检索结果-内蒙古大学图书馆

创伤外科杂志 2006年第5期8卷 472-474页

作者：王君付小兵李存保解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室北京100037 内蒙古医学院内蒙古呼和浩特010059

间充质干细胞的自我更新和体外扩增的能力及其多向分化的潜能已经被广泛认识。近来的研究表明间充质干细胞避免了在人和动物体内的异体移植排斥反应的发生,这一点在体外研究的共培养中也得到证实。其作用机制有:(1)间充质干细胞的低免... 详细信息

间充质干细胞的自我更新和体外扩增的能力及其多向分化的潜能已经被广泛认识。近来的研究表明间充质干细胞避免了在人和动物体内的异体移植排斥反应的发生,这一点在体外研究的共培养中也得到证实。其作用机制有:(1)间充质干细胞的低免疫原性;(2)这些干细胞通过间接调节树突细胞和直接破坏NK细胞阻止T细胞的反应;(3)减低了局部微环境中的免疫性。笔者现对间充质干细胞的免疫调节机制予以综述如下。

关键词：间充质干细胞免疫调节免疫耐受

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大鼠骨髓间充质干细胞作为滋养层培养小鼠胚胎干细胞

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感染．炎症．修复 2006年第3期7卷 153-155,193页

作者：梁晶冰雷永红付小兵李存保邬彩虹内蒙古医学院第四军医大学西安710032 解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室北京100037

目的:探讨大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSCs)作为滋养层体外培养小鼠胚胎干细胞(embryonic stem cells ESCs)的可能.方法:收集BALB/C小鼠3.5d胎龄的囊胚,接种于大鼠骨髓间充质干细胞的滋养层上,培养5～6d后挑取胚胎... 详细信息

目的:探讨大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSCs)作为滋养层体外培养小鼠胚胎干细胞(embryonic stem cells ESCs)的可能.方法:收集BALB/C小鼠3.5d胎龄的囊胚,接种于大鼠骨髓间充质干细胞的滋养层上,培养5～6d后挑取胚胎干细胞集落,胰酶消化传代.观察细胞集落生长情况,通过碱性磷酸酶染色、细胞核型分析对细胞生物学特性进行检测.结果:ES细胞呈集落性生长,碱性磷酸酶组织化学染色阳性,具有正常核型及多向分化潜能.结论:大鼠MSCs可以作为滋养层体外培养小鼠胚胎干细胞,并能保持未分化状态.

关键词：大鼠骨髓间充质干细胞滋养层体外培养小鼠胚胎干细胞 embryonic stem cells mesenchymal stem cells 细胞集落碱性磷酸细胞生物学特性酶组织化学染色多向分化潜能未分化状态磷酸酶染色生长情况核型分析酶消化阳性胎龄收集

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S100蛋白参与介导bFGF对热损伤诱导凋亡成纤维细胞中的生物学作用

S100蛋白参与介导bFGF对热损伤诱导凋亡成纤维细胞中的生物学作用

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中华医学会第十二次全国皮肤性病学术会议

作者：程飚刘宏伟付小兵盛志勇张萍孟晋红解放军广州军区广州总医院整形外科解放军广州军区广州总医院整形外科医院三○四临床部全军创伤修复重点实验室医院三○四临床部全军创伤修复重点实验室医大学部全军神经科学研究所医大学部全军神经科学研究所

目的建立离体培养细胞成纤维细胞凋亡模型,观察外用碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对成纤维细胞S100蛋白表达的影响。方法体外培养成纤维细胞,分成两组: (1)烫伤组:5％小牛血清浓度DMEM 培养细胞24hr,45℃恒温水浴锅中孵育10 min,制备烫... 详细信息

目的建立离体培养细胞成纤维细胞凋亡模型,观察外用碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对成纤维细胞S100蛋白表达的影响。方法体外培养成纤维细胞,分成两组: (1)烫伤组:5％小牛血清浓度DMEM 培养细胞24hr,45℃恒温水浴锅中孵育10 min,制备烫伤后凋亡模型(n=4): (2)bFGF组:5％小牛血清浓度的DMEM培养细胞24hr,45℃恒温水浴锅孵育10 min后立即加入bFGF(10ng／ml) (n=4)。30 min后

关键词：成纤维细胞热损伤生物学作用

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rhPDGF对糖尿病鼠全层皮肤缺损创面微血管形成的影响和意义

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感染．炎症．修复 2006年第4期7卷 210-212,257页

作者：熊美华程飚刘宏伟孙同柱付小兵广州军区广州总医院预防保健科广州510010 广州军区广州总医院整形外科广州510010 暨南大学华侨医院整形外科广州510630 解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室北京100037

目的:观察外源性重组人血小板源性生长因子(rhPDGF)对全层皮肤缺损的糖尿病鼠创面愈合过程中微血管形成的影响及促创面愈合的作用。方法:利用大鼠全层皮肤缺损创面愈合模型,将26只非糖尿病鼠52个创面分为3组:①A组为糖尿病大鼠创伤自然... 详细信息

目的:观察外源性重组人血小板源性生长因子(rhPDGF)对全层皮肤缺损的糖尿病鼠创面愈合过程中微血管形成的影响及促创面愈合的作用。方法:利用大鼠全层皮肤缺损创面愈合模型,将26只非糖尿病鼠52个创面分为3组:①A组为糖尿病大鼠创伤自然愈合组;②B组为接受rhPDGF治疗的糖尿病大鼠创伤愈合组;③C组为赋性剂组。于伤后3 d、7 d和14 d采取创面皮肤标本,用组织病理HE和血管Ⅷ因子抗体免疫组织化学染色技术检测创面肉芽再生与再血管化情况进行观察,同时观察创面的愈合情况。结果:全层皮肤缺损糖尿病鼠创面肉芽组织中微血管的形成数量少,采用赋性剂对照组与糖尿病鼠自然愈合组无显著差别。但外源性使用rhPDGF后,肉芽组织的形成量明显增多,内含的微小血管数量显著增加,愈合能力明显增强。结论:糖尿病大鼠微血管形成障碍可能是其创面愈合延迟的重要因素。而应用外源性的PDGF有助于微血管的形成,可以改善糖尿病鼠的创面愈合能力。

关键词：糖尿病鼠全层皮肤缺损创面愈合延迟微血管形成影响和意义 diabetic rats 糖尿病大鼠外源性自然愈合肉芽组织免疫组织化学染色源性生长因子组织病理再血管化愈合过程性剂微小血管皮肤标本能力技术检测

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骨髓基质细胞基因表达的研究进展

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中国修复重建外科杂志 2005年第2期19卷 153-158页

作者：韩冰付小兵孙晓庆解放军总医院304临床部全军创伤修复重点实验室

目的　介绍骨髓基质细胞 (marrow stromal cells,MSCs)基因表达与其生物学特性、诱导分化、基因治疗、造血调控和创伤修复中的炎症反应等方面的研究进展。　方法　查阅国内外近年有关文献 ,并做综合分析。　结果MSCs不仅能在不同的条件... 详细信息

目的　介绍骨髓基质细胞 (marrow stromal cells,MSCs)基因表达与其生物学特性、诱导分化、基因治疗、造血调控和创伤修复中的炎症反应等方面的研究进展。　方法　查阅国内外近年有关文献 ,并做综合分析。　结果MSCs不仅能在不同的条件下表达中胚层、内胚层和外胚层的特异性基因 ,而且能稳定地表达转导的外源基因 ,并且对造血系统有支持作用 ,也参加创伤修复过程中的炎症反应。　结论　 MSCs是一种具有自我更新和多向分化潜能的干细胞 ,且体外易于扩增 ,是一种理想的细胞治疗和基因治疗的靶细胞。

关键词：骨髓基质细胞创伤修复基因表达炎症反应基因治疗研究进展内胚层外源基因自我更新干细胞

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瘢痕疙瘩中皮肤附件结构破坏与瘢痕增生的关系

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中国修复重建外科杂志 2005年第1期19卷 15-19页

作者：姜笃银付小兵陈伟孙同柱盛志勇解放军总医院304临床部全军创伤修复重点实验室

目的　探讨瘢痕疙瘩 (keloid K)形成过程中皮肤附件 (skin appendages,SAs)结构破坏与瘢痕增生的关系。　方法　将来自 17例 K患者的活检标本按浸润生长 (K- I,n=9)、瘢痕增生 (K- P,n=17)、瘢痕萎缩 (K- A,n=10 )和边缘正常皮肤 (K- N,... 详细信息

目的　探讨瘢痕疙瘩 (keloid K)形成过程中皮肤附件 (skin appendages,SAs)结构破坏与瘢痕增生的关系。　方法　将来自 17例 K患者的活检标本按浸润生长 (K- I,n=9)、瘢痕增生 (K- P,n=17)、瘢痕萎缩 (K- A,n=10 )和边缘正常皮肤 (K- N,n=6 )进行分组 ,另以非 K患者胸部正常皮肤 (NS,n=6 )为对照 ,采用免疫组织化学方法观察SAs密度与广谱细胞角蛋白 (pan- fytokeratin,CKp)、CK19、腺上皮分泌成分 (secretory component,SC)和增殖细胞核抗原 (proliferating cell nuclearantigen,PCNA) ,以及凋亡相关蛋白 Bcl- 2和 Bax之间的变化规律 ,同时用组织学、解剖显微镜及扫描电镜观察 K胶原纤维和 SAs结构的组织形态学改变。　结果　与 K- N和 NS组相比 ,K组织中 CKp和 SC阳性的 SAs密度迅速减少 ,可见 SAs结构消失后残留 CKp阳性蛋白痕迹 ;多数 SAs上皮细胞 Bax表达增强 ,但 Bcl- 2、PC-NA和 CK19阳性的 SAs则呈现复层 (鳞状 )上皮化和形态结构异常。 K组织形态学大致经历浸润、增殖和成熟的过程 ,SAs也相应地发生增生 ,细胞迁移、炎性反应和血管闭塞等引起的形态结构破坏和几乎被纤维结缔组织完全取代的变化过程。直线相关分析显示 ,K的瘢痕厚度与 SAs密度之间呈显著的负相关 (r=- 0 .341,P<0 .0 1)。　结论?

关键词： SA 瘢痕增生瘢痕疙瘩 CK19 阳性正常皮肤组织形态学异常增生形态结构负相关

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猪急性创面不同部位组织匀浆液对体外培养的成纤维细胞凋亡的影响及其机制

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中国修复重建外科杂志 2005年第1期19卷 6-9页

作者：李金清付小兵孙同柱顾绍峰都义日解放军总医院304临床部全军创伤修复重点实验室

目的　探讨猪急性创面不同部位组织匀浆液对体外培养的成纤维细胞 (fibroblast,FB)凋亡的影响。　方法　在 6只小型猪的背部造成直径 4 cm的圆形全层皮肤缺损创面 ,用取下的真皮组织进行 FB原代培养。在创面形成后第 15天 ,取创面中心... 详细信息

目的　探讨猪急性创面不同部位组织匀浆液对体外培养的成纤维细胞 (fibroblast,FB)凋亡的影响。　方法　在 6只小型猪的背部造成直径 4 cm的圆形全层皮肤缺损创面 ,用取下的真皮组织进行 FB原代培养。在创面形成后第 15天 ,取创面中心及边缘新生上皮下的组织匀浆 ,离心后将上清液 - 70℃冰箱保存备用。用第 4代 FB进行实验 ,根据培养液的不同分成 7组 : 组 :DMEM+5 %胎牛血清 ; 组 :DMEM+5 %创面中心组织匀浆液 ; 组 :DMEM+5 %创面边缘组织匀浆液 ; 组 :DMEM+5 %创面中心组织匀浆液 +10μg/ ml广谱基质金属蛋白酶抑制剂 (GM6 0 0 1) ; 组 :DMEM+5 %创面边缘组织匀浆液 +10μg/ ml GM6 0 0 1; 组 :DMEM+5 %创面中心组织匀浆液 +10 ng/ ml酸性成纤维细胞生长因子 (acid fibroblast growth factor,a FGF) ; 组 :DMEM+5 %创面边缘组织匀浆液 +10 ng/ ml a FGF。在上述培养液中培养 16 h,均采用同一动物的匀浆液处理该动物来源的 FB(n=6 )。采用 PI和标记 FITC的 Annexin 作为探针 ,利用流式细胞仪检测细胞凋亡。　结果　各组细胞凋亡率分别为 : 组 4 .39%± 0 .4 1% , 组 10 .98%±1.4 2 % , 组 13.4 7%± 1.4 4 % , 组 7.2 %± 0 .4 6 % , 组 12 .1%± 0 .85 % , 组 3.9%± 0 .6 3% , 组 9.8%± 0 .5 0 % ;

关键词：创面组织匀浆液心组织 FB DMEM 凋亡体外培养 FGF 培养液成纤维细胞

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脂肪与创面愈合

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中国修复重建外科杂志 2005年第1期19卷 78-81页

作者：程飚付小兵盛志勇解放军总医院304临床部全军创伤修复重点实验室

目的　探讨脂肪组织与创面愈合的关系。　方法　通过对近期文献的回顾 ,脂肪组织参与食物摄入、能量代谢等生理过程。通过内分泌、自分泌和旁分泌参与创面愈合的调节。　结果　脂肪组织主要分泌的几种因子 :瘦素、细胞因子、生长因子和... 详细信息

目的　探讨脂肪组织与创面愈合的关系。　方法　通过对近期文献的回顾 ,脂肪组织参与食物摄入、能量代谢等生理过程。通过内分泌、自分泌和旁分泌参与创面愈合的调节。　结果　脂肪组织主要分泌的几种因子 :瘦素、细胞因子、生长因子和脂质等参与创面愈合过程。　结论　脂肪组织在创面愈合过程中可能具有重要作用 ,进一步了解脂肪细胞与上皮形成间的关系有助于揭示创面愈合的机制。

关键词：创面愈合脂肪组织上皮旁分泌瘦素生长因子细胞因子生理过程能量代谢自分泌

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人皮肤成纤维细胞的培养和鉴定

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中国危重病急救医学 2005年第2期17卷 89-91,F006页

作者：李海红周岗付小兵屈振亮孙同柱顾绍峰解放军总医院三○四临床部全军创伤修复重点实验室

目的　探索和建立人皮肤成纤维细胞体外分离、培养及鉴定的技术方法。方法　通过酶消化法分离人皮肤外分泌汗腺 ,在外分泌汗腺生长的同时 ,成纤维细胞也在生长 ;用质量分数为 0 .2 5 %的胰酶和0 .0 2 %的乙二胺四乙酸 (EDTA)消化分离汗... 详细信息

目的　探索和建立人皮肤成纤维细胞体外分离、培养及鉴定的技术方法。方法　通过酶消化法分离人皮肤外分泌汗腺 ,在外分泌汗腺生长的同时 ,成纤维细胞也在生长 ;用质量分数为 0 .2 5 %的胰酶和0 .0 2 %的乙二胺四乙酸 (EDTA)消化分离汗腺细胞和成纤维细胞 ;以 Dulbecco改良的 Eagle培养液 (DMEM)为基础培养基 ,添加胎牛血清 (体积分数 10 % )、青霉素 (10 0 k U/ L)和链霉素 (10 0 mg/ L) ,置 37℃、体积分数为 5 % CO2 、95 %空气、饱和湿度条件下培养。倒置相差显微镜和苏木素伊红染色 ,观察成纤维细胞形态 ,并对培养细胞行波形蛋白免疫组化及染色体鉴定。结果　分离的成纤维细胞可在体外快速贴壁生长、增殖 ,波形蛋白免疫组化染色为阳性 ,染色体分析为 4 6条。结论　该方法所获得的皮肤成纤维细胞可在体外稳定培养 ,为在细胞水平上研究伤口愈合的机制提供了充足、可靠的靶细胞。

关键词：皮肤成纤维细胞细胞培养免疫组化染色体细胞分离

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人骨髓间充质干细胞与汗腺细胞共同培养诱导细胞表型转化的初步研究

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中华医学杂志 2005年第27期85卷 1885-1889页

作者：李海红付小兵周岗费沛陈伟白晓东蔡存良孙同柱解放军总医院三○四临床部全军创伤修复重点实验室

目的研究人骨髓间充质干细胞(humanmesenchymalstemcells,hMSCs)在体外与损伤的人汗腺细胞(humansweatglandcells,hSGCs)共培养时的转化情况。方法体外分别分离培养和扩增hMSCs和hSGCs,用二步免疫细胞化学法检测hMSCs和hSGCs抗原表达情... 详细信息

目的研究人骨髓间充质干细胞(humanmesenchymalstemcells,hMSCs)在体外与损伤的人汗腺细胞(humansweatglandcells,hSGCs)共培养时的转化情况。方法体外分别分离培养和扩增hMSCs和hSGCs,用二步免疫细胞化学法检测hMSCs和hSGCs抗原表达情况。用5μmol/L的5溴2脱氧尿苷(BrdU)对培养的hMSCs进行连续培养标记。待原代培养的hSGCs达70%融合后,给予47℃高温处理40min造成热损伤体外模型,37℃冷却12h,然后加入(12)×105BrdU标记的hMSCs共同培养,2周后,以抗癌胚抗原(CEA)和抗BrdU单克隆抗体作为一抗,采用免疫细胞化学双染法检测共培养的细胞。结果hMSCs和hSGCs均呈克隆样生长,hMSCs表达CD44和CD105,不表达CD34和CEA;hSGCs表达CK7、CK8、CK19、CEA。用BrdU标记hMSCs阳性率可达90%,hSGCs经高温损伤后,大多数细胞的细胞间连接消失。共培养2周后,部分细胞同时表达CEA和BrdU,并有多核现象。细胞染色示双染细胞可达1%～5%,多核细胞且核染色不同的细胞约为0.01%～0.05%,多核细胞与其他双染细胞相比,细胞明显的宽大扁平。结论在损伤的微环境下,hMSCs可以向hSGCs转化,其机制可能是细胞分化、细胞融合甚至是核融合。

关键词：人骨髓间充质干细胞共同培养汗腺细胞细胞表型转化步研究癌胚抗原(CEA) hMSCs BrdU标记免疫细胞化学法 cells 多核细胞 mol/L 单克隆抗体抗BrdU 培养的细胞 CD105 细胞间连接表达情况 Cs抗原连续培养脱氧尿苷

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