检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：马奎赵志亮张翠萍付小兵解放军总医院第一附属医院全军创伤修复与组织再生重点实验室北京100048

目的：研究受体活性修饰蛋白1(receptor activity modifying protein 1,RAMP1)过表达对MG-63细胞降钙素受体样受体(calcitonin receptor-like receptor, CRLR)表达和分布的影响,探讨RAMP1过表达后对降钙素基因相关肽(calcitonin gene-re... 详细信息

关键词：受体活性修饰蛋白 MG-63细胞细胞分化

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骨髓间充质干细胞旁分泌成分修复难愈创面的基础研究

骨髓间充质干细胞旁分泌成分修复难愈创面的基础研究

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第九届全国创伤修复(愈合)与组织再生学术会议暨第二届中欧创面修复学术会议

作者：李基伟张翠萍付小兵解放军总医院第一附属医院全军创伤修复与组织再生重点实验室北京100048

目的：检测大鼠骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stromal cells,MSC)在促进局部难愈创面方面的影响,筛选MSC分泌的关键因子,过表达生长因子,以期为难愈性创面的治疗提供一种新的思路。

关键词：骨髓间充质干细胞细胞因子难愈创面

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搅拌式生物反应器培养促进拟胚体的形成及其向心肌细胞分化

搅拌式生物反应器培养促进拟胚体的形成及其向心肌细胞分化

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第八届全国创伤修复(愈合)与组织再生学术交流会

作者：何文俊付小兵解放军总医院第一附属医院全军创伤修复与组织再生重点实验室北京100048

目的：摸索搅拌式生物反应器培养小鼠胚胎干细胞(mESC)的最佳条件,建立一种批量制备拟胚体(EB)的方法。方法：研究mESC不同接种密度及生物反应器初始搅拌速度对EB形成的数量和质量的影响,以细菌培养皿中形成的EB为对照,用抗坏血酸诱导...

目的：摸索搅拌式生物反应器培养小鼠胚胎干细胞(mESC)的最佳条件,建立一种批量制备拟胚体(EB)的方法。方法：研究mESC不同接种密度及生物反应器初始搅拌速度对EB形成的数量和质量的影响,以细菌培养皿中形成的EB为对照,用抗坏血酸诱导其向心肌细胞分化,比较两种培养体系对EB心肌细胞分化潜能的影响,通过免疫荧光染色及RT-PCR对ESC来源的心肌细胞进行鉴定。结果：当mESC接种密度为1～3×105个/ml,搅拌速度设定为15～30 rpm时,搅拌式生物反应器能高效制备出大量相对均一的EB,EB中几乎没有坏死细胞。与细菌培养皿制备的EB相比,生物反应器培养的EB向心肌细胞分化的效率更高,并表达心肌特异性基因。结论：搅拌式生物反应器培养促进EB的形成及其向心肌细胞分化,是一种更为理想的EB培养系统。

关键词：

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240、Wnt/β-catenin信号通路活化促进人表皮细胞的增殖

240、Wnt/β-catenin信号通路活化促进人表皮细胞的增殖

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中国康复医学会修复重建外科专业委员会第19次学术交流会暨中国医师协会烧伤科医师分会2012年年会

作者：张翠萍付小兵孙同柱解放军总医院第一附属医院全军创伤修复与组织再生重点实验室北京100048

目的:探讨Wnt/β-catenin信号通路活化对人表皮细胞增值的影响.方法:差速贴壁法分离人成熟表皮细胞.将Wnt通路活化剂氯化锂(LiCl)(10 mmol/L)和GSK-3β抑制子(5 μmol/L)加入到细胞培养上清中,诱导3d和6d后观察细胞的生长特点,克隆形成...

目的:探讨Wnt/β-catenin信号通路活化对人表皮细胞增值的影响.方法:差速贴壁法分离人成熟表皮细胞.将Wnt通路活化剂氯化锂(LiCl)(10 mmol/L)和GSK-3β抑制子(5 μmol/L)加入到细胞培养上清中,诱导3d和6d后观察细胞的生长特点,克隆形成能力,计数细胞个数,并采用流式细胞仪检测细胞周期,计算细胞的增殖指数.

关键词：

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人骨髓间充质干细胞诱导分化为汗腺样细胞过程中microRNA表达谱差异的分析

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感染．炎症．修复 2016年第1期17卷 6-11页

作者：陈艳赵洪良谭志军赵焕军张翠萍付小兵北京军区总医院药理科北京100700 解放军总医院基础医学研究所北京100853 解放军总医院第一附属医院全军创伤修复与组织再生重点实验室暨皮肤损伤修复与组织再生北京市重点实验室北京100048

目的:利用微小RNA(microRNA)表达谱基因芯片检测新技术,寻找人骨髓间充质干细胞(MSCs)分化为汗腺样细胞(SGLCs)过程中的关键microRNAs及其介导的分子信号通路。方法:通过间接培养方法诱导MSCs分化为SGLCs后,利用microRNA基因芯片检测,分... 详细信息

目的:利用微小RNA(microRNA)表达谱基因芯片检测新技术,寻找人骨髓间充质干细胞(MSCs)分化为汗腺样细胞(SGLCs)过程中的关键microRNAs及其介导的分子信号通路。方法:通过间接培养方法诱导MSCs分化为SGLCs后,利用microRNA基因芯片检测,分析MSCs诱导前后以及MSCs、SGLC与正常成人汗腺细胞(SGCs)之间microRNA差异表达谱,筛选出其中发生极其显著改变的microRNAs,通过microRNA靶点预测软件,进一步筛选出其中直接靶向与汗腺发育、干细胞分化相关基因的microRNAs及其靶基因。结果:microRNA表达谱的差异比对结果显示,SGLCs与MSCs相比,19个microRNAs上调,49个microRNAs下调;SGCs与MSCs相比,120个microRNAs上调,59个microRNAs下调。取SGLCs与MSCs差异表达谱和SGCs与MSCs差异表达谱的交集,发现37个microRNAs在以上两个差异表达谱中均出现,其中12个microRNAs上调,25个microRNAs下调,它们可直接靶向与汗腺发育和干细胞分化相关的CEA等多个细胞因子,并参与EDA/EDAR、NF-κB、Wnt、ERK等多个相关信号通路的调节。结论:通过生物信息学靶点分析,成功寻找到在MSCs分化为SGLCs的过程中,靶向汗腺发育和干细胞分化相关细胞因子和信号通路的关键microRNAs。

关键词：骨髓间充质干细胞汗腺细胞 microRNA表达谱差异性分析

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人外分泌汗腺细胞分离方法的优化

人外分泌汗腺细胞分离方法的优化

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第九届全国创伤修复(愈合)与组织再生学术会议暨第二届中欧创面修复学术会议

作者：赵换军张翠萍付小兵解放军总医院第一附属医院全军创伤修复与组织再生重点实验室北京100048

目的：优化人体外外分泌汗腺细胞分离的方法,以高效地提取原代汗腺细胞.方法：新鲜的皮肤组织标本经过D-hank's液漂洗后,剪成组织微粒(大小约1mm3),A组使用胰蛋白酶-EDTA(胰蛋白酶0.25％,EDTA 0.53mM)和胶原酶Ⅱ型(2mg/ml)体积分数1... 详细信息

目的：优化人体外外分泌汗腺细胞分离的方法,以高效地提取原代汗腺细胞.方法：新鲜的皮肤组织标本经过D-hank's液漂洗后,剪成组织微粒(大小约1mm3),A组使用胰蛋白酶-EDTA(胰蛋白酶0.25％,EDTA 0.53mM)和胶原酶Ⅱ型(2mg/ml)体积分数1∶1混合的方法;B组采用传统消化方法,即胶原酶Ⅱ型(2mg/ml);C组采用胰蛋白酶-EDTA(胰蛋白酶0.25％,EDTA 0.53mM)消化的方法,三组同时置于37℃、5％CO2饱和湿度的恒温培养箱内消化,比较这三种方法处理后游离汗腺细胞团出现所需的时间.

关键词：汗腺细胞胰蛋白酶 Ⅱ型胶原酶分离培养

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244、搅拌式生物反应器培养促进拟胚体的形成及其向心肌细胞分化

244、搅拌式生物反应器培养促进拟胚体的形成及其向心肌细胞分化

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中国康复医学会修复重建外科专业委员会第19次学术交流会暨中国医师协会烧伤科医师分会2012年年会

作者：何文俊付小兵解放军总医院第一附属医院全军创伤修复与组织再生重点实验室北京100048

目的:摸索搅拌式生物反应器培养小鼠胚胎干细胞(mESC)的最佳条件,建立一种批量制备拟胚体(EB)的方法.方法:研究mESC不同接种密度及生物反应器初始搅拌速度对EB形成的数量和质量的影响,以细菌培养皿中形成的EB为对照,用抗坏血酸诱导其向...

目的:摸索搅拌式生物反应器培养小鼠胚胎干细胞(mESC)的最佳条件,建立一种批量制备拟胚体(EB)的方法.方法:研究mESC不同接种密度及生物反应器初始搅拌速度对EB形成的数量和质量的影响,以细菌培养皿中形成的EB为对照,用抗坏血酸诱导其向心肌细胞分化,比较两种培养体系对EB心肌细胞分化潜能的影响,通过免疫荧光染色及RT-PCR对ESC来源的心肌细胞进行鉴定.

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汗腺细胞冻存液的改进

汗腺细胞冻存液的改进

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第八届全国创伤修复(愈合)与组织再生学术交流会

作者：马奎付小兵解放军总医院第一附属医院全军创伤修复与组织再生重点实验室北京100048

目的：比较传统冻存液与新改进的冻存液对汗腺细胞存活率的影响.方法：将分离培养的人汗腺细胞随机分为两组计数冻存，一组使用传统冻存液(20％血清、10％DMSO、70％DMEM培养液)，另一组使用新改进的冻存液(在传统冻存液的基础上加入表...

目的：比较传统冻存液与新改进的冻存液对汗腺细胞存活率的影响.方法：将分离培养的人汗腺细胞随机分为两组计数冻存，一组使用传统冻存液(20％血清、10％DMSO、70％DMEM培养液)，另一组使用新改进的冻存液(在传统冻存液的基础上加入表皮生长因子80ng/ml、角质细胞生长因子-Ⅱ 50ng/ml、三碘甲状腺原氨酸30ng/ml、半琥珀酸氢化可的松0.8ug/ml、胰岛素-转铁蛋白-亚硒酸钠0.1ng/ml).冻存一周后，复苏细胞进行台盼兰染色计数活细胞数，并观察细胞的形态和生长情况.结果：汗腺细胞使用传统冻存液进行冻存复苏后，细胞存活率为20％;使用新改进的冻存液进行冻存复苏后，细胞存活率为80％，明显高于传统冻存液组(P＜0.01)，而且细胞生长状态良好，保持了原有的汗腺细胞形态.结论：新改进的冻存液在提高汗腺细胞存活率方面明显优于传统冻存液.

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微小RNA治疗从实验室到临床需突破的瓶颈限制

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感染．炎症．修复 2015年第2期16卷 114-117页

作者：陈艳张翠萍付小兵解放军总医院生命科学院北京100853 北京军区总医院药理科北京100700 解放军总医院第一附属医院全军创伤修复与组织再生重点实验室暨皮肤损伤修复与组织再生北京市重点实验室北京100048

微小RNA（miRNA）是由18～24个核苷酸组成的单链非编码小RNA。研究预测，人类基因组中超过60％的基因受miRNAs调节．miRNAs在各种生理、病理过程和疾病治疗中发挥着重要作用。作为分子生物领域一个新的研究热点，当前miRNAS的研究发展... 详细信息

微小RNA（miRNA）是由18～24个核苷酸组成的单链非编码小RNA。研究预测，人类基因组中超过60％的基因受miRNAs调节．miRNAs在各种生理、病理过程和疾病治疗中发挥着重要作用。作为分子生物领域一个新的研究热点，当前miRNAS的研究发展迅速，获得了重要的研究进展，但miRNA研究仍处于早期阶段，尤其面向临床应用时，许多现实问题和技术性瓶颈仍有待于解决。

关键词：临床应用微小RNA 治疗实验室 miRNAs 非编码小RNA 人类基因组 miRNAS

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脐带间充质干细胞对创伤后早期急性肺损伤作用的研究

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感染．炎症．修复 2013年第1期14卷 3-6,F0002页

作者：鲁刚马奎付小兵解放军医学院北京100853 解放军总医院第一附属医院全军创伤修复与组织再生重点实验室北京100048

目的:探讨脐带间充质干细胞(UCMSC)对创伤后急性肺损伤(ALI)早期的作用。方法:采用撞击后静脉注射脂多糖的二次打击方法复制创伤后ALI家兔模型。24只家兔随机分为正常对照组(正常饲养)、ALI组(复制ALI模型)和UCMSC组(伤前30 min静脉注射... 详细信息

目的:探讨脐带间充质干细胞(UCMSC)对创伤后急性肺损伤(ALI)早期的作用。方法:采用撞击后静脉注射脂多糖的二次打击方法复制创伤后ALI家兔模型。24只家兔随机分为正常对照组(正常饲养)、ALI组(复制ALI模型)和UCMSC组(伤前30 min静脉注射UCMSC 1×10~6个),每组8只。各组动物于伤后0、1.5、3和6 h测定血浆TNF-α含量;伤后6 h测定PaO_2,支气管肺泡灌洗液(BALF)中TNF-α、补体C3a和C5a、白蛋白含量及中性粒细胞计数,肺湿/干重比值(W/D),免疫组织化学法观察肺组织中TNF-α蛋白的表达,光镜下观察肺组织病理学变化。结果:与正常对照组比较,ALI组PaO_2下降,其余各检测指标均明显升高,镜下见肺泡壁破坏,肺泡腔渗出和出血,肺组织TNF-α表达增强。伤前给予UCMSC能提高ALI动物的PaO_2,不同程度降低外周血TNF-α及BALF中TNF-α[(0.72±0.70)μg/L比(1.82±0.60)μg/L]、C3a[(0.28±0.07)μg/L比(0.45±0.03)μg/L]、C5a[(0.08±0.01)μg/L比(0.19±0.03)μg/L]、白蛋白含量[(69.0±9.7)mg/L比(102.0±14.9)mg/L]和中性粒细胞计数[(229.0±21.4)×10^(6/)L比(298.0±36.8)×10^(6/)L],降低肺W/D,抑制肺组织TNF-α蛋白表达,减轻肺泡的损伤程度。结论:UCMSC能减少ALI时组织及血浆TNF-α的含量,减轻肺泡损伤程度,在一定程度上对早期创伤后急性肺损伤起保护作用。

关键词：脐带间充质干细胞肺损伤急性创伤肿瘤坏死因子-α

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