检索结果-内蒙古大学图书馆

中华创伤杂志 2009年第9期25卷 774-778页

作者：张翠萍付小兵孙同柱解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室北京100037

目的研究创伤微环境对表皮细胞的去分化诱导作用，并探讨Wnt通路在这一过程中的作用。方法包皮皮片去除皮下脂肪后，中性蛋白酶消化过夜，分离表皮和真皮。分离的表皮片用Ⅳ型胶原反复粘贴并冲洗去除表皮干细胞。处理后的表皮片经免疫... 详细信息

目的研究创伤微环境对表皮细胞的去分化诱导作用，并探讨Wnt通路在这一过程中的作用。方法包皮皮片去除皮下脂肪后，中性蛋白酶消化过夜，分离表皮和真皮。分离的表皮片用Ⅳ型胶原反复粘贴并冲洗去除表皮干细胞。处理后的表皮片经免疫组化鉴定后移植到BALB／c裸鼠背部全层皮肤缺损创面，5d后用免疫组化法检测皮片内细胞的表型特征，RT—PCR和Western blot检测表皮细胞表型转化过程中Wnts分子及下游分子的表达变化。结果未经处理的表皮片基底部细胞呈CK10染色阴性，CK19和β1整合素染色阳性；Ⅳ型胶原处理后的表皮片内细胞全呈CK10染色阳性。而去基底皮片移植后5d，在皮片的基底侧重新出现CK10染色阴性、CK19和β1整合素染色阳性的细胞。同时在移植皮片内Wnt-10b、Wnt-4和Wnt-7a mR—NA的表达分别增加了3．1倍、2．2倍和1．4倍，而Wnt通路下游β-catenin、cyclin D1和c—myc蛋白表达分别增加了3倍、1．5倍和2倍（P〈0．01）。结论创伤微环境可诱导表皮细胞去分化，Wnt／β-catenin信号通路可能在这一过程中起关键性的调控作用。

关键词：创伤和损伤表皮去分化信号传导 Wnt/β-catenin信号通路

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深Ⅱ度烧伤创面汗腺干细胞标志物的变化规律

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中华烧伤杂志 2009年第4期25卷 301-304页

作者：姜笃银宗宪磊付小兵王魏单菲山东大学第二医院急诊科济南250033 解放军总医院基础医学所第一附属医院全军创伤修复重点实验室

目的了解深Ⅱ度烧伤创面愈合过程中汗腺上皮细胞增殖并向表皮细胞转化的规律，探讨其机制。方法选择2004年1月-2007年12月，江苏省泰州市第四人民医院和山东大学第二医院收治的四肢与躯干烧伤患者28例。收集患者深Ⅱ度烧伤创面组织标本3... 详细信息

目的了解深Ⅱ度烧伤创面愈合过程中汗腺上皮细胞增殖并向表皮细胞转化的规律，探讨其机制。方法选择2004年1月-2007年12月，江苏省泰州市第四人民医院和山东大学第二医院收治的四肢与躯干烧伤患者28例。收集患者深Ⅱ度烧伤创面组织标本37块、浅Ⅱ度烧伤创面组织标本21块、正常皮肤标本10块。采用免疫组织化学双染色法，观察细胞角蛋白10（CK10）、CK14、CKl9、bcl-2和P63在深、浅Ⅱ度烧伤创面及正常皮肤汁腺分泌部上皮细胞中的表达情况。结果正常皮肤汗腺分泌部上皮细胞中等强度表达CK19、CK14和CK10，基底层肌上皮细胞做弱表达P63和CK14，CK10表达阳性的终末分化细胞不表达bcl-2和P63。浅Ⅱ度烧伤创面修复过程中，其汗腺分泌部结构及上述蛋白表达未见异常。深Ⅱ度烧伤后7d创面汗腺分泌部上皮细胞P63和bcl-2表达增强；伤后8～10d创面基底细胞增殖、迁移和鳞状七皮化，形成bcl-2、P63、CK19和CK14表达强阳性的实心岛状上皮结构，并随肉芽组织向创面浅层迁移，经鳞状上皮增殖完成创面再上皮化。深Ⅱ度烧伤创面愈合后13～30d，超常增殖的表皮基底层和基底上层细胞仍强烈表达bcl-2、CK14、CK19和P63。结论干细胞和短暂扩充细胞逆分化过程导致上皮生长滞后和肉芽组织过度增殖，这种失衡现象可能是导致深Ⅱ度烧伤创面修复失控的重要机制之一。

关键词：烧伤汗腺上皮细胞干细胞转分化

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碱性成纤维细胞生长因子基因转染人表皮细胞及其表达

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中华实验外科杂志 2009年第3期26卷 286-288,409页

作者：伊海英孙晓艳付小兵任明姬张广田解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室北京100037 解放军总医院基础医学研究所内蒙古医学院基础医学院

目的观察碱性成纤维细胞生长因子基因真核表达载体（pEGFP—C3-bFGF）能否转染体外培养的人表皮细胞并表达。方法采用脂质体（LipofectamineTM2000）转染法，将pEGFP—C3-bFGF转染至人表皮细胞系（HEKa细胞）中，在荧光显微镜下观察其... 详细信息

目的观察碱性成纤维细胞生长因子基因真核表达载体（pEGFP—C3-bFGF）能否转染体外培养的人表皮细胞并表达。方法采用脂质体（LipofectamineTM2000）转染法，将pEGFP—C3-bFGF转染至人表皮细胞系（HEKa细胞）中，在荧光显微镜下观察其瞬时表达及细胞形态。以同期培养的表皮细胞作为阴性对照，免疫细胞化学染色和免疫荧光标记法检测实验组及对照组中β1整合素、CK19、CK14及CK10在表皮细胞中表达的差异。结果荧光显微镜下观察基因转染率为31，6％，转染的细胞体积小，呈圆形或圆梭形，核质比大。免疫细胞化学染色结果显示，实验组细胞中CK19、CK14表达增强，CK10表达减弱。免疫荧光染色结果显示，转染阳性细胞β1整合素弱表达分布在胞膜上，CK19、CK14在胞膜和胞质中表达，CK10表达为阴性。结论pEGFP—C3-bFGF能够转染至人表皮细胞并表达，为探讨bFGF调控表皮细胞去分化的分子机制提供实验参考。

关键词：碱性成纤维细胞生长因子表皮细胞基因转染

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诱导骨髓间充质干细胞再生汗腺组织的神经与血管支配研究

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创伤外科杂志 2009年第5期11卷 388-392页

作者：付小兵孙同柱雷永红包晓霞张翠萍盛志勇解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室北京100037

目的研究诱导骨髓间充质干细胞再生汗腺组织后的神经与血管分布特征,以确认再生汗腺组织是否受到新生神经的支配和新生血管的血液供应,进而评价再生汗腺组织的质量。方法选择烧伤后行瘢痕切除术患者4例。每例患者均设创面自体骨髓间充... 详细信息

目的研究诱导骨髓间充质干细胞再生汗腺组织后的神经与血管分布特征,以确认再生汗腺组织是否受到新生神经的支配和新生血管的血液供应,进而评价再生汗腺组织的质量。方法选择烧伤后行瘢痕切除术患者4例。每例患者均设创面自体骨髓间充质干细胞(MSCs)移植和对照两个部位。移植部位在瘢痕切除的创面上接种经过诱导的MSCs,而对照部位除未接种MSCs外,其余方法同治疗创面。术后3个月在移植部位和对照部位分别进行发汗试验。在移植部位发汗试验呈阳性处取材,同时取对照部位的组织和术中切下的瘢痕组织。采用免疫组织化学二步法检测所取组织标本的S-100蛋白(S-100)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、八因子相关抗原(Ⅷ-RAg)和CD34的表达,并与正常皮肤作比较研究。结果4例创面移植部位发汗试验均呈阳性,对照部位发汗试验阴性。免疫组织化学检测显示移植部位的真皮浅层有结构类似于正常汗腺的组织团块,而对照部位未观察到类似结构。S-100、NSE、Ⅷ-RAg和CD34在移植部位、对照部位、瘢痕组织以及正常皮肤均有表达,并且S-100、NSE、Ⅷ-RAg和CD34在移植部位再生汗腺组织中的分布与在正常皮肤汗腺组织中的分布极其相似。结论诱导骨髓间充质干细胞再生汗腺的组织中均有神经与血管分布,提示形成具有功能的汗腺组织可能受到新生神经的支配和新生血管的血液供应,骨髓间充质干细胞经诱导可以生成形态和功能较好的汗腺组织。

关键词：汗腺干细胞 S-100蛋白神经元烯醇化酶抗原

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诱导性多潜能干细胞(iPS)研究：现状与展望

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中国工程科学 2009年第5期11卷 81-87页

作者：韩为东赵亚力付小兵解放军总医院基础医学研究所北京100853 解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室北京100037

通过特定的基因组合与转染可以将已分化的体细胞诱导重编程为多潜能干细胞(iPS),是近年来干细胞研究领域最令人瞩目的一项新的干细胞制造技术。与胚胎干细胞(ES)不同,iPS细胞的制造不需要毁损胚胎,因而不会涉及更多的伦理学问题。iPS的... 详细信息

通过特定的基因组合与转染可以将已分化的体细胞诱导重编程为多潜能干细胞(iPS),是近年来干细胞研究领域最令人瞩目的一项新的干细胞制造技术。与胚胎干细胞(ES)不同,iPS细胞的制造不需要毁损胚胎,因而不会涉及更多的伦理学问题。iPS的出现不仅为体细胞重编程去分化机制的研究注入了新的活力,而且为疾病发生发展相关机制研究与特异的细胞治疗,特别是再生医学带来新的曙光。目前,iPS的研究尚处于初级阶段,文章就iPS的研究现状与应用前景进行综述和展望。

关键词：体细胞重编程 iPS细胞

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成人表皮干细胞可能具有多潜能性分化特征

成人表皮干细胞可能具有多潜能性分化特征

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第七届全国创伤学术会议暨2009海峡两岸创伤医学论坛

作者：韩为东付小兵解放军总医院基础医学所解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室

目的多种组织特异干细胞在特定条件下具有分化为另外组织细胞类型的能力,这一特点使得利用某种特定干细胞进行组织修复与再生成为可能。然而,干细胞的大量获取与体外扩增存在困难。皮肤是人体最大的器官,富含未分化角质细胞(表皮干细胞)... 详细信息

目的多种组织特异干细胞在特定条件下具有分化为另外组织细胞类型的能力,这一特点使得利用某种特定干细胞进行组织修复与再生成为可能。然而,干细胞的大量获取与体外扩增存在困难。皮肤是人体最大的器官,富含未分化角质细胞(表皮干细胞),既往的移植实验证实该类细胞可参与

关键词：多潜能性人表皮干细胞定向分化

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创面治疗中心的建设势在必行

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中华创伤杂志 2009年第9期25卷 769-770页

作者：付小兵陆树良蒋建新王正国解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室北京100048 上海交通大学附属瑞金医院烧伤研究所第三军医大学附属大坪医院野战外科研究所、创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室

创面治疗不仅是一切创伤治疗的基础，而且也是防止后期并发症以及促进创伤患者早日康复的关键。而有一定规模和特色的创面治疗中心，则是促进创面治疗新技术发展和惠及创伤患者的保障。近二十余年来，各种创面在数量上的不断增多和导致... 详细信息

创面治疗不仅是一切创伤治疗的基础，而且也是防止后期并发症以及促进创伤患者早日康复的关键。而有一定规模和特色的创面治疗中心，则是促进创面治疗新技术发展和惠及创伤患者的保障。近二十余年来，各种创面在数量上的不断增多和导致创面形成各种原因的复杂性，使人们对创面治疗的需求也日益增高。另一方面，高新技术的发展给创面治疗提供了许多新的治疗手段和方法，

关键词：创面治疗治疗中心创伤患者后期并发症创伤治疗高新技术复杂性

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人脐带间充质干细胞的分离培养及生物学特性的研究

人脐带间充质干细胞的分离培养及生物学特性的研究

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第七届全国创伤学术会议暨2009海峡两岸创伤医学论坛

作者：赵宏宇付小兵孙同柱雷永红张翠萍艾丽解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室

目的探讨并建立可靠的人脐带间充质干细胞体外分离和培养的方法,并对其生物学特性进行研究。方法采用酶消化法分离脐带间充质干细胞,利用其易贴附朔料壁生长的特性进行传代和纯化,观察其形态学特征,绘制生长曲线,免疫组化及流式细胞技... 详细信息

目的探讨并建立可靠的人脐带间充质干细胞体外分离和培养的方法,并对其生物学特性进行研究。方法采用酶消化法分离脐带间充质干细胞,利用其易贴附朔料壁生长的特性进行传代和纯化,观察其形态学特征,绘制生长曲线,免疫组化及流式细胞技术检测细胞表面标志物的表达情况。结果

关键词：人脐带间充质干细胞生物学特性分离培养

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瘢痕组织成纤维细胞重编成iPS的实验研究

瘢痕组织成纤维细胞重编成iPS的实验研究

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第七届全国创伤学术会议暨2009海峡两岸创伤医学论坛

作者：李美蓉付小兵张翠萍解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室

目的通过逆转录病毒携带外源性基因Oct3/4、Sox2、Klf4及c-Myc多潜能转录因子转染宿主细胞,多种正常成体细胞能够进行重编程,形成在形态学、表观遗传学、全基因表达谱以及细胞分化潜能方面与胚胎干细胞高度相似的iPS(induced pluripoten... 详细信息

目的通过逆转录病毒携带外源性基因Oct3/4、Sox2、Klf4及c-Myc多潜能转录因子转染宿主细胞,多种正常成体细胞能够进行重编程,形成在形态学、表观遗传学、全基因表达谱以及细胞分化潜能方面与胚胎干细胞高度相似的iPS(induced pluripotent stem)细胞。但目前尚未见机体异常细胞重编程的报道。瘢痕发病机制目前尚待阐明,普遍认为创伤部位成纤维细胞异常是发生瘢痕的关键因素。

关键词：成纤维细胞培养皿瘢痕组织饲养层胚胎干细胞

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去分化来源表皮干细胞的分离及表型特征观察

去分化来源表皮干细胞的分离及表型特征观察

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第七届全国创伤学术会议暨2009海峡两岸创伤医学论坛

作者：张翠萍付小兵孙同柱解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室

目的分离培养去分化来源的表皮干细胞,并进一步观察其表型特征。方法包皮皮片去除皮下脂肪后,中性蛋白酶消化过夜,分离表皮和真皮。分离的表皮片用Ⅳ型胶原反复粘贴并冲洗去除表皮干细胞。处理后的表皮片经免疫组化鉴定后移植到BALB/c... 详细信息

目的分离培养去分化来源的表皮干细胞,并进一步观察其表型特征。方法包皮皮片去除皮下脂肪后,中性蛋白酶消化过夜,分离表皮和真皮。分离的表皮片用Ⅳ型胶原反复粘贴并冲洗去除表皮干细胞。处理后的表皮片经免疫组化鉴定后移植到BALB/c裸鼠背部全层皮肤缺损创面,5天后用免疫组化法检测皮片内CK19和1整合素的表达,然后用Ⅳ型胶原粘贴法分离皮片内去分化来源的

关键词：去分化来源表皮干细胞型胶原整合素

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