检索结果-内蒙古大学图书馆

农业生物技术学报 2024年第4期32卷 775-784页

作者：彭万明谭弋张晓丽罗亮李新艺黄海泉黄美娟西南林业大学园林园艺学院/国家林业和草原局西南风景园林工程技术研究中心/云南省功能性花卉资源及产业化技术工程研究中心/园林园艺花卉研发中心

乌蒙宽叶杜鹃(Rhododendron sphaeroblastum var. wumengense)是高海拔耐寒植物，基于课题组前期从其转录组中筛选，发现MYBS3和稀有冷诱导2(rare cold inducible 2, RCI2)基因在增强植物耐冷胁迫中作用显著。本研究克隆出2个乌蒙宽叶... 详细信息

乌蒙宽叶杜鹃(Rhododendron sphaeroblastum var. wumengense)是高海拔耐寒植物，基于课题组前期从其转录组中筛选，发现MYBS3和稀有冷诱导2(rare cold inducible 2, RCI2)基因在增强植物耐冷胁迫中作用显著。本研究克隆出2个乌蒙宽叶杜鹃中调控耐寒的关键转录因子基因，分别命名为RsMYBS3(GenBank No. OR178946)和RsRCI2B(GenBank No. OR178945)，其cDNA全长分别为795和165 bp，分别编码氨基酸数量为264和54 aa。生物信息学分析表明，RsMYBS3为亲水性不稳定蛋白，具有SANT超家族典型的SANT保守结构域；RsRCI2B为疏水性稳定蛋白，具有RCI2基因家族典型的PMP3高度保守结构域。基因同源性比对结果显示，RsMYBS3和RsRCI2B蛋白均与红马银花(Rhododendron vialii)中的MYBS3和RCI2B蛋白同源性较高，分别为93.73%和94.44%；系统进化分析发现，RsMYBS3和RsRCI2B均与红马银花RvMYBS3和RvRCI2B聚为一支，推测四者为直系同源关系。qPCR分析表明，低温胁迫下，2个基因在乌蒙宽叶杜鹃中均有显著表达，但在不同胁迫温度和时间下表达模式不同，其中RsMYBS3基因在-6℃处理1 d时表达量最高，随着胁迫时间延长，4 d时表达逐渐下调，7 d表达又逐渐上升；在-12℃处理1～4 d时表达量逐渐上升并达到峰值，7 d时表达逐渐下调；而RsRCI2B基因在-6℃处理1～7 d时表达均逐渐上升，在-12℃处理下除1 d时表达略有下调外，随着胁迫时间延长，4～7 d时表达量逐渐上升并达到峰值。上述结果推测，RsMYBS3和RsRCI2B基因可能参与了乌蒙宽叶杜鹃的耐寒响应生理过程。本研究为后续进一步探讨其耐寒分子机制提供了基础数据和理论依据。

关键词：乌蒙宽叶杜鹃 MYBS3 稀有冷诱导2(RCI2B)基因基因克隆表达分析

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滇水金凤花距发育相关基因GIF的克隆及表达分析

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植物生理学报 2023年第6期59卷 1117-1124页

作者：蔡斌魏春梅刘婕李新艺李洋黄海泉黄美娟西南林业大学园林园艺学院国家林业和草原局西南风景园林工程技术工程研究中心云南省功能性花卉资源及产业化技术工程研究中心西南林业大学园林园艺花卉研发中心昆明650224

GIF(GRF-interacting factor)是植物体内特有的转录共激活因子之一,对植物生长发育调控具有重要作用。本研究以滇水金凤(Impatiens uliginosa)花距为材料,采用RT-PCR等技术克隆得到GIF基因的2个拷贝,命名为IuGIF1和IuGIF2,其cDNA序列全... 详细信息

GIF(GRF-interacting factor)是植物体内特有的转录共激活因子之一,对植物生长发育调控具有重要作用。本研究以滇水金凤(Impatiens uliginosa)花距为材料,采用RT-PCR等技术克隆得到GIF基因的2个拷贝,命名为IuGIF1和IuGIF2,其cDNA序列全长分别为591和540 bp,分别编码196和179 aa。对其编码蛋白进行生物信息学分析,发现2个GIF蛋白均属于亲水性不稳定蛋白,且均具有SSXT超家族典型的保守结构域。多序列比对发现,IuGIF1和IuGIF2所编码的氨基酸序列与烟草、松蒿以及茶树等物种的同源性达54%左右。系统进化分析表明,IuGIF1基因和IuGIF2基因单独分为两支,其中IuGIF1与林烟草亲缘关系最近,而IuGIF2与松蒿亲缘关系最近,推测两者为旁系同源关系。qRT-PCR分析表明,随着花距发育,IuGIF1和IuGIF2基因在花距距部的表达量均呈下降趋势,且IuGIF1在两个部位的表达均高于IuGIF2,推测IuGIF1对促进花距檐部和距部细胞生长作用强于IuGIF2基因。此外,IuGIF1在始花期尖部的表达量最高,随着花距的发育逐渐降低,可能与IuGIF1在花距尖部的发育中发挥重要作用有关;而IuGIF2在始花期花距弯部中表达量最高,随着花距的发育逐渐降低,可能与IuGIF2在花距弯部的发育中发挥重要作用有关。综上表明,IuGIF1基因对花距发育的作用强于IuGIF2基因;IuGIF1主要在花距尖部发育中发挥着重要作用,而IuGIF2基因主要对花距弯部发育起重要作用。

关键词：滇水金凤花距发育 GIF基因基因克隆表达分析

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滇水金凤花距发育相关基因TCP4的克隆及表达分析

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浙江大学学报（农业与生命科学版） 2023年第3期49卷 341-348页

作者：李洋李凡孟丹晨李林菊魏春梅黄美娟黄海泉西南林业大学园林园艺学院/国家林业和草原局西南风景园林工程技术研究中心/云南省功能性花卉资源及产业化技术工程研究中心/西南林业大学园林园艺花卉研发中心云南昆明650224

为探究滇水金凤(Impatiens uliginosa)TCP4基因(IuTCP4)对花距发育的调控作用,通过反转录聚合酶链反应技术克隆其cDNA全长,对其序列进行生物信息学分析,并采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase ... 详细信息

为探究滇水金凤(Impatiens uliginosa)TCP4基因(IuTCP4)对花距发育的调控作用,通过反转录聚合酶链反应技术克隆其cDNA全长,对其序列进行生物信息学分析,并采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction, qRT-PCR)技术探讨IuTCP4基因在花距的不同发育阶段及不同组织部位的时空表达模式。结果表明:滇水金凤IuTCP4基因2个拷贝(IuTCP4.1和IuTCP4.2)的cDNA全长分别为1 194、1 173 bp,各编码397个和390个氨基酸,且均不包含内含子;IuTCP4.1和IuTCP4.2所编码的蛋白均为不稳定的亲水性蛋白,且均不存在信号肽和跨膜结构域,两者与茶(Camellia sinensis)、苦瓜(Momordica charantia)等15个物种TCP4蛋白的同源性达到66.11%。在系统发育树中这2个拷贝聚为一支,推测它们为旁系同源基因。qRT-PCR结果显示:IuTCP4.1在初期、开花期的花距和檐部存在差异性表达,且在初期的檐部表达量最高;IuTCP4.2在3个发育时期的花距和檐部均存在差异性表达,且在初期的花距中表达量最高。综上所述,IuTCP4基因在花距发育过程中具有一定的调控作用,且主要在花距发育初期发挥作用。上述结果为凤仙花花距发育机制、花形改良和新品种培育提供了一定的理论依据。

关键词：滇水金凤花距 TCP4基因基因克隆表达分析

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滇水金凤PAL基因的克隆与表达分析

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农业生物技术学报 2023年第11期31卷 2272-2283页

作者：李林菊冯志熙李新艺魏春梅黄海泉黄美娟西南林业大学园林园艺学院国家林业和草原局西南风景园林工程技术工程研究中心/云南省功能性花卉资源及产业化技术工程研究中心/园林园艺花卉研发中心

在植物次生代谢途径中，苯丙氨酸解氨酶(phenylalanine ammonia lyase, PAL)是第1个关键酶，与花青素和木质素的合成以及植物抗逆抗病有关，目前，未见滇水金凤(Impatiens uliginosa) PAL基因的相关报道。本研究主要以滇水金凤花器官为... 详细信息

在植物次生代谢途径中，苯丙氨酸解氨酶(phenylalanine ammonia lyase, PAL)是第1个关键酶，与花青素和木质素的合成以及植物抗逆抗病有关，目前，未见滇水金凤(Impatiens uliginosa) PAL基因的相关报道。本研究主要以滇水金凤花器官为实验材料，通过cDNA末端快速扩增技术(rapid-amplification of cDNA ends, RACE)和逆转录PCR (reverse transcription PCR, RT-PCR)等方法对IuPAL进行克隆，并对该基因进行序列分析和qRT-PCR表达分析。结果发现，成功获得了滇水金凤PAL基因的3个片段，分别命名为：IuPAL1、IuPAL2与IuPAL3，其cDNA全长为2 154、2 145和2 136 bp，分别编码717、714和711个氨基酸；其中IuPAL1与IuPAL2基因含有1个内含子，IuPAL3不含内含子。运用生物信息学软件对IuPAL进行分析，发现3个IuPAL蛋白均属于稳定的亲水蛋白，且均以α螺旋为主要的二级结构。基因同源性比对结果显示，滇水金凤IuPAL蛋白与其他植物中的PAL蛋白同源性较高，均达到80%以上。系统进化分析发现，IuPAL1与IuPAL2聚为一支，而IuPAL3与IuPAL1、IuPAL2共聚为一大支，推测三者为直系同源关系。qRT-PCR分析结果表明，3个IuPAL在滇水金凤的4种不同花色花的4个不同阶段均有表达，其中IuPAL1和IuPAL2在深红色花中表达量最高，IuPAL3在粉色花中表达量最高，而IuPAL1、IuPAL2和IuPAL3在白色花中表达量均最低。推测PAL基因的3个拷贝均参与了滇水金凤花青素的合成，且他们之间存在冗余作用，其中以PAL1和PAL2为深红色花花青素合成途径中的主效基因。上述结果为进一步研究PAL基因在滇水金凤花色变异机理及新品种培育等方面提供了基础数据和理论依据。

关键词：滇水金凤苯丙氨酸解氨酶(PAL)基因基因克隆与分析表达分析

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滇水金凤花距发育相关基因Aux/IAA的克隆及表达分析

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植物生理学报 2023年第5期59卷 899-908页

作者：杨建园童桢开闻永慧汪琼黄美娟鄢波黄海泉西南林业大学园林园艺学院国家林业和草原局西南风景园林工程技术研究中心云南省功能性花卉资源及产业化技术工程研究中心西南林业大学园林园艺花卉研发中心昆明650224

Aux/IAA(Auxin/Indole-3-Acetic Acid)作为诱导植物主要生长素的关键基因,在植物生长发育、细胞分裂及伸长等方面发挥重要调控作用。为研究Aux/IAA基因在滇水金凤(Impatiens uliginosa)花距发育中的功能,本试验从滇水金凤中克隆出Aux/IA... 详细信息

Aux/IAA(Auxin/Indole-3-Acetic Acid)作为诱导植物主要生长素的关键基因,在植物生长发育、细胞分裂及伸长等方面发挥重要调控作用。为研究Aux/IAA基因在滇水金凤(Impatiens uliginosa)花距发育中的功能,本试验从滇水金凤中克隆出Aux/IAA基因的2个拷贝,分别命名IuIAA1和IuIAA2,其cDNA全长序列分别为648和564 bp,分别编码215和187个氨基酸;分析发现, IuIAA1和IuIAA2分别含2个和1个内含子,其长度分别为84和108 bp;IuIAA1和IuIAA2蛋白都是不稳定蛋白。氨基酸序列分析表明, IuIAA1蛋白具有Domain Ⅰ、Domain Ⅱ、Domain Ⅲ和Domain Ⅳ 4个完整的保守结构域,而IuIAA2蛋白则缺乏完整的Domain Ⅳ,但是2个Aux/IAA蛋白中均发现核定位信号(NLS)。系统进化分析表明, IuIAA1和IuIAA2均与拟南芥的IAA1/AXR5、IAA2、IAA3/SHY2和IAA4聚为1支,其亲缘关系较近。qRT-PCR分析发现, 2个Aux/IAA基因在花发育的檐部和距部均呈现先升后降的趋势,且在始花期表达量最高,花苞期表达量最低,推测2个Aux/IAA基因在距部和檐部的始花期促进了细胞的分裂和伸长,而在盛花期Aux/IAA基因表达减弱。在始花期和盛花期, 2个Aux/IAA基因在尖部、弯部、基部和檐部相对表达量呈逐渐上升趋势,且均以檐部相对表达量最高,尖部相对表达量最低,推测2个Aux/IAA基因在檐部的始花期和盛花期均促进了细胞的分裂和伸长;上述结果为进一步研究滇水金凤花距发育提供一定的基础理论。

关键词：滇水金凤花距发育 Aux/IAA基因基因克隆表达分析

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新几内亚凤仙CCoAOMT和SAMS基因的克隆及表达分析

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植物遗传资源学报 2024年第3期25卷 462-471页

作者：李凡张晓丽赵潞秋石万磊谭弋黄美娟黄海泉西南林业大学园林园艺学院/国家林业和草原局西南风景园林工程技术研究中心/云南省功能性花卉资源及产业化技术工程研究中心/西南林业大学园林园艺花卉研发中心昆明650224

通过对新几内亚凤仙(Impatiens hawkeri)指甲花醚合成相关基因CCoAOMT和SAMS的克隆及表达分析,以期为解析其合成途径提供一定的理论依据。基于新几内亚凤仙指甲花醚含量测定和转录组测序数据分析,克隆到1个CCoAOMT和2个SAMS基因,将其命... 详细信息

通过对新几内亚凤仙(Impatiens hawkeri)指甲花醚合成相关基因CCoAOMT和SAMS的克隆及表达分析,以期为解析其合成途径提供一定的理论依据。基于新几内亚凤仙指甲花醚含量测定和转录组测序数据分析,克隆到1个CCoAOMT和2个SAMS基因,将其命名为IhCCoAOMT、IhSAMS1和IhSAMS2。3种处理(光培养、暗培养和前体物DHNA (1,4-dihydroxy-2-naphthoate)诱导)均能促进指甲花醚积累,且暗培养处理最佳。IhCCoAOMT的cDNA全长为729 bp,编码242 aa,其蛋白具有AdoMet_MTases超家族结构域;IhSAMS1和IhSAMS2的cDNA全长分别为1179 bp和1173 bp,分别编码393 aa和391 aa,其蛋白均具有S-AdoMet_synt超家族结构域。系统进化分析表明,IhCCoAOMT与喜马拉雅凤仙亲缘关系最近;IhSAMS1与IhSAMS2可能为旁系同源。qRT-PCR分析表明,3个基因在新几内亚凤仙的3个处理及4个时期中均有表达,其中IhCCoAOMT在暗培养及前体物DHNA诱导中表达量整体上调,且暗培养第60天时表达量最高;IhSAMS1和IhSAMS2在暗培养及DHNA诱导中表达量整体下调,但IhSAMS1在DHNA诱导中表达量较高,IhSAMS2在暗培养中表达量较高。综上所述,推测IhCCoAOMT在指甲花醚处理后期起主要作用,IhSAMS1和IhSAMS2在其早期起主要作用,且IhSAMS2作用更为显著。

关键词：新几内亚凤仙指甲花醚 CCoAOMT SAMS 表达分析

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滇水金凤花蜜相关SWEET7和SWEET16的克隆及表达分析

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西北农业学报 2024年第10期33卷 1933-1941页

作者：张晓丽谭弋李凡赵潞秋石万磊黄海泉黄美娟西南林业大学园林园艺学院国家林业和草原局西南风景园林工程技术研究中心云南省功能性花卉资源及产业化技术工程研究中心西南林业大学园林园艺花卉研发中心昆明650224

植物SWEET(Sugars will eventually be exported transporter)基因家族是一类重要的糖转运蛋白,参与开花植物的花蜜合成。本研究以野生型和突变型滇水金凤(Impatiens uliginosa)为材料,基于课题组前期的花距转录组数据,通过筛选和RT-PC... 详细信息

植物SWEET(Sugars will eventually be exported transporter)基因家族是一类重要的糖转运蛋白,参与开花植物的花蜜合成。本研究以野生型和突变型滇水金凤(Impatiens uliginosa)为材料,基于课题组前期的花距转录组数据,通过筛选和RT-PCR技术克隆得到花蜜相关基因SWEET7和SWEET16,分别命名为IuSWEET7和IuSWEET16,其cDNA分别为741 bp和903 bp,分别编码246和300个氨基酸。生物信息学分析表明:IuSWEET7为疏水性不稳定蛋白,IuSWEET16为疏水性稳定蛋白,二者均含有2个典型的MtN3/saliv保守结构域;IuSWEET7和IuSWEET16基因的氨基酸序列与杜鹃花(KAG5539487.1)、一串红(XP_042052415.1)等植物同源序列的相似性均在54.15%~71.48%;系统进化分析表明,IuSWEET7和IuSWEET16处于两个不同分支。qRT-PCR分析表明两个基因在野生型和突变型滇水金凤花距的3个时期中均有表达,且在不同部位中表达模式不同。其中IuSWEET7基因在野生型滇水金凤中其表达量从花苞期至盛花期逐渐上升;在突变型2距和3距中其表达量从花苞期至盛花期先上升后下降,且在始花期表达量最高;而IuSWEET16基因在野生型和突变型3距中其表达量从花苞期至盛花期均逐渐上升,但在突变型2距中其表达量从花苞期至盛花期先上升后下降,也在始花期时达到最高。

关键词：滇水金凤花蜜 SWEET7基因 SWEET16基因基因克隆表达分析

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含ACC脱氨酶的螃蟹脚内生细菌筛选及其acdS基因分析

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分子植物育种 2025年第6期23卷 1821-1831页

作者：李茜傅培龙贾颜李文祥王梦雨黄海泉黄美娟西南林业大学园林园艺学院国家林业和草原局西南风景园林工程技术研究中心云南省功能性花卉资源及产业化技术工程研究中心园林园艺花卉研发中心昆明650224

为更好了解与利用特殊环境下的植物内生细菌资源,本研究以前期从螃蟹脚中分离出的内生细菌为材料,筛选具ACC脱氨酶活性的内生细菌并测定其ACC脱氨酶活性。结果显示,从螃蟹脚中筛选出12株具ACC脱氨酶活性的菌株,分属于假单胞菌属(Pseudom... 详细信息

为更好了解与利用特殊环境下的植物内生细菌资源,本研究以前期从螃蟹脚中分离出的内生细菌为材料,筛选具ACC脱氨酶活性的内生细菌并测定其ACC脱氨酶活性。结果显示,从螃蟹脚中筛选出12株具ACC脱氨酶活性的菌株,分属于假单胞菌属(Pseudomonas)和短小杆菌属(Curtobacterium)等9个属;并以假单胞菌属SWFU34菌株ACC脱氨酶活性最高,为1.3201 U/mg。此外,选取3株具ACC脱氨酶活性的代表性菌株(高,中,低)进行acdS基因克隆,分别为短小杆菌属的SWFU8菌株和假单胞菌属的SWFU12、SWFU34菌株,3株菌株成功克隆了acdS基因,其长度均为1017 bp,编码338 aa;均隶属Try-synth-beta-Ⅱ家族,同时发现影响该酶活性的几个关键氨基酸位点均无任何变异;与同源acdS氨基酸序列相比同源性达98.06%,基于系统进化树分析发现3株菌与WP060756418.1假单胞菌属聚为一支,同源性高达99.48%,说明该基因具有较高的保守性。运用生物学软件分析发现3个acdS蛋白均属于不稳定亲水性蛋白,且均不具备跨膜结构和信号肽结构。本研究结果表明螃蟹脚中蕴藏丰富的含ACC脱氨酶活性的内生细菌,这为下一步生物菌肥开发提供研究基础,同时通过acdS基因克隆分析,为后续开展ACC脱氨酶基因表达及载体构建提供了一定的基础数据。

关键词：螃蟹脚 ACC脱氨酶基因克隆序列分析

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昆明地区凤仙花白粉病病原菌鉴定及其种质资源抗性评价分析

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甘肃农业大学学报 2025年第2期60卷 145-151,162页

作者：刘泽东罗亮贺海皓张晓丽陈心仪黄海泉黄美娟西南林业大学园林园艺学院国家林业和草原局西南风景园林工程技术研究中心云南省功能性花卉资源及产业化技术工程研究中心西南林业大学园林园艺花卉研发中心云南昆明650224

【目的】明确昆明地区凤仙花白粉病病原菌种类及凤仙花种质资源对白粉病的抗性。【方法】以凤仙花病叶为试材,对分离纯化凤仙花白粉病病原菌进行形态学和分子生物学鉴定,并采用离体叶片接种法对19种凤仙花种质资源进行了抗性评价。【结... 详细信息

【目的】明确昆明地区凤仙花白粉病病原菌种类及凤仙花种质资源对白粉病的抗性。【方法】以凤仙花病叶为试材,对分离纯化凤仙花白粉病病原菌进行形态学和分子生物学鉴定,并采用离体叶片接种法对19种凤仙花种质资源进行了抗性评价。【结果】病原菌分生孢子呈椭圆形,大小为24~32μm×17~23μm,内均含纤维体;分生孢子梗稍弯曲,大小为18~24μm×88~97μm,病原菌人工接种叶片与自然感病叶片症状一致。对病原菌的ITS序列进行PCR扩增,得到564 bp的序列(GenBank登录号:OQ940536),在GenBank上进行BLAST比对分析,与苍耳叉丝单囊壳白粉菌Podosphaera xanthii(GenBank登录号:OQ729746.1)的ITS序列同源性达100%,经离体叶片接种法,筛选出赤水凤仙花、大叶凤仙花2份免疫材料;棒凤仙花、白花凤仙花等10份高抗材料;滇水金凤、新几内亚凤仙花等3份感病材料和茶花凤仙花1份高感材料。【结论】昆明地区的凤仙花白粉病病原菌为苍耳叉丝单囊壳白粉菌***,筛选出赤水凤仙花、大叶凤仙花2份免疫种质资源,棒凤仙花、白花凤仙花等10份高抗种质资源,为筛选凤仙花抗白粉病基因及培育抗白粉病凤仙花新品种奠定了基础。

关键词：凤仙花白粉病病原鉴定分子系统发育抗性鉴定

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分子植物育种 2023年

作者：孟丹晨魏春梅陶宇蝶李洋李新艺黄海泉黄美娟西南林业大学园林园艺学院国家林业和草原局西南风景园林工程技术工程研究中心云南省功能性花卉资源及产业化技术工程研究中心园林园艺花卉研发中心

本研究通过对滇水金凤花斑形成相关基因MADS4和CAL A-like (CAULIFLOWER A-like)基因的克隆与表达分析，探究其对斑色系滇水金凤花斑形成的分子机理奠定理论基础。本研究以斑色系滇水金凤旗瓣为试材，成功克隆花斑相关基因MADS4和CAL A-... 详细信息

本研究通过对滇水金凤花斑形成相关基因MADS4和CAL A-like (CAULIFLOWER A-like)基因的克隆与表达分析，探究其对斑色系滇水金凤花斑形成的分子机理奠定理论基础。本研究以斑色系滇水金凤旗瓣为试材，成功克隆花斑相关基因MADS4和CAL A-like，其cDNA全长分别为732 bp和648 bp，分别编码244 aa和216 aa。基本理化性质分析显示，MADS4和CAL A-like的相对分子量分别为27.91 kDa和25.24 kDa，理论等电点分别为7.67和9.18。MADS4和CAL A-like的不稳定指数分别为77.49和82.91，均属于不稳定蛋白。通过NCBI CDD对其结构域分析显示，MADS4和CAL A-like蛋白均具有保守的MADS区和相对保守的K区，推测二者均为MIKC型MADS-box基因。多序列比对表明，滇水金凤MADS4和CAL A-like基因与新几内亚凤仙、可可及木棉等物种的氨基酸序列相似度较高。系统发育表明，滇水金凤MADS4与新几内亚凤仙亲缘关系最近，CAL A-like基因则与喜马拉雅凤仙的亲缘关系最近。RT-qPCR结果表明MADS4和CAL A-like基因在滇水金凤旗瓣斑区的表达量均高于非斑区，其中CAL A-like基因在斑区的表达量为非斑区的112倍；而MADS4基因斑区的表达量为非斑区的48倍，推测MADS4和CAL A-like基因参与滇水金凤花斑的形成。

关键词：滇水金凤(Impatiens uliginosa) MADS4 CAULIFLOWER A-like 基因克隆

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