检索结果-内蒙古大学图书馆

中华烧伤杂志 2018年第4期34卷 253-256页

作者：孙苏静霍嘉慧耿志军孙晓艳付小兵解放军总医院生命科学院北京100853 天津医科大学研究生院解放军总医院第一附属医院全军创伤修复与组织再生重点实验室暨皮肤损伤修复与组织再生北京市重点实验室

随着对DNA碱基精确识别的核酸酶研究的深入，第3代基因编辑技术，如锌指核酸酶（ZFN）技术、类转录激活因子样效应物核酸酶（TALEN）技术等发展迅速，由于该类技术能够精确地进行DNA水平的特定位点敲除、插入及替换，加深研究者对生物... 详细信息

随着对DNA碱基精确识别的核酸酶研究的深入，第3代基因编辑技术，如锌指核酸酶（ZFN）技术、类转录激活因子样效应物核酸酶（TALEN）技术等发展迅速，由于该类技术能够精确地进行DNA水平的特定位点敲除、插入及替换，加深研究者对生物基因组变化的了解，从而进一步探讨调控生物表型的内源性基因位点，最大限度在体外细胞模型中模拟疾病状态，因此越来越受到研究者的重视。这些技术在真核细胞中的应用也被证实是简便有效且具有位点特异性的，目前已成为实验室的一种常规基因编辑手段。虽然这些技术已进入临床应用阶段，但其脱靶率高、细胞毒性大及基因修饰类型单一等不足也亟待解决。

关键词：干细胞成簇规律间隔短回文重复序列及其相关蛋白基因9 基因编辑

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体外构建工程化汗腺类器官的初步研究

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解放军医学杂志 2020年第4期45卷 384-390页

作者：陈润开付小兵孙晓艳天津医科大学研究生院天津300070 解放军总医院医学创新研究部创伤修复与组织再生研究中心北京100853 解放军总医院第四医学中心组织修复与再生全军重点研究实验室北京100048

目的应用谱系重编程技术将表皮角质细胞转分化为汗腺样细胞,并在体外构建三维培养体系,诱导工程化的汗腺样细胞自组装为汗腺类器官,以实现汗腺功能性修复。方法采用CRISPR/dCas9系统上调内源性外胚层发育不全(EDA)基因在人永生化表皮角... 详细信息

目的应用谱系重编程技术将表皮角质细胞转分化为汗腺样细胞,并在体外构建三维培养体系,诱导工程化的汗腺样细胞自组装为汗腺类器官,以实现汗腺功能性修复。方法采用CRISPR/dCas9系统上调内源性外胚层发育不全(EDA)基因在人永生化表皮角质(HaCaT)细胞中的表达,筛选阳性克隆后进行诱导培养。将细胞分为HaCaT组(HaCaT细胞使用汗腺培养基培养)、HaCaT+Dox组(HaCaT细胞使用含5μg/ml Dox的汗腺培养基培养)、HaCaT-E组(HaCaT-E细胞使用汗腺培养基培养)、HaCaT-E+Dox组(HaCaT-E细胞使用含5μg/ml Dox的汗腺培养基培养),采用RT-PCR及Western blotting检测EDA基因在各组细胞中的表达水平,以验证质粒转染是否成功。另将细胞分为HaCaT-E组(汗腺培养基组)及HaCaT-E+Dox组(汗腺培养基+5μg/ml Dox组),利用免疫荧光染色鉴定汗腺表面标记物的表达水平,以验证HaCaT细胞是否成功重编程为汗腺样细胞。随后以Matrigel为主体支架模拟汗腺发育微环境,在体外诱导汗腺样细胞自组装形成汗腺类器官,并采用免疫荧光染色检测汗腺表面标记物的表达情况。将汗腺类器官移植至裸鼠烫伤创面后,采用碘-淀粉发汗实验及组织形态学方法检测工程化的汗腺类器官参与汗腺再生及皮肤创面修复的情况。结果CRISPR/dCas9慢病毒表达系统转染后,筛选获得HaCaT-E细胞。RT-PCR检测结果显示,与HaCaT组比较,HaCaT-E+Dox组细胞中EDA mRNA的表达水平上调(4.62±0.19)倍,差异有统计学意义(P<0.05),而HaCaT+Dox组及HaCaT-E组则未见明显上调,差异无统计学意义(P>0.05)。Western blotting检测结果显示,HaCaT组、HaCaT+Dox组、HaCaT-E组及HaCaT-E+Dox组的EDA蛋白表达趋势与RT-PCR检测结果基本一致。经含强力霉素的汗腺培养基诱导培养2~7 d,细胞形态逐渐变为长梭形,呈网络样生长,并表达汗腺表面标记物角蛋白18(CK18)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、水通道蛋白5(AQP5)。在含有Matrigel的三维培养体系中混合培养7 d后,细胞增殖、体积增大,形成具有囊腔的汗腺类器官,且表达汗腺表面标记物和功能性标记物CK18、α-SMA、AQP5。体内实验表明,移植组小鼠脚掌碘-淀粉发汗实验为阳性。组织免疫荧光染色结果进一步显示,绿色荧光蛋白(GFP)阳性细胞主要分布于表皮的基底层及亚基底层,且真皮深层及皮下组织内可见管腺状结构,同时表达GFP及汗腺细胞标记物CK18、α-SMA。结论采用CRISPR/dCas9系统上调内源性EDA基因可重编程表皮角质细胞为汗腺样细胞。以Matrigel为主体支架构建的三维培养环境可在体外诱导工程化的汗腺样细胞自组装并发育形成汗腺类器官。这些工程化的类器官不但具备汗腺原基的表型及结构特征,还能在体内促进汗腺再生,从而实现创面的功能性修复。

关键词：谱系重编程类器官汗腺再生创伤修复

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战场战伤救治--一场救治理念的革命

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解放军医学杂志 2015年第11期40卷 862-864页

作者：黎檀实付小兵解放军总医院急诊科北京100853 解放军总医院基础医学研究所、全军创伤修复与组织再生重点实验室北京100853

新的军事变革使卫勤保障面临多种挑战,战伤救治理念需要发展并不断更新。本文介绍战场战伤救治理念的提出与发展过程,分析战场战伤救治的阶段划分及各阶段的特点,梳理《战场战伤救治指南》的组织管理与完善更新,探讨战伤救治的现状及对... 详细信息

新的军事变革使卫勤保障面临多种挑战,战伤救治理念需要发展并不断更新。本文介绍战场战伤救治理念的提出与发展过程,分析战场战伤救治的阶段划分及各阶段的特点,梳理《战场战伤救治指南》的组织管理与完善更新,探讨战伤救治的现状及对我军战伤救治理论发展与体系建设的启示与借鉴作用。

关键词：战场战伤救治创伤和损伤军事医学

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二甲亚砜对酵母多糖致肠道屏障损伤的保护作用

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中国应用生理学杂志 2017年第3期33卷 193-196,I0001页

作者：张慧苹马丽千吕艺罗红敏李雨梦刘锐胡森解放军总医院第一附属医院烧伤研究所休克与多器官障碍实验室全军创伤修复与组织再生重点实验室暨皮肤损伤修复与组织再生北京市重点实验室北京100048

目的:探讨二甲亚砜(DMSO)对酵母多糖诱导的肠道炎性因子释放及肠屏障功能损伤的影响。方法:SD大鼠随机分为4组:生理盐水组(SS组),DMSO组(DS组),酵母多糖+生理盐水组(ZS组)和酵母多糖+DMSO组(ZD组)。每组又分为伤后4 h和24 h两个亚组。... 详细信息

目的:探讨二甲亚砜(DMSO)对酵母多糖诱导的肠道炎性因子释放及肠屏障功能损伤的影响。方法:SD大鼠随机分为4组:生理盐水组(SS组),DMSO组(DS组),酵母多糖+生理盐水组(ZS组)和酵母多糖+DMSO组(ZD组)。每组又分为伤后4 h和24 h两个亚组。检测肠组织细胞因子TNF-α和IL-10含量和血中二胺氧化酶(DAO)活性,并对肠损伤程度进行组织学评分。结果:与ZS组相应时间点相比,ZD组肠组织TNF-α含量减少、IL-10含量增加,血中DAO活性降低,肠绒毛损伤减轻、肠损伤评分降低。结论:DMSO可抑制酵母多糖引起的肠组织炎性因子释放,减轻肠屏障损伤程度。

关键词：二甲亚砜酵母多糖炎性因子肠屏障大鼠

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人骨髓间充质干细胞与其来源的汗腺样细胞微小RNAs差异表达谱分析

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中华医学杂志 2015年第32期95卷 2626-2629页

作者：谭志军陈艳赵洪良赵换军赵阿龙赵智亮孙梦黎马奎张翠萍付小兵天津医科大学研究生院 300070 解放军总医院第一附属医院全军创伤修复与组织再生重点实验室

目的分析入骨髓间充质干细胞（hBM-MSCs）与其来源的汗腺样细胞微小RNAs（miRNAs）差异表达谱.方法采用成骨、成脂细胞诱导分化液诱导hBM-MSCs分化,油红O和茜素红染色分别进行鉴定.当原代汗腺细胞密度达到70％～ 80％时进行热休克处理... 详细信息

目的分析入骨髓间充质干细胞（hBM-MSCs）与其来源的汗腺样细胞微小RNAs（miRNAs）差异表达谱.方法采用成骨、成脂细胞诱导分化液诱导hBM-MSCs分化,油红O和茜素红染色分别进行鉴定.当原代汗腺细胞密度达到70％～ 80％时进行热休克处理,然后将其与hBM-MSCs通过Transwell进行共培养诱导;10 d后分别提取hBM-MSCs和其诱导分化的汗腺样细胞的总RNA,纯化标记后,进行miRNAs杂交和数据分析以及靶基因预测.进一步采用实时荧光定量PCR验证芯片结果的可靠性.结果差异表达水平绝对值＞2倍的miRNAs有68个,其中上调的19个,下调的49个;其中13个表达水平发生显著变化,差异表达水平＞5倍（miRNA-132-3p、-4467、-4484、-146a-5p、-6126等5个上调;miRNA-708-5p、-138-5p、-6812-5p、-138-1-3p、-1281、-3157-3p、-4298、-4459等8个下调）.靶向汗腺发育相关通路核因子κB、丝裂原活化蛋白激酶/细胞外信号调节激酶、Wnt/β-连环蛋白和外胚叶发育不全基因/外胚叶发育不全基因受体的miRNAs有18个.其中上调的miRNA-146a-5p和下调的miRNA-6812-5p验证结果与芯片结果具有一致性.结论 hBM-MSCs与其来源的汗腺样细胞之间有明显的miRNAs差异性表达,其中13个差异表达＞5倍的miRNAs和18个与汗腺发育通路有关的miRNAs可能在hBM-MSCs向汗腺样细胞分化过程中有重要的调控作用.

关键词：间质干细胞汗腺微RNAs 基因表达谱

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激动素在创面修复及皮肤美容中作用的研究进展

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中华创伤杂志 2015年第12期31卷 1135-1138页

作者：周云超赵志力张翠萍付小兵北京军区总医院全军皮肤修复研究所整形美容中心 100700 解放军总医院第一附属医院全军创伤修复与组织再生重点实验室暨皮肤损伤修复与组织再生北京市重点实验室

激动素（kinetin，KT）是60年前发现的第一个细胞分裂素，经过国内外60年的不断研究，人们对它的观念已从最初的定义植物激素逐步发展为对动植物及人体起广泛作用的物质，并已把它应用于皮肤的美容护理和人体疾病的治疗。然而，KT对动... 详细信息

激动素（kinetin，KT）是60年前发现的第一个细胞分裂素，经过国内外60年的不断研究，人们对它的观念已从最初的定义植物激素逐步发展为对动植物及人体起广泛作用的物质，并已把它应用于皮肤的美容护理和人体疾病的治疗。然而，KT对动物和人体的一些作用机制，以及对多系统的作用是否存在共同作用机制还不太清楚。笔者通过KT对动物及人体各系统作用及作用机制进行归纳总结，

关键词：皮肤美容激动素创面修复细胞分裂素植物激素人体疾病美容护理归纳总结

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丁酸钠对大鼠肠缺血/再灌注后急性肺损伤的保护作用研究

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中国临床药理学杂志 2016年第10期32卷 901-904页

作者：唐富波李雨梦张文华何波胡森白晓东武警总医院烧伤整形科解放军总医院第一附属医院全军创伤修复与组织再生重点实验室暨皮肤损伤修复与组织再生北京市重点实验室武警总医院放疗科

目的研究丁酸钠（sodium butyrate,BTR）对大鼠肠缺血/再灌注（I/R）引起的急性肺损伤的保护作用。方法大鼠随机分为假手术组（Sham组）,肠缺血/再灌注1 h组和4 h组（I/R1组和I/R4组）,丁酸钠干预1 h组和4 h组（BTR1组和BTR4组）,每组1... 详细信息

目的研究丁酸钠（sodium butyrate,BTR）对大鼠肠缺血/再灌注（I/R）引起的急性肺损伤的保护作用。方法大鼠随机分为假手术组（Sham组）,肠缺血/再灌注1 h组和4 h组（I/R1组和I/R4组）,丁酸钠干预1 h组和4 h组（BTR1组和BTR4组）,每组10只。丁酸钠组和肠缺血/再灌注组夹闭大鼠肠系膜上动脉30 min,恢复灌流1,4 h,制备肠I/R模型;假手术组仅开腹不夹闭动脉。丁酸钠组术后立即皮下注射丁酸钠400 mg·kg;,假手术组和肠缺血/再灌注组皮下注射等量生理盐水。再灌注1,4 h后,经腹主动脉取血检测血浆肿瘤坏死因子（TNF-α）水平,取肺组织检测过氧化物酶（MPO）、丙二醛（MDA）活性和血管内皮生长因子（VEGF）含量,检测肺微血管通透性和肺组织含水率,观察肺组织病理变化。结果肠缺血/再灌注组血浆TNF-α及肺组织含水率、微血管通透性、MDA、MPO、VEGF显著高于假手术组（P<0.05）,肺组织损伤明显。与缺血/再灌注组相比,丁酸钠治疗后血浆TNF-α及肺组织含水率、微血管通透性、MDA、MPO、VEGF明显降低（P<0.05）,肺组织损伤减轻。结论丁酸钠能减轻大鼠肠缺血/再灌注后肺微血管通透性和肺组织水肿,有一定的肺保护作用,其保护机制可能与清除氧自由基、减轻炎症反应、减少中性粒细胞聚集和活化、降低肺组织VEGF水平有关。

关键词：丁酸钠缺血/再灌注肺损伤微血管通透性含水率

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电针足三里穴对失血性休克大鼠肾组织功能及脂质过氧化的影响

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中国急救医学 2015年第11期35卷 1036-1038页

作者：钟毓贤乔晋琳石现胡森中国人民解放军海军总医院康复医学科北京100048 解放军总医院针灸科北京100853 解放军总医院第一附属医院全军创伤修复与组织再生重点实验室暨皮肤损伤修复与组织再生北京市重点实验室北京100048

目的研究电针足三里穴对失血性休克大鼠肾组织功能及脂质过氧化损伤的保护作用。方法取40只SD雄性大鼠按全血容量的40％放血制成失血性休克模型。随机分为四组，电针足三里组（EA组）、电针非经非穴组（SEA组）、液体复苏组（FR组）、... 详细信息

目的研究电针足三里穴对失血性休克大鼠肾组织功能及脂质过氧化损伤的保护作用。方法取40只SD雄性大鼠按全血容量的40％放血制成失血性休克模型。随机分为四组，电针足三里组（EA组）、电针非经非穴组（SEA组）、液体复苏组（FR组）、模型对照组（MC组），每组10只。FR组于失血后10min静脉输入3倍失血量的乳酸林格液。EA组于失血后10min电针足三里穴（持续刺激25min，4Hz，4V）；SEA组电针非经非穴部位，其他操作同EA组。MC组制成失血性休克模型后不做任何处理。于失血后3、6h采血测定血浆肌酐（Cr）含量，并检测肾组织血流量（KBF），后处死动物取肾组织测定丙二醛（MDA）含量及组织含水率（WG）。结果失血性休克后3h和6h，EA组Cr含量显著低于SEA组和MC组，KBF显著高于SEA组和MC组（P〈0．05）；失血性休克后6h，EA组肾组织MDA含量及WG显著低于SEA组和MC组，以上三组均显著高于FR组（P〈0．05）。结论电针足三里能够一定程度上改善失血性休克大鼠肾组织缺血，减轻过氧化和组织水肿。

关键词：失血性休克足三里穴电针肾缺血

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自制毛囊再生乳膏对小鼠皮肤创面毛囊再生的影响

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解放军医学院学报 2021年第3期42卷 319-326页

作者：孙浩汤茂孙梦黎秦华马奎梅谨瑜赵安东付小兵解放军总医院医学创新研究部创伤修复和组织再生研究中心北京100853 解放军总医院第四医学中心全军创伤修复与组织再生重点实验室皮肤损伤修复与组织再生北京市重点实验室北京100048 天津医科大学天津300070 中国医学科学院严重创伤救治和组织修复与再生医学创新单元北京100048 解放军总医院第一医学中心组织再生与创面修复科北京100853

背景创面愈合时无毛囊等皮肤附属器再生是创面修复领域的难题。小分子化合物能够调控细胞增殖与分化,促使成熟体细胞再分化为具有增殖能力的前体细胞或其他细胞系,还能够靶向调控信号通路与代谢进程,是一种促进皮肤及附属器原位再生的... 详细信息

背景创面愈合时无毛囊等皮肤附属器再生是创面修复领域的难题。小分子化合物能够调控细胞增殖与分化,促使成熟体细胞再分化为具有增殖能力的前体细胞或其他细胞系,还能够靶向调控信号通路与代谢进程,是一种促进皮肤及附属器原位再生的安全有效的方法。目的本研究拟通过小分子化合物组合探索其促进创面毛囊再生的效果及机制。方法选取C57BL/6小鼠45只,雌性,体质量(20±5)g。以打孔器配合眼科剪制作小鼠背部双侧皮肤全层缺损创面动物模型,左侧创面为用药侧,右侧创面为对照侧。以负载CHIR-99021、Purmorphamine、Tofacitinib和SJ000291942四种小分子化合物的凡士林药膏(以下简称毛囊再生乳膏)连续涂抹小鼠背部皮肤全层缺损创面28 d,通过常规HE染色、Masson染色以及免疫组织化学染色分析创面愈合和毛囊再生情况。结果用药组与对照组小鼠背部创面愈合率无统计学差异,提示毛囊再生乳膏对创面愈合速度无显著影响。HE染色发现,毛囊再生乳膏处理创面14 d左右,用药组创面表皮形成毛囊上皮芽基细胞,真皮中出现毛乳头细胞。28 d可见用药组创面中大量毛囊样结构,免疫荧光染色证实其表达毛囊细胞特征性标志物CK5、CK15、CK17、Noggin,而对照组创面毛囊再生数量极少,用药组与对照组新生毛囊数量差异有统计学意义(17 vs 4,P<0.001)。Masson染色可见用药组与对照组创面胶原纤维密度及排列方式无明显区别,提示毛囊再生乳膏可诱导纤维瘢痕中毛囊再生。免疫组织化学染色显示用药侧创面新生的表皮细胞、毛囊上皮芽基细胞、新生毛乳头细胞中Wnt信号通路和Shh信号通路相关标志物β-catenin、Shh、Gli1显色明显,表明毛囊再生乳膏可能通过激活Wnt、Shh信号通路促进创面毛囊再生。结论本研究自制的毛囊再生乳膏能够通过调控毛囊生长发育过程中的Wnt信号通路和Shh信号通路促进创面愈合时毛囊再生,有望转化为创面治疗药物应用于临床。

关键词：小鼠皮肤创面小分子化合物CHIR-99021 小分子化合物Purmorphamine 小分子化合物Tofacitinib 小分子化合物SJ000291942 毛囊再生

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微小RNA调控骨髓间充质干细胞分化的研究进展

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中华实验外科杂志 2014年第6期31卷 1389-1390页

作者：谭志军陈艳张翠萍付小兵天津医科大学 300070 解放军总医院第一附属医院全军创伤修复与组织再生重点实验室

微小RNA（miRNA）是一类长度约为21-25个核苷酸的单链非编码小RNA分子，主要参与转录后基因的调控。骨髓间充质干细胞（BMSCs）是一类来源于骨髓非造血组织中的多能干细胞，具有良好的多向分化潜能和可塑性。现对miRNA在BMSCs向有关成... 详细信息

微小RNA（miRNA）是一类长度约为21-25个核苷酸的单链非编码小RNA分子，主要参与转录后基因的调控。骨髓间充质干细胞（BMSCs）是一类来源于骨髓非造血组织中的多能干细胞，具有良好的多向分化潜能和可塑性。现对miRNA在BMSCs向有关成体细胞定向分化中的调控机制及作用作以下综述。

关键词：骨髓间充质干细胞干细胞分化微小RNA 调控多向分化潜能细胞定向分化 RNA分子多能干细胞

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