[目的]比较大鼠股神经分支基膜管结构和成分差异,为组织工程神经引导周围神经损伤后的精确再生提供依据。[方法]选取健康8周龄雄性SD大鼠30只,随机分为2组,实验组取股神经及其分支进行化学去细胞处理;对照组取新鲜股神经及其分支;观察指标为超微结构、组织学、免疫组织化学、拉曼光谱特征。[结果](1)超微结构:对照组股神经肌支髓鞘厚度大于皮支(1.28±0.41)μm vs (0.81±0.32)μm,(P<0.05),对照组股神经肌支基底膜厚度大于股神经皮支(34.55±2.23) nm vs (31.86±3.47) nm,(P<0.05);扫描电镜显示实验组去细胞处理后的取向性结构管状结构,无可见细胞结构;对照组扫描电镜显示可见明显分束的神经纤维及细胞结构;(2)组织学及免疫荧光显示:对照组股神经肌支乙酰胆碱酯酶染色阳性部位所占比例较大,皮支染色阴性部位所占比例较大;实验组去细胞处理后HE神经纤维呈均一红染管状细胞外基质结构,无蓝色可见细胞核结构;实验组神经去细胞处理后DAPI和Laminin染色为红色层粘连蛋白背景,无亮蓝色细胞核结构;(3)拉曼光谱分析显示:实验组神经去细胞处理后股神经肌支和皮支波峰出现位置无差异,主要为脂类和蛋白质及微量核酸。[结论]大鼠股神经肌支主要含运动神经纤维,皮支主要含感觉神经纤维;肌支和皮支的基膜管在结构上存在差异,其拉曼光谱特征基本相似。
背景链球菌感染可诱发并加重银屑病。目前银屑病研究中运用最广的模型是咪喹莫特诱导的银屑病样皮炎动物模型,但皮损持续时间短、易消退的缺点影响了其应用价值。目的观察链球菌是否可改良咪喹莫特诱导建立的银屑病样皮炎动物模型。方法将C57BL/6小鼠随机分为链球菌组(GAS+IMQ)、咪喹莫特组(PBS+IMQ)及空白组(PBS+VAS),每组各15只。实验第1天,链球菌组小鼠鼻腔内滴加链球菌活菌液,空白组和咪喹莫特组小鼠鼻腔内滴加等量PBS溶液。实验第3天,链球菌组和咪喹莫特组小鼠背部皮肤涂抹咪喹莫特乳膏,空白组小鼠背部皮肤涂抹医用黄凡士林,三组小鼠连续涂抹并观察21 d。实验第3天后每天对皮损进行拍照及银屑病皮损面积及严重程度指数(psoriasis area and severity index,PASI)评分。实验第0、3、10、17、24天,每组随机处死3只小鼠,收集皮肤组织进行组织病理学检查,免疫组织化学法检测皮损中Ki-67表达情况,实验第24天酶联免疫吸实验(ELISA)法检测各组小鼠血清中白细胞介素(interleukin,IL)-17、IL-6及肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的含量。结果实验第3天后链球菌组及咪喹莫特组小鼠均出现银屑病样皮损,PASI评分于第10天达到顶峰。之后咪喹莫特组小鼠皮损严重程度逐渐下降,实验第24天皮损基本消退。链球菌组皮损严重程度同期均高于咪喹莫特组(P<0.05),实验第24天链球菌组小鼠皮肤鳞屑性红斑皮损持续存在。皮肤组织病理:链球菌组和咪喹莫特组小鼠均出现Munro微脓肿、棘层肥厚及真皮层炎症细胞浸润,同期相比链球菌组小鼠表皮厚度均高于咪喹莫特组小鼠(P<0.05),链球菌组小鼠皮损中Ki-67阳性表达显著强于咪喹莫特组(P<0.05)。与空白组和咪喹莫特组相比,链球菌组小鼠血清中IL-17、IL-6、TNF-α含量均升高(P<0.05)。结论链球菌可使咪喹莫特诱导的银屑病样皮炎动物模型皮损维持时间延长且更典型,可能是一种有效可行的改良动物模型。
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