检索结果-内蒙古大学图书馆

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2002年第3期20卷 161-163页

作者：何宏轩张西臣欧阳红生徐卫东陈建宝尹继刚李建华杨举解放军军需大学动物科技系预防兽医学教研室长春130062

目的　对微小隐孢子虫子孢子表面蛋白CP2 3编码区基因gp2 3进行克隆及测序。　方法　提取牛源微小隐孢子虫卵囊基因组DNA ,用聚合酶链反应 (PCR)扩增编码CP2 3的基因 ,然后将其克隆到 pMD1 8 T载体中 ,用双脱氧链末端终止法测DNA序列。... 详细信息

目的　对微小隐孢子虫子孢子表面蛋白CP2 3编码区基因gp2 3进行克隆及测序。　方法　提取牛源微小隐孢子虫卵囊基因组DNA ,用聚合酶链反应 (PCR)扩增编码CP2 3的基因 ,然后将其克隆到 pMD1 8 T载体中 ,用双脱氧链末端终止法测DNA序列。　结果与结论　获得了CP2 3的编码区基因 ,克隆出的 gp2 3基因的核苷酸与氨基酸序列长分别为 345bp和 1 1 4aa,有一个开放阅读框 ,与GenBank报道的 gp2 3基因比较 ,同源性分别为 97.3 %与 98 2 % ,在 2 32～ 2 38bp处多了 6bp。

关键词：微小隐孢子虫 gp23基因基因克隆序列分析聚合酶链反应隐孢子虫核酸疫苗

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

微小隐孢子虫种特异性基因片段的克隆及诊断引物的确定

引用

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2002年第2期20卷 72-75页

作者：田宗成张西臣李建华尹继刚杨举何宏轩解放军军需大学动物科技系预防兽医学教研室长春130062

目的　寻找用于诊断微小隐孢子虫病的特异性引物。　方法　在RAPD分析过程中获得了 1条微小隐孢子虫 [Cryptosporidium parvum (C .parvum ) ]种特有 712bp的基因片段 ,将该片段分离、纯化、克隆和测序 ,据此序列合成一对特异性引物FF... 详细信息

目的　寻找用于诊断微小隐孢子虫病的特异性引物。　方法　在RAPD分析过程中获得了 1条微小隐孢子虫 [Cryptosporidium parvum (C .parvum ) ]种特有 712bp的基因片段 ,将该片段分离、纯化、克隆和测序 ,据此序列合成一对特异性引物FF。用引物FF扩增美国 2株C .parvum和中国 4株C .parvum ,并用该引物与Morgan( 1996 )发表的C .parvum种特异性诊断引物 0 2 1作对照 ,检测镜检C .parvum卵囊阴性的兔粪样 35份和人粪样 5 5份。　结果　引物FF扩增 6株C .parvum均能产生预计 6 0 3bp的片段 ,引物FF和引物 0 2 1粪样检测结果完全一致 ,其敏感性是可检出 1个卵囊的DNA。　结论　获得的引物FF特异性强 ,敏感性高 ,可用于微小隐孢子虫病的诊断。

关键词：微小隐孢子虫特异性基因片段克隆诊断引物隐孢子虫病

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

微小隐孢子虫子孢子表面蛋白CP15/60编码基因核酸疫苗的研究

引用

中国农业科学 2003年第11期36卷 1357-1361页

作者：何宏轩张西臣尹继刚李建华杨举新乡453003 河南职业技术师范学院动物科学系解放军军需大学军事兽医学军事预防兽医学教研室解放军军需大学军事兽医学军事预防兽医学教研室长春130062 长春130062

将编码CP15 / 6 0的基因插入真核表达载体pcDNA3(+)中构建重组质粒pcDNA3 15 / 6 0 ,然后经鼻粘膜免疫怀孕成年山羊 ,观察其免疫应答的产生情况及其对后代的保护力。结果为抗CP15 / 6 0抗体存在于免疫山羊的血浆和初乳中。pcDNA3 15 / ... 详细信息

将编码CP15 / 6 0的基因插入真核表达载体pcDNA3(+)中构建重组质粒pcDNA3 15 / 6 0 ,然后经鼻粘膜免疫怀孕成年山羊 ,观察其免疫应答的产生情况及其对后代的保护力。结果为抗CP15 / 6 0抗体存在于免疫山羊的血浆和初乳中。pcDNA3 15 / 6 0经鼻粘膜免疫的怀孕山羊产生的免疫力能传给子代 ,使子代对微小隐孢子虫 (Cryp tosporidiumparvum)感染产生保护。CP15 / 6 0 DNA免疫母羊的后代比非免疫母羊的后代排出卵囊少且排卵时间短。这就表明重组质粒pcDNA3 15 / 6 0可作为隐孢子虫候选核酸疫苗

关键词：微小隐孢子虫 CP15/60 核酸疫苗鼻粘膜接种

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

小球隐孢子虫子孢子表面蛋白CP15/60基因的克隆和序列分析

引用

中国预防兽医学报 2002年第3期24卷 182-184页

作者：何宏轩张西臣欧阳红生徐卫东陈建宝尹继刚李建华杨举解放军军需大学动物科技系预防兽医学教研室吉林长春130062

将小球隐孢子虫子孢子表面蛋白 (CP15 / 6 0 )编码区基因克隆及测序 ,并对其抗原决定簇进行分析。抽提牛源小球隐孢子虫孵囊基因组DNA ,用聚合酶链反应 (PCR)扩增编码CP15 / 6 0的基因 ,然后将其克隆到pMD18_T载体中 ,用双脱氧链末端终... 详细信息

将小球隐孢子虫子孢子表面蛋白 (CP15 / 6 0 )编码区基因克隆及测序 ,并对其抗原决定簇进行分析。抽提牛源小球隐孢子虫孵囊基因组DNA ,用聚合酶链反应 (PCR)扩增编码CP15 / 6 0的基因 ,然后将其克隆到pMD18_T载体中 ,用双脱氧链末端终止法测DNA序列。结果 ,用PCR扩增获得了CP15 / 6 0的编码区基因 ,并测定了该基因编码区序列。与GenBank比较 ,核苷酸序列同源性为 :98.9% ;推导的氨基酸序列同源性为 :99.3%。

关键词：小球隐孢子虫子孢子表面蛋白 CP15/60基因序列分析基因克隆 CP15/60基因

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

火鸡隐孢子虫18S核糖体DNA部分序列测定与系统发育分析

引用

中国预防兽医学报 2002年第4期24卷 267-269页

作者：李建华张西臣田宗成尹继刚何宏轩杨举解放军军需大学动物科技系预防兽医学教研室吉林长春130062

从长春地区鸭的粪便中分离纯化了火鸡隐孢子虫 (Cryptosporidiummeleagridis )卵囊 ,根据隐孢子虫 18SrDNA基因序列设计合成引物 ,用PCR扩增了卵囊基因组DNA大小 5 86bp的片段 ,PCR产物经电泳鉴定后用试剂盒回收纯化 ,纯化后PCR产物直... 详细信息

从长春地区鸭的粪便中分离纯化了火鸡隐孢子虫 (Cryptosporidiummeleagridis )卵囊 ,根据隐孢子虫 18SrDNA基因序列设计合成引物 ,用PCR扩增了卵囊基因组DNA大小 5 86bp的片段 ,PCR产物经电泳鉴定后用试剂盒回收纯化 ,纯化后PCR产物直接测序。将测得的序列用Dnastar软件分析并与国外已发表的相应序列进行了同源性比较 ,并绘制了系统发育进化树。结果初步建立了火鸡隐孢子虫的PCR检测方法 ,序列分析显示长春鸭源火鸡隐孢子虫与国外 9株隐孢子虫相应序列同源性在 82 7%～ 99.8%之间 ,其中与国外火鸡源火鸡隐孢子虫相应序列同源性为 85 .3% ;与C .felis同源性最低 ,与C .muris同源性最高。

关键词：隐孢子虫 18S rDNA PCR

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

微小隐孢子虫子孢子表面蛋白质粒DNA接种诱导Balb/c小鼠的免疫应答

引用

免疫学杂志 2002年第4期18卷 263-265页

作者：何宏轩张西臣尹继刚李建华杨举刘明远宣华解放军军需大学动物科技系预防兽医学教研室吉林长春130062

目的　探讨微小隐孢子虫子孢子表面蛋白CP2 3重组质粒pCR3.1～ 2 3DNA疫苗诱导机体产生体液和细胞免疫应答的效果。方法　用重组的DNA疫苗于Balb/c小鼠后腿胫骨前肌注射免疫 ,于 0、3、6周共免疫 3次 ,10 0 μg/次。免疫后不同时间检测... 详细信息

目的　探讨微小隐孢子虫子孢子表面蛋白CP2 3重组质粒pCR3.1～ 2 3DNA疫苗诱导机体产生体液和细胞免疫应答的效果。方法　用重组的DNA疫苗于Balb/c小鼠后腿胫骨前肌注射免疫 ,于 0、3、6周共免疫 3次 ,10 0 μg/次。免疫后不同时间检测体液和细胞免疫应答指标。并用 1× 10 6卵囊进行攻虫试验。结果　pCR3.1～ 2 3可诱导机体产生相应的特异性抗体 ,对C .parvum卵囊攻击具有保护作用。结论　微小隐孢子虫子孢子表面蛋白CP2 3重组质粒pCR3.1～ 2 3有可能作为侯选的隐孢子虫DNA疫苗 ,值得进一步深入研究。

关键词：子孢子表面蛋白微小隐孢子虫 DNA疫苗免疫应答重组质粒隐孢子虫病

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

柔嫩艾美球虫重组质粒pVAX1-Mzp57的免疫保护性试验

引用

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2004年第6期22卷 334-337页

作者：秦睿玲张西臣李建华徐占云尹继刚杨举解放军军需大学军事兽医系军事预防兽医学教研室长春130062 河北北方学院动物医学系宣化075131

目的　用柔嫩艾美球虫 (Eimeriatenella ,E .t)子孢子表面蛋白基因构建的DNA重组质粒免疫海兰小公雏 ,观察其诱导鸡产生的免疫应答反应和对球虫攻击的保护作用。　方法　重组质粒经肌肉和鼻黏膜分别于 7、14、2 8日龄3次接种小公雏 ,用... 详细信息

目的　用柔嫩艾美球虫 (Eimeriatenella ,E .t)子孢子表面蛋白基因构建的DNA重组质粒免疫海兰小公雏 ,观察其诱导鸡产生的免疫应答反应和对球虫攻击的保护作用。　方法　重组质粒经肌肉和鼻黏膜分别于 7、14、2 8日龄3次接种小公雏 ,用间接ELISA、流式细胞仪检测免疫反应。最后一次免疫后 2周经口接种新鲜的E .t孢子化卵囊 ,确定其保护力的大小。　结果　构建的柔嫩艾美球虫重组质粒免疫雏鸡后能诱导有效的细胞免疫和体液免疫 ,表现为CD4+ /CD8+ T细胞比率、特异性抗体滴度明显高于对照组 (P <0 .0 5 )。可对抗中等剂量球虫的攻击 ,试验组和对照组相比 ,攻虫后卵囊排出量显著减少 ,体重增长快 ,盲肠病变较小 ,保护率达 80 %以上。肌注 10 0 μg重组质粒组综合免疫保护效果最好。　结论　构建的重组质粒对鸡柔嫩艾美球虫的攻击有较好的免疫保护作用。

关键词：重组质粒对照组诱导免疫保护性 CD4^+/CD8^+ 免疫后中等剂量柔嫩艾美球虫公雏卵囊

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

微小隐孢子虫CP15/60基因在Hela细胞中的表达

引用

中国生物制品学杂志 2002年第5期15卷 266-268页

作者：何宏轩张西臣欧阳红生尹继刚李建华杨举解放军军需大学动物科技系预防兽医学教研室长春130062

目的构建隐孢子虫CP15/60真核表达载体pcDNA3.1-15/60,观察其在Hela细胞中的表达。方法用Xho I和EcoR　I从pMD18-T-15/60中酶切得到CP 15/60基因,将其插入真核表达载体pCR3.1（+）的 XhoI和EcoRI位点,构建CP15/60真核表达载体pcDNA3.1-15/60,用脂质体介导法将其转染Hela细胞,并用G418加压筛选,用RT-PCR方法检测外源CP15/60基因的转录,ELISA法和间接免疫荧光法检测其活性。结果酶切鉴定表明已成功构建了重组真核表达载体pcDNA3.1-15/60,外源CP15/60基因能在转染细胞中有效转录,经检测表达产物具有良好的生物活性。结论已成功地构建了pcDNA3.1-15/60真核表达载体,并在Hela细胞中具有良好的表达。

关键词：微小隐孢子虫 CP15/60基因 Hela细胞表达真核表达载体

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

微小隐孢子虫CP15基因高效真核表达载体的构建及其在Hela细胞中的表达

引用

中国免疫学杂志 2003年第4期19卷 240-242页

作者：何宏轩张西臣欧阳红生尹继刚李建华杨举河南职业技术师范学院动物科学系新乡453003 解放军军需大学动物科技系预防兽医学教研室长春130062

目的 :构建隐孢子虫CP15真核表达载体pCR3 1 15 ,观察其在Hela细胞中的表达。方法 :用BglⅡ从pMD18 T 15中酶切得到CP15基因 ,将其插入真核表达载体pCR3 1(+)的BamHⅠ位点 ,构建CP15真核表达载体pCR3 1 15 ,脂质体介导法将其转染Hela细... 详细信息

目的 :构建隐孢子虫CP15真核表达载体pCR3 1 15 ,观察其在Hela细胞中的表达。方法 :用BglⅡ从pMD18 T 15中酶切得到CP15基因 ,将其插入真核表达载体pCR3 1(+)的BamHⅠ位点 ,构建CP15真核表达载体pCR3 1 15 ,脂质体介导法将其转染Hela细胞 ,并用G4 18加压筛选 ,用RT PCR方法检测外源CP15基因的转录 ,用ELISA法和间接免疫荧光法检测其活性。结果 :酶切鉴定表明已成功构建了重组真核表达载体pCR3 1 15 ;外源CP15基因能在转染细胞中有效转录 ;ELISA法和间接免疫荧光法实验结果表明表达产物具有良好的生物活性。结论 :构建的pCR3 1 15真核表达载体在Hela细胞中具有良好的表达活性。

关键词：微小隐孢子虫 CPl5基因真核表达载体构建

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

隐孢子虫核酸疫苗研究1.小球隐孢子虫gp15基因的克隆和序列分析

隐孢子虫核酸疫苗研究1.小球隐孢子虫gp15基因的克隆和序列分析

引用

中国原生动物学学会第十一次学术讨论会

作者：何宏轩张西臣欧阳红生尹继刚李建华杨举解放军军需大学动物科学系预防兽医学教研室解放军军需大学动物科学系预防兽医学教研室解放军军需大学动物科学系预防兽医学教研室解放军军需大学动物科学系预防兽医学教研室解放军军需大学动物科学系预防兽医学教研室解放军军需大学动物科学系预防兽医学教研室

小球隐孢子虫子孢子表面蛋白(CP15)是存在于小球隐孢子虫子孢子表面的一种分子量约为15kD的主要蛋白,是隐孢子虫疫苗的一种重要候选抗原,本研究对其基因gp15进行了克隆和序列分析。首先用蔗糖密度梯度离心法对接种犊牛粪便中的小球隐孢... 详细信息

小球隐孢子虫子孢子表面蛋白(CP15)是存在于小球隐孢子虫子孢子表面的一种分子量约为15kD的主要蛋白,是隐孢子虫疫苗的一种重要候选抗原,本研究对其基因gp15进行了克隆和序列分析。首先用蔗糖密度梯度离心法对接种犊牛粪便中的小球隐孢子虫卵囊进行分离纯化,以酚-氯仿抽提法提取的核酸为模板,以Pl 5’

关键词：隐孢子虫克隆和序列分析核酸疫苗

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：