检索结果-内蒙古大学图书馆

西北国防医学杂志 2007年第1期28卷 19-22页

作者：程飚刘宏伟付小兵陈葵孙同柱广州军区广州总医院整形外科广东广州510010 暨南大学华侨医院整形外科解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室

目的:探讨雌激素受体在大鼠全层皮肤缺损创面愈合中的表达情况及相关的分子机制。方法:Wistar雄性大鼠30只,在背部制成全层全损皮肤创伤愈合模型,分别于伤后1、3、5、7、15和21 d取材。常规组织学观察和免疫荧光染色,观察皮肤愈合过程... 详细信息

目的:探讨雌激素受体在大鼠全层皮肤缺损创面愈合中的表达情况及相关的分子机制。方法:Wistar雄性大鼠30只,在背部制成全层全损皮肤创伤愈合模型,分别于伤后1、3、5、7、15和21 d取材。常规组织学观察和免疫荧光染色,观察皮肤愈合过程与雌激素受体和原癌基因c-fos的表达变化规律。结果:损伤早期(1-3 d)ER-β和c-fos的表达逐渐增强,5 d时,ER-β和c-fos阳性表达进一步增加,但主要集中在真皮层,表皮层的表达较少。伤后7 d,在创缘部分角质形成细胞开始表达ER-β和c-fos。15 d后,ER-β和c-fos的表达仍维持在较高水平,创缘区域的表达尤其明显。伤后21 d,两者的表达有所减弱,但在愈合部位的表皮层角质形成细胞和真皮层血管内皮细胞仍有较强的表达。结论:雌激素受体系统参与全层皮肤缺损的愈合过程,影响组织的肉芽组织形成,再上皮化以及愈合后的塑性,可能与原癌基因c-fos蛋白的表达有关。

关键词：创伤雌激素受体皮肤全层缺损愈合原癌基因

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CK10、CK14、p63在移植至裸鼠皮下的人表皮的表达

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解剖科学进展 2007年第3期13卷 200-202页

作者：郭永峰付小兵蔡飒李海红王玉新中国医科大学附属口腔医院口腔颌面外科辽宁沈阳110002 解放军总医院附属第一医院全军创伤修复重点实验室北京100037

目的研究人表皮移植至裸鼠皮下后表皮细胞的表型变化。方法将制备的人包皮表皮皮片移植到裸鼠背部皮下,7d取材。移植前后人表皮皮片标本行HE染色及细胞角蛋白10(CK10)、细胞角蛋白14(CK14)、p63免疫组织化学染色镜下观察。结果人表皮皮... 详细信息

目的研究人表皮移植至裸鼠皮下后表皮细胞的表型变化。方法将制备的人包皮表皮皮片移植到裸鼠背部皮下,7d取材。移植前后人表皮皮片标本行HE染色及细胞角蛋白10(CK10)、细胞角蛋白14(CK14)、p63免疫组织化学染色镜下观察。结果人表皮皮片移植到裸鼠皮下成活率达70%,移植成活的表皮基底层细胞增殖,细胞数增多,新生表皮增厚。免疫组化结果显示,与移植前相比,CK10表达减弱,CK14和p63表达增强,这与人皮肤创伤愈合过程中表皮细胞表型变化一致。结论移植人表皮到裸鼠皮下的方法可以模拟人皮肤创伤愈合过程,是一种可行的在体研究人表皮细胞的实验方法。

关键词：细胞角蛋白10 细胞角蛋白14 p63 人表皮裸鼠

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大鼠脂肪干细胞(rADSCs)转运VEGF基因促进随意皮瓣成活率的研究

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中国美容医学 2007年第1期16卷 7-10页

作者：雷永红付小兵盛志勇鲁开化赵京禹孙同柱韩冰陈伟解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室北京100037 第四军医大学西京医院整形外科陕西西安710032 内蒙古医学院呼和浩特100059

目的:探讨人血管内皮细胞生长因子(VEGF165)基因转染大鼠脂肪干细胞(rADSCs)的稳定表达系统对皮瓣成活的影响。方法:①培养和鉴定大鼠ADSCs,脂质体介导pcDNA3.1-VEGF165质粒转染大鼠(rADSCs),经G418筛选抗性rADSCs并继续培养4周,用ELIS... 详细信息

目的:探讨人血管内皮细胞生长因子(VEGF165)基因转染大鼠脂肪干细胞(rADSCs)的稳定表达系统对皮瓣成活的影响。方法:①培养和鉴定大鼠ADSCs,脂质体介导pcDNA3.1-VEGF165质粒转染大鼠(rADSCs),经G418筛选抗性rADSCs并继续培养4周,用ELISA法检测转染后细胞培养上清中VEGF浓度。②Brdu标记被转染rADSCs后,在大鼠背部制备8.0cm×2.5cm的随意型皮瓣模型,实验组(10只大鼠)为注射pcDNA3.1-VEGF165质粒转染的rADSCs悬液到大鼠腹腔,对照组(8只大鼠)为注射2ml被空载体pcDNA3.1(-)转染的rADSCs悬液,术后7天用透明纸描记法记录皮瓣成活范围,记数坐标纸格子并换算为成活面积百分率。分别于术后3天、5天、7天在成活皮瓣的远端切取皮瓣组织标本行免疫组化染色。结果:①ELISA检测4株转染和经G418筛选抗性并继续培养2周的第二代rADSCs上清中VEGF浓度多达(4.21±0.35)pmol VEGF/1×106细胞/48h(x±s,n=4),有2株细胞培养液上清分泌VEGF较强,其余2株细胞相对较弱,均大于对照的空载体转染组和未转染组rADSCs培养液上清中的(0.49±0.15)pmol VEGF/1×106细胞/48h(x±s,n=3)和(0.62±0.86)pmol VEGF/1×106细胞/48h(x±s,n=3),均P<0.01,差异有统计学意义。分泌VEGF较强的rADSCs经Brdu标记后阳性率达到70%以上。②将获得的稳定表达VEGF165的rADSCs移植到随意型皮瓣动物模型体内,7天后实验组皮瓣的成活面积为(59.6±0.52)%,大于对照组的皮瓣成活面积(40.5±0.27)(%P<0.01)。成活皮瓣的远端组织标本切片在显微镜下可见皮下脂肪中有大量核仁深染棕黄色的细胞。结论:ADSCs可以作为载体细胞运送VEGF基因到达皮瓣远端并通过分泌VEGF提高皮瓣的成活面积。

关键词：成体干细胞基因治疗随意型皮瓣

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骨髓间充质干细胞分化为皮肤附属器细胞的初步实验研究

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中国修复重建外科杂志 2006年第6期20卷 675-678页

作者：李海红付小兵王君孙同柱周岗解放军总医院304临床部全军创伤修复重点实验室

目的探讨骨髓间充质干细胞(marrowmesenchymalstemcells,MSCs)分化为创面皮肤附属器细胞的可能性,及其参与创面修复的可能机制。方法无菌条件下取Wistar大鼠股骨骨髓细胞,密度梯度离心分离、纯化MSCs,体外培养扩增后,用BrdU标记细胞。... 详细信息

目的探讨骨髓间充质干细胞(marrowmesenchymalstemcells,MSCs)分化为创面皮肤附属器细胞的可能性,及其参与创面修复的可能机制。方法无菌条件下取Wistar大鼠股骨骨髓细胞,密度梯度离心分离、纯化MSCs,体外培养扩增后,用BrdU标记细胞。另于同种雄性Wistar大鼠背部正中,制备1cm×1cm全厚皮肤缺损创面模型,将BrdU标记的1×106/mlMSCs从阴茎静脉输注,术后第3天与第7天切取创面组织,行BrdU免疫组织化学单染色,以及BrdU和广谱角蛋白免疫组织化学双染色。结果BrdU阳性细胞出现在创面皮下组织、皮脂腺、毛囊和骨髓腔中。免疫组织化学双染色结果显示,皮脂腺和毛囊有BrdU阳性细胞,同时表达广谱角蛋白。结论创面愈合过程中,MSCs归巢并参与创面修复;在实验性全身皮肤缺损创面微环境下,MSCs可分化为皮肤附属器细胞。

关键词：骨髓间充质干细胞皮肤附属器创面修复分化

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间充质干细胞的研究进展与临床应用前景

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中国修复重建外科杂志 2006年第12期20卷 1257-1261页

作者：韩冰付小兵解放军总医院304临床部全军创伤修复重点实验室

目的介绍间充质干细胞(m esenchym a l stem ce lls,M SC s)的研究进展及其临床应用前景。方法查阅国内外近年有关文献,并行综合分析。结果由于M SC s能分化为多种类型的细胞,所以在细胞移植治疗和组织工程方面有广泛的应用。由于其能... 详细信息

目的介绍间充质干细胞(m esenchym a l stem ce lls,M SC s)的研究进展及其临床应用前景。方法查阅国内外近年有关文献,并行综合分析。结果由于M SC s能分化为多种类型的细胞,所以在细胞移植治疗和组织工程方面有广泛的应用。由于其能稳定表达转染到细胞内的目的基因,可治疗血友病、脑梗塞及骨缺损等,因此在基因治疗中应用广泛。其所具有的免疫调节特性,使它在免疫性疾病的治疗中也有广泛的用途。结论M SC s是一种具有自我更新和多向分化潜能的干细胞,且体外易于扩增,是一种理想的细胞治疗和基因治疗的靶细胞,临床应用前景非常广阔。

关键词：间充质干细胞细胞治疗基因治疗组织工程免疫治疗

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外胚叶发育不全基因信号途径与汗腺发育及修复的关系

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中国修复重建外科杂志 2006年第5期20卷 578-581页

作者：周岗李海红付小兵解放军总医院304临床部全军创伤修复重点实验室北京100037

目的探讨外胚叶发育不全(ectodysplasin,EDA)基因信号途径与汗腺发育及修复的关系。方法通过对近期国内外相关文献的回顾,了解EDA基因的生物学特性、信号传导途径和促进汗腺发育的分子机制。结果大量实验证实EDA基因在胎儿发育早期参与... 详细信息

目的探讨外胚叶发育不全(ectodysplasin,EDA)基因信号途径与汗腺发育及修复的关系。方法通过对近期国内外相关文献的回顾,了解EDA基因的生物学特性、信号传导途径和促进汗腺发育的分子机制。结果大量实验证实EDA基因在胎儿发育早期参与了胚胎皮肤汗腺的形态和功能发生。结论EDA基因对皮肤汗腺的发生和结构的形成以及皮肤生理功能的维持具有重要意义,可为实现基因调控皮肤受损汗腺的完美修复找到一条新路。

关键词： EDA基因汗腺修复信号传导

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烧伤血清对大鼠骨髓间充质干细胞基因表达的动态影响

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中国临床康复 2006年第37期10卷 7-10页

作者：韩冰付小兵陈伟周岗孙同柱白晓东解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室

目的:观察烧伤大鼠血清对体外培养的大鼠骨髓间充质干细胞基因表达的影响。方法:实验于2003-06/2004-4在解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室完成。①断头法处死Wistar大鼠,取股骨并暴露骨髓腔,用培养基冲洗骨髓腔,将骨髓... 详细信息

目的:观察烧伤大鼠血清对体外培养的大鼠骨髓间充质干细胞基因表达的影响。方法:实验于2003-06/2004-4在解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室完成。①断头法处死Wistar大鼠,取股骨并暴露骨髓腔,用培养基冲洗骨髓腔,将骨髓细胞悬液用密度梯度离心法分离骨髓单个核细胞并接种于培养瓶,贴壁法培养骨髓间充质干细胞。②用沸水烫伤的方法制作15%TBSAⅢ度烧伤模型。③烧伤3d后经腹主动脉取烧伤大鼠血液,分离血清备用。④同样取正常大鼠血液,分离血清备用。⑤骨髓间充质干细胞传代后分别用含有体积分数为0.1的正常大鼠血清(正常血清组)和烧伤后3d大鼠血清(烧伤血清组)的F-12培养基培养24h及72h。⑥从处理过的间充质干细胞内提取RNA,反转录为cDNA并以cy3-dUTP和cy5-dUT进行标记为荧光探针。⑦以含有5705种基因的寡核苷酸微阵列检测两组细胞基因表达的差异。结果:①烧伤血清处理不同时间后,两组间充质干细胞对比,均有不同数量的基因表达存在明显差异。②烧伤血清处理24h后,两组相比较有4条基因表达存在明显差异。③烧伤血清处理72h后,两组相比较有11条基因表达存在明显差异。④两个时间点差异表达的基因无相同基因。结论:烧伤后大鼠血清刺激间充质干细胞,使其基因表达发生了改变,且随着烧伤血清处理时间的不同,差异表达的基因也发生动态变化。这种改变可能与间充质干细胞受到刺激后参与创面修复有关。

关键词：间质干细胞基因表达烧伤

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人骨髓间充质干细胞表型转化为汗腺细胞的体外研究

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中华创伤杂志 2006年第2期22卷 81-86页

作者：李海红付小兵欧阳云淑周岗陈伟孙同柱解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室

目的研究体外人骨髓间充质干细胞(MSCs)和汗腺细胞(SGCs)直接和间接共培养条件下骨髓间充质干细胞的表型转化及其机制。方法体外分别分离培养、扩增并鉴定MSCs和汗腺细胞。将培养的MSCs和经47℃高温处理造成热休克的SGCs直接和间接共培... 详细信息

目的研究体外人骨髓间充质干细胞(MSCs)和汗腺细胞(SGCs)直接和间接共培养条件下骨髓间充质干细胞的表型转化及其机制。方法体外分别分离培养、扩增并鉴定MSCs和汗腺细胞。将培养的MSCs和经47℃高温处理造成热休克的SGCs直接和间接共培养,1周后,采用免疫细胞化学染色法和流式细胞仪法检测共培养体系中MSCs的表型改变,W estern b lot测定细胞外信号调节激酶(ERK)和磷酸化细胞外信号调节激酶(pERK)表达。结果MSCs和SGCs均呈克隆样生长,MSCs表达CD44、CD105和CD29,不表达CD34、CEA、CK19和CK7;SGCs表达CEA、CK19、CK8和CK7。MSCs与经高温损伤后的SGCs共培养1周后,部分MSCs呈汗腺细胞表型,间接共培养结果示各组MSCs均表达水平相当的ERK,但pERK水平表达不同。结论成人MSCs和热休克的SGCs直接和间接共培养均可诱导MSCs向SGCs表型转化,pERK途径参与这一过程。

关键词：干细胞细胞,汗腺 Ca(2+)-calmodulin dependent protein kinase 表型转化

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重组人血小板源性生长因子增加细胞外信号调节激酶磷酸化促进糖尿病大鼠全层皮肤缺损创面愈合(英文)

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中国修复重建外科杂志 2006年第11期20卷 1093-1098页

作者：程飚刘宏伟付小兵盛志勇孙同柱广州军区广州总医院整形外科广州510010 解放军总医院304临床部全军创伤修复重点实验室

目的在体观察重组人血小板源性生长因子（recombinant human platelet—derived growth factor，rhPDGF）促进糖尿病大鼠全层皮肤缺损创面修复可能涉及的细胞和分子机制，研究其可能涉及的信号通路。方法 26只糖尿病大鼠，每只动物背... 详细信息

目的在体观察重组人血小板源性生长因子（recombinant human platelet—derived growth factor，rhPDGF）促进糖尿病大鼠全层皮肤缺损创面修复可能涉及的细胞和分子机制，研究其可能涉及的信号通路。方法 26只糖尿病大鼠，每只动物背部制备4个全层皮肤缺损创面，选取其中52个创面，随机分成3组，即对照组，创面自然愈合；rhPDGF治疗组，创面rhPDGF用量为7．0μg／cm^2；赋形剂组，创面用等量赋形剂凝胶。观察治疗后3、7和14d创面肉芽形成、胶原沉积、再上皮化速率以及炎性细胞浸润情况，并采用免疫荧光和免疫组织化学技术观察创面周围和创面修复细胞内细胞外信号调节激酶1／2（extracellular signal—regulated kinase1／2，ERK1／2）磷酸化和增殖细胞核抗原（proliferative cell nuclear antigen，PCNA）的表达。结果组织学观察，rhPDGF治疗组创面可见大量炎性细胞浸润，毛细血管胚芽及成纤维细胞明显多于另两组（P〈0．05）；胶原沉积明显，肉芽组织生长活跃，创面收缩显著，与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。免疫学研究显示，应用rhPDGF7～14d后，rhPDGF治疗组ERK1／2明显强于对照组和赋形剂组（P〈0．05）；且损伤后3～7d rhPDGF治疗组修复细胞PCNA的表达明显高于对照组和赋形剂组（P〈0．05）。结论 rhPDGF促糖尿病大鼠刨面愈合的作用部分是通过ERK1／2信号通路的磷酸化来完成的。

关键词：糖尿病血小板源性生长因子创面愈合细胞外信号调节激酶

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重视神经、内分泌与免疫机制在皮肤修复与再生中作用的研究

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中国修复重建外科杂志 2006年第4期20卷 331-335页

作者：付小兵程飚解放军总医院基础医学研究所解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室北京100853 广州军区总医院整形外科

目的概述神经、内分泌与免疫学机制的变化对皮肤修复的影响,以及近年来的研究进展,为深入开展这一领域的研究和临床治疗提供依据。方法广泛阅读国内外相关文献,并进行分析、综合,确定神经、内分泌与免疫机制在皮肤修复中的作用。结果皮... 详细信息

目的概述神经、内分泌与免疫学机制的变化对皮肤修复的影响,以及近年来的研究进展,为深入开展这一领域的研究和临床治疗提供依据。方法广泛阅读国内外相关文献,并进行分析、综合,确定神经、内分泌与免疫机制在皮肤修复中的作用。结果皮肤作为神经依赖性器官、内分泌器官及免疫器官,在皮肤损伤修复与再生中发挥重要作用。结论目前对这一领域研究较少,应加强相关基础研究。

关键词：皮肤再生神经支配内分泌器官免疫功能

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