检索结果-内蒙古大学图书馆

细胞与分子免疫学杂志 2012年第4期28卷 337-339页

作者：陈殿君李晓松赵晖石秀丽张欢欢范忠义姚咏明杜楠解放军总医院第一附属医院肿瘤二科北京100048 解放军总医院第一附属医院烧伤研究所北京100048

目的:利用RNA干扰(RNAi)技术在体外干扰小鼠B16黑素瘤细胞Foxp3基因表达,探讨RNA干扰用于黑素瘤治疗的可行性。方法:针对Foxp3基因设计小干扰RNA(siR-NA),构建起短发夹状RNA(shRNA)慢病毒表达载体,并转染小鼠B16细胞,在体外诱导RNA干扰... 详细信息

目的:利用RNA干扰(RNAi)技术在体外干扰小鼠B16黑素瘤细胞Foxp3基因表达,探讨RNA干扰用于黑素瘤治疗的可行性。方法:针对Foxp3基因设计小干扰RNA(siR-NA),构建起短发夹状RNA(shRNA)慢病毒表达载体,并转染小鼠B16细胞,在体外诱导RNA干扰。分别采用Westernblot和RT-PCR检测Foxp3基因的表达情况;ELISA检测TGF-β1、TGF-β2和IL-10等细胞因子的变化;将干扰后的小鼠B16细胞与CD4+CD25-T淋巴细胞共培养,CCK8法检测CD4+CD25-T淋巴细胞增殖能力。结果:通过Foxp3 shRNA的转染,可实现对B16细胞Foxp3表达的沉默,可下调肿瘤细胞对CD4+CD25-T淋巴细胞增殖抑制的能力,并且下调TGF-β1、TGF-β2和IL-10等细胞因子的表达,尤其是TGF-β2的表达。结论:RNA干扰可抑制小鼠黑素瘤细胞靶基因Foxp3的表达及细胞增殖,并对CD4+CD25-T淋巴细胞增殖抑制的能力减弱,同时减弱抑制性细胞因子的分泌,为黑素瘤的基因治疗提供了新思路。

关键词：慢病毒黑素瘤 FOXP3 表达

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

严重烧伤家兔不同病理期丙泊酚的药代动力学差异

引用

中华烧伤杂志 2010年第1期26卷 37-40页

作者：胡清刚郝建华柴家科杨红明孙雪峰李平李萌萌刘甦解放军总医院第一附属医院全军烧伤研究所北京100048 解放军总医院第一附属医院麻醉科北京100048

目的了解严重烧伤家兔在休克期与高代谢期丙泊酚的药代动力学特征和差异。方法将20只新西兰大白兔按随机数字表法分为烧伤组和假伤组，每组10只。将烧伤组家兔造成30％TBSA的Ⅲ度烫伤（以下称烧伤），伤后即刻复苏；6h后静脉注射5．1mg... 详细信息

目的了解严重烧伤家兔在休克期与高代谢期丙泊酚的药代动力学特征和差异。方法将20只新西兰大白兔按随机数字表法分为烧伤组和假伤组，每组10只。将烧伤组家兔造成30％TBSA的Ⅲ度烫伤（以下称烧伤），伤后即刻复苏；6h后静脉注射5．1mg／kg丙泊酚，分别于注药后1、3、5、10、15、20、30、45、60、90min于左侧颈外静脉取血1，5mL；1周后重复上述注药及标本采集过程。假伤组家兔除致假伤外，其他处理同烧伤组。用高效液相色谱仪集中检测2组家兔血浆丙泊酚浓度，采用3P97实用药代动力学计算程序处理血浆药物浓度一时间数据，拟合药代动力学模型并求算参数。结果烧伤组家兔药物浓度一时间数据符合二房室模型，假伤组符合三房室模型。休克期，与假伤组家兔中央室分布容积[Vc，（3．1±1．5）L／kg]、曲线下面积[AUC，（25±7）mg·min·L^-1]、消除相半衰期[t1／2β，（113±93）min]、总清除率[CLs，（110±50）mL·kg^-1·min^-1]比较，烧伤组Vc[（8．8±4．2）L／kg]与AUC[（44±10）mg·min·L^-1]增大（t值分别为3．191与3．668，P值均小于0．01），t1／2β[（339±258）min]延长（t=2．932，P〈0．05），CLs[（40±30）mL·kg^-1·min^-1]降低（t=-3．013，P〈0．05）。高代谢期，烧伤组家兔CLs[（180±40）mL·kg^-1·min^-1]显著高于假伤组[（90±30）mL·kg^-1·min^-1，t=-3．013，P〈0．05]。与本组休克期比较，烧伤组家兔高代谢期Vc[（4．1±1．3）L／kg]与AUC[（24±5）mg·min·L^-1]显著减小（t值分别为2．979与3．766，P值均小于0．01），分布相半衰期[t1／2α，休克期为（16．1±13．1）min、高代谢期为（8．3±2．5）min]、t1／2β[（55±19）min]明显缩短（t值分别为9．065与8．795，P值均小于0．01），而CLs则显著增加（t=4．238，P〈0．01）。结论严重烧伤家兔休克期与高代谢期丙泊酚药代动力学差异较大，休克期以Ve、AUC增大，t1／2α、t1／2β延长，CLs降低为特点；高代谢期以CLs显著增加为特点。

关键词：烧伤二异丙酚药代动力学休克期高代谢期

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

西维来司钠对重度烧冲复合伤犬急性肺损伤的影响

引用

中华烧伤杂志 2014年第2期30卷 158-165页

作者：王一贺杨红明胡泉侯玉森罗红敏刘玲英解放军总医院第一附属医院全军烧伤研究所北京100048

目的观察并探讨西维来司钠在重度烧冲复合伤犬急性肺损伤中的作用。方法将32只清洁级健康雄性Beagle犬按随机数字表法分为未致伤组、复合伤对照组、复合伤＋小剂量西维来司钠组、复合伤＋大剂量西维来司钠组，每组8只。除未致伤组不致... 详细信息

目的观察并探讨西维来司钠在重度烧冲复合伤犬急性肺损伤中的作用。方法将32只清洁级健康雄性Beagle犬按随机数字表法分为未致伤组、复合伤对照组、复合伤＋小剂量西维来司钠组、复合伤＋大剂量西维来司钠组，每组8只。除未致伤组不致伤外，其余3组犬均致重度烧冲复合伤，伤后均按Parkland公式输入生理盐水；复合伤＋小剂量西维来司钠组和复合伤＋大剂量西维来司钠组犬同时再分别给予西维来司钠O．5、2．0mg·kg^-1·h^-1治疗，均为24h连续静脉滴注，持续2d。对复合伤犬，伤后6h行CT检查观察肺部损伤情况；伤后2、6、12、24、48h，监测平均动脉压（MAP）、呼吸频率（RR）、血管外肺水（EVLW）、肺血管通透性指数（PVPI）、PaO2、PaCO2，ELISA法检测血清中性粒细胞弹性蛋白酶（NE）及TNF-α、IL-8浓度；伤后48h将犬放血处死取肺组织测算肺湿干质量比。未致伤组犬于以上相同时相点行相关检测。对数据行重复测量方差分析和LSD检验。结果（1）复合伤对照组和复合伤＋小剂量西维来司钠组犬部分扫描层次内有渗出性改变，未致伤组和复合伤＋大剂量西维来司钠组犬各扫描层次均未见明显异常。（2）4组犬各时相点MAP组间两两比较差异均无统计学意义（P值均大于0．05）。未致伤组犬各时相点RR值与另3组比较均差异明显（P值均小于0．05），3组复合伤犬伤后6、12、24、48hEVLW和PVPI与未致伤组比较均差异明显（P值均小于0．05）。复合伤十小剂量西维来司钠组犬伤后12、24、48hRR值、EVLW与复合伤＋大剂量两维来司钠组比较均差异明显（P值均小于0．05）。复合伤＋小剂量西维来司钠组犬伤后24、48hPVPI与复合伤＋大剂量西维来司钠组比较均差异明显（P值均小于0．05）。（3）未致伤组犬各时相点PaO2、PaCO2与另3组比较均差异明显（P值均小于0．05）。复合伤＋小剂量西维来司钠组犬伤后12、24、48hPaO2与复合伤＋大剂量西维来司钠组比较均差异明显（P值均小于O．05）。复合伤＋小剂量西维来司钠组犬伤后24、48hPaCO2与复合伤＋大剂量西维来司钠组比较均差异明显（P值均小于0．05）。（4）未致伤组犬各时相点NE（伤后2h除外）、TNF-α、IL-8与另3组比较均差异明显（P〈0．05或P〈0．01）。伤后2、6、12、24、48h，未致伤组、复合伤对照组、复合伤＋小剂量西维来司钠组、复合伤＋大剂量西维来司钠组犬的NE分别为（69±21）、（83±24）、（80±20）、（75±17）、（72±27）pg／mL，（66±24）、（196±20）、（231±26）、（252±25）、（266±22）pg／mL，（7l±22）、（180±27）、（214±21）、（194±24）、（218±20）pg／mL，（68±22）、（136±24）、（153±22）、（146±26）、（150±28）pg／mL。复合伤＋大剂量西维来司钠组犬伤后6、12、24、48hNE与复合伤对照组、复合伤＋小剂量西维来司钠组比较均差异明显（P值均小于0．05）。复合伤＋小剂量西维来司钠组犬伤后24、48hTNF-α与复合伤对照组、复合伤＋大剂量西维来司钠组比较均差异明显（P值均小于0．05）。复合伤＋小剂量西维来司钠组犬伤后24、48hIL-8与复合伤＋大剂量西维来司钠组比较均差异明屁（P值均小于0．05）。（5）伤后48h，复合伤＋小剂量西维来司钠组和复合伤＋大剂量西维来司钠组犬肺湿干质量比与复合伤对照组比较均差异明显（P值均小于0．05），复合伤＋大剂量西维来司钠组犬与复合伤＋小剂量西维来司钠组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论烧冲复合伤后早期应用西维来司钠（尤其是大剂量）可以改善血气分析指标、减轻肺水肿、降低血清中炎症因子水平，达到保护肺组织的治疗效果。

关键词：烧伤急性肺损伤西维来司钠烧冲复合伤

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

腺病毒介导的人表皮生长因子基因转染对人表皮细胞生物学特性的影响

引用

中华烧伤杂志 2016年第5期32卷 305-311页

作者：尹凯马丽申传安尚玉茹李大伟李龙珠赵东旭程文凤解放军总医院第一附属医院全军烧伤研究所北京100048

目的观察腺病毒介导的人EGF（Ad-hEGF）基因转染人表皮细胞的合适条件及转染对该细胞生物学特性的影响。方法取包皮环切术后弃用的新鲜人体包皮组织，通过酶消化法分离人表皮细胞，传代培养，采用第3代细胞进行以下实验。（1）按随机数... 详细信息

目的观察腺病毒介导的人EGF（Ad-hEGF）基因转染人表皮细胞的合适条件及转染对该细胞生物学特性的影响。方法取包皮环切术后弃用的新鲜人体包皮组织，通过酶消化法分离人表皮细胞，传代培养，采用第3代细胞进行以下实验。（1）按随机数字表法（分组方法下同）将细胞分为未转染组及5、20、50、100、150、200倍转染组，每组3孔。未转染组不转染Ad-hEGF基因，后6组分别按感染复数（MOI）5、20、50、100、150、200转染Ad-hEGF基因。转染24、48、72h，倒置相差显做镜下观察细胞形态，倒置荧光显微镜下观察细胞绿色荧光蛋白表达。（2）另取3个批次细胞，分别同前分组处理，分别于转染24、48、72h，流式细胞仪检测Ad-hEGF基因转染率（样本数为3），ELISA法检测收集的细胞培养上清液中EGF质量浓度（样本数为6），细胞计数试剂盒8（CCK8）及酶标仪检测细胞增殖活性（样本数为6）。（3）另取细胞分为未转染组和转染组，每组6孔。未转染组用未转染细胞的细胞培养上清液孵育，转染组用以最佳MOI（50）转染Ad-hEGF基因细胞的细胞培养上清液孵育，分别于孵育1、3、5d，CCK8及酶标仪检测细胞分泌的EGF生物活性。（4）另取细胞分为未转染组和转染组，每组12孔。未转染组不转染Ad-hEGF基因，转染组以最佳MOI（50）转染Ad-hEGF基因。转染24h，免疫荧光染色法检测细胞角蛋白14（CK14）、CK19表达。（5）另取细胞，同（4）分组（每组6孔）处理，于划痕后0（即刻）、12、24、48h，倒置相差显微镜下观测细胞迁移距离。对数据行析因设计方差分析、重复测量方差分析、LSD检验。结果（1）转染24、48h，各转染组细胞形态与未转染组比较，无明显改变；转染72h，200倍转染组的细胞碎片较未转染组明显增多。转染24、48、72h，未转染组细胞未见绿色荧光蛋白表达，各转染组绿色荧光蛋白阳性细胞数随转染时间延长逐渐增多。（2）各转染组细胞***基因转染率随转染时间延长逐渐增高。转染72h，50～200倍转染组细胞Ad-hEGF基因转染率均大于90％；未转染组及5、20倍转染组细胞Ad-hEGF基因转染率则分别为（0．51±0．20）％、（62．44±6．23）％、（75．00±5．43）％，明显低于50倍转染组的（93．12±2．55）％，P值均小于0．01。随着转染时间的延长，各转染组细胞培养上清液中EGF质量浓度逐渐增高；转染72h，50倍转染组细胞培养上清液中EGF质量浓度明显高于其余各组（P值均小于0．01）。转染24、48h，各组细胞增殖活性相近（P值均大于0．05）；转染72h，200倍转染组细胞增殖活性明显低于其余各组（P值均小于0．05）。（3）孵育1d，2组细胞分泌的EGF生物活性相近（P〉0．05）；孵育3、5d，转染组细胞分泌的EGF生物活性明显高于未转染组（P值均小于0．01）。（4）转染24h，转染组细胞CK14、CK19表达较未转染组增强。（5）划痕后0h，2组细胞划痕宽度基本一致。划痕后12～48h，转染组细胞迁移距离明显长于未转染组（P值均小于0．01）。结论Ad-hEGF基因转染人表皮细胞的合适MOI为50～150，以50为最佳，以此MOI转染既能高效表达目的基因，又可保持细胞良好的增殖、分化和迁移能力。

关键词：表皮生长因子转染细胞增殖细胞运动人表皮细胞生物学特性

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

高迁移率族蛋白B1对人T淋巴细胞免疫功能影响的体外研究

引用

中国危重病急救医学 2008年第1期20卷 7-13页

作者：黄立锋姚咏明孟海东赵晓东董宁于燕盛志勇解放军总医院第一附属医院全军烧伤研究所北京100037

目的观察高迁移率族蛋白B1（HMGB1）对健康人T淋巴细胞增殖的影响，并对其机制进行初步探讨。方法分离健康人外周血单个核细胞（PBMCs），调整细胞浓度后接种于细胞培养板并加入重组人高迁移率族蛋白B1（rhHMGB1）进行刺激。以四甲基偶... 详细信息

目的观察高迁移率族蛋白B1（HMGB1）对健康人T淋巴细胞增殖的影响，并对其机制进行初步探讨。方法分离健康人外周血单个核细胞（PBMCs），调整细胞浓度后接种于细胞培养板并加入重组人高迁移率族蛋白B1（rhHMGB1）进行刺激。以四甲基偶氮唑盐微量Ⅱ酶反应比色法（MTT）检测细胞数量和细胞活性，观察HMGB1对T淋巴细胞增殖活性的影响。采用四色流式细胞术（FCM）分析CD3^＋淋巴细胞CD4表达。细胞中自细胞介素-2（IL-2）、IL-2α受体（IL-2Rα）基因表达水平采用逆转录一聚合酶链反应（RT—PCR）分析。结果①500～1000μg／L rhHMGB1作用48h后T淋巴细胞增殖反应显著抑制，低于这一剂量对其增殖活性影响不显著。②不同rhHMGB刺激时间和作用剂量对CD4^＋T淋巴细胞未造成明显改变，但rhHMGB1能时间-剂量依赖性增加Th2亚群比例，并因此降低Th1／Th2比值，刺激后T淋巴细胞免疫功能出现Th1优势向Th2优势偏移。③经植物血凝素激活后12hT淋巴细胞IL-2和IL-2Ra基因表达达到峰值；rhHMGB1与T淋巴细胞共同培养12h后，10～100μg／L剂量可明显上调IL-2和IL-2Ra基因表达；而较高剂量rhHMGB1（100～1000μg／L）刺激持续48h上述效应衰竭，并表现出相反的变化趋势。结论HMGB1对T淋巴细胞包括增殖、分化和细胞因子分泌等免疫功能具有直接调节效应。剂量蓄积和持续刺激可诱导T淋巴细胞功能亚群从促炎优势向抗炎优势转化。

关键词：高迁移率族蛋白B1 免疫 T淋巴细胞增殖白细胞介素-2

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

额部扩张双蒂轴型皮瓣修复老年患者颅顶部慢性难治性溃疡

引用

中国修复重建外科杂志 2007年第9期21卷 917-920页

作者：吴焱秋柴家科柳春明关雪峰朱志强孙有志戴承旺陈宝驹解放军总医院第一附属医院烧伤整形外科北京100037 太钢集团临汾钢铁有限公司职工医院烧伤科双鸭山矿业集团煤炭总医院烧伤科辽源矿务局总医院烧伤科临沂县人民医院外三科

目的探讨老年患者颅顶部慢性难治性溃疡的治疗方法,及额部扩张双蒂轴型皮瓣的临床应用效果。方法2002年9月~2006年6月,收治5例颅顶部慢性难治性溃疡老年男性患者,年龄55~76岁。外伤1例,感染1例,鳞状细胞癌2例,基底细胞癌1例。病程6~25... 详细信息

目的探讨老年患者颅顶部慢性难治性溃疡的治疗方法,及额部扩张双蒂轴型皮瓣的临床应用效果。方法2002年9月~2006年6月,收治5例颅顶部慢性难治性溃疡老年男性患者,年龄55~76岁。外伤1例,感染1例,鳞状细胞癌2例,基底细胞癌1例。病程6~25个月。曾行1~4次手术。溃疡范围5cm×3cm^10cm×9cm。一期手术于颞浅动脉额支下方和额肌下方设计植入皮肤软组织扩张器;二期手术扩大切除颅顶部慢性溃疡,采用额部扩张双蒂轴型皮瓣,旋转移位修复。创面清创后范围为6.0cm×3.5cm^12.0cm×10.5cm,皮瓣切取范围26cm×10cm^34cm×17cm。2例供区利用多余扩张皮瓣修复,3例植皮修复。结果术后皮瓣均成活,伤口期愈合,供区愈合良好。患者均获随访3~24个月,平均10个月。皮瓣附着良好,溃疡无复发,无上睑外翻及眼裂闭合不全,日常生活无不适。结论采用额部扩张双蒂轴型皮瓣修复老年颅顶部慢性难治性溃疡,临床效果满意,是治疗老年患者颅顶部难治性溃疡一种新的手术方法。

关键词：颅顶部难治性溃疡扩张皮瓣老年

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

肠内输入高渗电解质葡萄糖液对犬35％总体表面积烧伤复苏效果的研究

引用

中华外科杂志 2009年第20期47卷 1581-1584页

作者：胡泉胡森柴家科沈小鹏车晋伟盛志勇解放军总医院第一附属医院烧伤研究所北京100037

目的探讨肠内输入高渗电解质葡萄糖液（HEGS）对犬35％总体表面积（TBSA）烧伤复苏效果的影响。方法Beagle犬18只，随机分为对照组（N组）、高渗液组（H组）和等渗液组（I组），每组6只，采用凝固汽油燃烧法制作35％TBSAⅢ°烧伤模... 详细信息

目的探讨肠内输入高渗电解质葡萄糖液（HEGS）对犬35％总体表面积（TBSA）烧伤复苏效果的影响。方法Beagle犬18只，随机分为对照组（N组）、高渗液组（H组）和等渗液组（I组），每组6只，采用凝固汽油燃烧法制作35％TBSAⅢ°烧伤模型。高渗液组于伤后0．5h通过肠道给予HEGS（1．8％NaCI的5％葡萄糖液），24h补液总量按2ml／（kg·1％TBSA）计算；等渗液组烧伤后0．5h通过肠道补充IEGS（即0．9％NaCl的5％葡萄糖液），24h补液总量按4ml／（kg·1％TBSA）计算；对照组烧伤后不予补液。测定各组犬烧伤前及烧伤后0．5、2．0、4．0、6．0、8．0、24．0h的心排血指数、全心舒张末期容积指数、血容量、血浆渗透浓度、肠黏膜血流量、肠道对复苏液中水分和钠离子的吸收速率，数据进行双因素方差分析。结果烧伤后各组心排血指数、全心舒张末期容积指数、血容量和肠黏膜血流量均明显下降，两补液组于伤后2h逐渐回升，明显高于对照组（P〈0．05），两补液组之间差异无统计学意义（P〉0．05）；高渗液组补液后血浆渗透浓度明显升高，显著高于其他两组（P〈0．05）；烧伤后两补液组肠道对复苏液中的水分和钠离子的吸收速率均逐渐增加，高渗液组肠道对水分吸收速率低于等渗液组（P〈0．05），钠离子吸收速率则高于等渗液组（P〈0．05）。结论35％TBSA烧伤后0．5h通过肠内补充HEGS可以被肠道有效吸收，并在减少1／2补液量的前提下，基本维持有效血容量，达到肠内补充等渗液体复苏相似的血流动力学效果。

关键词：烧伤复苏术盐水高渗肠道

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

脾脏调节性树突细胞对烫伤小鼠炎症反应及预后的影响

引用

中国危重病急救医学 2011年第5期23卷 279-282页

作者：刘庆阳姚咏明解放军总医院第一附属医院烧伤研究所北京100048

目的观察调节性树突细胞（DCregs）对烫伤所致全身炎症反应及动物早期死亡率的影响。方法采用MiniMACS免疫磁性分离系统从100只正常BALB／c小鼠脾脏分离纯化DCregs，以获得其亚群CDllc^low CD45RB^hugh DCs。制备15％总体表面积Ⅲ度烫... 详细信息

目的观察调节性树突细胞（DCregs）对烫伤所致全身炎症反应及动物早期死亡率的影响。方法采用MiniMACS免疫磁性分离系统从100只正常BALB／c小鼠脾脏分离纯化DCregs，以获得其亚群CDllc^low CD45RB^hugh DCs。制备15％总体表面积Ⅲ度烫伤小鼠模型。取20只小鼠，烫伤即刻腹腔注射不同剂量DCregs（1×10^5／ml、5×10^5／ml、10×10^5／ml），观察动物48h死亡率，以确定最佳DCregs干预剂量。另取70只小鼠，按随机数字表法分为正常对照组（7只）、假烫伤组（21只）、烫伤组（21只）和DCregs治疗组（21只）。烫伤组伤后即刻腹腔注射林格液1ml抗休克治疗；DCregs治疗组则给予含10×10^5／ml CDllc^low CD45RB^hugh DCs的林格液1ml治疗。分别于烫伤后12、24、48h无菌取血，采用流式细胞术检测树突细胞的表型表达及血浆炎症因子水平。结果10×10^5／mlDCregs治疗组小鼠死亡率较烫伤组及1×10^5／ml、5×10^5／mlDCregs治疗组均显著下降（0％比80％、80％、60％，均P〈0．01）。10×10^5／mlDCregs治疗组小鼠伤后12、24、48h血浆自细胞介素-6（IL-6）水平（ng／L：98．76±10．02、57．83±6．83、13．29±1．07）显著低于烫伤组（156．32±12．85、84．50±9．29、23．04±2．53，均P〈0．01），血浆巨噬细胞趋化蛋白-1（MCP-1）水平（ng／L：102．79±9．88、42．56±5．90、12．96±1．34）显著低于烫伤组（168．23±23．85、83．39±8．41、42.92±4．96，均P〈0．01）．血浆肿瘤坏死因子-α（TNFα）水平（ng／L：16．84±1．92、16．62±1．28、10．26±1．10）亦显著低于烫伤组（24．16±4．93、24．25±4．01、17．91±1．82，均P％0．01）。结论严重烫伤后腹腔注射脾脏DCregs可能通过有效控制促炎因子的产生而明显降低动物早期死亡率。

关键词：树突细胞调节性烫伤脓毒症炎症反应细胞因子

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

外源性结缔组织生长因子在人毛囊混合细胞重建组织工程毛囊中的作用

引用

中华医学杂志 2013年第14期93卷 1063-1066页

作者：张培培柴家科王继萍段红杰马丽朱桂英解放军总医院第一附属医院烧伤整形外科北京100048

目的探讨外源性结缔组织生长因子（CTGF）在人毛囊混合细胞重建组织工程毛囊中的作用。方法采用细胞培养技术体外培养人毛囊外根鞘细胞及人毛乳头细胞，人毛囊外根鞘细胞与人毛乳头细胞以5：1的比例制备细胞混悬液。流式细胞学检测人... 详细信息

目的探讨外源性结缔组织生长因子（CTGF）在人毛囊混合细胞重建组织工程毛囊中的作用。方法采用细胞培养技术体外培养人毛囊外根鞘细胞及人毛乳头细胞，人毛囊外根鞘细胞与人毛乳头细胞以5：1的比例制备细胞混悬液。流式细胞学检测人毛囊外根鞘细胞中CD200阳性细胞含量。取8只裸鼠用随机数字表法均分为A、B组，制作裸鼠背部创面。A组移植添加20μg／LCTGF的细胞混悬液，B组移植单纯的细胞混悬液。于8周后进行组织学检查，观察毛囊形成情况。采用普通PCR检测移植物组织中人特异性DNA及鼠DNA表达情况。结果流式细胞学检测结果表明培养的人毛囊外根鞘细胞中CD200阳性细胞占细胞总量19．65％。组织学检查显示A组毛囊样结构形成数量（268±96）显著多于B组（62±20），差异有统计学意义（P〈0．05）。PCR结果表明移植物中含有人组织成分。结论CTGF可促进人毛囊外根鞘细胞与人毛乳头细胞相互作用，诱导毛囊样结构形成。

关键词：结缔组织生长因子毛囊小鼠,裸

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

犬脐静脉血管内皮细胞的分离培养与鉴定

引用

中国修复重建外科杂志 2013年第4期27卷 460-463页

作者：胡泉柴家科刘玲英侯玉森王一贺李百玲杨红明解放军总医院第一附属医院烧伤研究所北京100048

目的建立一种简便、高效的犬脐静脉血管内皮细胞分离方法,并进行培养和鉴定。方法无菌条件下取12只新生比格犬脐带共12根,脐带长(13.0±1.5)cm。PBS液冲洗后,各取4根脐带注入1%Ⅰ型胶原酶分别消化脐静脉5、7、10 min后,收集细胞并... 详细信息

目的建立一种简便、高效的犬脐静脉血管内皮细胞分离方法,并进行培养和鉴定。方法无菌条件下取12只新生比格犬脐带共12根,脐带长(13.0±1.5)cm。PBS液冲洗后,各取4根脐带注入1%Ⅰ型胶原酶分别消化脐静脉5、7、10 min后,收集细胞并行锥虫蓝计数;倒置相差显微镜下观察细胞形态,待细胞爬满培养瓶后以1∶2比例传代。取Ⅰ型胶原酶消化7 min获得的第3代细胞,通过免疫荧光染色和流式细胞仪检测细胞中血管假性血友病因子(vonWillebrand factor,vWF)和血小板-内皮细胞黏附分子CD31表达,进行细胞鉴定;MTT检测细胞增殖。结果消化5、10 min后未收集到或偶尔收集到血管内皮细胞;消化7 min可见大量血管内皮细胞,培养24 h后细胞呈多角形,随培养时间延长细胞逐渐呈"铺路石"样生长,细胞核较大,多为单核,少数细胞为双核,传代后细胞形态无明显变化。荧光倒置显微镜下观察,培养细胞vWF和CD31表达阳性;流式细胞仪检测示培养细胞vWF阳性表达率为99.0%±0.7%,CD31阳性表达率为98.0%±1.2%,提示培养细胞为血管内皮细胞。MTT检测示,随培养时间延长,血管内皮细胞增殖速度明显提高。结论采用酶消化法从犬脐静脉中分离培养血管内皮细胞操作简便,且细胞数量多、纯度高。

关键词：血管内皮细胞脐静脉细胞培养细胞鉴定犬

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：