检索结果-内蒙古大学图书馆

中华医学杂志 2005年第27期85卷 1885-1889页

作者：李海红付小兵周岗费沛陈伟白晓东蔡存良孙同柱解放军总医院三○四临床部全军创伤修复重点实验室

目的研究人骨髓间充质干细胞(humanmesenchymalstemcells,hMSCs)在体外与损伤的人汗腺细胞(humansweatglandcells,hSGCs)共培养时的转化情况。方法体外分别分离培养和扩增hMSCs和hSGCs,用二步免疫细胞化学法检测hMSCs和hSGCs抗原表达情... 详细信息

目的研究人骨髓间充质干细胞(humanmesenchymalstemcells,hMSCs)在体外与损伤的人汗腺细胞(humansweatglandcells,hSGCs)共培养时的转化情况。方法体外分别分离培养和扩增hMSCs和hSGCs,用二步免疫细胞化学法检测hMSCs和hSGCs抗原表达情况。用5μmol/L的5溴2脱氧尿苷(BrdU)对培养的hMSCs进行连续培养标记。待原代培养的hSGCs达70%融合后,给予47℃高温处理40min造成热损伤体外模型,37℃冷却12h,然后加入(12)×105BrdU标记的hMSCs共同培养,2周后,以抗癌胚抗原(CEA)和抗BrdU单克隆抗体作为一抗,采用免疫细胞化学双染法检测共培养的细胞。结果hMSCs和hSGCs均呈克隆样生长,hMSCs表达CD44和CD105,不表达CD34和CEA;hSGCs表达CK7、CK8、CK19、CEA。用BrdU标记hMSCs阳性率可达90%,hSGCs经高温损伤后,大多数细胞的细胞间连接消失。共培养2周后,部分细胞同时表达CEA和BrdU,并有多核现象。细胞染色示双染细胞可达1%～5%,多核细胞且核染色不同的细胞约为0.01%～0.05%,多核细胞与其他双染细胞相比,细胞明显的宽大扁平。结论在损伤的微环境下,hMSCs可以向hSGCs转化,其机制可能是细胞分化、细胞融合甚至是核融合。

关键词：人骨髓间充质干细胞共同培养汗腺细胞细胞表型转化步研究癌胚抗原(CEA) hMSCs BrdU标记免疫细胞化学法 cells 多核细胞 mol/L 单克隆抗体抗BrdU 培养的细胞 CD105 细胞间连接表达情况 Cs抗原连续培养脱氧尿苷

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骨髓基质细胞基因表达的研究进展

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中国修复重建外科杂志 2005年第2期19卷 153-158页

作者：韩冰付小兵孙晓庆解放军总医院304临床部全军创伤修复重点实验室

目的　介绍骨髓基质细胞 (marrow stromal cells,MSCs)基因表达与其生物学特性、诱导分化、基因治疗、造血调控和创伤修复中的炎症反应等方面的研究进展。　方法　查阅国内外近年有关文献 ,并做综合分析。　结果MSCs不仅能在不同的条件... 详细信息

目的　介绍骨髓基质细胞 (marrow stromal cells,MSCs)基因表达与其生物学特性、诱导分化、基因治疗、造血调控和创伤修复中的炎症反应等方面的研究进展。　方法　查阅国内外近年有关文献 ,并做综合分析。　结果MSCs不仅能在不同的条件下表达中胚层、内胚层和外胚层的特异性基因 ,而且能稳定地表达转导的外源基因 ,并且对造血系统有支持作用 ,也参加创伤修复过程中的炎症反应。　结论　 MSCs是一种具有自我更新和多向分化潜能的干细胞 ,且体外易于扩增 ,是一种理想的细胞治疗和基因治疗的靶细胞。

关键词：骨髓基质细胞创伤修复基因表达炎症反应基因治疗研究进展内胚层外源基因自我更新干细胞

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瘢痕疙瘩中皮肤附件结构破坏与瘢痕增生的关系

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中国修复重建外科杂志 2005年第1期19卷 15-19页

作者：姜笃银付小兵陈伟孙同柱盛志勇解放军总医院304临床部全军创伤修复重点实验室

目的　探讨瘢痕疙瘩 (keloid K)形成过程中皮肤附件 (skin appendages,SAs)结构破坏与瘢痕增生的关系。　方法　将来自 17例 K患者的活检标本按浸润生长 (K- I,n=9)、瘢痕增生 (K- P,n=17)、瘢痕萎缩 (K- A,n=10 )和边缘正常皮肤 (K- N,... 详细信息

目的　探讨瘢痕疙瘩 (keloid K)形成过程中皮肤附件 (skin appendages,SAs)结构破坏与瘢痕增生的关系。　方法　将来自 17例 K患者的活检标本按浸润生长 (K- I,n=9)、瘢痕增生 (K- P,n=17)、瘢痕萎缩 (K- A,n=10 )和边缘正常皮肤 (K- N,n=6 )进行分组 ,另以非 K患者胸部正常皮肤 (NS,n=6 )为对照 ,采用免疫组织化学方法观察SAs密度与广谱细胞角蛋白 (pan- fytokeratin,CKp)、CK19、腺上皮分泌成分 (secretory component,SC)和增殖细胞核抗原 (proliferating cell nuclearantigen,PCNA) ,以及凋亡相关蛋白 Bcl- 2和 Bax之间的变化规律 ,同时用组织学、解剖显微镜及扫描电镜观察 K胶原纤维和 SAs结构的组织形态学改变。　结果　与 K- N和 NS组相比 ,K组织中 CKp和 SC阳性的 SAs密度迅速减少 ,可见 SAs结构消失后残留 CKp阳性蛋白痕迹 ;多数 SAs上皮细胞 Bax表达增强 ,但 Bcl- 2、PC-NA和 CK19阳性的 SAs则呈现复层 (鳞状 )上皮化和形态结构异常。 K组织形态学大致经历浸润、增殖和成熟的过程 ,SAs也相应地发生增生 ,细胞迁移、炎性反应和血管闭塞等引起的形态结构破坏和几乎被纤维结缔组织完全取代的变化过程。直线相关分析显示 ,K的瘢痕厚度与 SAs密度之间呈显著的负相关 (r=- 0 .341,P<0 .0 1)。　结论?

关键词： SA 瘢痕增生瘢痕疙瘩 CK19 阳性正常皮肤组织形态学异常增生形态结构负相关

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骨髓间充质干细胞分化为皮肤附属器细胞的初步实验研究

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中国修复重建外科杂志 2006年第6期20卷 675-678页

作者：李海红付小兵王君孙同柱周岗解放军总医院304临床部全军创伤修复重点实验室

目的探讨骨髓间充质干细胞(marrowmesenchymalstemcells,MSCs)分化为创面皮肤附属器细胞的可能性,及其参与创面修复的可能机制。方法无菌条件下取Wistar大鼠股骨骨髓细胞,密度梯度离心分离、纯化MSCs,体外培养扩增后,用BrdU标记细胞。... 详细信息

目的探讨骨髓间充质干细胞(marrowmesenchymalstemcells,MSCs)分化为创面皮肤附属器细胞的可能性,及其参与创面修复的可能机制。方法无菌条件下取Wistar大鼠股骨骨髓细胞,密度梯度离心分离、纯化MSCs,体外培养扩增后,用BrdU标记细胞。另于同种雄性Wistar大鼠背部正中,制备1cm×1cm全厚皮肤缺损创面模型,将BrdU标记的1×106/mlMSCs从阴茎静脉输注,术后第3天与第7天切取创面组织,行BrdU免疫组织化学单染色,以及BrdU和广谱角蛋白免疫组织化学双染色。结果BrdU阳性细胞出现在创面皮下组织、皮脂腺、毛囊和骨髓腔中。免疫组织化学双染色结果显示,皮脂腺和毛囊有BrdU阳性细胞,同时表达广谱角蛋白。结论创面愈合过程中,MSCs归巢并参与创面修复;在实验性全身皮肤缺损创面微环境下,MSCs可分化为皮肤附属器细胞。

关键词：骨髓间充质干细胞皮肤附属器创面修复分化

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猪急性创面不同部位组织匀浆液对体外培养的成纤维细胞凋亡的影响及其机制

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中国修复重建外科杂志 2005年第1期19卷 6-9页

作者：李金清付小兵孙同柱顾绍峰都义日解放军总医院304临床部全军创伤修复重点实验室

目的　探讨猪急性创面不同部位组织匀浆液对体外培养的成纤维细胞 (fibroblast,FB)凋亡的影响。　方法　在 6只小型猪的背部造成直径 4 cm的圆形全层皮肤缺损创面 ,用取下的真皮组织进行 FB原代培养。在创面形成后第 15天 ,取创面中心... 详细信息

目的　探讨猪急性创面不同部位组织匀浆液对体外培养的成纤维细胞 (fibroblast,FB)凋亡的影响。　方法　在 6只小型猪的背部造成直径 4 cm的圆形全层皮肤缺损创面 ,用取下的真皮组织进行 FB原代培养。在创面形成后第 15天 ,取创面中心及边缘新生上皮下的组织匀浆 ,离心后将上清液 - 70℃冰箱保存备用。用第 4代 FB进行实验 ,根据培养液的不同分成 7组 : 组 :DMEM+5 %胎牛血清 ; 组 :DMEM+5 %创面中心组织匀浆液 ; 组 :DMEM+5 %创面边缘组织匀浆液 ; 组 :DMEM+5 %创面中心组织匀浆液 +10μg/ ml广谱基质金属蛋白酶抑制剂 (GM6 0 0 1) ; 组 :DMEM+5 %创面边缘组织匀浆液 +10μg/ ml GM6 0 0 1; 组 :DMEM+5 %创面中心组织匀浆液 +10 ng/ ml酸性成纤维细胞生长因子 (acid fibroblast growth factor,a FGF) ; 组 :DMEM+5 %创面边缘组织匀浆液 +10 ng/ ml a FGF。在上述培养液中培养 16 h,均采用同一动物的匀浆液处理该动物来源的 FB(n=6 )。采用 PI和标记 FITC的 Annexin 作为探针 ,利用流式细胞仪检测细胞凋亡。　结果　各组细胞凋亡率分别为 : 组 4 .39%± 0 .4 1% , 组 10 .98%±1.4 2 % , 组 13.4 7%± 1.4 4 % , 组 7.2 %± 0 .4 6 % , 组 12 .1%± 0 .85 % , 组 3.9%± 0 .6 3% , 组 9.8%± 0 .5 0 % ;

关键词：创面组织匀浆液心组织 FB DMEM 凋亡体外培养 FGF 培养液成纤维细胞

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脂肪与创面愈合

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中国修复重建外科杂志 2005年第1期19卷 78-81页

作者：程飚付小兵盛志勇解放军总医院304临床部全军创伤修复重点实验室

目的　探讨脂肪组织与创面愈合的关系。　方法　通过对近期文献的回顾 ,脂肪组织参与食物摄入、能量代谢等生理过程。通过内分泌、自分泌和旁分泌参与创面愈合的调节。　结果　脂肪组织主要分泌的几种因子 :瘦素、细胞因子、生长因子和... 详细信息

目的　探讨脂肪组织与创面愈合的关系。　方法　通过对近期文献的回顾 ,脂肪组织参与食物摄入、能量代谢等生理过程。通过内分泌、自分泌和旁分泌参与创面愈合的调节。　结果　脂肪组织主要分泌的几种因子 :瘦素、细胞因子、生长因子和脂质等参与创面愈合过程。　结论　脂肪组织在创面愈合过程中可能具有重要作用 ,进一步了解脂肪细胞与上皮形成间的关系有助于揭示创面愈合的机制。

关键词：创面愈合脂肪组织上皮旁分泌瘦素生长因子细胞因子生理过程能量代谢自分泌

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间充质干细胞的研究进展与临床应用前景

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中国修复重建外科杂志 2006年第12期20卷 1257-1261页

作者：韩冰付小兵解放军总医院304临床部全军创伤修复重点实验室

目的介绍间充质干细胞(m esenchym a l stem ce lls,M SC s)的研究进展及其临床应用前景。方法查阅国内外近年有关文献,并行综合分析。结果由于M SC s能分化为多种类型的细胞,所以在细胞移植治疗和组织工程方面有广泛的应用。由于其能... 详细信息

目的介绍间充质干细胞(m esenchym a l stem ce lls,M SC s)的研究进展及其临床应用前景。方法查阅国内外近年有关文献,并行综合分析。结果由于M SC s能分化为多种类型的细胞,所以在细胞移植治疗和组织工程方面有广泛的应用。由于其能稳定表达转染到细胞内的目的基因,可治疗血友病、脑梗塞及骨缺损等,因此在基因治疗中应用广泛。其所具有的免疫调节特性,使它在免疫性疾病的治疗中也有广泛的用途。结论M SC s是一种具有自我更新和多向分化潜能的干细胞,且体外易于扩增,是一种理想的细胞治疗和基因治疗的靶细胞,临床应用前景非常广阔。

关键词：间充质干细胞细胞治疗基因治疗组织工程免疫治疗

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细胞外信号调节激酶信号通路在血小板源生长因子促进糖尿病大鼠创面愈合中的作用

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中华创伤杂志 2004年第8期20卷 452-457页

作者：程飚付小兵盛志勇孙同柱解放军总医院三O四临床部全军创伤修复重点实验室

目的　观察重组人血小板源生长因子 (rhPDGF)促进糖尿病大鼠全层皮肤缺损创面修复可能涉及的信号通路。　方法　 2 6只糖尿病大鼠背部各制备 4个全层皮肤缺损创面 ,创面随机分成A和B两组 ,A组对照组 ,B组为rhPDGF(7.0 μg/cm2 )治疗组... 详细信息

目的　观察重组人血小板源生长因子 (rhPDGF)促进糖尿病大鼠全层皮肤缺损创面修复可能涉及的信号通路。　方法　 2 6只糖尿病大鼠背部各制备 4个全层皮肤缺损创面 ,创面随机分成A和B两组 ,A组对照组 ,B组为rhPDGF(7.0 μg/cm2 )治疗组。观察伤后 3,7,14d创面肉芽形成、胶原沉积、再上皮化速率以及炎症细胞浸润情况 ,并采用免疫荧光技术观察创周和创基修复细胞内细胞外信号调节激酶 1/ 2 (extracellularsignal-regulatedkinase 1/ 2 ,ERK1/ 2 )的表达 ,用免疫组织化学方法检测原癌基因c -fos、增殖细胞核抗原 (proliferationcellnuclearantigen ,PC NA)、黏着斑激酶 (focaladhesionkinase ,FAK)的变化情况。　结果　组织学检查显示 ,rhPDGF治疗的创面大量的炎症细胞浸润 ,毛细血管胚芽与成纤维细胞数量显著多于对照组 ,胶原沉积明显 ,肉芽组织生长活跃 ,创面收缩显著。免疫学研究显示 ,伤后 3d ,rhPDGF治疗组ERK1/ 2和c -fos的表达明显增强 ,7d时 ,ERK1/ 2和c -fos进一步增强 ,14d后开始减弱。rhPDGF治疗组各时相点修复细胞PCNA和FAK的表达明显强于对照组。　结论　ERK1/ 2信号通路在rhPDGF促糖尿病大鼠创面愈合中起一定作用 ,并在细胞增殖与迁移中充当重要角色。

关键词：细胞外信号调节激酶信号通路血小板源生长因子糖尿病大鼠创面愈合 rhPDGF 炎症细胞

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外胚叶发育不全基因信号途径与汗腺发育及修复的关系

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中国修复重建外科杂志 2006年第5期20卷 578-581页

作者：周岗李海红付小兵解放军总医院304临床部全军创伤修复重点实验室北京100037

目的探讨外胚叶发育不全(ectodysplasin,EDA)基因信号途径与汗腺发育及修复的关系。方法通过对近期国内外相关文献的回顾,了解EDA基因的生物学特性、信号传导途径和促进汗腺发育的分子机制。结果大量实验证实EDA基因在胎儿发育早期参与... 详细信息

目的探讨外胚叶发育不全(ectodysplasin,EDA)基因信号途径与汗腺发育及修复的关系。方法通过对近期国内外相关文献的回顾,了解EDA基因的生物学特性、信号传导途径和促进汗腺发育的分子机制。结果大量实验证实EDA基因在胎儿发育早期参与了胚胎皮肤汗腺的形态和功能发生。结论EDA基因对皮肤汗腺的发生和结构的形成以及皮肤生理功能的维持具有重要意义,可为实现基因调控皮肤受损汗腺的完美修复找到一条新路。

关键词： EDA基因汗腺修复信号传导

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人皮肤成纤维细胞的培养和鉴定

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中国危重病急救医学 2005年第2期17卷 89-91,F006页

作者：李海红周岗付小兵屈振亮孙同柱顾绍峰解放军总医院三○四临床部全军创伤修复重点实验室

目的　探索和建立人皮肤成纤维细胞体外分离、培养及鉴定的技术方法。方法　通过酶消化法分离人皮肤外分泌汗腺 ,在外分泌汗腺生长的同时 ,成纤维细胞也在生长 ;用质量分数为 0 .2 5 %的胰酶和0 .0 2 %的乙二胺四乙酸 (EDTA)消化分离汗... 详细信息

目的　探索和建立人皮肤成纤维细胞体外分离、培养及鉴定的技术方法。方法　通过酶消化法分离人皮肤外分泌汗腺 ,在外分泌汗腺生长的同时 ,成纤维细胞也在生长 ;用质量分数为 0 .2 5 %的胰酶和0 .0 2 %的乙二胺四乙酸 (EDTA)消化分离汗腺细胞和成纤维细胞 ;以 Dulbecco改良的 Eagle培养液 (DMEM)为基础培养基 ,添加胎牛血清 (体积分数 10 % )、青霉素 (10 0 k U/ L)和链霉素 (10 0 mg/ L) ,置 37℃、体积分数为 5 % CO2 、95 %空气、饱和湿度条件下培养。倒置相差显微镜和苏木素伊红染色 ,观察成纤维细胞形态 ,并对培养细胞行波形蛋白免疫组化及染色体鉴定。结果　分离的成纤维细胞可在体外快速贴壁生长、增殖 ,波形蛋白免疫组化染色为阳性 ,染色体分析为 4 6条。结论　该方法所获得的皮肤成纤维细胞可在体外稳定培养 ,为在细胞水平上研究伤口愈合的机制提供了充足、可靠的靶细胞。

关键词：皮肤成纤维细胞细胞培养免疫组化染色体细胞分离

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