检索结果-内蒙古大学图书馆

感染．炎症．修复 2010年第1期11卷 4-5页

作者：付小兵解放军总医院基础医学研究所解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室北京100048

组织再生及其相关领域的研究近年来在我国发展十分迅速，许多大学、医院、研究机构以及公司等都涉足于这个领域，标志着一个多学科、跨专业和产学研相结合的再生医学研究正在逐步形成。从学术层面来看，我国科学家在再生医学基础研究的... 详细信息

组织再生及其相关领域的研究近年来在我国发展十分迅速，许多大学、医院、研究机构以及公司等都涉足于这个领域，标志着一个多学科、跨专业和产学研相结合的再生医学研究正在逐步形成。从学术层面来看，我国科学家在再生医学基础研究的某些领域已有明显突破，如证明诱导性多能干细胞（iPS）具有发育的全能性，利用维生素C提高iPS产生率以及有关表皮细胞通过去分化途径转变为表皮干细胞现象的发现等都在国际重要杂志发表了相关结果，引起了较大的反响。

关键词：组织再生医学研究医学基础研究多能干细胞表皮干细胞研究机构分化途径表皮细胞

来源：评论

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复合汗腺的组织工程三维皮肤模型的构建

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感染．炎症．修复 2010年第1期11卷 6-9,F0002页

作者：黄沙付小兵解放军总医院基础医学研究所解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室北京100048

目的:运用组织工程化方法在体外建立复合汗腺的三维皮肤模型,阐明汗腺体外再生的可行性,并为初步建立含有汗腺的仿生化功能性组织工程皮肤奠定实验基础。方法:分离培养人表皮细胞、成纤维细胞和汗腺细胞,将表皮细胞与汗腺细胞按1:1的比... 详细信息

目的:运用组织工程化方法在体外建立复合汗腺的三维皮肤模型,阐明汗腺体外再生的可行性,并为初步建立含有汗腺的仿生化功能性组织工程皮肤奠定实验基础。方法:分离培养人表皮细胞、成纤维细胞和汗腺细胞,将表皮细胞与汗腺细胞按1:1的比例共培养,在培养体系中分别加入含表皮细胞生长因子(EGF)的微球,噻唑蓝(MTT)法观察细胞增殖情况,并与培养时直接加入EGF及不加EGF的对照组进行比较。将共培养的细胞接种于复合成纤维细胞的胶原基质并通过三维培养方式构建组织工程皮肤模型,在模型中加入复合EGF的微球释放载体促进汗腺再生和上皮化进程,HE染色和免疫组织化学方法检测所构建组织工程皮肤以及体外再生汗腺的结构,并与模型中直接加入EGF和未加EGF的对照组进行比较。结果:MTT检测结果显示,与两对照组相比较,通过共培养方式获得的表皮与汗腺细胞团在复合EGF微球作用下生长良好,有明显增殖作用;组织学观察结果显示所构建组织工程皮肤模型具有和正常皮肤相似的结构,并在真皮浅层形成了类似汗腺结构的细胞密集区域,存在大量汗腺特异性标志--角蛋白19(CKl9)和癌胚抗原(CEA)阳性的细胞,这种现象在单纯EGF组仅有微弱表现,在空白对照组则无此现象出现。结论:构建具有汗腺结构的体外皮肤模型具有可行性,这为汗腺再生和功能性组织工程皮肤的研究开创了新的途径。

关键词：汗腺再生组织工程皮肤三维皮肤模型

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盐酸法舒地尔对脂肪干细胞向表皮样细胞分化的影响

盐酸法舒地尔对脂肪干细胞向表皮样细胞分化的影响

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第二十次中日整形外科学术交流会暨中国康复医学会修复重建外科第十七次学术交流会暨第四届全国颅颌面整形美容外科专业组学术会议暨第一次修复重建外科学会皮瓣学组学术会议

作者：沙德潜付小兵张翠萍孙同柱解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室

目的观察Rho分子信号通路阻断剂盐酸法舒地尔(HA1077)对脂肪干细胞向表皮样细胞分化的影响。方法采用酶消化法,消化、分离人脂肪组织,获得人脂肪干细胞。流式检测第3代培养的细胞的CD44、CD34及CD49d的表达以鉴定其为hASC。用不同培养... 详细信息

目的观察Rho分子信号通路阻断剂盐酸法舒地尔(HA1077)对脂肪干细胞向表皮样细胞分化的影响。方法采用酶消化法,消化、分离人脂肪组织,获得人脂肪干细胞。流式检测第3代培养的细胞的CD44、CD34及CD49d的表达以鉴定其为hASC。用不同培养基设不同诱导组[诱导组2:培养液2(基础培养基+20umol/LHAl077)、诱导组3:培养液3(70%基础培养基+30%成纤维细胞培养基上清液+10 ng/LEGF)、诱导组4:培养液4(20μmol/LHA1077+培养液3)]与组1即对照组(基础培养基培养)作比较,诱导20d时1～4组均用流式细胞仪检测CK19,免疫组化检测CK19、CK10。结果流式细胞仪检测各实验组CK19的表达阳性率分别为(0.23±0.010)%、(0.35±0.020)%、(9.73±0.800)%、(17.65±0.998)%(n=3),20d时第2组的细胞形态仍为原来的长梭形成纤维细胞状结构,细胞紧密排列成片,与空白对照组细胞形态变化差别不大。第4组细胞形态由原来的长梭形逐渐变粗变短,其细胞形态变化较其它组出现早.对人ADSCs向表皮样细胞分化有促进趋势。免疫组化检测示第3、4组有CK19、CK10表达,第4组较第3组阳性率增高,对照组为阴性结果。结论单纯的盐酸法舒地尔不具有使人脂肪干细胞向表皮样细胞分化的能力;一定浓度的盐酸法舒地尔对人脂肪干细胞向表皮样细胞分化有促进作用。

关键词：细胞分化人脂肪干细胞盐酸法舒地尔

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重组人Oct4透膜蛋白的制备和鉴定

重组人Oct4透膜蛋白的制备和鉴定

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作者：刘波付小兵张翠萍孙同柱解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室

目的构建pET30a-TAT-Oct4重组子,表达具有细胞膜穿透能力的TAT-Oct4融合蛋白。方法人工合成编码TAT蛋白转导域的DNA片段,插入载体pET30a后再连接人Oct4基因,组成pET30a-TAT-Oct4重组表达子,转化大肠杆菌,IPTG诱导TAT-Oct4融合蛋白表达,... 详细信息

目的构建pET30a-TAT-Oct4重组子,表达具有细胞膜穿透能力的TAT-Oct4融合蛋白。方法人工合成编码TAT蛋白转导域的DNA片段,插入载体pET30a后再连接人Oct4基因,组成pET30a-TAT-Oct4重组表达子,转化大肠杆菌,IPTG诱导TAT-Oct4融合蛋白表达,经组氨酸亲和层析柱纯化,FITC标记融合蛋白,观察其透膜能力。结果成功构建了高表达pET30a-TAT-Oct4的重组子,纯化表达了TAT-Oct4融合蛋白,通过对融合蛋白的表达纯化及活性分析,证实了TAT的蛋白转导作用。结论利用生物工程技术人工合成了重组人Oct4透膜蛋白,为细胞去分化提供了新的诱导技术。

关键词：重组子 TAT

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表皮干细胞(hESCs)转分化与病理性瘢痕形成的相关性

表皮干细胞(hESCs)转分化与病理性瘢痕形成的相关性

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作者：雷永红解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室

目的探讨转化生长因子TGF-β1诱导表皮干细胞(hESCs)转分化与病理性瘢痕形成的相关性。方法采用改良的Ⅳ型胶原选择黏附法分离、培养表皮干细胞,检测表皮干细胞表面标志物β1整合素和CK19鉴定,第三代表皮干细胞

关键词：病理性瘢痕 hESCs

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快速建立人汗腺细胞培养系的实验方法研究

快速建立人汗腺细胞培养系的实验方法研究

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作者：许永安黄沙张翠萍孙同柱付小兵解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室

目的快速体外分离、培养人汗腺细胞培养系。方法在通过采用临床治疗过程中制作微粒皮的方法来缩小皮肤微粒大小、增加胶原酶Ⅱ型的浓度以及改变胶原酶Ⅱ型酶解消化皮肤的反应时的温度条件,进一步加快人皮肤汗腺细胞的获取速度。通过与... 详细信息

目的快速体外分离、培养人汗腺细胞培养系。方法在通过采用临床治疗过程中制作微粒皮的方法来缩小皮肤微粒大小、增加胶原酶Ⅱ型的浓度以及改变胶原酶Ⅱ型酶解消化皮肤的反应时的温度条件,进一步加快人皮肤汗腺细胞的获取速度。通过与现有的汗腺细胞分离方法做对比,进一步证实此方法分离、获取汗腺细胞的高效性。结论本试验建立的汗腺细胞分离、培养方法较现有的方法更加高效、便捷,为汗腺的修复与再生研究提供一种获取细胞的新策略。

关键词：汗腺细胞胶原酶实验方法

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Wnt/β-catenin信号通路活化对表皮细胞表型变化的影响

Wnt/β-catenin信号通路活化对表皮细胞表型变化的影响

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作者：张翠萍解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室

目的探讨Wnt/β-catenin信号通路活化对表皮细胞表型变化的影响。方法差速贴壁法分离成熟表皮细胞。将Wnt通路活化剂氯化锂(LiCl)(20mM)和GSK-3β抑制子(15μM)加入到细胞培养上清中,诱导6天后观察细胞的形态

关键词：信号通路细胞表型 Wnt catenin

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去分化来源表皮干细胞的分离及表型特征观察

去分化来源表皮干细胞的分离及表型特征观察

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作者：张翠萍付小兵孙同柱解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室

目的分离培养去分化来源的表皮干细胞(dedifferentiation-derived epidermal stem cells,DDESCs),并进一步观察其表型特征。方法包皮皮片去除皮下脂肪后,中性蛋白酶消化过夜,分离表皮和真皮。分离的表皮片用Ⅳ型胶原反复粘贴并冲洗去除... 详细信息

目的分离培养去分化来源的表皮干细胞(dedifferentiation-derived epidermal stem cells,DDESCs),并进一步观察其表型特征。方法包皮皮片去除皮下脂肪后,中性蛋白酶消化过夜,分离表皮和真皮。分离的表皮片用Ⅳ型胶原反复粘贴并冲洗去除表皮干细胞后,移植到BALB/c裸鼠背部全层皮肤缺损创面,移植5天后收集皮片制备单细胞悬液,流式检测CK10、CK19和?1整合素阳性细胞百分数,然后用Ⅳ型胶原粘贴法分离皮片内DDESCs,并采用免疫荧光法和荧光定量PCR法分别检测去分化细胞内CK19、?1整合素、Oct4和Nanog的表达。结果流式检测结果表明,皮片移植5天后,CK10阳性细胞减少(P<0.01),CK19和?1整合素阳性细胞增加(P<0.01)。Ⅳ型胶原粘贴分离DDESCs,结果表明,移植皮片组在10min内约有4.56%的贴壁细胞出现。细胞的表型分析结果表明DDESCs内CK19、?1整合素、Oct4和Nanog的表达量类似于原始表皮干细胞(P>0.05)但明显高于成熟表皮细胞(P<0.01)。结论 DDESCs的表型特征与原始表皮干细胞相类似,预示将来去分化细胞有可能代替原始表皮干细胞应用于创伤部位的修复和再生。

关键词：去分化来源表皮干细胞流式检测整合素

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科技成果转化中应当注意的几个关系

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感染．炎症．修复 2010年第3期11卷 131-132页

作者：付小兵解放军总医院基础医学研究所北京100853 解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室北京100048

转化医学代表了当今医学发展的一个潮流，成功的转化不仅是检验理论发现的重要标准，而且也是产生新的重大临床治疗新技术的基础。本文结合近年来我们自己将基础研究的成果转化为临床应用的体会，就医学科技成果转化中应当处理好的几个... 详细信息

转化医学代表了当今医学发展的一个潮流，成功的转化不仅是检验理论发现的重要标准，而且也是产生新的重大临床治疗新技术的基础。本文结合近年来我们自己将基础研究的成果转化为临床应用的体会，就医学科技成果转化中应当处理好的几个关系谈谈个人的意见。

关键词：科技成果转化医学发展转化医学临床治疗临床应用

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诱生型多能干细胞建系的技术要点

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感染．炎症．修复 2010年第4期11卷 251-253页

作者：刘波付小兵解放军总医院第一附属医院全军创伤修复与组织再生重点实验室北京100048

诱生型多能干细胞（induced pluripotent stem cell,iPSCs）技术是近几年发展起来的人工诱导细胞去分化（celldedifferentiation）技术,可以通过转录因子诱导细胞核重编程,导致细胞去分化而形成与胚胎干细胞特性近似的多能干细胞系,在... 详细信息

诱生型多能干细胞（induced pluripotent stem cell,iPSCs）技术是近几年发展起来的人工诱导细胞去分化（celldedifferentiation）技术,可以通过转录因子诱导细胞核重编程,导致细胞去分化而形成与胚胎干细胞特性近似的多能干细胞系,在基础研究和临床应用上有广阔前景.目前该技术尚处于研发起步阶段,仍有许多技术缺陷未取得突破和共识,未来需在方法学上进一步研究以形成统一的规范.

关键词：多能干细胞诱生型建系 cell 人工诱导转录因子干细胞系细胞特性

来源：评论

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