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第七届全国创伤学术会议暨2009海峡两岸创伤医学论坛

作者：艾丽付小兵张翠萍解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室

目的探讨在体外分离及培养的人外泌汗腺细胞免疫表型的表达情况。方法采用酶消化法(0.2%胶原酶Ⅱ)分离获取汗腺细胞,选用DMEM-LG培养基,添加10%特级胎牛血清、L-谷氨酰胺(2mM)、重组人表皮生长因子(10ng/ml)、三碘甲状腺原氨酸(2ng/ml)... 详细信息

目的探讨在体外分离及培养的人外泌汗腺细胞免疫表型的表达情况。方法采用酶消化法(0.2%胶原酶Ⅱ)分离获取汗腺细胞,选用DMEM-LG培养基,添加10%特级胎牛血清、L-谷氨酰胺(2mM)、重组人表皮生长因子(10ng/ml)、三碘甲状腺原氨酸(2ng/ml)、半琥珀氢化可的松(0.4μg/ml)、胰岛素转铁蛋白-亚硒酸钠(1m/100ml)、青霉素(100U/ml)、链霉素(100μg/ml)。汗腺细胞达

关键词：外泌汗腺免疫表型体外培养

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地塞米松上调骨髓间充质干细胞(MSC)CX43表达

地塞米松上调骨髓间充质干细胞(MSC)CX43表达

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第七届全国创伤学术会议暨2009海峡两岸创伤医学论坛

作者：雷永红付小兵盛志勇解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室

目的研究糖皮质激素地塞米松(dexamethasone,Dex)影响成体人骨髓间充质干细胞(human mesenchymal stem cells,hMSCs)表达CX43、CX26的效应。方法hMSC按标准方法培养(n=8)和检测其多向分化潜能,用免疫荧光和real-time qPCR检测CX43、CX2... 详细信息

关键词：骨髓间充质干细胞 hMSCs 地塞米松 MSC)CX43

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人皮肤汗腺细胞提取液诱导hMSCs定向分化的研究

人皮肤汗腺细胞提取液诱导hMSCs定向分化的研究

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第十一届中国科协年会

作者：雷永红付小兵盛志勇孙同柱周学萍解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室，北京 100048 解放军总医院第一附属医院烧伤科北京 100048

目的:探讨用汗腺细胞提取液在体外直接诱导成人骨髓间充质干细胞(hMSCs)转分化为汗腺细胞的技术。方法：体外分离和培养hMSCs,分别加入不同条件培养基进行成脂胁细胞、成骨细胞和成软骨细胞诱导分化，并以免疫组织化学染色(IC)和流... 详细信息

目的:探讨用汗腺细胞提取液在体外直接诱导成人骨髓间充质干细胞(hMSCs)转分化为汗腺细胞的技术。方法：体外分离和培养hMSCs,分别加入不同条件培养基进行成脂胁细胞、成骨细胞和成软骨细胞诱导分化，并以免疫组织化学染色(IC)和流式细胞仪(FACs)检测hMSCs抗原表达。利用Ⅱ型胶原酶消化皮肤标本，分离培养原代人皮肤汗腺细胞，液氮速冻和超声裂解后收集上清制备汗腺细胞(5×107个/ml)提取液并加入生成ATP成分(1mM ATP,1mN GTP,1mN NTP,10nM磷酸肌酸,25μg/ml肌酸激酶)，在800 ng/ml链球菌溶血素O(streptolysin O，SLO)可逆性通透处理hMSCs细胞1小时后,与汗腺细胞提取液孵育4小时,换用DMEM培养基诱导培养，对照组为单纯汗腺细胞提取液孵育组和单纯SLO处理组。培养3天后应用FACs、IC、和逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)以及蛋白印迹(Western blot)检测培养细胞的汗腺特异标志，癌胚抗原(CEA)、细胞角蛋白8(CK8)、CK18、CK19抗原表达。结果：hMSCs经加入不同条件培养基诱导后可以分化为脂肪细胞、成骨细胞和软骨细胞。CD29、CD44、CD90、和CD106抗原表达阳性，CD31、CD34、CD45和CD49b抗原表达阴性。FACs检查示SLO处理+汗腺细胞提取液孵育组与汗腺细胞提取液孵育组和SLO处理组比较，hMSCs细胞CEA阳性率分别为((85.74±2.53)[％])，对((71.36±1.04)[％]和(1.63±1.58)[％]))(P<0.05)，CK8阳性率((82.46±2.85)[％])对((3.54±1.92)[％])和((1.03±1.58)[％])(p<0.05).CK18阳性率((87.14±1.43)[％])，对((4.25±1.02)[％])和((1.92±0.46)[％])(P<0.05)，CK19阳性率((90.65±1.63))对((3.20±1.14)[％])和((2.82±0.65)[％])(P<0.05)，IC态学染色显示诱导的hMSC3抗CEA、CK8、CK18、CK19染色均呈阳性表达，RT-PCR和Westernblot表明诱导的hMSCs细胞表达CEA、CKS、CK18、CK19基因和蛋白。结论：汗腺细胞核酸提取液与SLO通透处理的hMSCs孵育1小时后.可以在体外诱导hMSCs转分化为汗腺细胞表型。

关键词：骨髓间充质干细胞汗腺细胞逆转录聚合酶链式反应抗原表达体外分离培养

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诱导性多潜能干细胞(iPS)研究：现状与展望

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中国工程科学 2009年第5期11卷 81-87页

作者：韩为东赵亚力付小兵解放军总医院基础医学研究所北京100853 解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室北京100037

通过特定的基因组合与转染可以将已分化的体细胞诱导重编程为多潜能干细胞(iPS),是近年来干细胞研究领域最令人瞩目的一项新的干细胞制造技术。与胚胎干细胞(ES)不同,iPS细胞的制造不需要毁损胚胎,因而不会涉及更多的伦理学问题。iPS的... 详细信息

通过特定的基因组合与转染可以将已分化的体细胞诱导重编程为多潜能干细胞(iPS),是近年来干细胞研究领域最令人瞩目的一项新的干细胞制造技术。与胚胎干细胞(ES)不同,iPS细胞的制造不需要毁损胚胎,因而不会涉及更多的伦理学问题。iPS的出现不仅为体细胞重编程去分化机制的研究注入了新的活力,而且为疾病发生发展相关机制研究与特异的细胞治疗,特别是再生医学带来新的曙光。目前,iPS的研究尚处于初级阶段,文章就iPS的研究现状与应用前景进行综述和展望。

关键词：体细胞重编程 iPS细胞

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TNF诱导人表皮干细胞通过p38 MAPK依赖机制产生VEGF、HGF和IGF-1的研究

TNF诱导人表皮干细胞通过p38 MAPK依赖机制产生VEGF、HGF和IGF-1...

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第七届全国创伤学术会议暨2009海峡两岸创伤医学论坛

作者：雷永红付小兵盛志勇刘波周学萍解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室解放军总医院第一附属医院烧伤科

目的旨在探讨hESCs是TNF靶细胞,通过p38 MAPK依赖机制,可以产生血管内皮细胞生长因子(VEGF)、肝细胞生长因子(HGF)、和胰岛素样生长因子(IGF-I)。方法将包皮用中性蛋白水解酶消化,采用改良的Ⅳ型胶原选择黏附法分离、培养表皮干细胞(hES... 详细信息

目的旨在探讨hESCs是TNF靶细胞,通过p38 MAPK依赖机制,可以产生血管内皮细胞生长因子(VEGF)、肝细胞生长因子(HGF)、和胰岛素样生长因子(IGF-I)。方法将包皮用中性蛋白水解酶消化,采用改良的Ⅳ型胶原选择黏附法分离、培养表皮干细胞(hESCs)(n=7),检测hESCs表面标志

关键词： TNF p38 MAPK IGF-1 人表皮干细胞 HGF

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雌激素提高缺血性皮瓣成活能力的研究

雌激素提高缺血性皮瓣成活能力的研究

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第七届全国创伤学术会议暨2009海峡两岸创伤医学论坛

作者：雷永红付小兵盛志勇孙同柱周学萍解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室解放军总医院第一附属医院烧伤科

目的旨在探讨雌激素对缺血皮瓣血循环重建和缺血皮瓣的保护作用。方法64只SD大鼠,切除双侧卵巢2 W后,制作以旋髂浅动脉为血管蒂的下腹部岛状皮瓣,夹闭血管蒂皮瓣缺血40 min后再灌注。实验组为去除卵巢夹闭血管组(n=20),对照组为去除卵... 详细信息

目的旨在探讨雌激素对缺血皮瓣血循环重建和缺血皮瓣的保护作用。方法64只SD大鼠,切除双侧卵巢2 W后,制作以旋髂浅动脉为血管蒂的下腹部岛状皮瓣,夹闭血管蒂皮瓣缺血40 min后再灌注。实验组为去除卵巢夹闭血管组(n=20),对照组为去除卵巢未夹闭血管组(n=12),正常大鼠夹闭血管组(n=13)和正常大鼠未夹闭血管组(n=10)。术后24 h切取皮瓣近、远端组织分别测定

关键词：皮瓣成活缺血皮瓣雌激素缺血性

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诱导脂肪干细胞向血管内皮细胞分化的研究

诱导脂肪干细胞向血管内皮细胞分化的研究

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第七届全国创伤学术会议暨2009海峡两岸创伤医学论坛

作者：雷永红付小兵盛志勇孙同柱周学萍解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室解放军总医院第一附属医院烧伤科

目的探讨诱导脂肪干细胞(adipose derived stem cells,ADSCs)向血管内皮细胞(endothelial cells,ECs)转分化,为ADSCs细胞应用于创伤修复的理论提供实验依据。方法切取大鼠脂肪组织,用酶消化法分离、培养ADSCs(n=8),流式细胞仪检测第3代A... 详细信息

目的探讨诱导脂肪干细胞(adipose derived stem cells,ADSCs)向血管内皮细胞(endothelial cells,ECs)转分化,为ADSCs细胞应用于创伤修复的理论提供实验依据。方法切取大鼠脂肪组织,用酶消化法分离、培养ADSCs(n=8),流式细胞仪检测第3代ADSCs细胞的CD49d和CD106的表达以鉴定ADSCs。实验组用含30%大鼠血管匀浆液的条件培养基诱导大鼠ADSCs细胞,对

关键词： ADSCs 阳性率

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表皮干细胞分化为成纤维细胞参与病理性瘢痕发生的体外研究

表皮干细胞分化为成纤维细胞参与病理性瘢痕发生的体外研究

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第七届全国创伤学术会议暨2009海峡两岸创伤医学论坛

作者：雷永红付小兵盛志勇孙同柱刘波周学萍解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室解放军总医院第一附属医院烧伤科

目的在体外研究表皮干细胞转分化参与病理性瘢痕形成的可能性,为我们提出的干细胞分化导致病理性瘢痕发生的理论提供实验依据。方法用中性蛋白水解酶消化人体包皮标本,采用改良的Ⅳ型胶原选择黏附法分离、培养人源表皮干细胞(hESCs)(n=... 详细信息

目的在体外研究表皮干细胞转分化参与病理性瘢痕形成的可能性,为我们提出的干细胞分化导致病理性瘢痕发生的理论提供实验依据。方法用中性蛋白水解酶消化人体包皮标本,采用改良的Ⅳ型胶原选择黏附法分离、培养人源表皮干细胞(hESCs)(n=8),并检测hESCs表面标志物β1整合

关键词：病理性瘢痕成纤维细胞干细胞分化体外研究

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人皮肤汗腺细胞提取液诱导hMSCs定向分化的研究

人皮肤汗腺细胞提取液诱导hMSCs定向分化的研究

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第七届全国创伤学术会议暨2009海峡两岸创伤医学论坛

作者：雷永红付小兵盛志勇孙同柱周学萍解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室解放军总医院第一附属医院烧伤科

目的探讨用汗腺细胞提取液在体外直接诱导成人骨髓间充质干细胞(hMSCs)转分化为汗腺细胞的技术。方法体外分离和培养hMSCs(n=6),分别加入不同条件培养基进行成脂肪细胞、成骨细胞和成软骨细胞诱导分化,并以免疫组织化学染色(IC)和流式... 详细信息

目的探讨用汗腺细胞提取液在体外直接诱导成人骨髓间充质干细胞(hMSCs)转分化为汗腺细胞的技术。方法体外分离和培养hMSCs(n=6),分别加入不同条件培养基进行成脂肪细胞、成骨细胞和成软骨细胞诱导分化,并以免疫组织化学染色(IC)和流式细胞仪(FACs)检测hMSCs抗原表达。利用Ⅱ型胶原酶消化皮肤标本,分离培养原代人皮肤汗腺细胞,收集原代人汗腺细胞5×107

关键词：汗腺细胞提取液 hMSCs 人皮肤定向分化

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成人表皮干细胞可能具有多潜能性分化特征

成人表皮干细胞可能具有多潜能性分化特征

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第七届全国创伤学术会议暨2009海峡两岸创伤医学论坛

作者：韩为东付小兵解放军总医院基础医学所解放军总医院第一附属医院全军创伤修复重点实验室

目的多种组织特异干细胞在特定条件下具有分化为另外组织细胞类型的能力,这一特点使得利用某种特定干细胞进行组织修复与再生成为可能。然而,干细胞的大量获取与体外扩增存在困难。皮肤是人体最大的器官,富含未分化角质细胞(表皮干细胞)... 详细信息

目的多种组织特异干细胞在特定条件下具有分化为另外组织细胞类型的能力,这一特点使得利用某种特定干细胞进行组织修复与再生成为可能。然而,干细胞的大量获取与体外扩增存在困难。皮肤是人体最大的器官,富含未分化角质细胞(表皮干细胞),既往的移植实验证实该类细胞可参与

关键词：多潜能性人表皮干细胞定向分化

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