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中国组织工程研究与临床康复 2007年第43期11卷 8649-8652页

作者：黄梁浒陈津王庆华蔡锦全杨顺良吴卫真谭建明解放军南京军区福州总医院全军器官移植中心福建省福州市350025

目的:提高胰岛的分离纯化率是胰岛移植成功的关键,其中胰腺的冷缺血时间是主要影响因素之一。探讨并建立供体胰腺长时间(>8h)保存和运送方法。方法:实验于2006-06/2007-02在解放军南京军区福州总医院全军器官移植中心完成,得到医院... 详细信息

目的:提高胰岛的分离纯化率是胰岛移植成功的关键,其中胰腺的冷缺血时间是主要影响因素之一。探讨并建立供体胰腺长时间(>8h)保存和运送方法。方法:实验于2006-06/2007-02在解放军南京军区福州总医院全军器官移植中心完成,得到医院伦理道德委员会批准。①实验方法:应用两层保存法(University of Wisconsin液/全氟化碳),将25例成人胰腺置于广口瓶中,充氧并盖紧,放入冰筒中送达实验室,按冷缺血时间的长短,分为>8h组(n=17)和≤8h组(n=8)。参照改良后Ricordi方法分离胰岛,将胰腺切片置入消化罐中循环消化。应用连续密度梯度离心法在COBE2991离心机中纯化胰岛组织,并用双硫腙、吖啶橙、碘化丙啶染色。②实验评估:分别进行纯化后胰岛计数、纯度和活率检测,同时检测胰岛对高、低糖的反应性。结果:①冷缺血时间>8h组胰腺的冷缺血时间显著长于≤8h组(P<0.01)。②经双硫腙染色后,两组分离纯化的总胰岛当量、胰岛收获量差异无显著性意义(P>0.05);两组胰岛纯度和活率差异也无显著性意义(P>0.05)。③经低糖、高糖分别刺激后,两组胰岛素释放量及其刺激指数差异均无显著性意义(P>0.05)。结论:应用两层保存法保存和运送供体胰腺,可明显延长保存时间,但对胰岛的分离纯化数量和功能没有明显影响,为胰岛移植远距离保存和运送腺体提供了有利条件。

关键词：胰岛移植器官保存分离和纯化细胞移植

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大鼠Delta1基因真核表达载体的构建与鉴定

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中国组织工程研究与临床康复 2010年第18期14卷 3331-3334页

作者：郑凯谭建明吴卫真杨顺良解放军南京军区福州总医院全军器官移植中心福建省福州市350025

背景:最近有数据表明,Notch信号通路在外周移植免疫应答反应中发挥重要的调节作用,可以促进调节性T的分化,诱导抗原特异性的免疫耐受。推测Notch/Notch配体可能在MHC:TCR界面发挥作用。目的:构建大鼠Delta1基因(Notch配体)真核表达载体... 详细信息

背景:最近有数据表明,Notch信号通路在外周移植免疫应答反应中发挥重要的调节作用,可以促进调节性T的分化,诱导抗原特异性的免疫耐受。推测Notch/Notch配体可能在MHC:TCR界面发挥作用。目的:构建大鼠Delta1基因(Notch配体)真核表达载体,并观察其在树突状细胞中的表达。方法:应用RT-PCR方法从大鼠骨髓细胞中获得全长Delta1基因片段,并将此基因片段构建在pcDNA3.1(+)真核表达载体上。利用脂质体基因转染技术将含大鼠Delta1基因片段的真核表达载体pcDNA3.1(+)/Delta1转染入树突状细胞中,观察Delta1基因在树突状细胞中的表达。结果与结论:双酶切鉴定结果显示,Delta1已成功构建在pcDNA3.1的HindIII和XbaI双酶切位点之间,任选一个酶切阳性克隆pcDNA3.1/Delta1送上海生工生物公司进行序列测定,测序结果与Genebank中Delta1基因序列完全一致,阅读框正确。转染Delta1基因的树突状细胞形态与其亲本细胞类似,蛋白免疫印迹法检测到细胞内Delta1的表达显著增高。实验成功利用基因转染方法将Delta1基因导入树突状细胞,构建了真核表达载体pcDNA3.1(+)/Delta1,并使之高效表达并分泌Delta1蛋白。

关键词：树突状细胞 Notch信号 Delta1 免疫耐受移植大鼠

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转化生长因子β_1基因型与移植肾的慢性排斥反应(英文)

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中国组织工程研究与临床康复 2008年第40期12卷 7935-7938页

作者：吕铁明吴卫真谭建明解放军南京军区福州总医院泌尿外科全军器官移植中心福建省福州市350025

背景:免疫损伤是慢性排斥反应的主要发病机制,与多种免疫相关基因多态性有关,尤其是转化生长因子β1基因多态性更显重要。目前关于转化生长因子β1基因多态性与移植肾慢性排斥反应的关系,不同的学者研究结果各异。目的:分析供、受者转... 详细信息

背景:免疫损伤是慢性排斥反应的主要发病机制,与多种免疫相关基因多态性有关,尤其是转化生长因子β1基因多态性更显重要。目前关于转化生长因子β1基因多态性与移植肾慢性排斥反应的关系,不同的学者研究结果各异。目的:分析供、受者转化生长因子β1基因型与移植肾慢性排斥反应的关系。设计:前瞻性病例分析。单位:解放军南京军区福州总医院泌尿外科,全军器官移植中心。对象:选择2000-06/2001-05在解放军南京军区福州总医院首次施行尸肾移植的受者144例和其中114例的供者65例(另30例缺乏供者血液标本)。手术方案得到医院伦理道德委员会批准。方法:用序列特异引物聚合酶链反应方法,在肾移植前对肾移植受者(n=144)和其中114例的供者(n=65)进行转化生长因子β1基因型检测。术后对受者进行5年随访,追踪移植肾慢性排斥反应发生情况,分析受者基因型、供者基因型及供、受者基因型组合对移植肾功能的影响。主要观察指标:①转化生长因子β1不同基因型的肾移植供、受者慢性排斥反应的发生率。②肾移植供、受者转化生长因子β1不同基因型组合慢性排斥反应的发生率。结果:①高分泌基因型组受者的慢性排斥反应发生率高于中低分泌基因型组(χ2=10.091,P<0.01);两组移植肾慢性排斥反应发生率差异无显著性意义(χ2=0.002,P>0.05)。②供、受者均为高分泌基因型组合的受者移植肾慢性排斥反应发生率高于所有其他基因型组合者(χ2=4.352,P<0.05);供、受者均为中低分泌基因型的受者慢性排斥反应发生率低于所有其他基因型组合者(χ2=4.134,P<0.05)。结论:肾移植术前同时检测移植供、受者转化生长因子β1基因多态性,有助于术前准确预测和评价移植后远期效果,指导术前做出合理的供、受者匹配。

关键词：肾移植移植物排斥转化生长因子β 基因型器官移植

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肝移植治疗晚期肝硬化伴门静脉高压症18例

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中国组织工程研究与临床康复 2007年第34期11卷 6872-6873页

作者：江艺吕立志胡还章张绍庚张小进陈永标张坤杨芳魏为明潘凡蔡秋程陈少华全军器官移植中心解放军南京军区肝胆外科研究所福州总医院肝胆病中心肝胆外科全军器官移植中心福建省福州市350025

目的:观察肝硬化伴门静脉高压症患者肝移植术后的随访结果。方法:选择2000-01/2006-12在福州总医院肝胆病中心肝胆外科行肝移植的晚期肝硬化伴门静脉高压症患者18例,患者均知情同意。12例行经典原位肝移植,6例行背驮式肝移植。平均手术... 详细信息

目的:观察肝硬化伴门静脉高压症患者肝移植术后的随访结果。方法:选择2000-01/2006-12在福州总医院肝胆病中心肝胆外科行肝移植的晚期肝硬化伴门静脉高压症患者18例,患者均知情同意。12例行经典原位肝移植,6例行背驮式肝移植。平均手术时间(12±4)h,平均输血量(7000±400)mL。所有病例术后病理证实均为弥漫性结节型肝硬化,术后均用FK506和激素二联免疫抑制剂治疗方案。结果:①无术中死亡,手术成功率100%。围手术期死亡3例,其余15例患者出现围手术期并发症13例次。②15例存活患者均获随访,肝功能恢复良好,术后未见上消化道大出血复发。其中12例患者生存超过半年,5例患者已过1年。结论:肝移植是治疗晚期肝硬化伴门静脉高压症的有效方法,结合患者病情,合理选择外科治疗方案对患者的愈后尤为重要。

关键词：肝移植肝硬化高血压门静脉器官移植

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螺旋CT三维成像评估活体供肾血管

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中国组织工程研究与临床康复 2011年第5期15卷 827-830页

作者：孙星慧陈自谦杨顺良吴卫真谭建明全军器官移植中心解放军南京军区福州总医院泌尿外科福建省福州市350025 全军器官移植中心解放军南京军区福州总医院放射科福建省福州市350025

背景:术前供肾血管的影像学评估对选择合适供肾及决定手术方式至关重要。目的:评估16层螺旋CT血管显影对活体供肾血管的显示水平。方法:术前对59例活体供肾者进行CT血管显影检查,三维重建肾脏动脉显像,由放射科医师评估血管情况,并与术... 详细信息

背景:术前供肾血管的影像学评估对选择合适供肾及决定手术方式至关重要。目的:评估16层螺旋CT血管显影对活体供肾血管的显示水平。方法:术前对59例活体供肾者进行CT血管显影检查,三维重建肾脏动脉显像,由放射科医师评估血管情况,并与术中描述的血管情况对比。分析CT血管显影检查肾脏血管的敏感性和准确度。结果与结论:螺旋CT血管显影检查肾动脉总的敏感性和准确度分别为96.6%,90.5%。50例供肾为单支动脉,螺旋CT血管显影诊断的敏感性和准确度分别为96.1%,92.9%。在6例有两支肾动脉供肾中,螺旋CT血管显影敏感性和准确度均下降为83.3%。3例供肾有3支肾动脉,螺旋CT血管显影的敏感性和准确度为66.7%。螺旋CT血管显影对多支肾动脉总的诊断准确度为77.7%。说明无创、立体直观的螺旋CT血管显影检查可以准确地预测90.5%以上供肾动脉血管情况,是供肾术前血管评估的较好手段。

关键词：螺旋CT血管显影肾移植活体供肾血管显影器官移植

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苦杏仁甙抑制成人肾脏成纤维细胞的增殖

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中国组织工程研究与临床康复 2008年第18期12卷 3575-3578页

作者：郭君其盛明雄王灵杰谭建明吴卫真杨顺良解放军南京军区福州总医院全军器官移植研究所泌尿外科福建省福州市350025

背景:苦杏仁甙在体外具有抑制纤维细胞增殖的作用,而肾脏移植后一定时间内的肾活检均提示有程度不同的纤维化,苦杏仁甙是否能抑制肾脏移植后的纤维化是一个有临床意义的课题。目的:观察苦杏仁甙对成人肾脏成纤维细胞增殖的影响。设计、... 详细信息

背景:苦杏仁甙在体外具有抑制纤维细胞增殖的作用,而肾脏移植后一定时间内的肾活检均提示有程度不同的纤维化,苦杏仁甙是否能抑制肾脏移植后的纤维化是一个有临床意义的课题。目的:观察苦杏仁甙对成人肾脏成纤维细胞增殖的影响。设计、时间及地点:前瞻性随机对照实验,于2003-06/2007-12在南京军区福州总医院实验科完成,实验室为南京军区重点实验室。材料:苦杏仁甙经中国药品生物制品检定所鉴定,批号020903。方法:采用消化法原代培养人肾成纤维细胞,并以免疫细胞化学方法鉴定。采用MTT比色法检测含25,50,80,100,200mg/L苦杏仁甙的培养液对人肾成纤维细胞增殖的影响,以不含苦杏仁甙的培养液为对照。主要观察指标:苦杏仁甙培养液对肾脏成纤维细胞的增殖活性的影响。结果:分离出的成纤维细胞免疫细胞化学方法进行鉴定显示,vimentin呈阳性表达,keramin和desmin呈阴性表达,确认为成纤维细胞。随着培养时间的延长,对照组肾脏成纤维细胞明显增殖。不同质量浓度苦杏仁甙组肾脏成纤维细胞增殖明显低于对照组。不同质量浓度苦杏仁甙对成纤维细胞的增殖活性均有抑制作用,且呈一定剂量依赖性,以100mg/L苦杏仁甙抑制作用最强。结论:苦杏仁甙能明显抑制人肾成纤维细胞增殖,并呈剂量依赖性。

关键词：苦杏仁甙肾脏间质纤维化成纤维细胞增殖

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细胞间黏附分子1与移植肾急性排斥反应

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中国组织工程研究与临床康复 2009年第5期13卷 862-864页

作者：郭君其黄一亮吴卫真谭建明杨顺良解放军南京军区福州总医院全军器官移植研究所泌尿外科福建省福州市350025

目的:检测移植肾组织内细胞间黏附分子1的表达水平,分析其与移植肾急性排斥反应的关系。方法:选择解放军南京军区福州总医院全军器官移植研究所在2002/2005进行的72例尸体肾移植的移植肾穿刺活检标本72份,其中移植肾急性排斥反应54份,... 详细信息

目的:检测移植肾组织内细胞间黏附分子1的表达水平,分析其与移植肾急性排斥反应的关系。方法:选择解放军南京军区福州总医院全军器官移植研究所在2002/2005进行的72例尸体肾移植的移植肾穿刺活检标本72份,其中移植肾急性排斥反应54份,环孢素A中毒标本18份;并取8份正常肾组织作对照。采用免疫组化技术检测细胞间黏附分子1在移植肾内的表达,分析其与病理形态结构的关系。结果:发生急性排斥反应的受者肾小管上皮细胞间黏附分子1表达显著高于正常者及环孢素A中毒受者(P<0.05),且随移植肾排斥程度加重,细胞间黏附分子1表达明显增多(P<0.05)。结论:细胞间黏附分子1的表达与移植肾急性排斥反应病理分级密切相关,移植肾组织内细胞间黏附分子1的检测对于肾移植后急性排斥反应的诊断具有参考价值。

关键词：肾移植急性排斥反应细胞间黏附分子1 器官移植

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ELISA定量测定sCD30的方法学评价与临床应用

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第二军医大学学报 2007年第9期28卷 1017-1018页

作者：曾章新邓章彬王栋王庆华谭建明王水良朱忠勇南京军区福州总医院泌尿外科解放军器官移植中心福州350025 南京军区福州总医院检验科解放军检验医学研究所

目的:用ELISA方法评价Bender MedSystems公司的"研究用"human sCD30 ELISA定量测定试剂盒的方法学及其在临床应用。方法:收集到458例尿毒症等待肾移植、淋巴瘤病和一些恶性肿瘤患者及健康成人的血清、尿液、腔积液,采用ELISA... 详细信息

目的:用ELISA方法评价Bender MedSystems公司的"研究用"human sCD30 ELISA定量测定试剂盒的方法学及其在临床应用。方法:收集到458例尿毒症等待肾移植、淋巴瘤病和一些恶性肿瘤患者及健康成人的血清、尿液、腔积液,采用ELISA定量检测sCD30浓度,并进行比较;另对该方法的精密度、准确性及曲线的线性与测定范围作了观察。结果:249例肾移植术前患者的sCD30浓度为(178.1±80.3)U/ml、11例非霍奇金淋巴瘤患者为(233.3±61.2)U/ml,比58名健康成人(45.5±16.8)U/ml显著增高(P<0.01);而肾移植术前及术后均增高患者在术后1周内发生急排率为38.5%;8例霍奇金病患者和9例恶性肿瘤患者的sCD30分别为(86.1±46.0)和(92.1±40.6)U/ml,也明显高于健康成人(P<0.01)。ELISA定量测定sCD30的批内CV3.9%,批间CV6.3%,回收率为(101.2±2.9)%,线性相关性系数r=0.999 2。结论:ELISA定量测定sCD30方法简便,重复性好,结果可靠,适用于各种体液标本的检测。在以免疫应答为主流的疾病中,血清中sCD30浓度增高常与疾病的活动性加重有关。而从目前接受肾移植的患者血清中的初步结果可以看出其浓度与急性排斥反应相关,有望成为预测排斥风险的有用标志物。

关键词：人可溶性CD30 免疫活性标志物 ELISA

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肾移植后尿瘘的诊断与治疗

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中国组织工程研究与临床康复 2010年第5期14卷 765-768页

作者：卓文利徐廷昭吴卫真杨顺良谭建明解放军南京军区福州总医院全军器官移植中心福建省移植生物学重点实验室福建省福州市350025

背景:在目前肾源奇缺的情况下,因尿瘘而导致移植肾切除者尤为可惜,尿瘘的合理诊治应引起器官移植工作者的高度重视。目的:探讨肾移植后尿瘘的临床诊断与治疗措施。方法:对解放军南京军区福州总医院全军器官移植中心收治的16例肾移植后... 详细信息

背景:在目前肾源奇缺的情况下,因尿瘘而导致移植肾切除者尤为可惜,尿瘘的合理诊治应引起器官移植工作者的高度重视。目的:探讨肾移植后尿瘘的临床诊断与治疗措施。方法:对解放军南京军区福州总医院全军器官移植中心收治的16例肾移植后尿瘘病例资料进行回顾性分析。结果及结论:尿瘘发生率为1.26%,13例单纯性尿瘘行保守治疗,保守治疗成功11例,2例因输尿管远端坏死保守治疗失败,行移植肾输尿管膀胱再吻合及带蒂大网膜修补后治愈,尿瘘保守治疗成功率84.6%;3例复杂性尿瘘患者采用带蒂大网膜移植修补,均1次手术成功。结果提示,对于肾移植后尿瘘患者应高度重视和积极治疗,早期诊断,选择正确治疗措施是救治成功的关键,利用大网膜的生物学特性,采用带蒂大网膜修补肾移植后复杂性尿瘘和单纯性尿瘘保守治疗失败后病例具有取材方便、组织修复快、尿瘘复发率低的特点,适于临床推广应用。

关键词：尿瘘肾移植诊治并发症复发

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根据可溶性CD30水平预测肾移植后急性排斥反应

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中华器官移植杂志 2008年第7期29卷 439-440页

作者：王栋谭建明杨顺良吴卫真中国人民解放军器官移植中心南京军区福州总医院泌尿外科福州350025

CD30为1型跨膜糖蛋白，属于肿瘤坏死因子受体（TNFR）超家族中的一员。CD30^＋T淋巴细胞活化后，其CD30分子细胞外部分被蛋白酶切断，形成相对分子质量为85000的可溶性CD30分子（sCD30）。最近的研究表明，术前及术后血清sCD30水平高的... 详细信息

CD30为1型跨膜糖蛋白，属于肿瘤坏死因子受体（TNFR）超家族中的一员。CD30^＋T淋巴细胞活化后，其CD30分子细胞外部分被蛋白酶切断，形成相对分子质量为85000的可溶性CD30分子（sCD30）。最近的研究表明，术前及术后血清sCD30水平高的肾移植受者，其急性排斥反应的发生率较高，移植肾预后较差。本研究检测了231例肾移植受者术前及术后血清sCD30的水平，以探讨依据血清sCD30水平预测急性排斥反应的可能性。

关键词：急性排斥反应 CD30^+ 肾移植受者可溶性预测移植后肿瘤坏死因子受体 CD30分子

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