检索结果-内蒙古大学图书馆

解放军医学杂志 2017年第7期42卷 617-622页

作者：房晓燕李萌萌郝济伟杨静邓城旗张庆红唐家广解放军总医院第一附属医院麻醉科北京100048 锦州医科大学研究生院辽宁锦州121001 解放军总医院第一附属医院全军创伤修复与组织再生重点实验室北京100048 解放军总医院第一附属医院骨科北京100048

目的探讨运动对发育期多次异氟烷处理大鼠成年后物体识别能力的影响。方法选取生后7d(P7)的SD大鼠110只,随机分为正常对照组(Naive),运动组(Naive+PE;P21开始,跑台30min/d,5次/周,连续6周),异氟烷组(Iso;P7、P9、P11吸入异氟烷2h,共3次... 详细信息

目的探讨运动对发育期多次异氟烷处理大鼠成年后物体识别能力的影响。方法选取生后7d(P7)的SD大鼠110只,随机分为正常对照组(Naive),运动组(Naive+PE;P21开始,跑台30min/d,5次/周,连续6周),异氟烷组(Iso;P7、P9、P11吸入异氟烷2h,共3次)和异氟烷运动组(Iso+PE)。P67(运动结束即刻)对4组大鼠进行旷场和物体识别行为学测试,P95(运动结束后4周)再次进行物体识别实验,记录大鼠的旷场及新旧物体识别行为学表现。结果运动对各组大鼠成年后旷场试验的影响差异无统计学意义(P>0.05)。与Naive相比,P67时Iso组雌性大鼠辨别指数(DR)明显增强,差异有统计学意义(P=0.034),而Iso组雄性大鼠P67和P95时两次测试DR均有增强趋势,但差异无统计学意义(P=0.341、P=0.052)。与非运动组相比,无论是否经过异氟烷处理,运动组雄鼠DR均明显增强(与Naive组及Iso组比较,P67时P=0.050、P=0.017,P95时P=0.037、P=0.019);与Naive组相比,运动组雌鼠P67时DR无明显差异,但到P95时明显增强(P=0.004);与Iso组相比,P67时运动组DR显著下降(P=0.036),而P95时有增强趋势(P=0.095)。与雄鼠相比,P67时非运动组雌鼠DR明显增强(Naive组,P=0.022;Iso组,P=0.011),到P95时,仅没有经过异氟烷处理的两组雌鼠DR高于雄鼠(Naive组,P=0.008;Naive+PE组,P=0.017)。结论发育期多次异氟烷处理对大鼠成年后非空间记忆的物体识别能力无明显损害;发育期接受规律运动能够促进大鼠成年后的物体识别能力,雄鼠的运动获益较大,而雌鼠的运动获益仅体现在远期效果上。

关键词：运动生长和发育异氟烷性别因素物体识别

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控制性诱导细胞分化与组织修复和再生

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中华创伤杂志 2008年第6期24卷 405-406页

作者：付小兵解放军总医院基础医学所、第一附属医院全军创伤修复重点实验室北京100853

组织修复与再生实际上是一个受损组织的再发育过程，其中修复细胞的有序增殖和分化是基础，而有目的可控性的诱导细胞增殖与分化则是实现完美修复和再生的重要手段之一。近年来有关采用控制性诱导细胞分化技术实现组织和器官的修复与再... 详细信息

组织修复与再生实际上是一个受损组织的再发育过程，其中修复细胞的有序增殖和分化是基础，而有目的可控性的诱导细胞增殖与分化则是实现完美修复和再生的重要手段之一。近年来有关采用控制性诱导细胞分化技术实现组织和器官的修复与再生已有较多的报道，已经显示出它潜在的应用前景，值得人们关注和开展相关研究。

关键词：组织修复细胞分化控制性再生细胞增殖发育过程受损组织修复细胞

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病理性瘢痕治疗现状与展望

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中华整形外科杂志 2006年第2期22卷 146-149页

作者：付小兵程飚解放军总医院基础医学研究所北京100853 解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室

目前瘢痕的治疗可分为侵袭性和非侵袭性两种[1-4],具体治疗要根据瘢痕的情况而定.本文综述病理性瘢痕的治疗现状及未来治疗有可能突破的方向。

关键词：病理性瘢痕治疗现状非侵袭性

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表皮干细胞的分离培养和鉴定

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中华实验外科杂志 2007年第2期24卷 163-165页

作者：孙晓艳付小兵孙同柱解放军总医院基础医学研究所北京100853 解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室

目的分离培养和鉴定人表皮基底层干细胞。方法中性蛋白水解酶选择性的消化表皮与真皮之间的细胞连接，采用改良的Ⅳ型胶原铺板选择黏附法分离、培养表皮中的干细胞，观察培养第2、4、6天时a6、β1整合素、K19、K14、p63、Nestin、CD34、... 详细信息

目的分离培养和鉴定人表皮基底层干细胞。方法中性蛋白水解酶选择性的消化表皮与真皮之间的细胞连接，采用改良的Ⅳ型胶原铺板选择黏附法分离、培养表皮中的干细胞，观察培养第2、4、6天时a6、β1整合素、K19、K14、p63、Nestin、CD34、PCNA及K10在表皮干细胞中的表达差异。结果改良过的Ⅳ型胶原铺板选择黏附法能够有效地促进表皮干细胞的贴壁和伸展。原代分离的表皮基底层干细胞a6、p1整合素，K19，K14，p63，Nestin，CD34及PCNA表达为强阳性而K10不表达。这些细胞具有干细胞的特点，可以形成克隆。随着培养时间的增加，表皮干细胞形态发生变化，a6、β1整合素、K19、K14，表达逐渐减弱，K10表达逐渐增强。此外，在原代分离的细胞中可见单个核样干细胞表达a6、β1整合素，K19，K14，P63，Nestin，CD34及PCNA，这些细胞形态相似体积较表皮基底层干细胞大，胞核为肾形，染色较深。结论中性蛋白水解酶消化合并改良过的Ⅳ型胶原铺板选择黏附法能够高效地分离表皮中的干细胞。分离的细胞具有干细胞的特点，可以形成集落。此外，原代分离培养的表皮干细胞中仍然可见单个核样干细胞，这些细胞形态相似，类似血液系统来源的单核细胞，胞质内均匀分布着粗大的阳性颗粒。单个核样干细胞可能与皮肤的发牛、发育以及创伤修复有关。

关键词：表皮干细胞单克隆抗体免疫组织化学

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雌激素对人表皮干细胞增殖与迁移影响的体外实验

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中国修复重建外科杂志 2011年第2期25卷 134-138页

作者：陈小波程飚刘宏伟孙同柱付小兵广州军区广州总医院整形外科广州 510010 暨南大学附属第一医院整形外科解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室

目的表皮干细胞(epidermal stem cells,ESCs)在体内的微环境十分复杂,雌激素可能是主要的参与者。探讨雌激素对体外培养的hESCs增殖与迁移的影响。方法取自愿捐赠的正常人包皮标本,采用密度梯度离心法分离培养hESCs,并传至第2代。流式... 详细信息

目的表皮干细胞(epidermal stem cells,ESCs)在体内的微环境十分复杂,雌激素可能是主要的参与者。探讨雌激素对体外培养的hESCs增殖与迁移的影响。方法取自愿捐赠的正常人包皮标本,采用密度梯度离心法分离培养hESCs,并传至第2代。流式细胞仪检测第2代hESCs整合素β1、细胞角蛋白19(cytokeratin 19,CK19)、CK14和CK10抗原表达以鉴定hESCs。取第2代hESCs 2×106个分别用含0.1 nmol/L雌激素的ESCs专用培养基(A组)、含10 nmol/L雌激素受体阻断剂的ESCs专用培养基(B组)以及普通ESCs专用培养基(C组)进行培养;于培养后24 h刮擦生长融合成片的hESCs,制备宽度为100μm的体外单层hESCs损伤模型。于模型制备后24、48、72 h,倒置相差显微镜下观察各组表皮创面愈合情况(即hESCs迁移情况),并计算模型制备后72 h各组创面愈合率;于模型制备后24、48、72、96、120 h,采用MTT法检测hESCs分裂增殖活性。结果原代培养的hESCs贴壁呈单层卵圆形、集落样生长。流式细胞仪检测第2代hESCs的整合素β1、CK19、CK14呈阳性标记,阳性率分别为96.63%、95.47%、94.27%;CK10呈阴性标记,阳性率为1.32%。模型制备后24、48、72 h,各组均可见hESCs迁移越过创缘,其中A组越过创缘的细胞数多于B、C组,C组多于B组;模型制备后72 h,A、B、C组创面愈合率分别为69.00%±0.05%、35.00%±0.05%、48.00%±0.06%,组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。模型制备后24、48、72、96和120 h,A组hESCs分裂增殖活性高于B、C组,C组高于B组,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论雌激素具有促进hESCs分裂增殖和迁移的作用,并藉此可能参与皮肤诸多的生物学作用。

关键词：人表皮干细胞雌激素细胞增殖细胞迁移体外实验

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胚胎组织提取液影响表皮干细胞表型变化的初步研究

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中国病理生理杂志 2008年第5期24卷 883-887页

作者：孙晓艳付小兵盛志勇张翠萍孙同柱解放军总医院基础医学研究所北京100853 解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室北京100037

目的:模拟表皮干细胞周围生态微环境,研究表皮干细胞在此环境中的表型变化,表皮干细胞微环境在表皮干细胞"命运"决定过程中的作用。方法:分离、培养表皮干细胞,观察其形态,并进行免疫组织化学鉴定及免疫荧光检测。制备小鼠胚... 详细信息

目的:模拟表皮干细胞周围生态微环境,研究表皮干细胞在此环境中的表型变化,表皮干细胞微环境在表皮干细胞"命运"决定过程中的作用。方法:分离、培养表皮干细胞,观察其形态,并进行免疫组织化学鉴定及免疫荧光检测。制备小鼠胚胎组织匀浆液,荧光活细胞示踪法和逆转录聚合酶链式反应检测胚胎组织提取液对表皮干细胞表型变化的影响。结果:原代分离培养的表皮基底层干细胞表达α6、β1整合素、K19、K14、p63、Nes-tin、PCNA为阳性,而K10不表达。激光共聚焦检测显示α6整合素和CD71在表皮干细胞中的分布存在着区域性差异。此外,流式细胞检测显示胚胎组织提取液作用后α6+CD71-表达细胞由细胞总数的22.49%减少至10.92%,而α6+CD71+、α6-CD71+表达细胞则分别由诱导前的62.29%及0.19%增加至诱导后的68.34%及4.51%。RT-PCR结果表明胚胎组织提取液作用后,表皮干细胞中β1整合素、K19、K10表达增强,而K14表达减弱。结论:Ⅳ型胶原黏附法分离的表皮干细胞具有干细胞的特点。α6整合素、CD71在表皮干细胞中分布的区域差异及CD71表达位点的空间变化可以作为区分表皮干细胞及其子代细胞标志之一。胚胎组织提取液对表皮干细胞的增殖分化具有促进作用。胚胎组织提取液中的某些因子可能抑制了K14表达的TA细胞的终末分化,甚至诱导其发生逆向分化,导致诱导后K14的总体表达水平下调。

关键词：表皮干细胞抗体单克隆胚胎组织提取液

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脂肪源性干细胞临床转化应用中的相关问题

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中国修复重建外科杂志 2012年第10期26卷 1242-1246页

作者：刘宏伟程飚付小兵暨南大学附属第一医院整形外科再生医学教育部重点实验室广州510630 广州军区广州总医院整形外科全军热区损伤救治与组织修复重点实验室解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室

目的对近年来国内外有关脂肪源性干细胞(adipose-derived stem cells,ASCs)在临床转化应用中应该或必须关注的问题进行综述。方法广泛查阅近年相关文献,对ASCs生产和使用过程中有关产品的管理、生产、运输、使用、安全性等方面进行综合... 详细信息

目的对近年来国内外有关脂肪源性干细胞(adipose-derived stem cells,ASCs)在临床转化应用中应该或必须关注的问题进行综述。方法广泛查阅近年相关文献,对ASCs生产和使用过程中有关产品的管理、生产、运输、使用、安全性等方面进行综合分析。结果 ASCs作为成体干细胞家族的新成员在再生医学领域展现了广阔的应用前景。目前在美国国立卫生研究院(NIH)的http://***网站上已注册登记的在15个国家进行的临床试验达40多个,说明世界范围内从事干细胞研究和应用的学者对ASCs临床转化应用的浓厚兴趣和重视。在临床转化应用中,ASCs产品存在管理,生产应遵循的质量控制标准,病原微生物污染的预防措施,分离过程中对酶和相关试剂的要求,取材过程中供区、年龄和性别可能的影响,低温贮藏,产品运输以及安全性等一系列问题。结论 ASCs作为成体干细胞具有较好的临床转化应用优点,在临床应用中对其存在的问题必须给予高度重视和进一步研究,以加速其临床转化过程。

关键词：脂肪源性干细胞基质血管成分细胞转化医学再生医学

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碱性成纤维细胞生长因子诱导表皮细胞去分化的初步研究

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第三军医大学学报 2008年第21期30卷 2003-2007页

作者：孙晓艳付小兵伊海英刘惠玲孙同柱解放军总医院基础医学研究所北京100853 解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室北京100037

目的初步探索表皮细胞体外去分化模型的建立方法。方法HEKa细胞体外培养6～7代时开始出现老化迹象,细胞体积膨大,形态发生明显改变。加入浓度为100ng/ml的碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth fac-tor,bFGF)诱导液分别培养6... 详细信息

目的初步探索表皮细胞体外去分化模型的建立方法。方法HEKa细胞体外培养6～7代时开始出现老化迹象,细胞体积膨大,形态发生明显改变。加入浓度为100ng/ml的碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth fac-tor,bFGF)诱导液分别培养6、12、24、48、72h后,MTT法检测bFGF对表皮细胞体外生长的促进作用。同时采用免疫细胞化学染色法、流式细胞检测技术、RT-PCR法检测bFGF诱导培养后,表皮细胞的表型及功能的改变。结果MTT检测结果显示浓度为100ng/ml,诱导时间为36～48h为诱导表皮细胞去分化的最佳实验条件。在bFGF的作用之下,老化的HEKa细胞周围开始出现新生的表皮干细胞样克隆。免疫细胞化学检测结果表明,实验组细胞中β1整合素、CK19、CK14的表达增强,而CK10作为终末分化细胞的标志,在bFGF诱导组中的表达明显降低。流式细胞检测分析显示bFGF作用后,实验组CK19表达阳性的细胞与对照组相比明显增多(分别为74.77%和15.74%);CK14表达阳性的细胞也由原来的67.26%增加至被检测细胞总数的87.14%。而bFGF诱导作用后,被检测细胞中表达CK10阳性的细胞数量较对照组明显下降(分别为4.56%和98.56%)。此外,RT-PCR检测结果同样再次支持了表皮细胞去分化的理论。在bFGF诱导组中,β1整合素、CK19、CK14mRNA转录水平明显上调,而CK10mRNA表达则明显下降。结论bFGF能够在体外诱导表皮细胞逆转分化形成幼稚型表皮前体干细胞,但其涉及具体机制需要进一步研究。

关键词：表皮细胞去分化干细胞免疫细胞化学流式细胞检测 MTT RT—PCR

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皮肤干细胞在胎皮中分布的免疫组织化学研究

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中华实验外科杂志 2007年第9期24卷 1090-1092页

作者：邬彩虹孙晓艳付小兵韩伊林解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室北京100073 内蒙古医学院

目的采用免疫组织化学方法研究不同时期胚胎皮肤中的干细胞,分析皮肤干细胞的形态、分布特点及发育过程中在胎儿皮肤中的迁徙、增殖分化特征,探讨皮肤干细胞与皮肤发生发育的关系。方法不同发育时期胎儿皮肤,取材、固定、制成石蜡切片,S... 详细信息

目的采用免疫组织化学方法研究不同时期胚胎皮肤中的干细胞,分析皮肤干细胞的形态、分布特点及发育过程中在胎儿皮肤中的迁徙、增殖分化特征,探讨皮肤干细胞与皮肤发生发育的关系。方法不同发育时期胎儿皮肤,取材、固定、制成石蜡切片,SP法检测整合素-β1、角蛋白19(K19)、K14、K10和PCNA的表达。结果胚胎发育期可见整合素-β1阳性的细胞在基底层散在分布。随胎龄增加,整合素-β1表达减弱,表达范围减小。同时,胚胎发育的不同阶段K19均在表皮基底层强烈表达。表皮分层期后,K14阳性细胞从基底层向上延伸至亚基底层。而K10作为表皮终末分化细胞的标志,主要分布在表皮的中层和外层。此外,在毛囊发育过程中,胎皮表皮嵴的细胞相互聚集成团,形成毛囊初级原基,表达整合素-β1、K19、K14及PCNA为阳性。随着毛囊的形成、成熟,皮肤干细胞主要聚集在与表皮相延续的外根鞘、毛囊隆突部及毛母质,表达整合素-β1、K19、K14和PCNA为阳性。结论(1)皮肤的发生、发育与角蛋白的程序性改变密切相关;(2)毛囊的发生、发育受到毛乳头的诱导作用。毛囊成熟期后,皮肤干细胞主要迁移至与表皮相延续的外根鞘、毛囊隆突部及毛母质等处。此外,还发现毛乳头及其周围组织内分布着单核样细胞表达整合素-β1、K19和K14为阳性。

关键词：皮肤干细胞胚胎角蛋白整合素-β1

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深Ⅱ度烧伤创面汗腺干细胞标志物的变化规律

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中华烧伤杂志 2009年第4期25卷 301-304页

作者：姜笃银宗宪磊付小兵王魏单菲山东大学第二医院急诊科济南250033 解放军总医院基础医学所第一附属医院全军创伤修复重点实验室

目的了解深Ⅱ度烧伤创面愈合过程中汗腺上皮细胞增殖并向表皮细胞转化的规律，探讨其机制。方法选择2004年1月-2007年12月，江苏省泰州市第四人民医院和山东大学第二医院收治的四肢与躯干烧伤患者28例。收集患者深Ⅱ度烧伤创面组织标本3... 详细信息

目的了解深Ⅱ度烧伤创面愈合过程中汗腺上皮细胞增殖并向表皮细胞转化的规律，探讨其机制。方法选择2004年1月-2007年12月，江苏省泰州市第四人民医院和山东大学第二医院收治的四肢与躯干烧伤患者28例。收集患者深Ⅱ度烧伤创面组织标本37块、浅Ⅱ度烧伤创面组织标本21块、正常皮肤标本10块。采用免疫组织化学双染色法，观察细胞角蛋白10（CK10）、CK14、CKl9、bcl-2和P63在深、浅Ⅱ度烧伤创面及正常皮肤汁腺分泌部上皮细胞中的表达情况。结果正常皮肤汗腺分泌部上皮细胞中等强度表达CK19、CK14和CK10，基底层肌上皮细胞做弱表达P63和CK14，CK10表达阳性的终末分化细胞不表达bcl-2和P63。浅Ⅱ度烧伤创面修复过程中，其汗腺分泌部结构及上述蛋白表达未见异常。深Ⅱ度烧伤后7d创面汗腺分泌部上皮细胞P63和bcl-2表达增强；伤后8～10d创面基底细胞增殖、迁移和鳞状七皮化，形成bcl-2、P63、CK19和CK14表达强阳性的实心岛状上皮结构，并随肉芽组织向创面浅层迁移，经鳞状上皮增殖完成创面再上皮化。深Ⅱ度烧伤创面愈合后13～30d，超常增殖的表皮基底层和基底上层细胞仍强烈表达bcl-2、CK14、CK19和P63。结论干细胞和短暂扩充细胞逆分化过程导致上皮生长滞后和肉芽组织过度增殖，这种失衡现象可能是导致深Ⅱ度烧伤创面修复失控的重要机制之一。

关键词：烧伤汗腺上皮细胞干细胞转分化

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