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国际口腔医学杂志 2023年第6期50卷 669-673页

作者：孙旭邓振南文才赵颖首都医科大学宣武医院口腔科北京100053 温州医科大学附属口腔医院修复科温州325000 西南医科大学口颌面修复重建和再生实验室、西南医科大学附属口腔医院种植科泸州646000

目的探讨Er:YAG激光不同模式、不同参数照射对种植体SA、SLA、Xpeed及RBM表面微形貌的影响。方法选择波长为2940 nm的Er:YAG激光并设置为软组织模式及参数50 mJ、10 Hz,100 mJ、10 Hz,200 mJ、10 Hz;设置硬组织模式及参数100 mJ、10 Hz,... 详细信息

目的探讨Er:YAG激光不同模式、不同参数照射对种植体SA、SLA、Xpeed及RBM表面微形貌的影响。方法选择波长为2940 nm的Er:YAG激光并设置为软组织模式及参数50 mJ、10 Hz,100 mJ、10 Hz,200 mJ、10 Hz;设置硬组织模式及参数100 mJ、10 Hz,200 mJ、10 Hz。均在水冷却环境下,采取非接触模式,工作尖距离种植体表面1 mm,对SA、SLA、Xpeed及RBM 4种种植体表面固定一点照射5 s。用扫描电子显微镜(SEM)观察照射前后表面微形貌的变化。结果SEM观察可见,SA表面在软组织模式50 mJ、10 Hz及100 mJ、10 Hz照射下无变化,能量提高到200 mJ、10 Hz可见表面微形貌部分熔化;SLA表面在软组织模式50 mJ、10 Hz照射下无变化,能量提高到100 mJ、10Hz及200 mJ、10 Hz可见表面部分熔化及完全熔化;SA及SLA表面在硬组织模式100 mJ、10 Hz或200 mJ、10 Hz照射下,表面无变化。Xpeed和RBM表面在软组织模式50 mJ、10 Hz照射下分别表现为高峰塌陷和片状熔化;在能量提高到100 mJ、10 Hz及200 mJ、10 Hz均可见部分熔化及完全熔化;Xpeed及RBM表面在硬组织模式100 mJ、10 Hz照射下无变化,能量提高到200 mJ、10 Hz可见部分熔化;Xpeed表面未见涂层剥脱。结论本研究显示,在用Er:YAG激光处理种植体表面时,为避免对种植体表面造成损伤,SA和SLA表面用软组织模式时能量参数需设置在50 mJ、10 Hz以下,硬组织模式时参数设置200 mJ、10 Hz以下。Xpeed及RBM表面不适合用软组织模式处理,可在硬组织模式100 mJ、10 Hz以下处理。

关键词： Er:YAG激光种植体微形貌表面处理

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纳米金颗粒@介孔二氧化硅修饰钛种植体促进高糖条件下的成骨分化

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中国组织工程研究 2025年第22期29卷 4694-4701页

作者：邓云艺陈世超罗明东李若彤兰小蓉余科李广文西南医科大学附属口腔医院种植科四川省泸州市646000 口颌面修复重建和再生泸州市重点实验室四川省泸州市646000 西南医科大学口腔医学研究所四川省泸州市646000

背景:微纳米结构改性是钛种植体表面处理的热点研究领域。糖尿病高血糖环境会影响钛种植体与骨组织形成稳定的结合,探索通过表面微纳结构改性来提高钛种植体在高糖环境下的成骨活性是有必要的。目的:观察钛表面纳米金颗粒@介孔二氧化硅... 详细信息

背景:微纳米结构改性是钛种植体表面处理的热点研究领域。糖尿病高血糖环境会影响钛种植体与骨组织形成稳定的结合,探索通过表面微纳结构改性来提高钛种植体在高糖环境下的成骨活性是有必要的。目的:观察钛表面纳米金颗粒@介孔二氧化硅涂层对体外高糖条件下成骨分化的影响。方法:分别制备纳米金颗粒悬浮液与介孔二氧化硅,将二者按一定比例混合在去离子水中,制备纳米金颗粒@介孔二氧化硅悬浮液。取钛片,分3组处理:光滑组经过水砂纸打磨处理,纳米管组经过水砂纸打磨处理后采用阳极氧化技术制备二氧化钛纳米管涂层,实验组制备二氧化钛纳米管涂层后浸泡于纳米金颗粒@介孔二氧化硅悬浮液中,制备纳米金颗粒@介孔二氧化硅涂层,表征3组钛片表面的微观形貌、亲水性。将大鼠骨髓间充质干细胞接种于3组钛片表面,通过细胞活/死荧光染色及CCK-8实验检测细胞增殖,DAPI/鬼笔环肽染色检测细胞黏附。将大鼠骨髓间充质干细胞接种于3组钛片表面,加入高糖成骨诱导培养基培养,通过碱性磷酸酶与茜素红S染色检测成骨分化。结果与结论:(1)扫描电镜下可见光滑组钛片表面均匀平坦,纳米管组钛片表面排列紧密的二氧化钛纳米管阵列,实验组钛片在二氧化钛纳米管表面及内部均负载纳米金颗粒@介孔二氧化硅;纳米管组、实验组钛片亲水性均优于光滑组。(2)细胞活/死荧光染色结果显示,3组钛片表面的细胞活力均高于90%;CCK-8实验结果显示,实验组细胞增殖率高于光滑组、纳米管组;DAPI/鬼笔环肽染色结果显示,二氧化钛纳米管涂层、纳米金颗粒@介孔二氧化硅涂层更有利于细胞黏附。(3)碱性磷酸酶与茜素红S染色结果显示,实验组钛片表面细胞碱性磷酸酶活性与细胞外基质矿化程度均高于光滑组、纳米管组。(4)结果表明,纳米金颗粒@介孔二氧化硅涂层可增强钛表面生物活性,促进高糖环境下的成骨分化。

关键词：纳米金颗粒介孔二氧化硅钛表面改性微纳结构高糖条件成骨分化

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上调Decorin对口腔鳞癌荷瘤裸鼠EGFR、C-Myc、p21表达的影响

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上海口腔医学 2023年第1期32卷 40-46页

作者：郭梦瑶李凯玉聂敏海刘旭倩西南医科大学附属口腔医院牙周黏膜病科四川泸州646000 西南医科大学口颌面修复重建和再生泸州市重点实验室西南医科大学口腔医学研究所四川泸州646000

目的:探讨饰胶蛋白聚糖基因(decorin,DCN)过表达对口腔鳞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)裸鼠荷瘤中表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)、骨髓细胞瘤病毒癌基因(cellular-myelocytomatosis viral oncogene,C-Myc)和细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂(cyclin dependent kinase inhibitor,p21)表达水平的影响。方法:通过脂质体转染法上调人口腔鳞癌细胞(HSC-3)中DCN基因的表达,使用裸鼠作为OSCC疾病模型构建载体,建立OSCC裸鼠荷瘤模型。H-E法确定各组裸鼠荷瘤组织的病理分级,免疫组织化学染色检测DCN过表达后各组裸鼠荷瘤组织中EGFR、C-Myc和p21蛋白的表达差异,RT-qPCR及Western印迹定量检测DCN过表达后各组裸鼠荷瘤组织中EGFR、C-Myc和p21在转录水平和蛋白水平上的表达差异,明确DCN过表达对OSCC裸鼠荷瘤组织中EGFR、C-Myc和p21表达的影响。采用SPSS 20.0软件包对数据进行统计学分析。结果:H-E染色结果显示,OSCC动物疾病模型构建成功。重量分析结果显示,质粒组裸鼠荷瘤组织轻于空载组和未转染组(P<0.05)。IHC结果显示,DCN、EGFR、C-Myc和p21蛋白在各组裸鼠荷瘤组织中均有表达,质粒组中DCN、EGFR和C-Myc蛋白的表达水平差异有统计学意义(P<0.05),各组中p21蛋白的表达水平无统计学差异(P>0.05)。RT-qPCR和Western印迹结果显示,DCN、EGFR、C-Myc和p21在各组裸鼠荷瘤组织中均有不同程度表达(P<0.05)。结论:上调DCN可抑制OSCC裸鼠荷瘤的生长。在OSCC裸鼠荷瘤组织中,DCN过表达下调EGFR及C-Myc的表达,上调p21的表达。DCN可能通过以上机制调节OSCC的发生、发展,发挥抑癌作用。

关键词：饰胶蛋白聚糖口腔鳞癌表皮生长因子受体骨髓细胞瘤病毒癌基因细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂

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意向性牙再植术后根尖及根周骨小梁分形维度化的初步研究

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北京口腔医学 2024年第2期32卷 115-119页

作者：付广丽贺晓萍舒丹黎春晖文才谭丹西南医科大学附属口腔医院口颌面修复重建和再生实验室泸州646000

目的利用分形维度分析评价意向性牙再植治疗畸形舌面沟伴牙周牙髓联合病变根尖及根周区骨小梁微观结构的变化,评价骨愈合情况。方法纳入西南医科大学附属口腔医院就诊的畸形舌面沟伴牙周牙髓联合病变(影像学检查伴有根尖及根周明显暗影... 详细信息

目的利用分形维度分析评价意向性牙再植治疗畸形舌面沟伴牙周牙髓联合病变根尖及根周区骨小梁微观结构的变化,评价骨愈合情况。方法纳入西南医科大学附属口腔医院就诊的畸形舌面沟伴牙周牙髓联合病变(影像学检查伴有根尖及根周明显暗影)并且在我院完成显微根管治疗及意向性牙再植的患者,分别记录牙再植术后即刻(T0)和术后1年(T1)的根尖片进行分形分析研究,在根尖片上裁剪患牙根尖暗影区及根周暗影区这两个区域的影像作为目标区域(ROI),通过ImageJ软件获得骨小梁的二维数据,通过计盒法获得ROI内的分形指数(FD)。使用SPSS17.0统计分析在T0和T1时间点上,患牙根尖区的分形维度指数(FDa)及根周区分形维度指数(FDp)是否有统计学差异。结果共有10名患者纳入了本研究,其中男6例,女4例,年龄组:<30岁6例,≥30岁4例。所有患者,患牙FDa及FDp随着时间推移均有升高,同时差异具有统计学意义(P<0.05)。年龄分组中,与≥30岁组相比,<30岁组,FDa升高明显,差异具有统计学意义(P<0.05),提示可能年轻患者根尖区骨修复速度较年长者快,而FDp的升高不受患者年龄因素的影响,且差异不具有统计学意义(P>0.05)。在根尖区及根周骨愈合过程中,患牙根尖区及根周区域的FD值升高不受患者性别因素影响。结论意向性牙再植术可能是畸形根面沟致牙周牙髓联合病变的一种可行治疗方法。分形分析可以作为一种无创的、经济的,可定量评价其骨愈合的分析工具。

关键词：分形维度分析畸形舌面沟牙周牙髓联合病变意向性牙再植

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聚醚醚酮定位标志物联合混合现实技术在股前外侧穿支皮瓣血管定位中的应用研究

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中国修复重建外科杂志 2024年第12期38卷 1499-1504页

作者：徐庆吴双江吴剑周莲李真华何云刚刘一秀成都大学附属医院口腔科成都610081 西南医科大学附属口腔医院口腔颌面外科口腔颌面修复重建和再生泸州市重点实验室四川泸州646000 重庆大学附属肿瘤医院头颈肿瘤科肿瘤转移与个体化诊治转化研究重庆市重点实验室重庆400030

目的探讨聚醚醚酮(poly ether ether ketone,PEEK)定位标志物联合混合现实技术应用于股前外侧穿支皮瓣血管定位中的效果。方法回顾分析2022年1月—2023年6月,采用股前外穿支皮瓣修复40例口腔癌切除后组织缺损患者临床资料。根据术中股... 详细信息

目的探讨聚醚醚酮(poly ether ether ketone,PEEK)定位标志物联合混合现实技术应用于股前外侧穿支皮瓣血管定位中的效果。方法回顾分析2022年1月—2023年6月,采用股前外穿支皮瓣修复40例口腔癌切除后组织缺损患者临床资料。根据术中股前外侧穿支皮瓣定位方式不同,随机分为PEEK组[采用PEEK定位标志物联合CT血管造影(CT angiography,CTA)数据的混合现实技术定位]和彩超组(采用彩色超声多普勒引导定位),每组20例。两组患者性别、年龄、病因、病程等基线资料比较差异均无统计学意义(P>0.05)。记录两组感兴趣区域识别到的穿支血管数量,并与术中实际探查到的数量进行比较,计算穿支血管识别成功率;测量两组定位的穿支血管穿出点与实际穿出点之间的距离;记录制取皮瓣的手术时间。结果PEEK组共识别32个穿支血管,术中探查发现34个,识别成功率为94.1%(32/34);彩超组识别穿支血管29个,术中探查发现33个,识别成功率为87.8%(29/33);两组穿支血管识别成功率比较差异有统计学意义(P<0.05)。PEEK组定位的穿支血管穿出点与实际穿出点距离以及手术时间均短于彩超组(P<0.05)。两组患者均获随访,随访时间6~30个月,中位时间17个月;两组随访时间比较差异无统计学意义(P>0.05)。PEEK组1例皮瓣远端边缘坏死,经修剪换药后延迟愈合;彩超组1例皮瓣术后7 d坏死,清除坏死皮瓣后选择胸大肌皮瓣修复;其余患者皮瓣均成活,切口Ⅰ期愈合。PEEK组发生供区感染1例,经抗炎处理后愈合。两组修复颌面部外形好,皮瓣无明显臃肿,患者对修复效果较满意。结论相较于传统彩色超声多普勒定位,PEEK定位标志物结合CTA数据的混合现实技术定位股前外侧穿支皮瓣血管的识别成功率和定位精度更高,制取皮瓣时间短,具有较高临床应用价值。

关键词：聚醚醚酮混合现实技术彩色超声多普勒引导股前外侧穿支皮瓣穿支血管定位

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周期性张应力作用下Hippo-YAP信号通路调控人牙周膜细胞自噬

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华西口腔医学杂志 2023年第3期41卷 260-268页

作者：晚晓芳何海燕吕佳岭伍宇婕钟冠男徐晓梅西南医科大学附属口腔医院正畸科泸州646000 西南医科大学口颌面修复重建和再生实验室泸州646000 成都市温江区人民医院口腔科成都611130 富顺县人民医院口腔科自贡643299

目的探究周期性张应力(CTS)作用下人牙周膜细胞(hPDLCs)自噬激活的分子机制。方法分离培养正常牙周组织的hPDLCs,利用Forcel四点弯曲细胞加力仪对hPDLCs加载张应力模拟正畸牙移动过程中正畸力诱导的张力侧hPDLCs自噬,利用XMU-MP-1抑制Hi... 详细信息

目的探究周期性张应力(CTS)作用下人牙周膜细胞(hPDLCs)自噬激活的分子机制。方法分离培养正常牙周组织的hPDLCs,利用Forcel四点弯曲细胞加力仪对hPDLCs加载张应力模拟正畸牙移动过程中正畸力诱导的张力侧hPDLCs自噬,利用XMU-MP-1抑制Hippo信号通路探究Hippo-YAP信号通路在张应力激活hPDLCs自噬中的作用。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测hPDLCs自噬相关基因(Beclin-1、LC3、p62)的表达;采用蛋白免疫印迹(Western blot)检测hPDLCs自噬相关蛋白(Beclin-1、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、p62)及Hippo-YAP通路相关蛋白(active-YAP、p-YAP)的表达;采用免疫荧光染色定位hPDLCs自噬相关蛋白(LC3-Ⅱ、p62)及Hippo-YAP通路相关蛋白(active-YAP)。结果CTS激活hPDLCs的自噬,自噬相关因子表达随加力时间的延长呈先升高后降低的趋势,30 min自噬开始,3 h达到高峰,随后出现下调(P<0.05);CTS促进active-YAP蛋白表达增加,p-YAP蛋白表达降低(P<0.05)。XMU-MP-1抑制Hippo-YAP信号通路后(P<0.05),促进active-YAP蛋白进入细胞核,自噬表达增强(P<0.05)。结论Hippo-YAP信号通路参与CTS作用下hPDLCs自噬激活的调控。

关键词：自噬 Hippo-YAP信号通路张应力人牙周膜细胞

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血小板衍生生长因子BB促进人牙周膜干细胞的增殖和成骨分化

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中国组织工程研究 2023年第10期27卷 1534-1540页

作者：陈佳娜聂敏海胡馨月刘旭倩西南医科大学附属口腔医院牙周黏膜病科四川省泸州市646000 西南医科大学口颌面修复重建和再生泸州市重点实验室四川省泸州市646000

背景:人牙周膜干细胞具有多向分化的潜能,在一定条件下能够发生成骨向分化,诱导骨组织再生,因此,人牙周膜干细胞作为骨组织工程种子细胞之一,在牙槽骨缺损骨再生修复中具有良好的研究前景和临床应用价值。目的:探讨血小板衍生生长因子B... 详细信息

背景:人牙周膜干细胞具有多向分化的潜能,在一定条件下能够发生成骨向分化,诱导骨组织再生,因此,人牙周膜干细胞作为骨组织工程种子细胞之一,在牙槽骨缺损骨再生修复中具有良好的研究前景和临床应用价值。目的:探讨血小板衍生生长因子BB在促进人牙周膜干细胞增殖和成骨分化中的功能特征,旨在为牙槽骨缺损的骨再生修复提供相关的实验室依据。方法:人牙周膜干细胞取自就诊于西南医科大学附属口腔医院口腔颌面外科正畸拔牙患者的牙周膜组织,CCK-8法绘制第1-6代人牙周膜干细胞生长曲线,以及不同质量浓度血小板衍生生长因子BB作用下人牙周膜干细胞的增殖曲线。将第3代人牙周膜干细胞分为空白对照组、成骨诱导液组、成骨诱导液+血小板衍生生长因子BB组,分别诱导7,14,21 d,矿化实验观察人牙周膜干细胞钙化结节形成情况,RT-qPCR、Western blot检测Runx2、骨形态发生蛋白2的mRNA和蛋白的相对表达量。结果与结论:(1)CCK-8实验结果显示第2,3代人牙周膜干细胞的对数生长期比其余代次细胞增殖水平显著升高(P <0.05);(2)同一时间点上,100μg/L血小板衍生生长因子BB组的人牙周膜干细胞增殖能力明显优于0,50,200μg/L血小板衍生生长因子BB组(P <0.05);(3)100μg/L血小板衍生生长因子BB与成骨诱导液联合使用对人牙周膜干细胞具有明显的成骨诱导作用,在成骨诱导第14天时,与成骨诱导液组和空白对照组相比,成骨诱导液+血小板衍生生长因子BB组Runx2、骨形态发生蛋白2的mRNA和蛋白相对表达量明显升高(P <0.05);(4)结果表明,血小板衍生生长因子BB能够促进人牙周膜干细胞的增殖及成骨方向分化。

关键词：人牙周膜干细胞血小板衍生生长因子增殖成骨牙槽骨缺损

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基于混合现实与人工智能算法在股前外穿支血管定位中的前瞻性研究

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华西口腔医学杂志 2024年第6期42卷 795-803页

作者：刘一秀汤喜吴剑周莲吴双江瞿杨吴小月重庆大学附属肿瘤医院头颈肿瘤科肿瘤转移与个体化诊治转化研究重庆市重点实验室重庆400000 西南医科大学附属口腔医院口腔颌面外科口腔颌面修复重建和再生泸州市重点实验室泸州646000 西南医科大学附属医院口腔颌面外科泸州646000 瞿杨口腔诊所重庆400000

目的构建混合现实技术与人工智能算法的系统,评估其在股前外穿支皮瓣手术中定位血管的效果,为临床实践提供新的思路。方法选取20例行股前外穿支皮瓣修复的患者,在下肢黏贴定位装置后行CT血管造影(CTA)扫描,将所得二维数据制成定位装置... 详细信息

目的构建混合现实技术与人工智能算法的系统,评估其在股前外穿支皮瓣手术中定位血管的效果,为临床实践提供新的思路。方法选取20例行股前外穿支皮瓣修复的患者,在下肢黏贴定位装置后行CT血管造影(CTA)扫描,将所得二维数据制成定位装置与血管等的三维模型,并通过混合现实技术实现穿支血管三维可视化。在HoloLens 2中开发人工算法,术中使用人工智能算法自动匹配定位装置与其三维模型以实现穿支血管与其三维模型的重叠。记录制取皮瓣区域内定位的穿支血管数量及术中探查的实际数量,以此计算基于CTA数据重建的血管识别正确率;测量系统定位的穿支血管穿出点与实际血管穿出点之间的距离,计算误差值;记录系统辅助下制取股前外穿支皮瓣的手术时间,并与常规方法制取皮瓣的手术时间进行对比分析。探讨该系统的临床实用性。结果CTA数据重建的穿支血管30个,手术中探查发现实际存在32个,识别正确率为93.75%;系统定位的穿支血管穿出点与实际穿出点的平均距离为(1.65±0.52)mm,系统定位下制取皮瓣的平均手术时间为(43.45±4.6)min,常规方法制取皮瓣的手术时间为(57.6±7.9)min。所有穿支皮瓣均成活,1例皮瓣术后7 d出现感染,1例皮瓣局部坏死,经对症治疗后延迟愈合。结论本研究搭建的系统可以通过混合现实技术实现穿支血管三维可视化,利用人工智能算法提高穿支血管定位精度,在穿支皮瓣制取手术中具有应用潜力。

关键词：混合现实人工智能算法股前外穿支皮瓣穿支血管

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1,8-桉叶油素干预大鼠实验性牙周炎模型的炎症反应

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中国组织工程研究 2025年第17期29卷 3605-3613页

作者：何丽任潞江小茜刘旭倩黎春晖西南医科大学附属口腔医院牙周黏膜病科四川省泸州市646000 西南医科大学附属口腔医院口腔医学研究所口颌面修复重建和再生泸州市重点实验室四川省泸州市646000

背景:研究表明,天然植物精油提取物1,8-桉叶油素具有抗炎、抗氧化、抗菌、抗肿瘤等多种药理作用,在多种疾病中表现出抗炎作用。目的:探讨1,8-桉叶油素对大鼠实验性牙周炎模型炎症反应的影响。方法:按照完全随机数字表法将30只SD大鼠随... 详细信息

背景:研究表明,天然植物精油提取物1,8-桉叶油素具有抗炎、抗氧化、抗菌、抗肿瘤等多种药理作用,在多种疾病中表现出抗炎作用。目的:探讨1,8-桉叶油素对大鼠实验性牙周炎模型炎症反应的影响。方法:按照完全随机数字表法将30只SD大鼠随机分为正常对照组、牙周炎对照组和1,8-桉叶油素组,每组10只。牙周炎对照组和1,8-桉叶油素组利用正畸钢丝结扎法构建实验性牙周炎模型。造模8周后,正常对照组和牙周炎对照组大鼠颊、腭侧牙周袋内均注射生理盐水,1,8-桉叶油素组大鼠颊、腭侧牙周袋内注射1,8-桉叶油素溶液,2次/d,连续给药4周。给药结束后,进行牙周临床指标检测、牙周组织学评估、血清炎症因子水平检测及牙龈组织中炎症因子m RNA与蛋白表达检测。结果与结论:①与正常对照组比较,牙周炎对照组大鼠牙龈出血指数、牙周探诊深度增加(P<0.05),血清中白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α、白细胞介素6水平升高(P<0.05),血清中白细胞介素10水平降低(P<0.05),牙龈组织中白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α、白细胞介素6mRNA与蛋白表达均升高(P<0.05),牙龈组织中白细胞介素10 mRNA与蛋白表达均降低(P<0.05);苏木精-伊红染色结果显示,牙周炎对照组大鼠牙周组织炎症明显。②与牙周炎对照组比较,1,8-桉叶油素组大鼠牙龈出血指数、牙周探诊深度减少(P<0.05),血清中白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α、白细胞介素6水平降低(P<0.05),血清中白细胞介素10水平升高(P<0.05),牙龈组织中白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α、白细胞介素6 mRNA与蛋白表达均降低(P<0.05),牙龈组织中白细胞介素10 mRNA与蛋白表达均升高(P<0.05);苏木精-伊红染色结果显示,1,8-桉叶油素组大鼠牙周组织炎症明显减轻。结果表明,1,8-桉叶油素治疗可减轻大鼠实验性牙周炎模型的炎症反应。

关键词： 1 8-桉叶油素植物精油牙周炎动物模型牙周组织炎症反应白细胞介素1β 肿瘤坏死因子α 白细胞介素6 白细胞介素10 工程化组织构建

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淫羊藿苷预处理增强人牙周膜干细胞对M1型巨噬细胞的影响

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中国组织工程研究 2025年第7期29卷 1328-1335页

作者：喻婷吕冬梅邓浩孙涛程钎西南医科大学口颌面修复重建和再生泸州市重点实验室四川省泸州市646000 西南医科大学口腔医学研究所四川省泸州市646000 西南医科大学附属口腔医院正畸科四川省泸州市646000 西南医科大学口腔医学院四川省泸州市646000

背景:人牙周膜干细胞对M1型巨噬细胞促炎功能有一定抑制作用,具有抗炎等药理活性的淫羊藿苷是否能增强人牙周膜干细胞对M1型巨噬细胞的抑制作用尚不明确。目的:探究淫羊藿苷预处理人牙周膜干细胞后对M1型巨噬细胞的影响。方法:分离培养... 详细信息

背景:人牙周膜干细胞对M1型巨噬细胞促炎功能有一定抑制作用,具有抗炎等药理活性的淫羊藿苷是否能增强人牙周膜干细胞对M1型巨噬细胞的抑制作用尚不明确。目的:探究淫羊藿苷预处理人牙周膜干细胞后对M1型巨噬细胞的影响。方法:分离培养原代人牙周膜干细胞,并进行鉴定。对THP-1细胞进行诱导,采用免疫荧光染色及PCR进行M1型巨噬细胞鉴定。用含浓度10^(-7),10^(-6),10^(-5),10^(-4)mol/L淫羊藿苷的α-MEM完全培养基培养人牙周膜干细胞1,3,5,7 d,采用CCK-8法筛选合适的淫羊藿苷浓度进行实验。将α-MEM完全培养基、未处理的人牙周膜干细胞α-MEM条件培养基及淫羊藿苷预处理24 h的人牙周膜干细胞α-MEM条件培养基与RPMI-1640完全培养基以1∶1的比例对M1型巨噬细胞进行条件培养,分别为对照组、未处理组及预处理组,24 h后RT-PCR法检测M1型巨噬细胞炎症因子的mRNA表达情况;ELISA法检测M1型巨噬细胞炎症因子的蛋白表达情况;Western blot检测M1/M2型巨噬细胞表面标记物及核转录因子κB通路相关蛋白的表达。结果与结论:(1)CCK-8检测结果显示,10^(-7),10^(-6),10^(-5),10^(-4)mol/L淫羊藿苷对人牙周膜干细胞均无细胞毒性,且从第5天起,各浓度都提高了细胞活力,促进细胞增殖,选择10^(-4)mol/L淫羊藿苷进行后续实验。(2)RT-PCR法及ELISA检测结果显示,与对照组相比,未处理组及预处理组均降低了M1型巨噬细胞白细胞介素1β、白细胞介素6及肿瘤坏死因子α的表达与分泌(P<0.05),且预处理组低于未处理组(P<0.05)。(3)Western blot检测结果显示,与未处理组相比,预处理组CD86的表达明显降低(P<0.05);与对照组相比,未处理组和预处理组M2型巨噬细胞表面标志物CD206的表达均升高(P<0.01),且预处理组明显高于未处理组(P<0.01);M1型巨噬细胞经24 h条件培养后,与对照组相比,核转录因子κB/P65的表达在未处理组和预处理组均有降低(P<0.01),p-IκBα的表达仅在预处理组降低(P<0.01);与未处理组相比,预处理组核转录因子κB/P65和p-IκBα的表达均显著降低(P<0.05),而IκBα在3组中的表达差异无显著性意义。(4)上述结果证实,淫羊藿苷增强了人牙周膜干细胞对M1型巨噬细胞的抑制作用,此作用可能与抑制了巨噬细胞的核转录因子κB信号通路相关。

关键词：人牙周膜干细胞淫羊藿苷巨噬细胞条件培养基共培养表面标志物炎症因子抗炎核转录因子κB信号通路

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