检索结果-内蒙古大学图书馆

中华医学杂志 2007年第17期87卷 1153-1155页

作者：付小兵解放军总医院基础医学研究所第一附属医院全军创伤修复重点实验室北京100853

再生医学是近年来生物学和医学领域发展最为迅速并且已经初见成效的领域之一。随着人们认识的不断深入以及对科技投入的增加和大量高新技术的应用，使再生医学、特别是成体干细胞与再生医学的基础研究和临床治疗都取得了显著的成绩，为... 详细信息

再生医学是近年来生物学和医学领域发展最为迅速并且已经初见成效的领域之一。随着人们认识的不断深入以及对科技投入的增加和大量高新技术的应用，使再生医学、特别是成体干细胞与再生医学的基础研究和临床治疗都取得了显著的成绩，为将来大规模的治疗性应用提供了重要的理论依据和实验基础。

关键词：成体干细胞再生医学治疗性应用医学领域高新技术科技投入临床治疗生物学

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循环骨髓间充质干细胞在体内的分布

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中国组织工程研究与临床康复 2007年第11期11卷 2109-2113页

作者：韩兵付小兵解放军总医院附属第一医院全军创伤修复重点实验室北京市100037

目的:骨髓间充质干细胞具有多向分化的潜能,进入循环的间充质干细胞在体内的分布对其应用有重要意义,本文综述其分布特点及机制的研究。资料来源:应用计算机检索Pubmed、OVID数据库1999-01/2006-06与间充质干细胞分布有关的文献,检索词... 详细信息

目的:骨髓间充质干细胞具有多向分化的潜能,进入循环的间充质干细胞在体内的分布对其应用有重要意义,本文综述其分布特点及机制的研究。资料来源:应用计算机检索Pubmed、OVID数据库1999-01/2006-06与间充质干细胞分布有关的文献,检索词为"bonemarrow mesenchymal stem cells,distribution,homing,infuse,transplant"。应用计算机检索清华全文数据库2000-01/2006-06相关文章,检索词为"骨髓间充质干细胞,分布,归巢,移植"。资料选择:对资料进行初审。纳入标准:①骨髓间充质干细胞移植的研究。②骨髓间充质干细胞归巢和体内分布相关的文献。排除标准:重复性研究、综述。资料提炼:共检索与骨髓间充质干细胞移植和在体分布有关文献128篇,最后符合纳入标准的37篇。资料综合:循环的骨髓间充质干细胞分布部位广泛,分布在损伤的骨髓、心肌、肺、脑、皮肤、肝脏、肾等重要脏器。全身放射性损伤后具有向损伤部位分布的规律,并且对于某些脏器存在倾向性。影响其分布特点可能与组织器官的血管分布和血流动力学特点、血管通透性、靶部位表达和释放趋化骨髓间充质干细胞因子、骨髓间充质干细胞自身表型的改变有关。结论:进入循环的间充质干细胞在体内分布有向某些器官和部位的倾向性,并且有向损伤部位靶向分布的特点,这与器官组织结构和间充质干细胞本身特点有关,机制有待进一步阐明。

关键词：骨髓间充质干细胞分布归巢修复

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体外诱导表皮细胞去分化的初步实验研究

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解放军医学杂志 2007年第10期32卷 1023-1027页

作者：蔡飒付小兵孙同柱王君韩冰韩兵盛志勇解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室北京100037

目的建立表皮细胞去分化体外模型,探索与去分化过程有关的信号通路。方法分离培养人表皮细胞,分别用双氧水、ERK阻断剂PD98059加双氧水处理细胞,采用免疫细胞化学染色法和Western blot法检测不同方式处理后表皮细胞表型的变化情况,Weste... 详细信息

目的建立表皮细胞去分化体外模型,探索与去分化过程有关的信号通路。方法分离培养人表皮细胞,分别用双氧水、ERK阻断剂PD98059加双氧水处理细胞,采用免疫细胞化学染色法和Western blot法检测不同方式处理后表皮细胞表型的变化情况,Western blot法检测双氧水处理后ERK信号通路相关蛋白的表达情况。结果双氧水处理后,表皮细胞干细胞标志物(CK19、β1整合素、Oct4和p63)表达增加,分化细胞标记物(CK10)表达减少,ERK信号通路中相关的磷酸化蛋白表达增强。以PD98059阻断ERK通路的活化后,双氧水诱导的表皮细胞表型逆转受到了抑制。结论ERK通路参与了双氧水诱导的表皮细胞去分化过程。

关键词：去分化表皮细胞有丝分裂素激活蛋白激酶类

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去分化:一种新的干细胞来源

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中华医学杂志 2007年第8期87卷 573-575页

作者：蔡飒付小兵盛志勇解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室北京100037

修复与再生是生物界中普遍存在的现象。当生物体某一组织或器官发生损伤或丢失时，机体在一定条件下能够形成一个新的组织或器官，二者在结构和功能上几乎完全一样，这个过程称为再生。在不同的生物种群中，再生的潜能和机制存在很大差... 详细信息

修复与再生是生物界中普遍存在的现象。当生物体某一组织或器官发生损伤或丢失时，机体在一定条件下能够形成一个新的组织或器官，二者在结构和功能上几乎完全一样，这个过程称为再生。在不同的生物种群中，再生的潜能和机制存在很大差异。对于一些低等的无脊椎动物，如蚯蚓，当身体被切成两截之后，它们能轻而易举再生出两个新的，遗传性完全相同的个体。两栖动物，如蝾螈，也具有强大的再生能力，它们能通过去分化过程产生完整的四肢，脊柱，尾巴，视网膜，晶状体以及上下颌等。哺乳动物的再生能力则非常有限，由于发育过程中，细胞发生不可逆的定向分化，他们只能依靠体内为数不多的干细胞储备来对受损的组织进行修复。目前，研究者正探索从三个途径提高哺乳动物的再生能力：（1）将干细胞、祖细胞或分化细胞直接移植于受损组织；（2）将细胞种子支架植入受损组织；（3）通过激活体内现存的干细胞或促进损伤组织周围分化细胞发生去分化以获得多分化潜能细胞来诱导机体自身的再生能力。其中，通过外部干预提高自身再生能力具有更重要的应用价值。因此，本文将集中阐述这方面的工作和已取得的进展。

关键词：干细胞来源去分化再生能力受损组织哺乳动物细胞发生分化潜能损伤组织

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人成纤维细胞生长因子7的基因克隆和蛋白鉴定

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中国组织工程研究与临床康复 2007年第14期11卷 2629-2632页

作者：韩兵陈伟付小兵解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室北京市100037

目的:构建人成纤维细胞生长因子7的重组原核表达质粒pGEX-4T-3-FGF7,并诱导其基因在大肠杆菌DH5α中大量表达,纯化蛋白并检验生物学活性。方法:实验于2006-12在本实验室完成。采用逆转录-聚合酶链反应技术,从人皮肤成纤维细胞内扩增编... 详细信息

目的:构建人成纤维细胞生长因子7的重组原核表达质粒pGEX-4T-3-FGF7,并诱导其基因在大肠杆菌DH5α中大量表达,纯化蛋白并检验生物学活性。方法:实验于2006-12在本实验室完成。采用逆转录-聚合酶链反应技术,从人皮肤成纤维细胞内扩增编码人成纤维细胞生长因子7的cDNA序列,以DNA重组技术将获得的目的基因片段连接至原核表达载体pGEX-4T-3上,经抗生素筛选挑取阳性克隆扩增后,提取DNA进行酶切鉴定和测序。同时应用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和蛋白免疫印迹方法对其表达产物进行特异性鉴定。超滤纯化蛋白后以四甲基偶氮唑盐法测定其在不同浓度作用下对人表皮角化细胞系生长的影响。结果:克隆出的成纤维细胞生长因子7基因的cDNA包括翻译起始密码子、编码序列和终止密码子等部分,含有成纤维细胞生长因子7基因的cDNA的表达质粒pGEX-4T-3-hFGF7在DH5α细菌体内能够表达,并且随着诱导时间的延长,成纤维细胞生长因子7基因的表达量增加,重组人成纤维细胞生长因子7蛋白主要存在于包涵体中。在所测浓度范围内该蛋白可以剂量依赖模式促进人表皮角化细胞系细胞在体外分裂增殖。结论:人成纤维细胞生长因子7基因可以在原核细胞中获得表达并具有促角质细胞增殖的生物活性,为深入研究该蛋白在皮肤创伤愈合中的具体作用奠定了基础。

关键词： FGF7基因原核表达载体融合克隆纯化组织构建

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表皮干细胞的分离培养和鉴定

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中华实验外科杂志 2007年第2期24卷 163-165页

作者：孙晓艳付小兵孙同柱解放军总医院基础医学研究所北京100853 解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室

目的分离培养和鉴定人表皮基底层干细胞。方法中性蛋白水解酶选择性的消化表皮与真皮之间的细胞连接，采用改良的Ⅳ型胶原铺板选择黏附法分离、培养表皮中的干细胞，观察培养第2、4、6天时a6、β1整合素、K19、K14、p63、Nestin、CD34、... 详细信息

目的分离培养和鉴定人表皮基底层干细胞。方法中性蛋白水解酶选择性的消化表皮与真皮之间的细胞连接，采用改良的Ⅳ型胶原铺板选择黏附法分离、培养表皮中的干细胞，观察培养第2、4、6天时a6、β1整合素、K19、K14、p63、Nestin、CD34、PCNA及K10在表皮干细胞中的表达差异。结果改良过的Ⅳ型胶原铺板选择黏附法能够有效地促进表皮干细胞的贴壁和伸展。原代分离的表皮基底层干细胞a6、p1整合素，K19，K14，p63，Nestin，CD34及PCNA表达为强阳性而K10不表达。这些细胞具有干细胞的特点，可以形成克隆。随着培养时间的增加，表皮干细胞形态发生变化，a6、β1整合素、K19、K14，表达逐渐减弱，K10表达逐渐增强。此外，在原代分离的细胞中可见单个核样干细胞表达a6、β1整合素，K19，K14，P63，Nestin，CD34及PCNA，这些细胞形态相似体积较表皮基底层干细胞大，胞核为肾形，染色较深。结论中性蛋白水解酶消化合并改良过的Ⅳ型胶原铺板选择黏附法能够高效地分离表皮中的干细胞。分离的细胞具有干细胞的特点，可以形成集落。此外，原代分离培养的表皮干细胞中仍然可见单个核样干细胞，这些细胞形态相似，类似血液系统来源的单核细胞，胞质内均匀分布着粗大的阳性颗粒。单个核样干细胞可能与皮肤的发牛、发育以及创伤修复有关。

关键词：表皮干细胞单克隆抗体免疫组织化学

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进一步重视创面处理中的几个重要环节

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中华烧伤杂志 2007年第1期23卷 13-15页

作者：付小兵解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室、解放军总医院基础医学研究所北京100037

创面处理贯穿于整个创（烧）伤治疗的始终，是该领域最重要、最基本的问题之一。20余年来，由于干细胞、组织工程和基因工程等高新生物技术的发展及其在创（烧）伤救治中的应用，使得创面处理的基础理论研究不断深入，临床治疗也有突破... 详细信息

创面处理贯穿于整个创（烧）伤治疗的始终，是该领域最重要、最基本的问题之一。20余年来，由于干细胞、组织工程和基因工程等高新生物技术的发展及其在创（烧）伤救治中的应用，使得创面处理的基础理论研究不断深入，临床治疗也有突破性进展，较大程度上推动了该学科领域的进步。当然，也应看到由于创面的复杂性，该领域仍有许多没解决的问题制约着临床治疗的进展，成为今后一段时间创面处理中不可忽视的重要环节。

关键词：烧伤创伤和损伤修复外科手术干细胞伤口愈合

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高钙培养促进人表皮角质细胞间的黏附和聚集

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中华实验外科杂志 2007年第8期24卷 1004-1005,I0004页

作者：张翠萍付小兵李淑云孙同柱孙晓艳蔡飒解放军总医院第一附属医院全军烧伤研究所北京100037 解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室

目的观察细胞外钙浓度变化对表皮角质细胞黏附聚集的影响,并探讨其可能的调控机制。方法本实验分为两组:低钙培养组(60μmol/L);高钙(2 mmol/L)培养组。培养3d后,镜下观察细胞的黏附和聚集现象;然后利用逆转录.聚合酶链反应(RT-PCR)的... 详细信息

目的观察细胞外钙浓度变化对表皮角质细胞黏附聚集的影响,并探讨其可能的调控机制。方法本实验分为两组:低钙培养组(60μmol/L);高钙(2 mmol/L)培养组。培养3d后,镜下观察细胞的黏附和聚集现象;然后利用逆转录.聚合酶链反应(RT-PCR)的方法测定E-钙调素和P-钙调素mRNA的表达水平;最后借助免疫荧光法检测E-钙调素和P-钙调素蛋白在细胞内的表达和分布。结果高钙培养3d后细胞分层并出现明显的黏附和聚集,E-钙调素也在高钙培养的条件下表达明显增加(P<0.01),而P-钙调素的表达没有明显的变化。结论高钙培养促进人表皮角质细胞的黏附和聚集,E-钙调素的表达可能在其中发挥重要作用。

关键词：钙角质细胞培养钙调素

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低氧促进神经干细胞向多巴胺能神经元分化

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生理学报 2007年第3期59卷 273-277页

作者：赵彤张翠萍朱玲玲靳冰黄欣范明军事医学科学院基础医学研究所解放军304医院全军创伤修复重点实验室

神经干细胞(neural stem cells,NSCs)作为具有多向分化潜能的神经前体细胞,被广泛应用于细胞移植等研究,而低氧不但调节干细胞的体外增殖,在干细胞分化中也具有重要的作用。本文着重探讨了低氧对NSCs分化的调节作用。采用Wistar孕大鼠(E... 详细信息

神经干细胞(neural stem cells,NSCs)作为具有多向分化潜能的神经前体细胞,被广泛应用于细胞移植等研究,而低氧不但调节干细胞的体外增殖,在干细胞分化中也具有重要的作用。本文着重探讨了低氧对NSCs分化的调节作用。采用Wistar孕大鼠(E13.5d),分离胚胎中脑NSCs,加入无血清DMEM/F12培养液(含20ng/mLEGF、20ng/mLbFGF、1%N2和B27),3～5d后传代,细胞培养至第三代进行诱导分化,分别在低氧(3%O2)和常氧(20%O2)条件下诱导分化3d,然后在常氧条件下分化成熟5-7d(DMEM/F12含1%FBS、N2和B27)后进行检测。Nestin、NeuN以及TH免疫组织化学鉴定NSCs;流式细胞术分析测定NSCs向TH阳性神经元方向的分化;高效液相色谱测定细胞培养上清液中多巴胺(dopamine,DA)含量。结果显示,分离培养的NSCs均为nestin阳性细胞;低氧呵明显促进NSCs向神经元方向的分化;TH阳性神经元比例在常氧和低氧组分别为(10.25±1.03)%和(19.88±1.44)%。NSCs诱导分化7d后,低氧组细胞培养上清液中DA浓度明显增加,约为常氧组的2倍(P<0.05,n=8)。上述结果表明,3%低氧可促进NSCs向神经元方向,特别是向DA能神经元方向分化。这为NSCs应用于临床治疗帕金森病提供了基础。

关键词：神经干细胞低氧分化多巴胺能神经元

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皮肤干细胞在胎皮中分布的免疫组织化学研究

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中华实验外科杂志 2007年第9期24卷 1090-1092页

作者：邬彩虹孙晓艳付小兵韩伊林解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室北京100073 内蒙古医学院

目的采用免疫组织化学方法研究不同时期胚胎皮肤中的干细胞,分析皮肤干细胞的形态、分布特点及发育过程中在胎儿皮肤中的迁徙、增殖分化特征,探讨皮肤干细胞与皮肤发生发育的关系。方法不同发育时期胎儿皮肤,取材、固定、制成石蜡切片,S... 详细信息

目的采用免疫组织化学方法研究不同时期胚胎皮肤中的干细胞,分析皮肤干细胞的形态、分布特点及发育过程中在胎儿皮肤中的迁徙、增殖分化特征,探讨皮肤干细胞与皮肤发生发育的关系。方法不同发育时期胎儿皮肤,取材、固定、制成石蜡切片,SP法检测整合素-β1、角蛋白19(K19)、K14、K10和PCNA的表达。结果胚胎发育期可见整合素-β1阳性的细胞在基底层散在分布。随胎龄增加,整合素-β1表达减弱,表达范围减小。同时,胚胎发育的不同阶段K19均在表皮基底层强烈表达。表皮分层期后,K14阳性细胞从基底层向上延伸至亚基底层。而K10作为表皮终末分化细胞的标志,主要分布在表皮的中层和外层。此外,在毛囊发育过程中,胎皮表皮嵴的细胞相互聚集成团,形成毛囊初级原基,表达整合素-β1、K19、K14及PCNA为阳性。随着毛囊的形成、成熟,皮肤干细胞主要聚集在与表皮相延续的外根鞘、毛囊隆突部及毛母质,表达整合素-β1、K19、K14和PCNA为阳性。结论(1)皮肤的发生、发育与角蛋白的程序性改变密切相关;(2)毛囊的发生、发育受到毛乳头的诱导作用。毛囊成熟期后,皮肤干细胞主要迁移至与表皮相延续的外根鞘、毛囊隆突部及毛母质等处。此外,还发现毛乳头及其周围组织内分布着单核样细胞表达整合素-β1、K19和K14为阳性。

关键词：皮肤干细胞胚胎角蛋白整合素-β1

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