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中华医学超声杂志（电子版） 2019年第5期16卷 386-392页

作者：蔡璐尹立雪王斯佳周婕徐芸郭智宇西南医科大学临床医学院泸州646000 四川省医学科学院·四川省人民医院超声医学研究所超声心脏电生理学与生物力学四川省重点实验室成都610072 通用电气医疗超声临床心血管应用部 611731

目的应用二维超声斑点追踪成像(2D-STI)分层应变技术,评价阿霉素致大鼠急性左心室心肌早期毒性损伤的特点。方法选取体质量300~350g SD雄性大鼠32只,完全随机分为阿霉素组和空白对照组,每组各16只。阿霉素组:采用浓度2mg/ml盐酸阿霉素,... 详细信息

目的应用二维超声斑点追踪成像(2D-STI)分层应变技术,评价阿霉素致大鼠急性左心室心肌早期毒性损伤的特点。方法选取体质量300~350g SD雄性大鼠32只,完全随机分为阿霉素组和空白对照组,每组各16只。阿霉素组:采用浓度2mg/ml盐酸阿霉素,按12mg/kg给药剂量一次性腹腔注射。空白对照组:给予同等容量的0.9%氯化钠溶液一次性腹腔注射。应用常规二维灰阶采集给药前、给药后24h和给药后48h3个时间点的左心室短轴乳头肌水平的超声心动图像,采用解剖M型超声技术测量左心室舒张末期内径(LVEDD)、左心室收缩末期内径(LVESD),以及测量舒张末期室间隔(IVSd)、左心室后壁(LVPWd)厚度,计算左心室短轴缩短率(FS)和左心室射血分数(LVEF)。应用基于二维超声斑点追踪成像工作站心肌分层应变分析技术获取左心室乳头肌水平短轴切面心肌整体圆周分层应变值,比较两组大鼠3个时点的左心室FS、EF测值及左心室乳头肌水平短轴切面心内膜下心肌、中层心肌、心外膜下心肌3层圆周应变差异。完成3个时间点超声心动图检查后,两组各随机处死3只大鼠,取大鼠心脏行HE染色行常规心肌病理学检查。组内给药后24h、48h数据与给药前数据比较采用配对t检验,组间给药前数据比较采用成组t检验。结果两组大鼠左心室短轴乳头肌水平整体圆周分层应变值分布均存在梯度特征:心内膜下心肌>中层心肌>心外膜下心肌。阿霉素组大鼠左心室乳头肌水平短轴心内膜下心肌圆周应变在给药48h后减低。与给药前相比,差异有统计学意义(-25.13±10.6vs -17.04±2.89,t=2.3,P<0.05);对照组大鼠左心室乳头肌水平短轴切面三层心肌圆周应变参数及阿霉素组大鼠左心室乳头肌水平短轴切面中层心肌及心外膜下心肌圆周应变参数在给药前后3个时点比较,差异均无统计学意义(P均>0.05)。LVEDD、LVESD、IVSd、LVPWd、FS、LVEF在两组中给药前后3个时点比较,差异均无统计学意义(P均>0.05)。阿霉素组大鼠心脏病理改变主要是:心内膜下心肌细胞水肿,空泡样变,心肌细胞核萎缩、溶解,间质水肿,毛细血管扩张等。结论采用超声分层应变成像技术有可能早期检出并定量分析阿霉素致SD大鼠左心室心内膜下心肌力学功能异常变化。

关键词：超声检查分层应变大鼠

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肌球蛋白轻链磷酸酶靶向亚基1在调节血管张力中的作用的研究进展

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四川生理科学杂志 2019年第3期41卷 237-241页

作者：刘小勤杨艳西南医科大学心血管医学研究所医学电生理学教育部和四川省重点实验室四川省心血管疾病防治协同创新中心

肌球蛋白轻链磷酸酶靶向亚基1(Myosin phosphatase target subunit1,MYPT1)可通过其亮氨酸亚型转换和丝氨酸/苏氨酸(Serine/threonine,S/T)可磷酸化位点的磷酸化,调节血管张力。虽然MYPT1调节血管张力的功能研究较多,但针对其具体机制,... 详细信息

肌球蛋白轻链磷酸酶靶向亚基1(Myosin phosphatase target subunit1,MYPT1)可通过其亮氨酸亚型转换和丝氨酸/苏氨酸(Serine/threonine,S/T)可磷酸化位点的磷酸化,调节血管张力。虽然MYPT1调节血管张力的功能研究较多,但针对其具体机制,目前尚不完全清楚。现就肌球蛋白磷酸酶靶向亚基与调节血管张力有关的结构,疾病下该结构与张力调节的关系进行综述,为血管疾病的研究和治疗提供理论基础。

关键词： MYPT1 血管张力亮氨酸拉链结构丝氨酸/苏氨酸磷酸化位点 NO/cGMP/PKG

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Synaptobrevin-2促进心房肌SK2通道转运的机制研究

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中国科学：生命科学 2018年第1期48卷 84-92页

作者：李涛范学慧余奕言陈琳琳黄文俊杨艳曹济民曾晓荣谭晓秋西南医科大学心血管医学研究所医学电生理学教育部重点实验室四川省心血管疾病防治协同创新中心泸州646000

小电导钙激活钾通道亚型2(SK2通道)主要在心房表达,与心房颤动有关.高频刺激模拟心房快速起搏可以增加SK2电流,但是其中的机制并不完全清楚.本研究旨在研究转运调节蛋白Synaptobrevin-2(VAMP2)在调节心房肌细胞膜SK2通道转运过程中的作... 详细信息

小电导钙激活钾通道亚型2(SK2通道)主要在心房表达,与心房颤动有关.高频刺激模拟心房快速起搏可以增加SK2电流,但是其中的机制并不完全清楚.本研究旨在研究转运调节蛋白Synaptobrevin-2(VAMP2)在调节心房肌细胞膜SK2通道转运过程中的作用.以培养的新生大鼠(Rattus norvegicus)心房肌细胞(NRAMs)和表达有SK2通道的HEK293细胞为研究对象,采用蛋白质印迹、膜片钳、共聚焦显微成像、流式细胞术和全内荧光反射等技术研究VAMP2对SK2通道转运的影响.结果发现,快速起搏可上调VAMP2蛋白和增加SK2通道蛋白在细胞膜上的表达,而敲低VAMP2可降低NRAMs细胞膜上SK2通道蛋白的表达.在HEK293细胞上共表达VAMP2和SK2,增加了SK2的表达,加速了SK2向细胞膜的转运,并通过抑制SK2内吞来稳定SK2通道蛋白在细胞膜上表达.由以上结果可知,VAMP2可能通过促进SK2通道的表达,转运和稳定细胞膜上的表达,参与快速起搏心房肌细胞SK2功能的增强.

关键词： SK2通道 VAMP2 SNAREs 转运心律失常

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神经递质释放的分子机制

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中国细胞生物学学报 2019年第1期41卷 34-41,33页

作者：陈瑛颀张晨董伟阳小飞首都医科大学基础医学院神经生物学系北京100069 北京大学麦戈文脑科学研究所北京大学生命科学学院北京100871 西南医科大学心血管医学研究所医学电生理学教育部重点实验室医学电生理四川省重点实验室泸州646000 中南民族大学生物医学工程学院脑认知国家民委重点实验室医学信息分析及肿瘤诊疗湖北省重点实验室膜离子通道与药物研发实验室武汉430074

大脑中的神经细胞主要依赖神经突触进行细胞间信息传递。神经递质从突触前释放到突触间隙中,将电信号转换为化学信号。释放的递质与突触后的相应受体结合,引起受体通道的打开再将化学信号转换为突触后电信号。到目前为止,对SNARE复合体... 详细信息

大脑中的神经细胞主要依赖神经突触进行细胞间信息传递。神经递质从突触前释放到突触间隙中,将电信号转换为化学信号。释放的递质与突触后的相应受体结合,引起受体通道的打开再将化学信号转换为突触后电信号。到目前为止,对SNARE复合体介导的钙离子触发的神经递质释放分子机制已经有了深入理解,囊泡融合的基本模型也得到了广泛认可,但仍有问题没有解决。该文对近年来与神经递质释放分子机制相关的研究作一综述,以期为递质释放过程中重要分子的深入解析提供理论依据。

关键词：神经递质突触 SNARE复合体囊泡融合

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银杏内酯A对老年大鼠心肌细胞收缩功能的影响

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中国药理学通报 2018年第12期34卷 1674-1678页

作者：郝艳玲薛敏孙红曾晓荣徐州医科大学基础医学国家级实验教学示范中心机能实验分中心江苏徐州221004 徐州医科大学生理教研室江苏徐州221004 西南医科大学医学电生理学教育部重点实验室心血管医学研究所四川泸州646000

目的探讨银杏内酯A后处理对缺血/再灌注(ischemia/reperfusion, I/R)损伤的老年大鼠单个心肌细胞收缩功能的影响及其机制。方法将SD老年大鼠离体心脏用酶分离获得单个心肌细胞,并制备细胞水平I/R损伤模型,分别用0.1、1、10、30、100μmo... 详细信息

目的探讨银杏内酯A后处理对缺血/再灌注(ischemia/reperfusion, I/R)损伤的老年大鼠单个心肌细胞收缩功能的影响及其机制。方法将SD老年大鼠离体心脏用酶分离获得单个心肌细胞,并制备细胞水平I/R损伤模型,分别用0.1、1、10、30、100μmol·L^(-1)的银杏内酯A在模拟复灌注时进行后处理,并检测细胞存活率、单个心肌细胞收缩幅度、收缩时间(TTP)、舒张50%时间(R_(50))和舒张100%时间(R_(100));检测培养基中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)和超氧化物岐化酶(superoxide dismutase, SOD)的含量;测定细胞中Bcl-2和Bax蛋白表达。在银杏内酯A最佳浓度组中加入PI3K/Akt信号通路抑制剂LY294002,检测细胞中p-Akt蛋白表达变化。结果银杏内酯A浓度在10、30μmol·L^(-1)时,增加心肌细胞存活率,明显增强心肌细胞的收缩幅度(P<0.01),并缩短缺血造成TTP的延长,降低LDH含量,提高SOD活性,并能降低Bax与Bcl-2的比值,减少凋亡,增加p-Akt蛋白的表达。结论银杏内酯A后处理能够增强老年大鼠心肌细胞的收缩力,降低心肌I/R的损伤程度。

关键词：银杏内酯A 缺血/再灌注老年大鼠心肌细胞收缩功能 PI3K/Akt信号通路

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镁离子对豚鼠心脏离体缺血再灌注损伤的影响

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解剖科学进展 2019年第4期25卷 430-434页

作者：赵美眯李卓杨艳范钦梅刘皆晖毛楠霍原曾晓荣郝丽英中国医科大学药学院药物毒理学教研室辽宁沈阳110122 西南医科大学心血管医学研究所医学电生理学教育部重点实验室、四川省心血管疾病防治协同创新中心四川泸州646000

目的观察不同浓度镁离子对豚鼠离体心脏缺血再灌注损伤的影响。方法建立离体心脏缺血再灌注模型,应用含不同浓度镁离子的Krebs-henseleit(KH)液,观察心率(heartrate,HR)、冠脉流量(coronary flow,CF)以及灌流液中乳酸脱氢酶(lactate deh... 详细信息

目的观察不同浓度镁离子对豚鼠离体心脏缺血再灌注损伤的影响。方法建立离体心脏缺血再灌注模型,应用含不同浓度镁离子的Krebs-henseleit(KH)液,观察心率(heartrate,HR)、冠脉流量(coronary flow,CF)以及灌流液中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)等指标的变化。结果缺血再灌注模型组与正常对照组(Control)相比较,HR、CF和CF/HR均有明显降低,而灌流液中LDH含量明显增加。与模型组相比较,低浓度镁离子再灌注诱发缺血再灌注损伤心脏的HR异常增加,对CF、CF/HR、LDH含量没有影响。高浓度镁离子再灌注对HR没有影响,却增加了CF和CF/HR,同时降低灌注液中LDH含量。结论低镁增加缺血再灌注中的心率,可能带来增加耗氧量,增大心律失常的危险性。而高镁可能通过改善心肌收缩力(CF/HR)降低缺血再灌注损伤。

关键词：镁离子心肌缺血再灌注损伤 Langendorff灌流豚鼠

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肿瘤心脏病学的生理学基础

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生理科学进展 2018年第5期49卷 337-342页

作者：党喜同黄文俊曾晓荣唐朝枢西南医科大学心血管研究所医学电生理学教育部重点实验室四川省心血管疾病防治协同创新中心泸州646000 北京大学医学部生理学与病理生理学系北京100191

肿瘤心脏病学是对肿瘤病人在其恶性肿瘤的治疗期间所出现的心脏毒性的早期诊断、预防、治疗和监测。随着肿瘤学基础研究的深入及临床治疗的飞速发展,肿瘤病人的病死率逐年降低,从而引起肿瘤幸存者人数逐年升高。不幸的是,所有的抗肿瘤... 详细信息

肿瘤心脏病学是对肿瘤病人在其恶性肿瘤的治疗期间所出现的心脏毒性的早期诊断、预防、治疗和监测。随着肿瘤学基础研究的深入及临床治疗的飞速发展,肿瘤病人的病死率逐年降低,从而引起肿瘤幸存者人数逐年升高。不幸的是,所有的抗肿瘤药物都具有不同程度的心血管毒性,所以肿瘤幸存者往往伴有心血管系统的并发症。其次,随着人口的老龄化,肿瘤与心血管疾病共患病人数逐年增加。再者,由于肿瘤与某些心血管疾病(如房颤)具有"共同发病机理",进一步增加了肿瘤和心血管疾病共患病的人数。因此,肿瘤或心血管病专家在管理越来越多的肿瘤-心脏病共患病病人时遇到了前所未有的挑战。为了全面、有效、及科学地管理肿瘤-心脏病共患病病人,预防肿瘤病人因肿瘤的治疗而诱发心血管疾病,及避免肿瘤患者因继发心脏疾病或心脏疾病患者因继发肿瘤而影响对其首发病的治疗,因而产生了肿瘤心脏病学。肿瘤心脏病学的目的在于联合心脏病和肿瘤专家、及基础、转化医学、和临床研究科学家来共同增进肿瘤幸存者心血管系统的健康。肿瘤心脏病学涉及的领域主要包括:对肿瘤患者的原发肿瘤及肿瘤患者同发或继发的心脏疾病的临床治疗;对肿瘤患者因放射及化学药物治疗而引起的心脏毒性的早期诊断;对肿瘤病人继发心脏疾病危险因素分层及预防;以及对肿瘤患者心脏病的治疗及对放化疗所引起的心脏毒性的治疗和监测。因此,肿瘤心脏病学不单是对肿瘤病人出现心脏并发症的临床治疗学,而且包括了推动肿瘤心脏病学赖以发展的基础研究,以阐明肿瘤心脏病的发病机理,从而为肿瘤心脏病的早期诊断、治疗、预防、及监测提供理论基础。

关键词：肿瘤心脏病学心脏毒性放化疗肿瘤抑制基因心房颤动

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小电导钙激活钾通道在人心房中的增龄性变化

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重庆医学 2018年第33期47卷 4218-4222页

作者：余奕言何容芳于风旭范学慧张娟李涛李妙龄医学电生理学教育部重点实验室/医学电生理四川省重点实验室/西南医科大学心血管医学研究所四川泸州646000 西南医科大学附属医院心脏外科四川泸州646000

目的研究增龄对人心房肌小电导钙激活钾(SK2)通道的影响。方法选取3个不同年龄阶段:60岁(n=18)窦性心律(SR)患者为研究对象,于体外循环手术中获取患者右心耳组织。急性酶分离方法分离单个人心房肌细胞,全细胞膜片钳技术检测不同年龄患... 详细信息

目的研究增龄对人心房肌小电导钙激活钾(SK2)通道的影响。方法选取3个不同年龄阶段:<40岁(n=22)、40～60岁(n=34)和>60岁(n=18)窦性心律(SR)患者为研究对象,于体外循环手术中获取患者右心耳组织。急性酶分离方法分离单个人心房肌细胞,全细胞膜片钳技术检测不同年龄患者心房SK2通道电流的差异。Western blot和qRT-PCR检测不同年龄患者心房组织SK2通道蛋白和基因的表达变化。结果采用该急性酶分离方法可获得细胞完整、横纹清晰、有电生理活性的心房肌细胞;<40岁患者组(n=18)与40～60岁患者组(n=8)相比,SK2通道电流无明显变化(P>0.05),与<40岁患者组(n=8)相比,>60岁患者组(n=10)SK2通道电流明显增加(-130mV,P<0.01);与40～60岁患者组(n=8)相比,>60岁患者组(n=10)SK2通道电流也增加且差异有统计学意义(-130mV,P<0.01)。分别与<40岁(n=12)和40～60岁患者组(n=18)相比,>60岁患者组(n=10)SK2通道蛋白表达和基因表达均明显增加(P<0.05)。结论随着年龄的增加,人心房组织中SK2通道电流、基因和蛋白表达水平均明显增加,增龄导致的SK2通道重构可能参与了心房颤动的病理生理过程。

关键词：心房颤动小电导钙激活钾通道老龄电重构膜片钳

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CS_L载体构建表达纯化及活性鉴定

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解剖科学进展 2018年第6期24卷 644-647页

作者：雷帅胡慧媛王一妃周诗苏敬阳曾晓荣郝丽英中国医科大学药学院药物毒理学教研室辽宁沈阳110122 西南医科大学心血管医学研究所医学电生理学教育部重点实验室四川泸州646000

目的构建Calpastatin N末端结构域Calpastatin domain L(CS L)(a.a.150-230)融合蛋白质粒,表达、提取、纯化CS L蛋白并进行生物学活性鉴定。方法将CS L的cDNA片段插入pGEX-6p-3质粒载体后,转化大肠杆菌BL21感受态细胞,大量培养后用异丙... 详细信息

目的构建Calpastatin N末端结构域Calpastatin domain L(CS L)(a.a.150-230)融合蛋白质粒,表达、提取、纯化CS L蛋白并进行生物学活性鉴定。方法将CS L的cDNA片段插入pGEX-6p-3质粒载体后,转化大肠杆菌BL21感受态细胞,大量培养后用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(isopropy-β-D-thiogalactoside, IPTG)诱导蛋白表达,超声破碎法提取CS L蛋白。利用Glutathione-Sepharose 4B (GS-4B)beads和PreScission蛋白酶分离纯化蛋白,pull down assay检测其生物学活性。结果 CS L质粒经测序比对后表明构建成功;超声破碎法提取的CS L蛋白纯度和浓度均较高,并具有能够与GST-CT1融合蛋白浓度依赖性结合的生物学活性。结论成功构建CS L融合蛋白质粒,提取纯化具有生物活性的CS L蛋白,为探讨Cav1.2钙通道自身调节机制奠定基础。

关键词：钙蛋白酶抑素 pulldownassay 质粒构建

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蛋白激酶C对高血压状态下血管平滑肌收缩的调节作用及机制的研究进展

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四川生理科学杂志 2018年第4期40卷 301-306页

作者：周远群杨艳西南医科大学心血管医学研究所医学电生理学教育部和四川省重点实验室四川省心血管疾病防治协同创新中心四川泸州646000

血管平滑肌的舒张与收缩是调节血管外周阻力和血压的重要因素,其功能紊乱可能导致高血压。血管调控剂通过细胞内信号转导通路影响肌球蛋白轻链磷酸化水平,从而调节血管平滑肌的收缩。此过程中蛋白激酶C(Protein kinase C,PKC)是重要调... 详细信息

血管平滑肌的舒张与收缩是调节血管外周阻力和血压的重要因素,其功能紊乱可能导致高血压。血管调控剂通过细胞内信号转导通路影响肌球蛋白轻链磷酸化水平,从而调节血管平滑肌的收缩。此过程中蛋白激酶C(Protein kinase C,PKC)是重要调节因子。研究发现,血管平滑肌中PKC的表达或活性增加可以引起血管过度收缩以及营养性血管变化,导致血管阻力增加和高血压,且PKC突变可能影响个体对血管反应性的敏感性。本文就PKC对高血压状态下血管平滑肌收缩的调节作用及机制进行阐述。

关键词：蛋白激酶C 高血压血管平滑肌收缩肌球蛋白轻链

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