检索结果-内蒙古大学图书馆

西南医科大学学报 2017年第1期40卷 39-42页

作者：刘雪茹刘力程俊黄文俊谭晓秋西南医科大学附属医院麻醉科四川泸州646000 西南医科大学医学电生理学教育部重点实验室心血管医学研究所四川泸州646000

目的:研究异丙酚对表达在HEK293细胞上的BK_(Ca)通道的作用,探讨异丙酚降低血压的作用机制。方法:将含有人血管平滑肌BK_(Ca)通道α亚单位(h Slo1)的表达质粒pc DNA3.1-h Slo1使用脂质体转染法(lipofectamine 2000)转染至培养的HEK293细... 详细信息

目的:研究异丙酚对表达在HEK293细胞上的BK_(Ca)通道的作用,探讨异丙酚降低血压的作用机制。方法:将含有人血管平滑肌BK_(Ca)通道α亚单位(h Slo1)的表达质粒pc DNA3.1-h Slo1使用脂质体转染法(lipofectamine 2000)转染至培养的HEK293细胞,使用膜片钳全细胞和单通道记录方式研究异丙酚对BK_(Ca)通道的作用。结果:在全细胞构型下,56μM异丙酚能够明显增加BK_(Ca)宏观电流(P<0.01或P<0.05),在膜电位(Vm)为+60 mV时,56μM异丙酚明显增加BK_(Ca)宏观电流密度(87.29±7.10 pA/pF到131.21±9.68 pA/p F,n=6),两组相比,差异具有统计学意义(P<0.01)。在内面向外式膜片下,56μM异丙酚能够明显增加BK_(Ca)单通道开放概率(0.015±0.002到0.066±0.013,n=10),两组相比,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:异丙酚能够明显激活表达在HEK293细胞上的BK_(Ca)通道,BK_(Ca)通道的激活可能参与了异丙酚介导的血管舒张。

关键词：异丙酚大电导钙激活钾通道血管张力基因转染

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人心房肌AT1R和AT2R表达质粒的构建和鉴定

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西南医科大学学报 2017年第1期40卷 31-34页

作者：余奕言李涛谭晓秋李妙龄西南医科大学心血管医学研究所、医学电生理学省部教育部重点实验室、四川省心血管疾病防治协同创新中心四川泸州646000

目的:血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)作为肾素-血管紧张素系统(RAS)中重要的致心律失常的肽类物质,主要通过与细胞膜上AT1、AT2两种受体亚型结合而发挥其生物学作用。本研究构建带有荧光蛋白标记的AT1R和AT2R质粒,旨在为进一步观察其生物学效应奠... 详细信息

目的:血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)作为肾素-血管紧张素系统(RAS)中重要的致心律失常的肽类物质,主要通过与细胞膜上AT1、AT2两种受体亚型结合而发挥其生物学作用。本研究构建带有荧光蛋白标记的AT1R和AT2R质粒,旨在为进一步观察其生物学效应奠定基础。方法:通过PCR扩增出含有Bam HⅠ和Hind Ⅲ酶切位点的目的基因(AT1R、AT2R)片段,然后分别与有着相同酶切位点的载体pDs Red-N1、pEGFP-N3连接。将重组子转入TOP10感受态细胞中,通过抗生素筛选、酶切鉴定等方法挑选出阳性克隆,并经测序鉴定。结果:经过定向克隆的方法,最后得到的表达质粒酶切结果正确,测序结果与基因库数据基本一致。结论:成功构建带有红色荧光表达人心房肌AT1R、AT2R的质粒pDs Red-N1-AT1R、pDs Red-N1-AT2R和带有绿色荧光表达人心房肌AT1R、AT2R的质粒pEGFP-N3-AT1R、pEGFP-N3-AT2R。

关键词：血管紧张素II受体质粒构建肾素-血管紧张素系统

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窦性心律与心房颤动患者心房成纤维细胞大电导钙激活钾通道表达差异研究

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中国胸心血管外科临床杂志 2017年第12期24卷 937-942页

作者：毕红亲李妙玲周伟李光董亚辉黄涛于风旭西南医科大学附属医院心胸外科四川泸州646000 西南医科大学心血管医学研究所医学电生理学省部教育部重点实验室四川省心血管疾病防治协同创新中心四川泸州646000

目的通过分析窦性心律与心房颤动患者心房肌成纤维细胞BKCa通道表达差异,探索心肌纤维化产生的机制,为治疗和逆转心房颤动结构重构提供新的治疗策略。方法选择西南医科大学附属医院心胸外科2015年6月至2016年12月收治确诊为风湿性心脏... 详细信息

目的通过分析窦性心律与心房颤动患者心房肌成纤维细胞BKCa通道表达差异,探索心肌纤维化产生的机制,为治疗和逆转心房颤动结构重构提供新的治疗策略。方法选择西南医科大学附属医院心胸外科2015年6月至2016年12月收治确诊为风湿性心脏病且行体外循环瓣膜置换术的10例患者,其中窦性心律患者(窦性心律组)5例,男2例、女3例,年龄(49.1±8.3)岁;心房颤动患者(心房颤动组)5例,男3例、女2例,年龄(50.3±5.8)岁。于术中获取右心耳组织约100 mg,采用组织块贴壁法培养心房成纤维细胞,实时荧光定量聚合酶链式反应(q RT-PCR)检测培养的成纤维细胞中BKCa通道m RNA表达水平及western blotting检测BKCa通道蛋白的表达情况。结果 (1)比较心房颤动组及窦性心率组患者的一般情况,两组患者年龄(t=1.21,P=0.67)、性别(t=2.56,P=0.75)差异无统计学意义。两组患者左房内径、右房内径差异有统计学意义(t=19.45,P=0.01;t=23.52,P=0.06)。(2)两组BKCaα和BKCaβ1的m RNA表达差异无统计学意义(t=3.14,P=0.79;t=2.88,P=0.69);(3)两组BKCaα和BKCaβ1的蛋白表达差异均无统计学意义(t=0.55,P=0.31;t=0.73,P=0.46)。结论 BKCa通道可能不参与心房颤动的发生及维持,其在心肌纤维化进程中可能发挥着作用。

关键词：心房颤动窦性心律成纤维细胞 BKCa

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银杏内酯B后处理改善缺血/再灌注损伤的老年大鼠心功能

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中国新药杂志 2016年第23期25卷 2707-2713页

作者：郝艳玲杨艳吴金霞彭康张春平孙红曾晓荣徐州医科大学机能学实验中心医学电生理学教育部重点实验室西南医科大学心血管医学研究所徐州医科大学生理教研室徐州医科大学临床学院徐州医科大学药学院

目的:探讨银杏内酯B（ginkgolide B,GB）后处理对缺血/再灌注（ischemia/reperfusion,I/R）损伤的老年大鼠心功能的影响。方法:将老年SD大鼠随机分为正常对照组、单纯缺血/再灌注组和GB后处理组。制备离体心脏I/R损伤模型,记录心脏血流... 详细信息

目的:探讨银杏内酯B（ginkgolide B,GB）后处理对缺血/再灌注（ischemia/reperfusion,I/R）损伤的老年大鼠心功能的影响。方法:将老年SD大鼠随机分为正常对照组、单纯缺血/再灌注组和GB后处理组。制备离体心脏I/R损伤模型,记录心脏血流动力学各指标,测定心肌梗死面积、冠脉流出液乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）含量。分离心脏得单个心肌细胞,行细胞I/R损伤模型,分别用不同浓度GB在再灌注时进行后处理,并检测单个心肌细胞的收缩幅度,收集细胞,检查其Bcl-2和Bax蛋白表达。在GB最佳浓度组中分别加和不加PI3K/Akt信号通路抑制剂LY294002,检测细胞的收缩幅度和p-Akt蛋白表达含量。结果:GB后处理能明显降低左心室舒张末压（LVEDP）,增强+dp/dtmax,并抑制-dp/dtmax的抬升,降低LDH含量。GB 1μmol·L;能明显增强心肌细胞的收缩幅度（P<0.01）,并能降低Bax与Bcl-2的比值,降低凋亡。而GB增强细胞收缩幅度的作用能够被LY294002抑制,并且GB能增加p-Akt蛋白的表达。结论:GB后处理可通过PI3K/Akt信号通路改善缺血/再灌注损伤的老年大鼠的心功能。

关键词：银杏内酯B 缺血/再灌注老年大鼠心肌细胞 PI3K/Akt信号通路

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外泌体介导的靶向基因运送及在心血管疾病中的应用

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中国生物化学与分子生物学报 2016年第12期32卷 1286-1294页

作者：李雪党喜同曾晓荣西南医科大学心血管医学研究所医学电生理学教育部重点实验室四川省心血管疾病防治协同创新中心四川泸州646000

外泌体是体内几乎所有细胞分泌的具有双层脂质膜结构的纳米级小囊泡。外泌体大小均匀,平均直径为40-120 nm,存在于所有体液中。外泌体曾一度被认为是细胞成熟过程中清除废弃细胞器的‘垃圾袋’。但近年研究显示：外泌体含有丰富的来源... 详细信息

外泌体是体内几乎所有细胞分泌的具有双层脂质膜结构的纳米级小囊泡。外泌体大小均匀,平均直径为40-120 nm,存在于所有体液中。外泌体曾一度被认为是细胞成熟过程中清除废弃细胞器的‘垃圾袋’。但近年研究显示：外泌体含有丰富的来源于‘供体细胞’的信号分子,如蛋白质、DNA、mRNA、miRNA以及lncRNA等。当外泌体与‘受体细胞’融合时,这些信号分子便被运送到‘受体细胞’,从而实现细胞-细胞之间的通讯,影响‘受体细胞’的生理病理过程。虽然外泌体的研究目前主要集中在癌症等疾病的预防、诊断与治疗中,但是越来越多的研究显示,外泌体在心血管系统的生理及病理过程中同样发挥着重要作用。本文将对外泌体的起源、分离与纯化方法及外泌体介导的‘细胞-细胞’之间的通讯机制进行综述,并重点论述利用基因工程技术对外泌体进行靶向运输的方法及靶向外泌体运送在心血管疾病治疗中的应用。

关键词：外泌体 miRNA 靶向基因运送心血管疾病基因治疗

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一种有效急性酶分离大鼠心肌细胞及复钙的方法

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泸州医学院学报 2016年第1期39卷 31-33页

作者：程俊曾晓荣谭晓秋李鹏云文静毛亮杨艳医学电生理学教育部重点实验室四川医科大学心血管医学研究所四川泸州646000

目的:本研究旨在探讨一种既简便又高效的急性酶分离大鼠心肌细胞及有效复钙的方法,拟建立一种稳定高效分离大鼠心肌细胞且复钙后细胞成活率高的方法,为进一步研究单个心肌细胞的各种生理机制等诸多实验提供有利的前提保障。方法:应用II... 详细信息

目的:本研究旨在探讨一种既简便又高效的急性酶分离大鼠心肌细胞及有效复钙的方法,拟建立一种稳定高效分离大鼠心肌细胞且复钙后细胞成活率高的方法,为进一步研究单个心肌细胞的各种生理机制等诸多实验提供有利的前提保障。方法:应用II型胶原酶于Langendorff灌流装置下进行恒压或恒流灌流,得到横纹清晰、立体感较强的大鼠心肌细胞,然后应用三步法对心肌细胞进行复钙。结果:应用Langendorff灌流系统对大鼠心脏进行恒压或恒流灌流II型胶原酶,成功得到横纹清晰、立体感较强的大鼠心肌细胞,且复钙后在台式液中存活率仍然高达50%。结论:成功建立了一种既简便高效又稳定的急性分离大鼠心肌细胞且复钙后心肌细胞成活率较高的方法,为今后研究大鼠心肌细胞舒缩功能及其基本生理特性提供良好的单个细胞。

关键词：大鼠心肌细胞 Langendorff

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脂质体与细胞相互作用的研究进展

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泸州医学院学报 2016年第1期39卷 93-95页

作者：郁蕾杨艳医学电生理学教育部重点实验室四川医科大学心血管医学研究所四川泸州646000

1前言20世纪70年代初期,Gregoriadis和Rymen等开始用脂质体作为药物载体开展研究,揭开了药物载体研究的序幕。伴随着生物技术长足地发展,其制备工艺逐步完善,作用机制进一步阐明,在药物递送方面的研究成果不断得到重视。脂质体作为药物... 详细信息

1前言 20世纪70年代初期,Gregoriadis和Rymen等开始用脂质体作为药物载体开展研究,揭开了药物载体研究的序幕。伴随着生物技术长足地发展,其制备工艺逐步完善,作用机制进一步阐明,在药物递送方面的研究成果不断得到重视。脂质体作为药物载体具有保护药物活性基团、降低药物毒性、提高疗效、避免耐药性等优点。

关键词：细胞相互作用药物载体药物毒性药物靶向作用机制器官水平两亲性药物靶区研究成果主动靶向制剂

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Flag和GFP双标记的SK2通道表达质粒的构建、鉴定和序列分析

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泸州医学院学报 2016年第6期39卷 527-530页

作者：黄文俊李涛范学慧余奕言杨艳曾晓荣谭晓秋西南医科大学心血管医学研究所医学电生理学教育部重点实验室四川省心血管疾病防治协同创新中心四川泸州646000

目的:采用Overlapping PCR(重叠PCR)法进行人源SK2通道Flag和GFP融合表达质粒的构建,为下一步胞外运用Flag抗体进行SK2通道的转运调控研究奠定基础。方法:在既往克隆的人SK2通道基因的表达质粒p IRES-SK2的基础上,采用重叠PCR法构建Flag... 详细信息

目的:采用Overlapping PCR(重叠PCR)法进行人源SK2通道Flag和GFP融合表达质粒的构建,为下一步胞外运用Flag抗体进行SK2通道的转运调控研究奠定基础。方法:在既往克隆的人SK2通道基因的表达质粒p IRES-SK2的基础上,采用重叠PCR法构建Flag和GFP双标签标记的表达质粒pEGFP-N3-Flag-SK2(简写为Flag-SK2-GFP)。结果:构建的表达质粒Flag标签插入SK2通道的S1-S2胞外环区域,GFP标签连接SK2通道胞内的C末端,通过酶切、测序等证实质粒构建成功。结论:成功构建人心房肌SK2通道基因表达质粒Flag-SK2-GFP,为下一步研究SK2通道转运过程及调控机制奠定了基础。

关键词：小电导钙激活钾通道重叠PCR 基因工程

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β-雌二醇对女性高血压患者肠系膜动脉BKCa活性研究

β-雌二醇对女性高血压患者肠系膜动脉BKCa活性研究

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中国生理学会张锡钧基金会第十三届全国青年优秀生理学学术论文交流及评奖会议、中国生理学会第十一届全国青年生理学工作者学术会议

作者：程俊曾晓荣谭晓秋文静李鹏云周文杨艳四川省四川医科大学心血管医学研究所四川医科大学心肌电生理学教育部重点实验室

目的:本文旨在研究β-雌二醇（β-estradiol,β-E）对动脉平滑肌大电导钙激活钾通道(1arge-conductance Ca-activated potassium channels,BKca)的作用,并比较绝经前女性非高血压（pre-menopause women non-hypertension,PNH）组、绝经后女性非高血压（post-menopause women non-hypertension,NH）组及绝经后女性原发性高血压（post-menopause women essential hypertension,EH）组肠系膜动脉平滑肌细胞上BK及STOCs对β-E敏感性变化,从而探讨β-E、

关键词：肠系膜动脉平滑肌细胞高血压患者活性研究 β-雌二醇

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β-雌二醇对女性高血压患者肠系膜动脉BKCa活性研究

β-雌二醇对女性高血压患者肠系膜动脉BKCa活性研究

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中国生理学会张锡钧基金第十三届全国青年优秀生理学学术论文交流会暨中国生理学会第十一届全国青年生理学工作者学术会议

作者：程俊曾晓荣谭晓秋文静李鹏云周文杨艳四川省四川医科大学心血管医学研究所四川医科大学心肌电生理学教育部重点实验室四川泸州646000

目的:本文旨在研究β一雌二醇(β-estradiol,β-E2)对动脉平滑肌大电导钙激活钾通道(large-conductance Ca2+-activated potassium channels,BKCa)的作用,并比较绝经前女性非高血压(pre-menopause women non-hypertension,PNH)组、绝经后女性非高血压(post-menopause women non-hypertension,NH)组及绝经后女性原发性高血压(post-menopause women essential hypertension,EH)组肠系膜动脉平滑肌细胞上BKCa及STOCs对β-E2敏感性变化,从而探讨β-E2、BKCa与女性原发性高血压之间的关系.

关键词：

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