目的:探讨雷帕霉素(Rapa)保护脓毒症大鼠下丘脑的作用机制。方法:将60只健康雄性SD大鼠随机分为四组:假手术组(Sham)、雷帕霉素组(Rapa)、脓毒症组(Sepsis)以及脓毒症+雷帕霉素预处理组(Sepsis+Rapa),每组含15只大鼠。经4天腹腔雷帕霉素注射后,采用盲肠结扎穿孔(CLP)的方法建立脓毒症模型。随后,绘制大鼠的生存曲线,通过HE染色和尼氏染色技术观察下丘脑的组织病理学变化。利用ELISA技术测定下丘脑组织中活性氧(ROS)和丙二醛(MDA)的含量;原位末端转移酶标记法观察大鼠下丘脑组织凋亡;Western blot方法测定大鼠下丘脑组织中p-mTOR、mTOR、P62和LC3的表达,并计算LC3II/LC3I比值;免疫荧光检测下丘脑中LC3与Tom20的共定位。结果:与脓毒症组相比,雷帕霉素提高脓毒症大鼠的生存率(P=0.0022),减轻脓毒症大鼠下丘脑病理损伤和细胞凋亡(11.75±4.77 vs 30.63±6.65),减少下丘脑组织的ROS(163.8±21.28 vs 283.8±55.98)和MDA(63.35±11.62 vs 91.64±8.166)的水平。Western-blot和免疫荧光结果显示,雷帕霉素下调脓毒症大鼠下丘脑组织中mTOR和p62的水平,增加LC3II/LC3I比值,增强LC3和Tom20在下丘脑组织中的相互结。结论:雷帕霉素通过抑制mTOR信号通路,上调线粒体自噬,减轻脓毒症对下丘脑的损伤,有效保护下丘脑。
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