,搜集阿司匹林用于心血管疾病一级预防的随机对照试验(RCT)... 详细信息

目的系统评价阿司匹林在心血管疾病一级预防中的有效性和安全性。方法计算机检索PubMed、EMbase、Web of Science、The Cochrane Library、CBM、WanFang Data、CNKI和VIP数据库,搜集阿司匹林用于心血管疾病一级预防的随机对照试验(RCT),检索时限均从建库至2018年11月。由2名研究者独立筛选文献、提取资料并评价纳入研究的偏倚风险后,采用RevMan 5.3软件进行Meta分析。结果共纳入13个RCT,包括164 225例研究对象。Meta分析结果显示,阿司匹林可有效降低心肌梗死[RR=0.85,95%CI(0.75,0.97),P=0.01]、缺血性卒中[RR=0.86,95%CI(0.79,0.95),P=0.002]和主要不良心血管事件[RR=0.90,95%CI(0.86,0.94),P<0.000 1]的发生风险;但未降低全因死亡率[RR=0.97,95%CI(0.93,1.02),P=0.22]和心血管死亡率[RR=0.93,95%CI(0.85,1.02),P=0.11],同时增加了出血性卒中[RR=1.29,95%CI(1.02,1.64),P=0.03]、大出血[RR=1.43,95%CI(1.31,1.56),P<0.000 01]和胃肠道出血风险[RR=1.59,95%CI(1.33,1.90),P<0.000 01]。结论当前证据显示,阿司匹林用于心血管疾病一级预防可降低主要不良心血管事件及心肌梗死发生率,但出血风险尤其是胃肠道出血风险也随之升高,其潜在益处可能被抵消。受纳入研究数量和质量的限制,上述结论尚待更多高质量研究予以验证。

关键词：阿司匹林心血管疾病一级预防 Meta分析系统评价随机对照试验

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