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四川大学学报（医学版） 2010年第2期41卷 212-217页

作者：孙万森任艳芸赵艳龙马巧亚西安交通大学医学院第二附属医院中西医结合科西安710004

目的观察阿霉素肾病大鼠肾小球基底膜硫酸肝素蛋白多糖(HSPG)蛋白及其mRNA表达及祛风通络方对其表达的影响。方法尾静脉注射阿霉素建立阿霉素肾病大鼠模型,并随机分为A(空白对照,n=32)、B(模型,n=18)、C(祛风通络方,n=18)、D(祛风通络方... 详细信息

目的观察阿霉素肾病大鼠肾小球基底膜硫酸肝素蛋白多糖(HSPG)蛋白及其mRNA表达及祛风通络方对其表达的影响。方法尾静脉注射阿霉素建立阿霉素肾病大鼠模型,并随机分为A(空白对照,n=32)、B(模型,n=18)、C(祛风通络方,n=18)、D(祛风通络方+激素,n=18)、E(激素,n=18)、F(苯那普利,n=18)组,应用间接免疫荧光染色、RT-PCR分别检测各组大鼠肾小球基底膜HSPG的荧光分布和HSPGmRNA表达的变化。结果造模成功后透射电镜示B组肾小球足突呈部分或弥漫性融合。干预结束后与B组相比,C、E组HSPG的荧光分布呈连续性或斑片状,平均荧光强度明显增强(P<0.01);D、F组HSPG的荧光呈不连续分布或点状分布,平均荧光强度增强(P<0.01)。干预结束后与B组相比,各干预组HSPGmRNA的表达均上调(P<0.01),尤以C、F组明显。相关分析显示24 h尿蛋白定量与HSPG蛋白表达呈明显负相关(r=-0.7353,P<0.001)。结论肾小球基底膜HSPG的表达异常和分布改变是阿霉素肾病大鼠蛋白尿发生发展的重要机制,祛风通络方可能通过改变HSPG的表达和分布而达到治疗蛋白尿的目的。

关键词：阿霉素肾病蛋白尿硫酸肝素蛋白多糖祛风通络方

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祛风通络方对阿霉素肾病大鼠肾小球足细胞nephrin mRNA表达的影响

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中南大学学报（医学版） 2009年第12期34卷 1216-1223页

作者：任艳芸孙万森赵艳龙马巧亚王竹西安交通大学医学院第二附属医院中西医结合科西安710004

目的:观察阿霉素肾病(AN)大鼠肾小球足细胞nephrin mRNA表达及祛风通络方对其表达的影响。方法:清洁级SD大鼠140只,随机抽取32只作为空白组,余108只建立AN大鼠模型,90只大鼠模型成功后随机分为模型组、祛风组、祛风+激素组、激素组和苯... 详细信息

目的:观察阿霉素肾病(AN)大鼠肾小球足细胞nephrin mRNA表达及祛风通络方对其表达的影响。方法:清洁级SD大鼠140只,随机抽取32只作为空白组,余108只建立AN大鼠模型,90只大鼠模型成功后随机分为模型组、祛风组、祛风+激素组、激素组和苯那组,给予相应干预,电镜检测超微结构变化,第0,3,5,7周应用间接免疫荧光技术、RT-PCR分别检测nephrin蛋白荧光表达分布和nephrinmRNA表达并进行组间比较。结果:模型成功时,透射电镜示AN大鼠肾小球足突呈部分或弥漫性融合。7周时与模型组相比,祛风组和激素组nephrin蛋白的荧光分布呈连续性或斑片状分布,荧光强度明显增强(P<0.01);祛风组和激素组nephrin mRNA的表达明显上调(P<0.01)。结论:Nephrin的表达异常是AN大鼠蛋白尿发生发展的重要分子机制,祛风通络方可上调AN大鼠足细胞nephrin的表达和分布而起保护肾小球滤过屏障的作用。

关键词：阿霉素肾病蛋白尿 nephrin 祛风通络方

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祛风通络方对肾小球系膜细胞间隙连接蛋白36及基因表达的影响

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四川大学学报（医学版） 2014年第2期45卷 207-211页

作者：吴喜利叶冰玉安鹏乔成林石兴民付荣国西安交通大学第二附属医院中西医结合科西安710004 西安交通大学医学院西安710061 西安交通大学第二附属医院肾病科西安710004

目的研究间隙连接蛋白36(Cx36)及其基因在肾小球系膜细胞(MCs)的表达,观察祛风通络方的干预作用,从而进一步探讨祛风通络方抑制肾小球MCs增殖的作用机制。方法应用血清药理学方法,制备贝那普利药物血清和祛风通络药物血清,体外培养肾小... 详细信息

目的研究间隙连接蛋白36(Cx36)及其基因在肾小球系膜细胞(MCs)的表达,观察祛风通络方的干预作用,从而进一步探讨祛风通络方抑制肾小球MCs增殖的作用机制。方法应用血清药理学方法,制备贝那普利药物血清和祛风通络药物血清,体外培养肾小球MCs,并将其分为正常对照、脂多糖(LPS)、贝那普利治疗和祛风通络方治疗组。分别采用激光扫描共聚焦显微镜、Western blot、免疫组化及实时定量PCR检测各组肾小球系膜细胞Cx36蛋白及基因的表达变化。结果与对照组比较,脂多糖组肾小球MCs Cx36表达明显增强(P<0.01);与脂多糖组比较,两治疗组Cx36表达均减弱(P<0.01或P<0.05)。各组肾小球MCs Cx36基因表达与蛋白表达相似。结论 Cx36及基因在脂多糖诱导的肾小球MCs中有明显表达,祛风通络方抑制肾小球系膜细胞增殖的作用可能与其调节Cx36及基因表达有关。

关键词：系膜细胞间隙连接蛋白36 祛风通络方

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祛风通络方对肾小球系膜细胞周期蛋白表达的影响

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南方医科大学学报 2012年第12期32卷 1699-1703页

作者：吴喜利孙万森叶冰玉安鹏石兴民傅荣国王竹乔成林西安交通大学医学院第二附属医院中西医结合科陕西西安710004 西安交通大学医学院陕西西安710061

目的通过不同检测方法观察祛风通络方对肾小球系膜细胞周期调节蛋白表达的影响,进一步探讨祛风通络方抑制肾小球系膜细胞增殖的作用机制。方法以体外培养肾小球系膜细胞为研究对象,应用血清药理学方法,分别采用激光扫描共聚焦显微镜及... 详细信息

目的通过不同检测方法观察祛风通络方对肾小球系膜细胞周期调节蛋白表达的影响,进一步探讨祛风通络方抑制肾小球系膜细胞增殖的作用机制。方法以体外培养肾小球系膜细胞为研究对象,应用血清药理学方法,分别采用激光扫描共聚焦显微镜及免疫组化法检测各组大鼠肾小球系膜细胞周期蛋白的表达变化。结果与正常组比较,LPS组肾小球系膜细胞周期蛋白CyclinD1、CDK2、P21表达明显增强(P<0.01),P27蛋白表达明显减弱(P<0.01);经过药物干预治疗,肾小球系膜细胞周期蛋白Cyclin D1、CDK2、P21的表达均有不同程度减弱(P<0.05或P<0.01),而P27蛋白表达明显增强(P<0.01),且祛风通络方对Cyclin D1、P21和P27蛋白表达的调节明显优于贝那普利(P<0.05或P<0.01)。结论祛风通络方抑制肾小球系膜细胞增殖的作用机制可能与其下调细胞周期蛋白Cyclin D1、CDK2、P21和上调P27蛋白的表达有密切关系。

关键词：祛风通络方系膜细胞细胞周期调节蛋白激光扫描共聚焦显微镜免疫组化法

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祛风通络方对阿霉素肾病大鼠蛋白尿及肾小球滤过膜的影响

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南方医科大学学报 2011年第1期31卷 11-16页

作者：马巧亚孙万森任艳芸王竹西安交通大学医学院第二附属医院老年干部一病区陕西西安710004 西安交通大学医学院第二附属医院中西医结合科陕西西安710004

目的探讨祛风通络方对阿霉素肾病(AN)大鼠蛋白尿及肾小球滤过膜的影响。方法 56只雄性清洁级SD健康大鼠随机分为空白对照组(A组)和AN模型组,采用一次性尾静脉注射阿霉素(ADR)的方法,建立大鼠AN模型,空白对照组一次性尾静脉注射等量生理... 详细信息

目的探讨祛风通络方对阿霉素肾病(AN)大鼠蛋白尿及肾小球滤过膜的影响。方法 56只雄性清洁级SD健康大鼠随机分为空白对照组(A组)和AN模型组,采用一次性尾静脉注射阿霉素(ADR)的方法,建立大鼠AN模型,空白对照组一次性尾静脉注射等量生理盐水,造模成功后再将模型组分为病理组(B组)、祛风通络方组(C组)、强的松组(D组)和贝那普利组(E组)。邻苯三酚红/钼酸盐法测定24 h尿蛋白量;取肾皮质经聚乙烯亚胺(PEI)染色检测大鼠肾小球滤过膜上AS的表达;免疫荧光技术检测Nephrin蛋白表达。结果①模型组大鼠于实验第21天时尿蛋白排泄较正常对照组明显增高(P<0.01),提示造模成功;药物干预后,各药物组大鼠尿蛋白排泄均显著下降,与病理组比较(P<0.01);②祛风通络方组比模型组大鼠肾小球滤过膜上阴离子位点、Nephrin蛋白表达明显上调(P<0.01)。结论祛风通络方能显著降低阿霉素肾病大鼠24 h尿蛋白定量,改善症状,上调肾小球滤过膜上AS及Nephrin蛋白表达。

关键词：祛风通络方阿霉素肾病蛋白尿肾小球滤过膜

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祛风通络方抑制NF-κB活化对脂多糖诱导的体外培养大鼠肾小球系膜细胞TGF-β1mRNA和IL-6mRNA表达的影响

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南方医科大学学报 2008年第10期28卷 1825-1827,1830页

作者：王竹孙万森王娟马巧亚张晓强吴喜利西安交通大学医学院第二附属医院中西医结合科陕西西安710004

目的研究祛风通络方对脂多糖刺激大鼠肾小球系膜细胞表达炎性细胞因子TGF-β1、IL-6的影响及其作用机制。方法采用体外培养大鼠系膜细胞和血清药理学方法,分为空白组,病理组,治疗组和阳性对照组。采用生物素核酸-蛋白结合凝胶迁移电泳... 详细信息

目的研究祛风通络方对脂多糖刺激大鼠肾小球系膜细胞表达炎性细胞因子TGF-β1、IL-6的影响及其作用机制。方法采用体外培养大鼠系膜细胞和血清药理学方法,分为空白组,病理组,治疗组和阳性对照组。采用生物素核酸-蛋白结合凝胶迁移电泳分析法检测NF-κB的表达;RT-PCR检测TGF-β1mRNA和IL-6mRNA表达。结果祛风通络方能够抑制脂多糖刺激肾小球系膜细胞中NF-κB活化,且在祛风通络方的作用下,TGF-β1mRNA和IL-6mRNA表达均呈不同程度减弱。结论提示祛风通络方可能通过抑制NF-κB活化,下调TGF-β1mRNA和IL-6mRNA的表达达到减轻系膜细胞增殖,防止肾小球硬化的作用。这可能是祛风通络方治疗系膜增生性肾炎的机制之一。

关键词：祛风通络方大鼠肾小球系膜细胞 NF-κB TGF-β1 IL-6

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青蒿素对大鼠肾小球系膜细胞增殖、凋亡及Caspase-3活性的影响

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中药材 2010年第3期33卷 407-410页

作者：吴喜利张王刚石兴民安鹏孙万森乔成林王竹西安交通大学医学院第二附属医院中西医结合科/陕西省中医重点专科/肾病科陕西西安710004 西安交通大学医学院第二附属医院血液科陕西西安710004 西安交通大学医学院陕西西安710061

目的:观察青蒿素对大鼠肾小球系膜细胞(mesangial cell,MC)增殖、凋亡及Caspase-3活性的影响。方法:以体外培养大鼠肾小球系膜细胞为研究对象,应用不同质量浓度青蒿素干预系膜细胞,分别采用甲基噻唑基四唑(methyl thiazolyl tetrazolium... 详细信息

目的:观察青蒿素对大鼠肾小球系膜细胞(mesangial cell,MC)增殖、凋亡及Caspase-3活性的影响。方法:以体外培养大鼠肾小球系膜细胞为研究对象,应用不同质量浓度青蒿素干预系膜细胞,分别采用甲基噻唑基四唑(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)比色法、荧光倒置显微镜及酶标分析仪检测系膜细胞的增殖、凋亡及Caspase-3活性。结果:与对照组比较,不同质量浓度青蒿素对肾小球系膜细胞的增殖及Caspase-3活性均有不同程度的影响(P<0.01);与地塞米松组比较,其他2组相同质量浓度药物对肾小球系膜细胞增殖及Caspase-3活性均有显著影响(P<0.01),尤以青蒿素联合地塞米松高剂量组的抑制作用最强,且3组药物对肾小球系膜细胞的增殖、Caspase-3活性及其凋亡的影响均呈剂量依赖趋势,在中、高剂量药物联合治疗组中出现了系膜细胞大量死亡。结论:青蒿素能剂量依赖性抑制系膜细胞增殖、增强Caspase-3活性及促进肾小球系膜细胞凋亡。

关键词：青蒿素系膜细胞细胞增殖细胞凋亡 Caspase-3活性

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通络方防治大鼠肾小球硬化的作用机制

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南方医科大学学报 2008年第7期28卷 1198-1201页

作者：吴喜利孙万森张王刚王竹西安交通大学医学院第二附属医院中西医结合科陕西省中医重点专科-肾病科陕西西安710004 西安交通大学医学院第二附属医院血液科陕西西安710004

目的观察通络方对肾组织中Ⅳ型胶原(ColIV)、纤维连接蛋白(FN)、层粘连蛋白(LN)及转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响,探讨通络方防治大鼠肾小球硬化的作用机制。方法通过光镜观察治疗组肾脏病理学改变,同时应用免疫组化技术及图像采... 详细信息

目的观察通络方对肾组织中Ⅳ型胶原(ColIV)、纤维连接蛋白(FN)、层粘连蛋白(LN)及转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响,探讨通络方防治大鼠肾小球硬化的作用机制。方法通过光镜观察治疗组肾脏病理学改变,同时应用免疫组化技术及图像采集分析系统测定各组大鼠肾脏组织中Ⅳ-C、FN、LN、TGF-β1表达情况。结果通络方可明显降低大鼠肾组织中ColIV、FN、LN、TGF-β1表达(P<0.05或P<0.01),减轻肾脏的病理损害(P<0.01)。结论通络方可能是通过降低肾脏组织中ColIV、FN、LN及TGF-β1表达起到治疗作用的。

关键词：通络方肾小球硬化转化生长因子β1 Ⅳ型胶原纤维连接蛋白层粘连蛋白

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助孕胶囊对多囊卵巢综合征大鼠卵巢局部细胞因子表达的影响

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中医杂志 2008年第5期49卷 453-455,458页

作者：刘艳巧党慧敏刘润侠康晓玲陈梅西安交通大学医学院第二附属医院中西医结合科

目的观察助孕胶囊对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠血清性激素水平及卵巢局部细胞因子表达的影响。方法采用孕激素联合人绒毛膜促性腺激素(HCG)法制备PCOS模型大鼠。SD大鼠40只随机分为正常对照组、模型组、助孕胶囊组、克罗米酚组,每组10只... 详细信息

目的观察助孕胶囊对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠血清性激素水平及卵巢局部细胞因子表达的影响。方法采用孕激素联合人绒毛膜促性腺激素(HCG)法制备PCOS模型大鼠。SD大鼠40只随机分为正常对照组、模型组、助孕胶囊组、克罗米酚组,每组10只,运用放射免疫法测定血清性激素水平的变化;免疫组化法检测卵巢组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)、胰岛素样生长因子1(IGF-1)、白血病抑制因子(LIF)表达水平并分析各因子之间的关系。结果助孕胶囊可明显降低PCOS大鼠血清睾酮(T)、促黄体生成素(LH)水平,并下调卵巢组织TNF-α和IGF-1的表达,上调卵巢组织LIF的表达。结论助孕胶囊能够通过调整内分泌及影响卵巢局部细胞因子的表达,调整PCOS大鼠性腺功能,促进卵泡的发育成熟及排卵。

关键词：多囊卵巢综合征助孕胶囊大鼠卵巢细胞因子性激素

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应用甲状腺素片及饥饱失常法建立肝郁证大鼠模型的研究

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西安交通大学学报（医学版） 2009年第2期30卷 251-253,260页

作者：刘素蓉曹瑾吴喜利王志勇王敏高艳琼西安交通大学医学院第二附属医院中西医结合科陕西西安710004

目的探讨建立中医肝郁证大鼠模型的一种新的造模方法。方法依次采用甲状腺素片灌胃、饥饱失常法喂养,观察大鼠的行为学变化,测量大鼠肛温、并用夹心ELISA法检测其血浆五羟色胺(5-hydroxytrypta mine,5-HT)、去甲肾上腺素(norepinephrine... 详细信息

目的探讨建立中医肝郁证大鼠模型的一种新的造模方法。方法依次采用甲状腺素片灌胃、饥饱失常法喂养,观察大鼠的行为学变化,测量大鼠肛温、并用夹心ELISA法检测其血浆五羟色胺(5-hydroxytrypta mine,5-HT)、去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)、肾上腺素(epinephrine,E)水平的变化及逍遥散对其含量的影响。结果肝郁模型组及逍遥散组大鼠于造模第28天均出现了典型的心肝火旺之症,体温均升高,与空白对照组相比有显著性差异(P<0.05);于造模第44天,肝郁模型组大鼠血浆5-HT、NE、E水平均较前明显升高(P<0.05或P<0.01);且NE、E水平高于逍遥散组(P<0.01和P<0.05);于造模第56天肝郁模型组出现典型的肝郁证的行为学特点,逍遥散组大鼠血浆中5-HT水平低于肝郁模型组(P<0.01)。结论应用甲状腺素片及饥饱失常法建立的肝郁证大鼠模型基本符合中医肝郁证的特征。

关键词：肝郁证大鼠模型逍遥散

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