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PD-L1单抗加强紫杉醇联合香菇多糖体外抗人乳腺癌MDA-MB-231作用

西安交通大学学报(医学版) 2025年第1期46卷 94-100页

作者：李汾平娜娜曾菊绒胥晓丽刘鹏西安医学院药理学和毒理学教研室陕西西安710021 陕西省血液中心陕西西安710061

目的探讨程序性细胞死亡-配体1(PD-L1)单抗、紫杉醇(PTX)联合香菇多糖(LNT)体外对人乳腺癌细胞(MDA-MB-231)的作用。方法将MDA-MB-231、人外周血单个核细胞(PBMC)和MDA-MB-231+PBMC共培养,随机分为对照组、PTX组、LNT组、MPDL3280A(PD... 详细信息

目的探讨程序性细胞死亡-配体1(PD-L1)单抗、紫杉醇(PTX)联合香菇多糖(LNT)体外对人乳腺癌细胞(MDA-MB-231)的作用。方法将MDA-MB-231、人外周血单个核细胞(PBMC)和MDA-MB-231+PBMC共培养,随机分为对照组、PTX组、LNT组、MPDL3280A(PD-L1单抗)组、PTX+LNT组和PTX+LNT+MPDL3280A组。采用CCK8检测细胞的活性;流式细胞术检测MHC-I和PD-L1的表达;ELISA试剂盒检测IFN-γ和TNF-α的含量。结果与对照组相比,PTX组、MPDL3280A组、PTX+LNT组及PTX+LNT+MPDL3280A组显著抑制MDA-MB-231的活性(P<0.01);LNT组和PTX+LNT+MPDL3280A组显著促进PBMC的免疫作用(P<0.05,P<0.01);PTX+LNT+MPDL3280A组显著抑制MDA-MB-231+PBMC共培养MDA-MB-231的活性(0.56±0.16 vs. 0.39±0.13,P<0.05);LNT显著促进MDA-MB-231上PD-L1的表达和PBMC分泌IFN-γ(P<0.05)。结论 PD-L1单抗通过阻断PD-L1与PD-1之间的作用,提高免疫,促进PTX联合LNT的体外抗三阴性乳腺癌作用。

关键词：程序性细胞死亡-配体1(PD-L1)单抗紫杉醇(PTX) 香菇多糖(LNT) 抗人乳腺癌MDA-MB-231

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3,4-二羟基-5-硝基苯甲醛对小鼠及鹌鹑高尿酸血症模型的降尿酸作用比较

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西安交通大学学报（医学版） 2022年第6期43卷 827-832页

作者：李汾张光伟李新华曾菊绒胥晓丽弥曼西安医学院药理学和毒理学教研室陕西西安710021

目的观察3,4-二羟基-5-硝基苯甲醛(3,4-dihydroxy-5-nitrobenzaldehyde, DHNB)对小鼠及鹌鹑高尿酸血症模型的降尿酸作用,完善高尿酸血症模型的药效学验证。方法氧嗪酸钾(potassium oxonate, PO)300 mg/kg腹腔注射制备小鼠高尿酸血症... 详细信息

目的观察3,4-二羟基-5-硝基苯甲醛(3,4-dihydroxy-5-nitrobenzaldehyde, DHNB)对小鼠及鹌鹑高尿酸血症模型的降尿酸作用,完善高尿酸血症模型的药效学验证。方法氧嗪酸钾(potassium oxonate, PO)300 mg/kg腹腔注射制备小鼠高尿酸血症动物模型;30 g/(kg·d)的酵母粉混合饲料(酵母粉∶饲料为1∶4)制备鹌鹑高尿酸血症动物模型。于小鼠高尿酸血症模型造模前1 h腹腔注射DHNB 100 mg/kg;连续2 d灌胃DHNB 100 mg/kg处理鹌鹑高尿酸血症模型。另设对照组。生化试剂盒检测各组小鼠及鹌鹑血清尿酸(serum uric acid, SUA)、谷草转氨酶(aspartate aminotransaminase, AST)、谷丙转氨酶(alanine aminotransaminase, ALT)、肌酐(creatinine, Cr)和尿素氮(blood urea nitrogen, BUN)。取小鼠及鹌鹑的心、肺、肝和肾组织进行HE染色。结果小鼠及鹌鹑高尿酸血症模型组SUA均高于对照组[(277.37±94.89)μmol/L vs.(176.49±44.83)μmol/L,P<0.05;(313.58±191.87)μmol/L vs.(167.26±66.56)μmol/L,P<0.05],提示造模成功。DHNB不能降低高尿酸血症小鼠模型SUA[(277.37±94.89)μmol/L vs.(238.72±63.43)μmol/L,P>0.05],但明显降低高尿酸血症鹌鹑模型SUA[(313.58±191.87)μmol/L vs.(160.44±49.90)μmol/L,P<0.05]。DHNB 100 mg/kg给药对小鼠和鹌鹑肝肾功无影响,且对小鼠和鹌鹑心、肺、肝和肾组织无毒性。结论 DHNB对高尿酸血症鹌鹑模型具有降尿酸作用,且单次给予降尿酸剂量对小鼠及鹌鹑脏器无明显毒性。鹌鹑高尿酸血症模型比小鼠高尿酸血症模型更适用于DHNB降尿酸药效的验证。

关键词： 3,4-二羟基-5-硝基苯甲醛(DHNB) 小鼠鹌鹑高尿酸血症模型尿酸

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橙皮素通过激活SIRT1/NRF2信号改善阿霉素诱导的H9c2细胞毒性

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四川大学学报（医学版） 2023年第5期54卷 947-953页

作者：李新华闫爱丽常晋瑞李汾朱娟霞西安医学院药理学与毒理学教研室西安710021 西安医学院病理学教研室西安710021 西安医学院生理学教研室西安710021

目的本研究旨在探讨橙皮素(hesperetin,Hes)能否通过调控沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)/核转录因子E2相关因子2(nuclear transcription factor E2-related factor 2,NRF2)信号减轻氧化应激改善阿霉素(doxorubicin,DOX)诱导的H9c2心肌细胞毒性。方法采用DOX诱导的H9c2心肌细胞毒性模型,随机分为4组:对照组(Control)、DOX处理组(DOX)、Hes加DOX处理组(DOX+Hes)以及Hes加SIRT1抑制剂EX527联合DOX处理组(DOX+Hes+EX527)。光镜下观察细胞形态,CCK-8检测各组细胞活力,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,DCFH-DA染色观察各组ROS水平,ELISA试剂盒检测乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)和SIRT1活性以及丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,Western blot检测裂解的caspase-3(cleaved caspase-3)、细胞色素c(cytochrome c)、SIRT1、Ac-FOXO1、NRF2和血红素加氧酶1(heme oxygenase1,HO-1)的表达。结果和Control组相比,DOX组细胞形态肿胀,密度减小,细胞活力降低,培养基中LDH活性增加(P<0.01);细胞凋亡增多,cleaved caspase-3和cytochrome c表达增加(P<0.01);CAT和SOD活性降低,MDA含量和ROS水平增加(P<0.01);SIRT1、NRF2和HO-1表达以及SIRT1活性降低,Ac-FOXO1表达增加(P<0.01);与DOX组相比,DOX+Hes组细胞形态改善,密度和细胞活力增加,培养基中LDH活性降低(P<0.01);细胞凋亡减少,cleaved caspase-3和cytochrome c表达降低(P<0.01);CAT和SOD活性升高,MDA含量和ROS水平降低(P<0.01);SIRT1、NRF2和HO-1表达以及SIRT1活性增加,Ac-FOXO1表达降低(P<0.01);而与DOX+Hes组相比,EX527阻断Hes对DOX诱导的H9c2细胞损伤、氧化应激和SIRT1/NRF2信号的作用。结论Hes可以通过调控SIRT1/NRF2信号抑制氧化应激和细胞凋亡减轻DOX诱导的H9c2心肌细胞毒性。

关键词：橙皮素氧化应激 SIRT1/NRF2 H9c2细胞阿霉素

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胰岛素与硒对链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠心肌胰岛素信号转导的联合作用

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药学学报 2011年第3期46卷 274-279页

作者：徐天娇袁秉祥邹亚敏西安医学院药理学与毒理学教研室陕西西安710021 西安交通大学医学院药理学教研室陕西西安712000

为阐明小剂量胰岛素(***-1)与硒(180μ***-1)对糖尿病大鼠糖脂代谢及其对心肌细胞胰岛素信号分子表达的联合作用,采用One TouchⅡ血糖仪和血糖试纸测定血糖水平;微柱法测定糖化血红蛋白浓度;酶学法测定甘油三酯(TG)和总胆固醇(TC)含量;... 详细信息

为阐明小剂量胰岛素(***-1)与硒(180μ***-1)对糖尿病大鼠糖脂代谢及其对心肌细胞胰岛素信号分子表达的联合作用,采用One TouchⅡ血糖仪和血糖试纸测定血糖水平;微柱法测定糖化血红蛋白浓度;酶学法测定甘油三酯(TG)和总胆固醇(TC)含量;免疫印迹和免疫组化法检测心肌细胞中PI3K和GLUT4表达的变化。结果表明,联合用药组血糖和血脂明显下降(P<0.01);同时联合用药明显增加糖尿病大鼠心肌细胞上PI3K和GLUT4的表达(P<0.01)。整体动物实验结果表明:胰岛素和硒联合应用在降低血糖和血脂方面发挥了协同作用;胰岛素与硒联合应用通过改善糖尿病大鼠心肌细胞胰岛素信号转导通路中PI3K的表达,从而改善了GLUT4的移位障碍,最终改善心肌的能量代谢。

关键词：糖尿病大鼠胰岛素亚硒酸钠磷脂酰肌醇3激酶葡萄糖转运蛋白4 心肌

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苹果粗多糖抑制胃腺癌SGC7901细胞增殖的研究

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中国肿瘤临床 2010年第15期37卷 850-852,861页

作者：李汾弥曼李新华贾敏杨颖西安医学院药理学与毒理学教研室西安市710021 西安医学院科研中心西安市710021

目的:经多年实验研究,多糖具有体外及体内抗肿瘤作用,而体外抗肿瘤实验是抗肿瘤药物进行初步筛选的主要方法。我国苹果资源丰富,苹果粗多糖具有一定开发价值,从新鲜苹果中提取苹果粗多糖,并对其进行体外抗胃腺癌SGC7901肿瘤细胞增殖的... 详细信息

目的:经多年实验研究,多糖具有体外及体内抗肿瘤作用,而体外抗肿瘤实验是抗肿瘤药物进行初步筛选的主要方法。我国苹果资源丰富,苹果粗多糖具有一定开发价值,从新鲜苹果中提取苹果粗多糖,并对其进行体外抗胃腺癌SGC7901肿瘤细胞增殖的研究。方法:采用醇沉法从新鲜苹果中提取粗多糖。新鲜苹果榨汁,取果汁经透析法除色素、Sevage法除蛋白、乙醇沉淀、冰冻干燥后得苹果粗多糖。采用MTF法观察苹果粗多糖不同作用时间、不同剂量对胃腺癌SGC7901肿瘤细胞增殖的抑制作用;采用集落形成实验法观察苹果粗多糖对胃腺癌SGC7901肿瘤细胞克隆形成率的影响。结果:获取苹果粗多糖,多糖获取率为0.1%。MTT法显示,苹果粗多糖(0.5,0.1,0.02mg/mL)在48h对体外胃腺癌SGC7901肿瘤细胞均有不同程度抑制作用(P<0.05),其中中浓度组和高浓度组的肿瘤抑制率分别达到10.8%和18.9%。在24h及72h抑制作用不明显。集落形成实验法显示,随着多糖给药量增加(0.02、0.1、0.5mg/mL)胃腺癌SGC7901肿瘤细胞集落形成率依次呈现97.10±2.33、95.30±3.62、93.6±5.66的下降趋势。结论:苹果粗多糖对胃腺癌SGC7901肿瘤细胞有较强的体外抗肿瘤作用,并呈现一定的量效关系。

关键词：苹果粗多糖抑制胃腺癌SGC7901

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Klotho蛋白对帕金森病模型小鼠的神经保护作用

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中国老年学杂志 2009年第17期29卷 2190-2192页

作者：杜洪霞张湛睿弥曼西安医学院药理学与毒理学教研室陕西西安710021

目的观察Klotho蛋白对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导所致C57BL/6小鼠黑质神经元损伤的保护作用,并探讨其可能的保护机制。方法C57BL/6小鼠分4组:野生型(WT)生理盐水(NS)对照(WT+NS)组,野生型MPTP(WT+MPTP)组,Klotho蛋白高... 详细信息

目的观察Klotho蛋白对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导所致C57BL/6小鼠黑质神经元损伤的保护作用,并探讨其可能的保护机制。方法C57BL/6小鼠分4组:野生型(WT)生理盐水(NS)对照(WT+NS)组,野生型MPTP(WT+MPTP)组,Klotho蛋白高表达型(KO)生理盐水对照组(KO+NS),Klotho蛋白高表达型MPTP组(KO+MPTP)。WT+MPTP组和KO+MPTP组小鼠皮下注射MPTP(20mg/kg),连用2d制备帕金森病(PD)模型;WT+NS和KO+NS皮下注射等体积生理盐水。用酪氨酸羟化酶(TH)免疫组织化学法观察黑质神经元的变化;应用高效液相电化学方法(HPLC)检测纹状体(Str)多巴胺(DA)及其代谢产物3,4-二羟基苯乙酸(DOPAC)和高香草酸(HVA)的含量变化。结果KO+MPTP组黑质致密带(SNc)TH免疫阳性神经元数目较KO+NS组有所减少,但差异不显著;而WT+MPTP组SNc区TH免疫阳性神经元数目较WT+NS组明显减少(P<0.01)。KO+MPTP组小鼠Str区DA及其代谢产物DOPAC含量较KO+NS减少,但差异不显著,HVA含量的改变差异显著(P<0.05);而WT+MPTP组DA及其代谢产物DOPAC、HVA含量较WT+NS明显减少(P<0.01)。结论Klotho蛋白可以拮抗MPTP对小鼠黑质多巴胺能神经元损伤,其机制可能因为Klotho蛋白是成纤维细胞生长因子23(FGF23)信号转导中其受体的基本辅助因子及抗氧化应激作用有关。

关键词： Klotho蛋白帕金森病多巴胺能神经元黑质

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Klotho蛋白对C57BL/6小鼠黑质神经元数目的影响

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中国老年学杂志 2010年第12期30卷 1709-1711页

作者：杜洪霞周芳张湛睿李新华弥曼西安医学院药理学与毒理学教研室陕西西安710021

目的观察Klotho蛋白对C57BL/6小鼠黑质神经元数目的影响并探讨其可能机制。方法 C57BL/6小鼠分3组:野生型雄性小鼠(WT),Klotho基因过表达型(Tg)小鼠,Klotho基因敲除鼠(KO)各6只,行为学观察及体重测定,用酪氨酸羟化酶(TH)免疫组织化学法... 详细信息

目的观察Klotho蛋白对C57BL/6小鼠黑质神经元数目的影响并探讨其可能机制。方法 C57BL/6小鼠分3组:野生型雄性小鼠(WT),Klotho基因过表达型(Tg)小鼠,Klotho基因敲除鼠(KO)各6只,行为学观察及体重测定,用酪氨酸羟化酶(TH)免疫组织化学法观察黑质神经元的变化。结果 KO小鼠与WT、Tg组小鼠相比体重明显降低(P<0.01)。WT组小鼠与Tg组小鼠相比体重差别不显著(P>0.05);与WT小鼠相比KO组小鼠脑黑质神经原数目上调而Tg组小鼠脑黑质神经原数目下调,三组间均有显著性差异(P<0.01)。结论 Klotho基因可影响黑质纹状体内多巴胺能神经元的数目。与WT组小鼠相比KO小鼠脑黑质神经原数目上调而Tg小鼠脑黑质神经原数目下调,可能是Klotho-FGF23共受体存在负反馈调节机制的影响。

关键词： Klotho蛋白多巴胺能神经元黑质

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百合多糖1可增强二甲双胍对乳腺癌细胞的抗增殖作用并促进其凋亡

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细胞与分子免疫学杂志 2016年第6期32卷 780-783,788页

作者：侯进李汾李新华梅其炳弥曼西安医学院基础医学部药理学与毒理学教研室陕西西安710021 第四军医大学药理学教研室陕西西安710032

目的研究百合多糖1(LP1)对二甲双胍的抗乳腺癌细胞作用的影响。方法培养MCF-7乳腺癌细胞,加入(0.5、1.0)mg/m L LP1和(5、10、20、50)mmol/L的二甲双胍,MTT法检测LP1和二甲双胍对MCF-7细胞增殖的影响;异硫氰酸荧光素标记的膜联素Ⅴ/碘... 详细信息

目的研究百合多糖1(LP1)对二甲双胍的抗乳腺癌细胞作用的影响。方法培养MCF-7乳腺癌细胞,加入(0.5、1.0)mg/m L LP1和(5、10、20、50)mmol/L的二甲双胍,MTT法检测LP1和二甲双胍对MCF-7细胞增殖的影响;异硫氰酸荧光素标记的膜联素Ⅴ/碘化丙啶(annexinⅤ-FITC/PI)双染色结合流式细胞术观察细胞周期和细胞凋亡;Western blot法检测Bcl-2、Bax、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)和磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(p-AMPK)蛋白含量。结果 1 mg/m L LP1可以增强二甲双胍的抗增殖作用、细胞周期阻滞于G1期作用和诱导细胞凋亡作用。LP1处理增强二甲双胍对Bcl-2蛋白的下调和Bax蛋白的上调作用,但不影响二甲双胍对MAPK通路的激活作用。结论 LP1增强二甲双胍对MCF-7乳腺癌细胞的抗增殖作用,促进细胞凋亡,其机制与凋亡蛋白Bcl-2和Bax参与有关。

关键词： MCF-7细胞百合多糖1(LP1) 二甲双胍

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泛素连接酶Cbl-b调控p38MAPK在胰岛素与硒协同抑制糖尿病心肌病大鼠心肌细胞凋亡中的作用

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中国药理学通报 2016年第8期32卷 1170-1174页

作者：徐天娇刘勇李萍胥晓丽曾菊绒西安医学院药理学与毒理学教研室陕西西安710021 延安大学咸阳医院老年病科陕西咸阳712000

目的初步探讨胰岛素和硒协同抑制糖尿病心肌病大鼠心肌细胞凋亡的机制。方法 SD大鼠50只,随机分为空白对照组(Control组)、糖尿病心肌病模型组(DCM组)、糖尿病心肌病+胰岛素组(DCM+In组)、糖尿病心肌病+硒组(DCM+Se组)、糖尿病心肌病+... 详细信息

目的初步探讨胰岛素和硒协同抑制糖尿病心肌病大鼠心肌细胞凋亡的机制。方法 SD大鼠50只,随机分为空白对照组(Control组)、糖尿病心肌病模型组(DCM组)、糖尿病心肌病+胰岛素组(DCM+In组)、糖尿病心肌病+硒组(DCM+Se组)、糖尿病心肌病+胰岛素+硒组(DCM+In+Se组)。TUNEL法观察心肌细胞凋亡;Western blot观察凋亡相关蛋白Bcl-2、caspase-3和PARP剪切片段的变化,同时观察Cbl-b和p38MAPK表达变化;免疫沉淀法检测Cbl-b与p38MAPK、Ku70与Bax之间的相互作用。结果胰岛素与硒协同抑制心肌细胞凋亡(P<0.01);胰岛素联合硒协同,增加Cbl-b的表达,降低p38MAPK表达(P<0.01);两药联合协同增加Cbl-b与p38MAPK、Ku70与Bax之间的相互作用(P<0.01)。结论胰岛素与硒通过调控Cbl-b,抑制p38MAPK而阻止Bax转位来协同抑制心肌细胞凋亡。

关键词：胰岛素硒糖尿病心肌病凋亡 Cbl-b p38丝裂原活化蛋白激酶 Ku70

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百合多糖联合大蒜素对肝癌H22荷瘤小鼠肿瘤生长及血清细胞因子水平的影响

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现代肿瘤医学 2021年第23期29卷 4114-4118页

作者：李汾李新华曾菊绒胥晓丽弥曼西安医学院药理与毒理学教研室陕西西安710021

目的:探讨百合多糖联合大蒜素对肝癌H22荷瘤小鼠肿瘤生长及血清细胞因子水平的影响。方法:雄性BALB/c小鼠腋下注射肝癌H22细胞计数瘤液建立荷瘤模型,分为百合多糖组(100 mg/kg)、大蒜素组(40 mg/kg)、百合多糖低剂量+大蒜素组(50 mg/kg+... 详细信息

目的:探讨百合多糖联合大蒜素对肝癌H22荷瘤小鼠肿瘤生长及血清细胞因子水平的影响。方法:雄性BALB/c小鼠腋下注射肝癌H22细胞计数瘤液建立荷瘤模型,分为百合多糖组(100 mg/kg)、大蒜素组(40 mg/kg)、百合多糖低剂量+大蒜素组(50 mg/kg+40 mg/kg)、百合多糖中剂量+大蒜素组(100 mg/kg+40 mg/kg)、百合多糖高剂量+大蒜素组(150 mg/kg+40 mg/kg)、正常组、模型组和环磷酰胺组(30 mg/kg)。处理7 d后,观察小鼠的肿瘤重量,计算抑瘤率;胸腺、脾脏称重,计算胸腺指数和脾脏指数;ELISA法检测血清免疫相关细胞因子IL-18、TNF-α、IFN-γ、IL-2、IL-6水平及促血管生长因子VEGF水平。结果:大蒜素组、百合多糖中剂量+大蒜素组、百合多糖高剂量+大蒜素组抑瘤率分别为27.27%、34.68%和30.64%。百合多糖中剂量+大蒜素组和百合多糖高剂量+大蒜素组胸腺指数明显高于模型组(P<0.01)。百合多糖高剂量+大蒜素组较模型组明显升高IL-18水平(P<0.01)。百合多糖中剂量+大蒜素组TNF-α水平高于模型组(P<0.05)。百合多糖中剂量+大蒜素组较模型组明显升高IL-2水平(P<0.01)。百合多糖高剂量+大蒜素组较模型组降低VEGF水平(P<0.05)。结论:百合多糖联合大蒜素能抑制肝癌H22荷瘤小鼠肿瘤的生长,提高荷瘤小鼠的胸腺指数,并促进小鼠分泌免疫相关细胞因子IL-18、TNF-α、IL-2,减少分泌VEGF。

关键词：百合多糖大蒜素肝癌细胞因子

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