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第10届全国中西医结合肾脏病学术会议

作者：马林林殷敏魏日胞谢院生解汝娟陈香美解放军总医院全军肾脏病研究所暨重点实验室哈尔滨医科大学附属第一临床医学院肾内科解放军总医院全军肾脏病研究所暨重点实验室哈尔滨医科大学附属第一临床医学院肾内科

慢性肾衰竭(CRF)是一类严重威胁人类健康的疾病。肾脏血管内皮损伤是CRF肾脏病变不断进展的机制之一。促进损伤内皮的修复会获得独立于控制血压和蛋白尿之外的稳定肾功能和延缓进展的作用。部分肾切除(STNx)模型是目前被广泛采用的慢性... 详细信息

慢性肾衰竭(CRF)是一类严重威胁人类健康的疾病。肾脏血管内皮损伤是CRF肾脏病变不断进展的机制之一。促进损伤内皮的修复会获得独立于控制血压和蛋白尿之外的稳定肾功能和延缓进展的作用。部分肾切除(STNx)模型是目前被广泛采用的慢性进展性肾病模型。本研究用大鼠5/6肾切除动物模型，观察舒洛地特对大鼠残余肾脏功能、肾脏形态学及血管内皮的影响，以评价其对CRF肾脏及肾脏血管内皮的保护作用。

关键词：慢性肾衰竭肾功能保护舒洛地特实验药理

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伴恶性高血压IgA肾病的临床病理特征及其与肾血管病变的相关性

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中华肾脏病杂志 2008年第6期24卷 392-397页

作者：陈仆陈香美谢院生蔡广研孙雪峰师锁柱吴杰尹忠解放军总医院肾科全军肾脏病研究所暨重点实验室北京100835

目的分析伴恶性高血压IgA肾病（IgAN—MHT）的临床病理特征并探讨其与肾血管病变的相关性。方法从我科1997年4月至2007年5月间肾活检确诊的2000例原发性IgA肾病中筛选出29例***患者，收集其临床、病理及预后资料。半定量分析肾小球、肾... 详细信息

目的分析伴恶性高血压IgA肾病（IgAN—MHT）的临床病理特征并探讨其与肾血管病变的相关性。方法从我科1997年4月至2007年5月间肾活检确诊的2000例原发性IgA肾病中筛选出29例***患者，收集其临床、病理及预后资料。半定量分析肾小球、肾小管间质及血管（肾内微动脉、小动脉）的病理改变，包括436条入球动脉、124条小叶间动脉及5条弓形动脉。分析血管病变与肾脏病理改变、临床指标及预后的相关性。终点事件为基线Scr水平增加1倍或终末期肾病。结果原发性IgAN中MHT发生率约为1．5％。***患者的临床表现主要为肾功能不全（100％）、高尿酸血症（62．7％）、高三酰甘油血症（51．7％），尿蛋白量（24h）平均为2．8g。常见肾脏病理改变为中度系膜细胞增殖、重度肾小球硬化、重度间质炎细胞浸润、重度肾小管萎缩及间质纤维化。IgAN—MHT患者的肾内小动脉（弓形动脉和小叶间动脉）及微动脉（入球动脉）均可受累。常见肾内血管病变特点为动脉闭塞、动脉中膜增厚、增生性动脉内膜炎（洋葱皮样改变、黏液样变性）、血管壁透明样变性，其中以肾内动脉闭塞为主（86．2％）。微动脉病变程度与年龄、总蛋白水平呈负相关；血管闭塞程度与尿酸水平呈正相关。平均随访21．1个月（1～84个月），14例患者达到终点。肾内微动脉病变是IgAN—MHT患者预后不良的主要危险因素（RR=10．21，95％CI=1．16～89．67）。结论IgAN—MHT的主要临床特点是肾功能不全；主要病理特征是以动脉闭塞为主的微动脉病变。微动脉病变是IgAN—MHT患者预后不良的主要危险因素。

关键词：肾小球肾炎 IgA 高血压恶性病理学临床动脉预后

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钠-氢交换蛋白1小干扰RNA对抗霉素A诱导人肾小管上皮细胞缺血再灌注损伤的保护机制

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中华肾脏病杂志 2008年第8期24卷 560-565页

作者：洪权吴镝冯哲张雪光汪杨吕杨陈香美解放军总医院肾脏病研究所暨全军重点实验室北京100853

目的通过构建钠-氢交换蛋白1（NHE-1）小干扰RNA（siRNA）抑制肾小管上皮细胞NHE-1的表达，探讨其对细胞缺血再灌注损伤的保护作用机制。方法根据人NHE-1全长基因序列设计并合成NHE-1-siRNA，转染人肾小管上皮细胞系（HKC），以无关siRN... 详细信息

目的通过构建钠-氢交换蛋白1（NHE-1）小干扰RNA（siRNA）抑制肾小管上皮细胞NHE-1的表达，探讨其对细胞缺血再灌注损伤的保护作用机制。方法根据人NHE-1全长基因序列设计并合成NHE-1-siRNA，转染人肾小管上皮细胞系（HKC），以无关siRNA转染组作为对照。利用10μmol／L抗霉素A诱导细胞来模拟缺血缺氧环境。用RT—PCR、Western印迹法检测NHE-1的表达。用BCECF／AM、Fluo-3／AM和SBFI-AM标记HKC，通过激光共聚焦显微镜分别检测其细胞内pHi、Ca^2＋和Na^＋浓度的变化。用Hoechst 33342染色技术及AnnexinV／PI染色结合流式细胞仪技术检测细胞凋亡情况。利用荧光探针JC-1检测细胞线粒体膜电位的变化。结果特异性NHE-1-siRNA能有效抑制HKC的NHE-1表达，与无关siRNA转染组相比，NHE-1-siRNA转染组NHE-1 mRNA和蛋白表达水平明显下调（均P〈0．05）。抗霉素A刺激后，2组细胞NHE-1 mRNA及蛋白表达水平显著上调，而NHE-1-siRNA转染组低于无关siRNA转染组；同时NHE-1-siRNA转染组细胞凋亡率（8．9％±2．9％）明显低于抗霉素A处理组（18．8％±3．2％）和抗霉素A＋无关siRNA转染组（17．4％±3．6％）（均P〈0．05）；NHE-1-siRNA转染组线粒体膜电位明显增高；与无关siRNA转染组相比较，NHE-1-siRNA转染组经抗霉素A处理后，细胞内钠离子、氢离子及钙离子增高的幅度较低（P〈0．05）。结论NHE-1-siRNA可抑制肾小管上皮细胞内NHE-1的表达，对抗霉素A诱导肾小管上皮细胞的缺血再灌性损伤有一定的保护作用。其机制可能通过抑制NHE-1表达，延缓细胞内Na^＋的积聚，减轻细胞内钙离子的超载，抑制损伤细胞的线粒体膜电位下降，减少细胞的凋亡。

关键词：钠氢交换子1 缺血再灌注损伤肾小管上皮细胞细胞凋亡

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生物人工肾小管上皮种子细胞的建立

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中华肾脏病杂志 2008年第1期24卷 46-50页

作者：黄大伟傅博陈香美孙雪峰谢院生蔡广研严泉剑解放军总医院肾脏病研究所暨全军肾脏病重点实验室北京100853

目的利用人Nanog基因转染生物人工肾的种子细胞（肾近曲小管上皮细胞HKC），提高其增殖能力，在较短时间内获得大量种子细胞，为克服肾脏组织工程种子细胞来源的匮乏及生物人工肾的快速构建提供新途径。方法制备含有人Nanog基因的复制... 详细信息

目的利用人Nanog基因转染生物人工肾的种子细胞（肾近曲小管上皮细胞HKC），提高其增殖能力，在较短时间内获得大量种子细胞，为克服肾脏组织工程种子细胞来源的匮乏及生物人工肾的快速构建提供新途径。方法制备含有人Nanog基因的复制缺陷型重组腺相关病毒血清2型病毒颗粒rAAV2-hNanog，用rAAV2-hNanog转染肾小管上皮细胞，然后采用RT-PCR检测hNanog基因在转染的肾小管上皮细胞中的表达，再用MTT、免疫荧光及激光共聚焦技术检测hNanog基因对肾小管细胞HKC生长的影响。结果rAAV2-hNanog转染肾小管上皮细胞后，RT-PCR检测表明hNanog基因能在肾小管上皮细胞中稳定表达；同时，小管上皮细胞在转染后的增殖能力也显著增强（P〈0．05）。光镜下观察发现，转染的小管上皮细胞的形态无明显改变。结论利用hNanog基因提高生物人工肾小管种子细胞的增殖能力，可为生物人工肾的快速构建及应用提供一种新的方法。

关键词： hNanog基因重组腺相关病毒载体血清2型种子细胞生物人工肾转染

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高糖对人肾小管上皮细胞氧化应激及蛋白质损伤效应的实验研究

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解放军医学杂志 2008年第11期33卷 1318-1321页

作者：汪杨白雪源魏日胞陈香美冯哲洪权傅博解放军总医院全军肾脏病研究所暨重点实验室北京100853

目的探讨高糖对人肾小管上皮细胞(HKC)氧化应激及蛋白质氧化损伤的作用。方法将体外培养的HKC分为3组:对照组、高糖短期处理组、高糖长期处理组。对照组葡萄糖浓度为5.5mmol/L,高糖处理组葡萄糖浓度为30mmol/L。高糖短期处理组分为6个... 详细信息

目的探讨高糖对人肾小管上皮细胞(HKC)氧化应激及蛋白质氧化损伤的作用。方法将体外培养的HKC分为3组:对照组、高糖短期处理组、高糖长期处理组。对照组葡萄糖浓度为5.5mmol/L,高糖处理组葡萄糖浓度为30mmol/L。高糖短期处理组分为6个时间点,即30min及1、6、12、24、48h高糖刺激组;高糖长期处理组为高糖连续刺激2个月。用活性氧(ROS)捕获剂氯甲基二氯二氢荧光素二乙酯(CM-H2DCFDA)孵育各组细胞,通过流式细胞技术和激光共聚焦显微镜检测高糖处理后不同时间点HKC中ROS的荧光强度以反映细胞内ROS的水平,用共聚焦显微镜检测荧光探针JC-1的荧光强度来表示线粒体膜电位,用2,4-二硝基苯肼(DNPH)比色法测定细胞内蛋白质羰基含量的变化。结果流式细胞技术和激光共聚焦显微镜检测显示,经高糖刺激后,HKC内ROS含量在1h时达高峰,随后逐渐降低;线粒体膜电位在高糖刺激后短时间内(1h)有增高,其后下降;DNPH比色法显示,短时高糖刺激对细胞中蛋白质羰基含量影响不明显(P>0.05),高糖刺激2个月时蛋白质羰基含量与短时刺激相比明显升高(P<0.05)。结论高糖处理可使HKC细胞氧化应激增强,从而造成生物大分子蛋白质的损伤。

关键词：葡萄糖肾小管上皮细胞活性氧膜电位线粒体

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地震伤挤压综合征导致急性肾衰竭救治体会和思考

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中国实用内科杂志 2008年第11期28卷 1006-1008页

作者：孙雪峰解放军总医院全军肾脏病研究所暨重点实验室北京100853

挤压综合征是地震相关损伤中除直接外伤导致死亡以外的第2位死亡原因.1995年日本阪神地震挤压综合征发病率为13.6%,病死率为13.4%;1999年土耳其马尔马拉地震挤压综合征病死率为15.2%.

关键词：急性肾衰竭挤压综合征地震

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低分子肝素和尿激酶对老年大鼠肾小球内皮细胞损伤保护作用的比较

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中国老年学杂志 2008年第3期28卷 212-214页

作者：林淑芃孙雪峰陈香美师锁柱洪权吕杨解放军总医院全军肾脏病研究所暨重点实验室北京100853

目的探讨炎症状态下增龄对肾小球内皮损伤的影响,比较低分子肝素和尿激酶对损伤的保护作用。方法3月龄及27月龄雌性Wistar大鼠各40只,随机分为正常对照组(NC组)、脂多糖(LPS)组(L组)、LPS+氨甲环酸组(LT组)、LPS+氨甲环酸+低分子量肝素... 详细信息

目的探讨炎症状态下增龄对肾小球内皮损伤的影响,比较低分子肝素和尿激酶对损伤的保护作用。方法3月龄及27月龄雌性Wistar大鼠各40只,随机分为正常对照组(NC组)、脂多糖(LPS)组(L组)、LPS+氨甲环酸组(LT组)、LPS+氨甲环酸+低分子量肝素组(LTH组)及LPS+氨甲环酸+尿激酶组(LTU组)。采用直接免疫荧光检测肾小球纤维蛋白沉积,Western印迹法检测血管内皮血栓调节蛋白(TM),纤溶酶原激活物抑制物1(PAI-1)蛋白质表达。结果(1)LPS刺激后纤维蛋白沉积增多(P<0.05),TM几乎无表达(P<0.01),PAI-1表达明显上调(P<0.05);(2)加用氨甲环酸后,PAI-1表达进一步上调(P<0.05);(3)应用低分子肝素和尿激酶后纤维蛋白沉积明显减轻(P<0.05),PAI-1表达与LT组比较明显下调(P<0.05),TM表达增多(P<0.05),两组之间无统计学差异。(4)老年大鼠各组肾小球纤维蛋白沉积均比相同干预组的青年大鼠明显,PAI-1的表达均较青年大鼠相同干预组显著增多,TM表达则显著减少,差别均有统计学意义(P<0.05)。结论增龄可加重LPS诱导的肾小球内皮损伤;低分子肝素与尿激酶均能有效保护老年大鼠肾小球血管内皮损伤,两者无明显差别,但增龄可减弱低分子肝素和尿激酶对血管内皮的保护作用。

关键词：衰老肾小球内皮细胞肝素尿激酶

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血清低半乳糖化IgA1测定对鉴别IgA肾病的临床价值

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中华肾脏病杂志 2008年第6期24卷 373-376页

作者：邱强列才华曹翠明谢院生陈香美解放军总医院肾内科全军肾脏病研究所暨重点实验室北京100853

目的确定血清低半乳糖化IgA1对鉴别诊断IgA肾病的临床价值。方法以原发性肾小球疾病患者91例为研究对象，接受肾活检并留取血清；以健康体检者20例血清作为对照。血清标本先用装有耦联蚕豆凝集素的微球进行微量离心柱法分离并洗脱，获... 详细信息

目的确定血清低半乳糖化IgA1对鉴别诊断IgA肾病的临床价值。方法以原发性肾小球疾病患者91例为研究对象，接受肾活检并留取血清；以健康体检者20例血清作为对照。血清标本先用装有耦联蚕豆凝集素的微球进行微量离心柱法分离并洗脱，获得低半乳糖化IgA1。再以凝集素HAA（Helix aspersa）用ELISA法定量检测异常糖基化IgA1（HAA—IgA1）。分析血清低半乳糖IgA1升高在鉴别诊断IgA肾病方面的临床价值。结果48例IgA肾病患者HAA-IgA1水平[（83．7±41．0）U]高于健康对照组[（52．6±22．9）U]及43例其他原发性肾小球疾病患者组[（49．2±27．3）U]（均P〈0．01）。而该43例中，非IgA系膜增殖性肾炎患者22例（51％）的HAA—IgA1水平[（47．6±21．5）U]亦显著低于IgA肾病患者。以肾穿刺病理诊断为金标准，所绘制ROC曲线面积为0．797，面积的标准误为0．047（P〈0．01）；鉴别诊断IgA肾病的灵敏度为72．9％，特异度为72．1％，准确度为72．5％。结论应用微量离心柱法联合ELISA法检测IgA肾病患者血清低半乳糖IgAl对于鉴别诊断IgA肾病具有一定临床价值。

关键词：肾小球肾炎 IgA 糖链异常IgA1 微量离心柱法

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纤溶酶原激活物及其抑制剂-1表达与IgA肾病毛细血管密度相关关系的研究

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中国实用内科杂志 2008年第5期28卷 343-346页

作者：邱强孙雪峰陈香美洪权解放军总医院全军肾脏病研究所暨肾病重点实验室北京100853

目的应用激光微切割和定量PCR技术检测IgA肾病纤溶酶原激活物(PA)和纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)的表达及其在IgA肾病毛细血管病变中的作用。方法对2003—2004年全军肾脏病研究所收治的24例IgA肾病患者采用激光微切割方法分离肾组织切... 详细信息

目的应用激光微切割和定量PCR技术检测IgA肾病纤溶酶原激活物(PA)和纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)的表达及其在IgA肾病毛细血管病变中的作用。方法对2003—2004年全军肾脏病研究所收治的24例IgA肾病患者采用激光微切割方法分离肾组织切片(8μm)中的肾小球(20个/例)和肾小管及其周围间质(200个/例),提取RNA反转录后,进行TaqMan实时定量PCR检测肾小球及肾小管间质内PA及PAI-1的mRNA表达。同时,对肾组织切片进行免疫组织化学染色,采用计算机图像分析系统定量分析毛细血管密度。结果随着病变的加重,IgA肾病肾小球毛细血管袢密度、肾小管周围毛细血管密度均随之减小;IgA肾病患者的肾小球毛细血管袢密度及肾小管周围毛细血管密度均与血清肌酐成负相关,R2分别为0.6946和0.6271(P均<0.05)。肾小球tPA mRNA/PAI-1 mRNA比值与肾小球毛细血管袢密度呈正相关(R2=0.7094,P<0.01);肾小管间质uPA mRNA/PAI-1 mRNA比值与肾小管周围毛细血管密度呈正相关(R2=0.6668,P<0.01)。结论肾小球和肾间质毛细血管密度的下降可能与IgA肾病的进展有关。肾小球局部tPA与PAI-1 mRNA表达失衡及肾小管间质中uPA与PAI-1 mRNA表达失衡可能是导致肾小球和肾小管周围毛细血管密度降低的原因。

关键词： IgA肾病毛细血管病变纤溶酶原激活物纤溶酶原激活物抑制剂-1

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以IgA沿肾小球毛细血管襻沉积为主的急进性肾小球肾炎

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军医进修学院学报 2008年第1期29卷 9-11页

作者：蔡广研陈仆吴镝师锁柱尹忠张雪光魏日胞陈香美解放军总医院全军肾脏病研究所暨重点实验室北京100853

目的:明确以IgA沿肾小球毛细血管襻沉积为主的急进性肾小球肾炎的临床与病理特点。方法:分析解放军总医院全军肾脏病研究所收治的1例以IgA沿肾小球毛细血管襻沉积为主的急进性肾小球肾炎病例,分析其临床特点、病理与电镜特征,以及对强... 详细信息

目的:明确以IgA沿肾小球毛细血管襻沉积为主的急进性肾小球肾炎的临床与病理特点。方法:分析解放军总医院全军肾脏病研究所收治的1例以IgA沿肾小球毛细血管襻沉积为主的急进性肾小球肾炎病例,分析其临床特点、病理与电镜特征,以及对强化免疫抑制治疗的反应。结果:该病例临床表现为急进性肾炎综合征,肾功能恶化发展迅速。但无肺出血及全身性血管炎症状。血清自身抗体系列、抗GBM抗体与ANCA均为阴性。病理光镜示肾小球环绕型新月体形成,肾小血管无炎症改变。冰冻切片与石蜡微波修复直接免疫荧光示IgA沿肾小球毛细血管襻细颗粒状沉积,间接免疫荧光法检测血清IgA型抗GBM为阴性;电镜示节段性上皮下、基底膜内及系膜区电子致密物沉积。对强化激素冲击与免疫抑制剂治疗效果欠佳。结论:本病例为特殊类型的急进性肾小球肾炎,根据其临床特点、血清学检测、免疫荧光及电镜检查结果,无法归于目前急进性肾炎的分型,对其临床特点应予重视。

关键词：肾小球肾炎新月体肾炎免疫球蛋白A

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