检索结果-内蒙古大学图书馆

南方医科大学学报 2007年第12期27卷 1834-1837页

作者：石秦东张蓬勃康前雁陈新林田玉梅刘建新刘勇西安交通大学医学院神经生物学研究所西安交通大学医学院第一附属医院中心ICU陕西西安710061 第二附属医院麻醉科陕西西安710004

目的构建以EGFP为报告基因的增强子鉴定质粒载体,并对其进行鉴定。方法以pEGFP-N1质粒为模板,PCR法扩增获得EGFP基因片段,并将其亚克隆入PGL3-promoter质粒骨架,得到以EGFP为报告基因的增强子鉴定质粒pEGFP-enhancer。人工合成不同拷贝... 详细信息

目的构建以EGFP为报告基因的增强子鉴定质粒载体,并对其进行鉴定。方法以pEGFP-N1质粒为模板,PCR法扩增获得EGFP基因片段,并将其亚克隆入PGL3-promoter质粒骨架,得到以EGFP为报告基因的增强子鉴定质粒pEGFP-enhancer。人工合成不同拷贝的缺氧反应元件(HRE)增强子序列,插入到pEGFP-enhancer多克隆位点获得重组质粒pEGFP-HRE、pEGFP-5HR,以脂质体Lipofectamine 2000转染Hela细胞,常氧与缺氧处理后以荧光显微镜及流式细胞仪观察EGFP荧光表达。结果构建的不同拷贝HRE的增强子鉴定质粒pEGFP-HRE、pEGFP-5HRE转染Hela细胞后,常氧处理绿色荧光表达无差异,缺氧处理后随HRE拷贝数增加绿色荧光表达强度增加。结论成功构建了增强子表达质粒pEGFP-enhancer,通过EGFP的表达强度可以反应增强子活性。

关键词：增强子绿色荧光蛋白载体缺氧反应元件 Hela细胞

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硒对体外培养大骨节病软骨细胞生长及凋亡的影响

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中国地方病学杂志 2010年第5期29卷 480-484页

作者：段琛郭雄张晓东高宗强张银刚于曰祥西安交通大学医学院公共卫生系地方病研究所 710061 西安交通大学医学辽第一附属医院外科 710061 西安交通大学医学辽第二附属医院骨科 710061 陕西省地方病防治研究所外科

目的观察硒对体外培养大骨节病（KBD）患者和正常人关节软骨细胞增殖和凋亡的影响,探索补硒防治KBD的作用,并为硒对正常软骨细胞生长的影响提供依据.方法依据〈大骨节病临床诊断标准〉（GB 16003-1995）,选择Ⅱ度和Ⅲ度KBD患者5例和... 详细信息

目的观察硒对体外培养大骨节病（KBD）患者和正常人关节软骨细胞增殖和凋亡的影响,探索补硒防治KBD的作用,并为硒对正常软骨细胞生长的影响提供依据.方法依据〈大骨节病临床诊断标准〉（GB 16003-1995）,选择Ⅱ度和Ⅲ度KBD患者5例和非病区正常人意外事故者5例的关节软骨进行体外分离、培养.KBD组和对照组分别给予不同剂量的硒（0、0.0125、0.0250、0.0500、0.1000、0.2500、0.5000、1.0000 mg/L）进行干预,采用四氮唑蓝（MTT）法、流式细胞仪和免疫组化法观察细胞生长和凋亡情况.结果对照组第6天时各剂量组的细胞增殖率（0.086±0.025、0.077±0.012、0.073±0.027、0.071±0.017、0.058±0.028、0.052±0.028和0.046±0.037）比0 mg/L组（0.138±0.026）明显降低（P均＜0.05）;0.1000～1.0000 mg/L剂量组的平均细胞增殖率为负值（-0.001±0.001、-0.003±0.000、-0.003±0.001和-0.004±0.001）,显著低于0 mg/L组（0.025±0.003,P均＜0.05）;KBD组,与0 mg/L组（0.115±0.011）比较,0.2500 mg/L剂量组促进细胞增殖（0.128±0.037,P＜0.05）,1.0000 mg/L剂量组细胞生长受到抑制（0.071±0.019,P＜0.05）.对照组0.0500～1.0000mg/L剂量组的细胞凋亡率[（18.88±0.02）%、（17.58±0.01）%、（17.09±0.04）%、（56.00±0.02）%、（57.85±0.03）%]比0 mg/L组[（13.51±0.01）%]增高（P均＜0.05）;KBD组,与0 mg/L组[（25.84±0.02）%]比较,0.0250～0.2500 mg/L剂量组的细胞凋亡率[（13.69±0.02）%、（15.96±0.03）%、（16.68±0.03）%、（16.67±0.02）%]降低,0.5000、1.0000 mg/L剂量组的细胞凋亡率[（59.58±0.03）%、（73.48±0.04）%]明显增高（P均＜0.05）.KBD组0.0500～0.2500 mg/L剂量组的Fas表达[（41.2±1.5）%、（40.3±2.0）%、（50.2±2.5）%]低于同剂量硒干预的对照组[（52.4±1.0）%、（67.2±4.0）%、（75.1±5.0）%,P均＜0.05],0.0500、0.1000 mg/L剂量组的Caspase-3表达[（40.8±1.1）%、（45.1±2.1）%]低于同剂量硒干预的对照组[（68.0±3.0）%、（70.6±3.5）%,P均＜0.05].结论适宜的补硒剂量（0.1000～0.2500 mg/L）具有促进KBD软骨细胞生长的作用,降低细胞凋亡率,但补硒剂量＞0.5000 mg/L时具有损伤作用;促进KBD软骨细胞生长的硒剂量并非也能促进正常人活体软骨细胞的生长.

关键词：大骨节病硒软骨细胞细胞凋亡

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脑源性神经营养因子融合蛋白真核表达质粒的构建及表达

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西安交通大学学报（医学版） 2009年第2期30卷 141-144页

作者：石秦东张蓬勃田玉梅张军峰陈新林刘勇西安交通大学医学院神经生物学研究所陕西西安710061 西安交通大学医学院第一附属医院中心ICU 陕西西安710061 西安交通大学医学院第二附属医院麻醉科陕西西安710004

目的构建以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)为报告基因的脑源性神经营养因子(BDNF)融合蛋白真核表达质粒,并对其表达和定位进行研究。方法以人血白细胞DNA为模板,利用一对删除终止密码子的引物进行PCR获得BDNF基因片段,并将其与pEGFP-N1质粒... 详细信息

目的构建以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)为报告基因的脑源性神经营养因子(BDNF)融合蛋白真核表达质粒,并对其表达和定位进行研究。方法以人血白细胞DNA为模板,利用一对删除终止密码子的引物进行PCR获得BDNF基因片段,并将其与pEGFP-N1质粒载体连接,构建BDNF-EGFP融合蛋白真核表达质粒。以脂质体Lipo-fectamine2000转染Hela细胞,提取总RNA,通过RT-PCR方法检测BDNF-EGFP在转录水平的表达,Western blot及荧光显微镜进一步观察融合蛋白的表达定位。结果酶切和PCR鉴定证实BDNF基因片段正确克隆入载体质粒中,转染Hela细胞后,RT-PCR证实BDNF-EGFP融合蛋白在转录水平有表达,荧光显微镜观察显示BDNF-EGFP融合蛋白主要分布于细胞质中,Western blot结果显示Hela细胞培养液中有BDNF-EGFP融合蛋白存在。结论成功构建了BDNF-EGFP融合蛋白真核细胞表达质粒,BDNF-EGFP融合蛋白能够在Hela细胞中表达,主要位于细胞质中并可以分泌到细胞外。

关键词：脑源性神经营养因子绿色荧光蛋白融合蛋白 Hela细胞

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基于随机森林模型的中国中老年人群HDL-C环境影响因素研究

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地球信息科学学报 2022年第7期24卷 1286-1300页

作者：裴泽华葛淼李浩何进伟王聪霞陕西师范大学地理科学与旅游学院健康地理研究所西安710119 延安大学医学院延安716000 西安交通大学医学院第二附属医院心内科西安710004

高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)可以有效促进人体内胆固醇的代谢外排,其水平的高低与患心血管疾病的风险呈负相关关系,是心血管疾病的预防与保护因素。厘清我国中老年人群HDL-C水平的地理分异特征及环境影响因素,对我国心血管疾病防治工作... 详细信息

高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)可以有效促进人体内胆固醇的代谢外排,其水平的高低与患心血管疾病的风险呈负相关关系,是心血管疾病的预防与保护因素。厘清我国中老年人群HDL-C水平的地理分异特征及环境影响因素,对我国心血管疾病防治工作的开展有重要意义。论文基于中国中老年人纵向追踪调查,利用全局空间自相关、冷热点分析等方法阐释中国中老年人群HDL-C水平的空间分异特征及变化趋势,同时对比引入随机森林回归模型及多元线性回归方法探讨HDL-C水平空间分布的环境影响因素及其指示作用。结果表明:中国中老年人群HDL-C水平表现为女性高于男性、农村高于城镇,具有明显的地域差异性,整体呈现出“北低南高,中间过渡”的分布格局,且北方出现了以内蒙古、河北、辽宁为代表的低值聚集区,南方出现了以广东、广西、云南为代表的高值聚集区;SO_(2)、NO_(2)、降水、气压、PM_(10)和PM_(2.5)是影响中老年人群HDL-C水平差异分布的主要环境因素,其中高浓度的空气污染物是造成HDL-C值较低的危险因素,充沛的降水和低压环境是防治HDL-C值较低的保护因素。因此,今后关于HDL-C血脂异常防控工作在全国各地应注重其空间分布规律,重点加强对HDL-C低值区的监测,以达到因地制宜、精准防控的目的。

关键词：中老年人群高密度脂蛋白胆固醇时空变化特征气象条件空气污染空间相关分析随机森林影响因素

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国产人工前庭的工作原理及原型机构建

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临床耳鼻咽喉头颈外科杂志 2022年第9期36卷 690-697页

作者：任鹏宇张青韩鹏徐颂华徐创新李宗芳杨军西安交通大学第二附属医院医学人工智能研究院西安710016 西安交通大学第二附属医院神经外科上海交通大学医学院附属新华医院耳鼻咽喉-头颈外科上海交通大学医学院耳科学研究所上海耳鼻疾病转化医学重点实验室西安交通大学医学院第一附属医院耳鼻咽喉-头颈外科

目的:完成具有自主知识产权的国产人工前庭工作原理设计及原型机构建,并验证其工作性能,为人工前庭临床推广应用奠定基础。方法:在既往研究的基础上,以前庭神经系统信息编码原则为核心,构建国产多通道人工前庭的工作原理,并依据该原理... 详细信息

目的:完成具有自主知识产权的国产人工前庭工作原理设计及原型机构建,并验证其工作性能,为人工前庭临床推广应用奠定基础。方法:在既往研究的基础上,以前庭神经系统信息编码原则为核心,构建国产多通道人工前庭的工作原理,并依据该原理进行电路设计;选择合适电子元器件以及软件系统,构建国产多通道人工前庭原型机;通过性能测试,验证该原型机的输入、输出特性。结果:成功设计了国产多通道人工前庭工作原理框图,并依据此框图进行了工作原理的详细阐明;依据工作原理,设计并绘制了国产多通道人工前庭电路图,并依据电路图布局将所选的电子元器件以及软件系统有机组合起来,完成国产多通道人工前庭原型机的构建;性能测试实验表明,国产多通道人工前庭原型机各个刺激电极能够输出双相脉冲电流,能够感知空间旋转运动并且依据旋转运动数据输入调制输出的脉冲电流频率。结论:国产多通道人工前庭工作原理及电路设计合理;国产多通道人工前庭原型机构建成功,空间旋转运动感知输入及调制脉冲电流输出稳定且可靠。

关键词：多通道人工前庭工作原理电路设计原型机构建双侧前庭病

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MicroRNA在软骨损伤退变中作用机制的研究进展

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中国骨伤 2012年第6期28卷 530-534页

作者：余强李浩鹏郭雄西安交通大学医学院硕士研究生陕西西安710061 西安交通大学医学院第二附属医院骨科陕西西安710004 西安交通大学医学院公共卫生系地方病研究所

MicroRNA(miRNA)是一种在转录后水平调控基因表达的非编码蛋白的RNA分子,参与了各种重要的细胞生物学过程,如细胞增殖、分化、凋亡和脂代谢等。软骨损伤退变可引起多种骨关节疾病,尚无有效的治疗手段。目前研究已发现,miRNA在软骨细胞... 详细信息

MicroRNA(miRNA)是一种在转录后水平调控基因表达的非编码蛋白的RNA分子,参与了各种重要的细胞生物学过程,如细胞增殖、分化、凋亡和脂代谢等。软骨损伤退变可引起多种骨关节疾病,尚无有效的治疗手段。目前研究已发现,miRNA在软骨细胞增殖分化以及合成与分解代谢中起重要作用。随着miRNA新的靶目标的研究发现,其重要作用进一步被证实。本综述总结了miRNA的合成与功能,及其在软骨损伤退变中的具体作用及调节机制。认为miRNA在软骨损伤退变所致疾病的发病机制中起重要作用,在诊断和治疗中有重要的潜在价值,为治疗退变性疾病提供了一种新的思路。

关键词：微核糖核酸类软骨细胞软骨分子作用机制

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米非司酮对大鼠胚胎神经干细胞存活、增殖及分化的影响

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基础医学与临床 2013年第5期33卷 537-541页

作者：冯敏娟王媛媛焦倩杨志倩邢兰英吕海侠刘勇西安交通大学医学院神经生物学研究所陕西西安710061 西安交通大学医学院第二附属医院妇产科陕西西安710004

目的观察米非司酮处理后大鼠胚胎神经干细胞(NSCs)增殖、凋亡和分化变化,分析其对神经发育的可能影响。方法以不同浓度米非司酮处理体外培养的NSCs,通过活细胞计数、流式细胞仪检测细胞周期及线粒体膜电位、免疫细胞化学染色等方法检测N... 详细信息

目的观察米非司酮处理后大鼠胚胎神经干细胞(NSCs)增殖、凋亡和分化变化,分析其对神经发育的可能影响。方法以不同浓度米非司酮处理体外培养的NSCs,通过活细胞计数、流式细胞仪检测细胞周期及线粒体膜电位、免疫细胞化学染色等方法检测NSCs存活、增殖、凋亡及分化情况。结果 10-5mol/L米非司酮处理后NSCs存活和增殖明显下降(P<0.05),10-6和10-8mol/L对细胞无明显影响,而10-7mol/L处理第4天后细胞增殖明显,但其对NSCs线粒体膜电位及增殖指数影响不大;处理后NSCs仍保持多向分化能力,神经元和胶质细胞分化比例与对照组相比无差异。结论大剂量米非司酮抑制NSCs增殖,小剂量则促进细胞增殖、不影响NSCs命运决定。

关键词：米非司酮神经干细胞增殖分化凋亡

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慢型克山病患者血清蛋白质双向凝胶电泳图谱分析

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四川大学学报（医学版） 2013年第3期44卷 388-392页

作者：孙玉晓朱延河朱建宏牛小麟阎超杨光林琳西安交通大学医学院第二附属医院心内科地方病科西安710004 西安交通大学环境与疾病相关基因教育部重点实验室医学院地方病研究所西安710061

目的分析克山病(KD)患者差异表达的血清蛋白质。方法以慢型KD和正常血清标本为研究对象,利用双向凝胶电泳(2-DE)分离KD和健康人血清蛋白质,银染显色,PowerLook2100XL扫描仪(Umax)透射扫描获取图像,ImageMaster 2DPlatinum 5.0软件分析... 详细信息

目的分析克山病(KD)患者差异表达的血清蛋白质。方法以慢型KD和正常血清标本为研究对象,利用双向凝胶电泳(2-DE)分离KD和健康人血清蛋白质,银染显色,PowerLook2100XL扫描仪(Umax)透射扫描获取图像,ImageMaster 2DPlatinum 5.0软件分析图像。并通过与ExPASy-SWISS-2DPAGE数据库关联,推测KD相关的差异蛋白。结果建立了稳定的慢型KD和健康人血清蛋白质2-DE图谱,分别检测到808和814个蛋白质点,匹配率96.5475%。软件分析显示2组样本共有44个差异蛋白质点,11个仅在KD组血清中表达,12个仅在正常血清组出现,21个为共有蛋白但在表达量上存在差异(KD组14个上调、7个下调,差异倍数≥3倍,P<0.01)。将差异蛋白与ExPASy-SWISS-2DPAGE数据库关联,在匹配值范围内出现的353个蛋白中,仅比对出KD2-DE图谱胶内编号为1177的蛋白点在属性上与数据库中的P02774 2-D0004T6名为维生素D结合蛋白(VDBP)匹配度最高,推测编号为1177的差异蛋白是VDBP。结论 KD患者与正常人血清蛋白质组存在明显差异。推测VDBP可能通过炎症免疫反应途径参与了KD的心肌损伤。

关键词：克山病血清蛋白质组学 2-DE(双向凝胶电泳)

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艾拉莫德(T-614)在类风湿关节炎基础实验与临床疗效的研究进展

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中国新药杂志 2013年第9期22卷 1052-1055页

作者：刘丹陈妤丁汉飞陈庆平李可西安市第五医院西安市风湿病研究所西安交通大学医学院第二附属医院

类风湿关节炎(RA)是一种慢性全身性关节炎性自身免疫性疾病,累及多关节肿痛、活动受限和畸形,病因复杂,最终可导致残疾,对社会产生严重危害,专科治疗药物有限。艾拉莫德(T-614)是我国于2012年2月首发上市的用于治疗RA的1.1类新药,在风... 详细信息

类风湿关节炎(RA)是一种慢性全身性关节炎性自身免疫性疾病,累及多关节肿痛、活动受限和畸形,病因复杂,最终可导致残疾,对社会产生严重危害,专科治疗药物有限。艾拉莫德(T-614)是我国于2012年2月首发上市的用于治疗RA的1.1类新药,在风湿免疫领域中备受关注。本文综述T-614在RA中关节炎症的基础实验,包括减轻炎症反应,抑制滑膜生长、促进骨形成,抑制破骨细胞作用等研究和多项多中心临床疗效观察。证实T-614是治疗作用明确,效果良好的新型免疫抑制剂,在风湿免疫治疗领域具有重要价值。

关键词：艾拉莫德类风湿关节炎基础研究临床疗效

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采用杆状病毒表达系统表达EGFP标记的HPV-16L1病毒样颗粒

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中华微生物学和免疫学杂志 2007年第3期27卷 207-212页

作者：杨军王一理司履生西安交通大学医学院第二附属医院病理科 710004 西安交通大学医学院生物医学信息工程教育部重点实验室生命科学与技术学院癌症研究所710061

目的制备增强型绿色荧光蛋白（EGFP）标记的人乳头状瘤病毒16型（HPV-16）病毒样颗粒，为研究HPV-16L1的生物学活性提供一种方法。方法采用Xbal＋HindⅢ双酶切pGEM-T-HPV-16质粒，获得HPV-16L1基因片段，用PCR法从pEGFP质粒中扩增EGFP... 详细信息

目的制备增强型绿色荧光蛋白（EGFP）标记的人乳头状瘤病毒16型（HPV-16）病毒样颗粒，为研究HPV-16L1的生物学活性提供一种方法。方法采用Xbal＋HindⅢ双酶切pGEM-T-HPV-16质粒，获得HPV-16L1基因片段，用PCR法从pEGFP质粒中扩增EGFP基因片段，NcoⅠ＋SalⅠ双酶切，依次克隆入杆状病毒转移载体，获得重组pFB-EGFP-HPV-16L1转移载体；在DHIOBac内通过转座子Tn7的介导，获得重组Ac-EGFP-HPV-16L1杆状病毒；感染Sf-9昆虫细胞；荧光显微镜、激光共聚焦显微镜和免疫组织化学法确定融合蛋白的荧光特性及细胞学定位；利用Western blot分析融合蛋白的表达；电子显微镜观察病毒样颗粒（VLP）的形成；利用小鼠红细胞凝集试验及凝集抑制试验分析生物学活性。结果重组pFB-EGFP-HPV-16L1辅助表达载体及重组杆状病毒中EGFP-HPV-16L1融合基因构建正确；荧光显微镜和激光共聚焦显微镜证实感染重组杆状病毒AC-EGFP-HPV-16L1的Sf-9细胞核内可见耀眼的绿色荧光，免疫组织化学证实EGFP-HPV-16L1融合蛋白主要位于Sf-9细胞核内；Western blot证实EGFP-HPV-16L1融合蛋白相对分子质量（Mr）为83×10^3，与理论值一致；透射电子显微镜观察发现感染重组Ac-EGFP-HPV-16L1杆状病毒的Sf-9细胞核内和裂解上清内均可发现大量形态均一的vIJP形成；小鼠红细胞凝集试验证实EGFP-HPV-16L1融合蛋白可引起小鼠红细胞凝集，且可被抗HPV-16L1单克隆抗体抑制。结论杆状病毒表达系统表达的EGFP标记的HPV-16L1蛋白既能自组装成病毒样颗粒、具有构象依赖性生物学活性，又能发射易于检测的绿色荧光，有可能用于HPV-16L1蛋白的生物行为研究，并实时可视化追踪其在宿主细胞内的转运过程。

关键词：人乳头状瘤病毒16型重组杆状病毒增强型绿色荧光蛋白病毒样颗粒融合蛋白

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