检索结果-内蒙古大学图书馆

机械敏感性离子通道Piezo对干细胞增殖、迁移、分化的影响

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中国病理生理杂志 2023年第6期39卷 1095-1102页

作者：谢诚李鹏云程俊西南医科大学心血管医学研究所医学电生理学教育部重点实验室医学电生理四川省重点实验室四川省心血管疾病防治协同创新中心四川泸州646000

在细胞外的物理刺激如声、光、温度和机械力等转化为胞内生物信号反应的过程中,例如听力、疼痛、触摸、本体感觉、血压调节等,机械敏感性离子通道都在其中发挥了关键性作用。近年来,瞬时受体电位通道家族、机械活化双孔钾通道家族、上... 详细信息

在细胞外的物理刺激如声、光、温度和机械力等转化为胞内生物信号反应的过程中,例如听力、疼痛、触摸、本体感觉、血压调节等,机械敏感性离子通道都在其中发挥了关键性作用。近年来,瞬时受体电位通道家族、机械活化双孔钾通道家族、上皮钠通道家族。

关键词： Piezo蛋白机械转导钙离子干细胞

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小鼠血管壁CD34+干细胞的分离、培养及鉴定

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生理学报 2023年第2期75卷 205-215页

作者：杨礼菊马颖李源党青亚程俊杨艳李鹏云西南医科大学心血管医学研究所医学电生理学教育部重点实验室医学电生理四川省重点实验室四川省心血管疾病防治协同创新中心西南医科大学附属医院心内科

血管壁干细胞（vascular wall-resident stem cells, VW-SCs）在维持血管正常功能以及损伤血管的修复过程中发挥着关键性的作用，对其功能特性的研究将有助于干细胞的调控及应用。本文旨在建立稳定的VW-SCs分离、培养及分选鉴定技术，... 详细信息

血管壁干细胞（vascular wall-resident stem cells, VW-SCs）在维持血管正常功能以及损伤血管的修复过程中发挥着关键性的作用，对其功能特性的研究将有助于干细胞的调控及应用。本文旨在建立稳定的VW-SCs分离、培养及分选鉴定技术，为进一步深入研究VW-SCs在生理和疾病状态下的增殖、迁移和分化等机制提供丰富、可靠的细胞来源。首先利用组织块贴壁法获取小鼠主动脉外膜以及肠系膜动脉血管壁细胞，传代培养到细胞数量至少达到1×10～7后经磁珠分选和流式细胞术鉴定CD34+的VW-SCs；其次采用细胞免疫荧光染色检测干细胞标志物（CD34、Flk-1、c-kit、Sca-1）以及平滑肌标志物（SM22、SM MHC）、内皮标志物（CD31）和细胞核内分裂增殖相关蛋白（Ki-67）；血管壁CD34+干细胞的定向分化采用EBM-2内皮分化诱导培养基和FM-2成纤维细胞培养基分别培养7天和3天；利用细胞免疫荧光染色和q-PCR检测内皮细胞标志物（CD31, VWF）和成纤维细胞标志物（Vimentin, PDGFRα）的表达。此外，采用TILLvisION胞内钙信号检测系统结合Ca2+荧光探针Fura-2/AM观察CD34+干细胞胞内钙库Ca2+释放和胞外Ca2+内流特性。结果显示，血管组织块贴壁法和磁珠分选可获取较高纯度（> 90%）的小鼠主动脉外膜以及肠系膜动脉血管壁CD34+干细胞。体外培养的血管壁CD34+干细胞可诱导分化为内皮细胞和成纤维细胞。咖啡因和ATP可显著激活CD34+干细胞胞内钙库Ca2+释放，毒胡萝卜素（thapsigargin, TG）耗竭内质网钙库Ca2+后触发钙库操纵的外钙内流(store-operated Ca2+entry, SOCE)。该方法建立了稳定、高效的血管壁CD34+干细胞分离、培养和鉴定技术，为体外深入研究VW-SCs的调控机制以及靶向药物的筛选提供了保障。

关键词：血管壁干细胞细胞分离细胞鉴定磁珠分选

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补骨脂酚启动自噬减轻β-GP诱导的小鼠主动脉中膜钙化

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重庆医科大学学报 2023年第7期48卷 784-792页

作者：何虎强朱俊龙李勤罗泽恩代江红胥雄飞曾宏刘勇西南医科大学附属医院血管外科、西南医科大学心血管医学研究所、医学电生理学教育部重点实验室、四川心血管病防治协同创新中心泸州646000

目的:在选定的36种中药单体中筛选能够启动细胞自噬的药物;探究补骨脂酚对小鼠血管平滑肌细胞自噬的影响以及对血管平滑肌细胞钙化的影响。方法:从中草药中提取的黄酮类化合物以不同浓度处理人脑胶质瘤细胞(human glioma cells,U87)72 h... 详细信息

目的:在选定的36种中药单体中筛选能够启动细胞自噬的药物;探究补骨脂酚对小鼠血管平滑肌细胞自噬的影响以及对血管平滑肌细胞钙化的影响。方法:从中草药中提取的黄酮类化合物以不同浓度处理人脑胶质瘤细胞(human glioma cells,U87)72 h,用MTT法得到药物对U87细胞的半抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC_(50)),并以小于IC_(50)浓度的条件下以不同浓度梯度处理U87细胞,观察U87细胞GFP-LC3微管相关蛋白1轻链3(Microtubule-associated protein light chain 3,LC3)的荧光信号和Western blot检测自噬指标LC3从而观察细胞自噬活动激活情况,以筛选出能够启动自噬的药物。后续选取补骨脂酚进行进一步实验,探究药物启动自噬后对血管平滑肌细胞钙化的影响。使用β-GP构建小鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)钙化模型,分为对照组(C-CTR组)和钙化组(C-CAL组),并通过Western blot检测Runx2、BMP2及LC3的表达。使用补骨脂酚干预后,分为对照组(C-CTR组)、钙化组(C-CAL组)、钙化+补骨脂酚组(C-CAL+Administration组)、对照+补骨脂酚组(C-CTR+Administration组)4组,分别用Western blot检测LC3、Runx2和BMP2,用茜素红染色观察细胞钙化结节的形成。在动物实验中使用高脂饮食同时在腹腔注射维生素D的方式构建小鼠主动脉钙化模型,使用腹腔注射补骨脂酚的方式对小鼠进行干预,分为对照组(CTR组)、钙化组(CAL组)、钙化+补骨脂酚组(CAL+Administration组)、对照+补骨脂酚组(CTR+Administration组)4组。通过冯库萨染色观察主动脉中膜钙沉积情况,使用HE染色法观察小鼠主动脉中膜的厚度。结果:观察LC3的荧光强度和Western blot提示:细辛脂素(Asarinim)、补骨脂甲素(Bavachin)、灯心草酚(Juncusol)、桑黄酮(Mullberrin)、地榆皂苷2(Ziyuglycoside 2)、补骨脂酚(Bakuchiol)、补骨乙素(Corylifolinin)、五味子甲素(Schisandrin A)、五味子乙素(Schisandrin B)可以显著增加自噬小体的表达(P<0.05)。Western blot结果提示,在钙化的血管平滑肌细胞中,BMP2、Runx2以及LC3的表达显著增加(P<0.05)。使用补骨脂酚干预后Western blot结果提示BMP2和Runx2表达降低(P<0.05),LC3-Ⅱ表达显增加(P<0.05)。茜素红结果显示钙结节沉积也显著降低(P<0.05)。动物实验中,补骨脂酚干预后HE结果显示中膜厚度较钙化组显著增厚,冯库萨染色结果提示补骨脂酚可以显著减轻钙沉积。结论:补骨脂酚可以激活VSMCs的自噬,并减缓小鼠主动脉钙化的进程。

关键词：补骨脂酚自噬血管平滑肌细胞动脉中膜钙化

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针刺原位开窗胸主动脉腔内修复术治疗主动脉夹层累及主动脉弓

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中国介入影像与治疗学 2024年第9期21卷 517-521页

作者：朱俊龙徐通洁李朋代江红陈豪窦涠刘勇何虎强西南医科大学附属医院血管外科四川泸州646000 西南医科大学心血管医学研究所医学电生理学教育部重点实验室四川心血管病防治协同创新中心四川泸州646000 隆昌市人民医院外七科四川内江642150 重庆市第九人民院胃肠血管外科重庆400799

目的观察针刺原位开窗胸主动脉腔内修复术(TEVAR)治疗主动脉夹层(AD)累及主动脉弓的效果。方法回顾性分析16例接受针刺原位开窗TEVAR重建主动脉弓分支的AD累及主动脉弓患者,记录开窗数目、技术成功率及治疗相关并发症;通过随访评估夹层... 详细信息

目的观察针刺原位开窗胸主动脉腔内修复术(TEVAR)治疗主动脉夹层(AD)累及主动脉弓的效果。方法回顾性分析16例接受针刺原位开窗TEVAR重建主动脉弓分支的AD累及主动脉弓患者,记录开窗数目、技术成功率及治疗相关并发症;通过随访评估夹层修复、开窗分支血管通畅性及有无内漏等,记录患者生存情况。结果对16例均成功植入主动脉主体支架;对其中4例植入Z0、Z1及Z2区三开窗支架,6例植入Z1及Z2区双开窗支架,2例植入Z0及Z1区双开窗支架,4例植入Z2区单开窗支架。头臂干(BCT)开窗成功率83.33%(5/6),对1例未成功开通者行左颈总动脉(LCCA)-右颈总动脉搭桥术;LCCA开窗成功率100%(12/12);左锁骨下动脉(LSA)开窗成功率87.50%(14/16),对2例未顺利开窗者改行腋-腋动脉人工血管旁路转流术。治疗技术成功率100%(16/16)。TEVAR中1例发生Ⅰa型内漏,以弹簧圈栓塞后好转;1例TEVAR结束后出现心包压塞而死亡。15例接受随访,中位随访时间20个月,期间出现短暂性脑缺血发作及主体支架近端起始处局部小夹层各1例,均未经特殊处理而改善;1例出现Ⅰ型、2例出现Ⅲ型内漏,予近端开窗覆膜支架植入或以弹簧圈栓塞后好转;1例因冠心病死亡。结论针刺原位开窗TEVAR治疗AD累及主动脉弓有效且安全。

关键词：主动脉夹层胸主动脉腔内修复术原位开窗治疗效果

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儿茶酚胺检测技术的研究进展

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中国现代应用药学 2022年第2期39卷 253-260页

作者：叶珂君周小琳欧贤红医学电生理学教育部重点实验室医学电生理四川省重点实验室四川省心血管疾病防治协同创新中心西南医科大学心血管医学研究所四川泸州646000

儿茶酚胺(catecholamines,CAs)是一类生物源性化合物,它们作为神经递质和激素在人和动物体内发挥着重要的生理作用。它们是诊断疾病和功能障碍的重要标志物,也是拟交感神经药物制剂的成分。因此生物样品、活细胞中CAs的测定方法,以及它... 详细信息

儿茶酚胺(catecholamines,CAs)是一类生物源性化合物,它们作为神经递质和激素在人和动物体内发挥着重要的生理作用。它们是诊断疾病和功能障碍的重要标志物,也是拟交感神经药物制剂的成分。因此生物样品、活细胞中CAs的测定方法,以及它们的精确度、灵敏度、选择性及实时性,对疾病的诊断及病理生理机制的研究具有重要意义。本文从临床生物样品、活体细胞、活体等不同层次综述近5年来CAs的检测方法,描述包括荧光成像法、电化学法、质谱法、光度分析法、非损伤成像技术等检测方法的性能特征及应用。

关键词：儿茶酚胺荧光成像法质谱法电化学法非损伤成像技术

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新生与成年大鼠心脏成纤维细胞来源外泌体蛋白质组学差异分析

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西南医科大学学报 2024年第2期47卷 130-135页

作者：高小平倪潇周文李畅李光西南医科大学心血管医学研究所医学电生理学教育部重点实验室医学电生理四川省重点实验室四川省心血管疾病防治协同创新中心泸州646000

目的幼体心脏具有再生修复功能,通过分析新生大鼠与成年大鼠心脏成纤维细胞来源外泌体的差异蛋白,从分子水平上探讨心肌受损后可能的治疗靶点。方法分别从新生和成年大鼠心脏成纤维细胞中分离出外泌体,并提取蛋白质进行高效液相色谱法(h... 详细信息

目的幼体心脏具有再生修复功能,通过分析新生大鼠与成年大鼠心脏成纤维细胞来源外泌体的差异蛋白,从分子水平上探讨心肌受损后可能的治疗靶点。方法分别从新生和成年大鼠心脏成纤维细胞中分离出外泌体,并提取蛋白质进行高效液相色谱法(high per-formance liquid chromatography,HPLC)和液相色谱串联质谱法(liquid chromatography coupled to tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)分析,鉴定差异表达的蛋白质。使用DAVID数据库对差异表达蛋白基因进行基因本体论(Gene Ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路分析。并进一步使用STRING数据库和Cytoscape软件进行蛋白质相互作用网络(protein-protein interaction,PPI)分析,以筛选出关键基因。结果在新生大鼠中共发现241个差异表达蛋白,其中上调表达的蛋白有117个,下调表达的蛋白有124个。GO分析显示上调表达基因主要涉及整合素介导的信号通路和对缺氧的反应,而对内肽酶活性负调控的基因下调表达。KEGG分析结果表明上调表达基因主要富集于Hippo信号通路,而下调表达基因主要涉及细胞外基质与受体相互作用。通过PPI分析得出有6个关键基因(Lamc1、Agrn、Itih3、Tfrc、Bgn和Atp5pd)下调,有1个关键基因(Rp17a)上调。结论通过蛋白组学和生物信息学方法,筛选出了新生大鼠和成年大鼠心脏成纤维细胞来源外泌体的差异蛋白,以及相关的信号通路和关键基因,为心肌受损精准治疗提供了潜在的靶点。

关键词：新生大鼠心脏成纤维细胞外泌体蛋白质组学

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G蛋白偶联胆汁酸受体1通过抑制内质网应激减轻内皮素-1介导的乳鼠心肌细胞凋亡

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西南医科大学学报 2024年第6期47卷 528-534页

作者：陈德秀雷贤英李家富西南医科大学附属医院重症医学科泸州646000 西南医科大学附属医院心血管内科泸州646000 心血管医学研究所医学电生理学教育部重点实验室医学电生理四川省重点实验室(四川省心血管疾病防治协同创新中心)泸州646000

目的观察G蛋白偶联胆汁酸受体1(G protein-coupled bile acid receptor 1,TGR5)被激活后对内皮素-1(endothelin-1,ET-1)介导的心肌细胞凋亡的作用,并探讨其机制。方法首先分对照组和ET-1组,ET-1浓度分别为10-6、10-7、10-8 mmol/L,分别培养12、24、36、48 h,流式细胞术检测各组各时段凋亡率。选择凋亡率较高的ET-1浓度及时间,进行后续实验。后续实验分为对照组、ET-1组、TGR5激动组、TGR5表达抑制组、TGR5空病毒组,流式细胞术检测各组心肌细胞凋亡率,CCK-8测心肌细胞存活率,RT-PCR检测TGR5mRNA,Western blot检测TGR5、C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)、c-Jun氨基末端激酶(c-Jun-N-terminal protein kinase,JNK)、磷酸化JNK(phosphorylated JNK,p-JNK)及门冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(casepase-12)表达。结果ET-1在10^(-8)~10^(-6) mmol/L的浓度范围呈浓度依赖性,48 h内呈时间依赖性介导心肌细胞凋亡(P<0.05)。后续实验发现激活TGR5后,相较于ET-1组,心肌细胞凋亡率下降,心肌细胞存活率提高,且CHOP、p-JNK、Caspase12蛋白表达受到抑制(P<0.05)。而抑制TGR5表达后可阻断TGR5对心肌细胞凋亡的抑制作用,降低心肌细胞存活率,CHOP、p-JNK、Caspase12蛋白表达增加(P<0.05)。结论ET-1可介导心肌细胞凋亡,其机制可能与内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)过度激活有关,而TGR5可能通过抑制ERS,拮抗ET-1对心肌细胞介导的凋亡作用。

关键词： G蛋白偶联胆汁酸受体1 心肌细胞凋亡内皮素-1 内质网应激

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血管壁Sca-1+细胞上中电导钙激活钾通道作用初探

血管壁Sca-1+细胞上中电导钙激活钾通道作用初探

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第四届（2023年）中国安全药理学学术年会

作者：蓝婷李鹏云崔艺琴杨礼菊车畅程俊杨艳医学电生理学教育部/四川省重点实验室四川省心血管疾病防治协同创新中心心血管医学研究所西南医科大学

目的:在成体血管系统中,干细胞大多保持相对静止状态,一旦血管受到损伤,相关的损伤信号发出后,干细胞接收相应信号并被激活,通过迁移与分化活动促进血管重塑。近年来,对于血管壁干细胞在血管重塑中的作用及其机制研究进展迅速,但针对血... 详细信息

目的:在成体血管系统中,干细胞大多保持相对静止状态,一旦血管受到损伤,相关的损伤信号发出后,干细胞接收相应信号并被激活,通过迁移与分化活动促进血管重塑。近年来,对于血管壁干细胞在血管重塑中的作用及其机制研究进展迅速,但针对血管壁Sca-1+细胞上的离子通道研究至今未见相关报道。中电导钙激活钾通道(Intermediate-conductancecalcium-activatedpotassium channel,IK)是钙激活钾通道(Calcium-activatedpotassium channel,K)的一种亚型,由细胞内Ca激活,调节细胞膜内外K流动,在多种细胞的生理活动中发挥重要作用。由此,本研究以血管壁Sca-1细胞为对象,从离子通道角度探索血管壁Sca-1细胞上IK的作用及其在血管重塑中的影响,为Sca-1细胞在血管重塑中的调控机制提供新靶点。方法:利用C小鼠胸主动脉外膜分离培养外膜细胞,以此作为免疫磁珠筛选Sca-1细胞的细胞来源,获得具有干细胞基本特性的Sca-1细胞。在细胞学水平上利用免疫荧光染色,qPCR,Transwell对IK在Sca-1细胞迁移及体外诱导定向分化中的作用进行研究。此外,对Sca-1细胞电生理学特性进行研究,包括K电流基本特性、K电流对Ca敏感性、K电流随Ca变化的时间依赖性、IK特异性阻断剂TRAM-34分离的IK电流。在此基础上,在小鼠股动脉导丝拉伤模型中,用TRAM-34阻断损伤血管局部IK,观察其对血管重塑的影响。结果:（1）从C小鼠胸主动脉分离的Sca-1细胞具备干细胞基本特性,可稳定使用。在体外定向诱导分化下,Sca-1细胞K的两种亚型IK与SK的mRNA表达明显增加（P<0.01,n=3）。（2）电生理结果显示,Sca-1细胞上K电流主要有两种:第一种即最常见的一种为内向与外向电流均较小（50 pA左右）的类型,第二种电流呈现典型的内向整流特性,内向电流极大（最大可达900pA）,外向电流极小。且Sca-1细胞上K电流具有Ca敏感性,在此基础上,用TRAM-34成功分离到IK电流。（3）使用TRAM-34阻断Sca-1细胞上IK,细胞迁移能力下降（P<0.0001,n=4）。（4）小鼠股动脉导丝拉伤模型中,阻断损伤血管局部的IK对血管内膜新生与纤维化有一定程度影响。结论:Sca-1细胞上存在IK电流,IK参与Sca-1细胞的迁移过程。IK参与股动脉导丝拉伤模型小鼠的血管重塑。

关键词： IKCa 血管壁Sca-1+细胞血管重塑

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细胞焦亡与血管重塑相关疾病的研究进展

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重庆医学 2022年第20期51卷 3564-3568页

作者：陈颖弘李倩吴学铭(综述) 李鹏云(审校) 西南医科大学医学电生理学教育部重点实验室/四川省心血管疾病防治协同创新中心/心血管医学研究所四川泸州646000

血管重塑涉及细胞增殖、迁移、死亡和细胞外基质的合成与降解等细胞生物学活性,是冠心病、高血压、血管再狭窄等多种心血管疾病发生、发展的重要病理学基础。而细胞焦亡是新近发现的一种新的程序性细胞死亡方式,目前已被证实其广泛参与... 详细信息

血管重塑涉及细胞增殖、迁移、死亡和细胞外基质的合成与降解等细胞生物学活性,是冠心病、高血压、血管再狭窄等多种心血管疾病发生、发展的重要病理学基础。而细胞焦亡是新近发现的一种新的程序性细胞死亡方式,目前已被证实其广泛参与感染性疾病、神经系统疾病等多种疾病的发生、发展过程,近年来其在心血管疾病中的作用日益受到关注。本文旨在阐述细胞焦亡在血管重塑性疾病发生、发展和转归中的作用及其调控机制,为缓解血管炎症和防治相关心血管疾病提供新思路。

关键词：细胞焦亡血管重塑心血管疾病综述

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导管接触溶栓联合Angiojet机械吸栓在伴有髂静脉受压综合征的下肢深静脉血栓形成中的应用

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中国心血管病研究 2021年第7期19卷 657-660页

作者：冯松林余皓周浩戈郭剑吴欣择李朝阳施森西南医科大学附属医院血管外科四川省泸州市646000 西南医科大学心血管医学研究所医学电生理学教育部重点实验室四川心血管病防治协同创新中心

目的评估导管接触溶栓(CDT)联合Angiojet机械吸栓在伴有髂静脉受压综合征(IVCS)的急性下肢深静脉血栓形成(LEDVT)中的疗效。方法回顾性分析我院2018年12月至2020年8月共计29名LEDVT伴IVCS患者,将CDT联合Angiojet患者作为研究组(n=11),单... 详细信息

目的评估导管接触溶栓(CDT)联合Angiojet机械吸栓在伴有髂静脉受压综合征(IVCS)的急性下肢深静脉血栓形成(LEDVT)中的疗效。方法回顾性分析我院2018年12月至2020年8月共计29名LEDVT伴IVCS患者,将CDT联合Angiojet患者作为研究组(n=11),单纯CDT患者作为对照组(n=18),分析两组患者下肢肿胀消除率、静脉通畅率、尿激酶使用量和溶栓时间、住院时间及并发症等指标,评估两种治疗方式的效果。结果两组患者中技术成功率100%,研究组与对照组的大腿肿胀消除率为[(87.19±2.46)%和(52.42±3.53)%,P<0.05],小腿肿胀消除率为[(95.45±0.65)%和(86.74±2.14)%,P<0.05],血栓清除率为[(92.89±3.13)%和(82.23±2.93)%,P<0.05],溶栓时间为[(31.13±7.71)h和(81.50±11.77)h,P<0.05],尿激酶量为[(138.00±34.36)×10^(4)U和(296.90±35.68)×10^(4)U,P<0.05],住院时间为[(7.18±0.52)d和(10.33±0.73)d,P<0.05];研究组均出现一过性血红蛋白尿,两组均无急性肾损伤、肺栓塞、出血等并发症发生。结论相比单纯CDT疗效,CDT联合Angiojet机械吸栓在LEDVT伴IVCS患者中具有肿胀消退快、溶栓效率高、溶栓时间短、尿激酶使用少、出血风险低、住院时间短等优点,近期疗效可靠。

关键词：深静脉血栓形成导管接触溶栓 Angiojet机械吸栓

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