检索结果-内蒙古大学图书馆

白细胞介素-6／信号转导及转录激活因子-3通路的活化在大鼠胆管上皮细胞增殖中的意义

中华肝脏病杂志 2009年第5期17卷 374-377页

作者：陈莉萍钱叶勇李州利柏宏伟蔡明石炳毅解放军总医院第二附属医院器官移植中心ICU 北京100091

目的探讨脂多糖（LPS）是否通过白细胞介素-6（IL-6）／信号转导及转录激活因子（STAT3）通路，促进大鼠胆管上皮细胞（BEC）增殖。方法大鼠随机分为3组，LPS组：尾静脉注射LPS2．5mg／kg；抗白细胞介素-6（抗IL-6）组：注射LPS后1h，... 详细信息

目的探讨脂多糖（LPS）是否通过白细胞介素-6（IL-6）／信号转导及转录激活因子（STAT3）通路，促进大鼠胆管上皮细胞（BEC）增殖。方法大鼠随机分为3组，LPS组：尾静脉注射LPS2．5mg／kg；抗白细胞介素-6（抗IL-6）组：注射LPS后1h，静脉注射抗IL-6单克隆抗体0．5mg／kg及对照组。注射LPS后6、12、24、48、72h，采用动态比浊法鲎试验测定血浆LPS浓度；酶联免疫吸附法或实时荧光定量RT—PCR法测定肝组织匀浆和BEC中IL-6的表达水平；Westernblot检测BEC内STAT3的活化水平；免疫组织化学法检测各组BEC增殖隋况。多组均数间的比较采用单因素方差分析。结果血浆LPS水平在注射后6h，LPS组为（0．318±0．015）EU／ml，对照组为（0．011±0．002）EU／ml，F=523．7，P〈0．01，差异有统计学意义。此后随观察时间的推移逐渐降低，LPS组48h含量接近对照组水平。肝脏匀浆及BEC中IL-6表达在注射后6h，分别为（358．5±22．1）ng／g和（0．62±0．04）ng／g，与对照组相比明显上调。BEC内磷酸化-STAT3蛋白表达为0．72±0．07，细胞增殖率为4．8％±0．5％，亦明显高于对照组水平；抗IL-6组，上述效应明显受抑制。结论LPS通过激活BEC内IL-6／STAT3信号通路，从而促进BEC增殖。

关键词：大鼠脂多糖类胆管上皮细胞白细胞介素6 信号传导

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IL-6／STAT3通路在冷缺血-再灌注损伤后胆管上皮细胞再生中的意义

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中华外科杂志 2009年第11期47卷 863-867页

作者：陈莉萍钱叶勇蔡明李州利柏宏伟石炳毅解放军总医院第二附属医院器官移植中心ICU 北京100091

目的探讨白介素6／信号转导及转录激活因子3（IL-6／STAT3）通路在冷缺血-再灌注损伤诱导的胆管上皮细胞（BEC）再生过程中的意义。方法将大鼠随机分为4组：对照组、CP1h组、CP12h组（供肝分别冷保存1、12h后行原位肝移植术）和anti—I... 详细信息

目的探讨白介素6／信号转导及转录激活因子3（IL-6／STAT3）通路在冷缺血-再灌注损伤诱导的胆管上皮细胞（BEC）再生过程中的意义。方法将大鼠随机分为4组：对照组、CP1h组、CP12h组（供肝分别冷保存1、12h后行原位肝移植术）和anti—IL-6组（CP12h组术前1h给予抗IL-6中和抗体0．5mg／kg，术后每日给予相同剂量直至观察结束）。术后1、3、7、14d，分别采用ELISA法、免疫组织化学法测定肝组织IL-6浓度及BEC再生情况；实时荧光定量PCR法、Westernblot法检测各组BEC内IL-6mRNA以及磷酸化STAT3（p-STAT3）、细胞周期蛋白（cyclin）D1表达水平，测定血清碱性磷酸酶（ALP）、谷氨酰转肽酶（GGT）浓度，并进行肝脏组织学检查。结果与对照组相比，CP1h组术后IL-6、p-STAT3及cyclinD1表达水平略增加，血清GGT、ALP仅有轻度、短暂的升高，BEC损伤及再生均不明显。CP12h组术后BEC损伤严重，血清GGT、ALP明显升高，至术后14d恢复正常，肝组织及BEC内IL-6含量增加、BEC内p-STAT3和cyclinD1蛋白表达上调，BEC再生明显。经anti—IL-6中和抗体处理后，CP12h组IL-6以及p-STAT3和cyclinD1表达降低，BEC再生明显抑制，术后14d仍可见细胞损伤及ALP、GGT的升高。结论IL-6／STAT3信号转导通路可能参与缺血-再灌注损伤后胆管上皮细胞的再生过程，对肝移植术后的胆道功能恢复有利。

关键词：再灌注损伤上皮细胞再生

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负向调节树突状细胞对心脏移植大鼠调节性T细胞的影响

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细胞与分子免疫学杂志 2010年第1期26卷 13-17页

作者：郑德华石炳毅邹一平蔡明钱叶勇洪宝发窦立萍黎力解放军总医院第二附属医院全军器官移植中心北京100091

目的:探讨受者树突状细胞(DC)与体外光化学法(PUVA)处理的供者脾淋巴细胞共培养,对心脏移植受者CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)及移植心存活时间的影响。方法:以DA大鼠为供者,Lewis大鼠为受者,SD大鼠为无关供者,建立大鼠腹部异位心脏移植... 详细信息

目的:探讨受者树突状细胞(DC)与体外光化学法(PUVA)处理的供者脾淋巴细胞共培养,对心脏移植受者CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)及移植心存活时间的影响。方法:以DA大鼠为供者,Lewis大鼠为受者,SD大鼠为无关供者,建立大鼠腹部异位心脏移植模型。分离正常的供者脾淋巴细胞(SP),制备经PUVA处理的供者脾淋巴细胞(PU-VA-SP)。在体外将DA大鼠PUVA-SP或SP与受者骨髓来源的DC共同培养,收集经上述处理后受者DC,流式细胞术(FCM)检测其表面分子CD80、CD86以及OX6的表达状况。根据受者术前静脉输注的成分将实验动物随机分为3组:①Control组:单纯输注PBS,n=7;②SPDC组:输注加载供者SP的受者大鼠DC,n=8;③PUVA-SPDC组:输注加载PUVA处理的供者SP的受者大鼠DC,n=8。移植术前7d,经外周静脉给受者输注与PUVA-SP共培养后的DC(PUVA-SPDC组)、正常受者DC(DC组)或只输注PBS(Control组),移植术后观察受者移植物的存活时间,检测受者外周血中CD4+CD25+T细胞、CD4+CD25highT细胞的比例及其Foxp3表达状况。过继转移PUVA-SPDC组受者大鼠的T细胞后,检测正常LEW大鼠对供者抗原或无关抗原的DTH反应。结果:受者DC与供者未经处理的脾淋巴细胞(SP)混合培养后,其表面分子CD80、CD86以及OX6的表达分别为16.6%±0.72%、36.5%±0.87%及65.6%±1.45%,明显高于未处理DC组(3.53%±0.27%、13.0%±0.57%及27.7%±1.23%)(P<0.01);而受者DC与PUVA处理过的供者脾淋巴细胞(PUVA-SP)混合培养后,其表面分子的表达仍保持较低的水平,CD80、CD86以及OX6的表达分别为3.9%±0.12%、13.4%±0.59%及28.0%±1.73%,与未经任何处理的受者DC无统计学差异(P>0.05)。移植术后,PUVA-SPDC组受者,外周血CD4+CD25+T、CD4+CD25highT细胞占CD4+T的比例分别是18.97%和3.81%,明显高于输注DC组(4.40%和0.81%)和Control组(3.11%和0.09%)的大鼠(P<0.01)。PUVA-SPDC组大鼠外周血CD4+CD25+T细胞中Foxp3表达率为29%±1.73%,CD4+CD25highT细胞中Foxp3阳性率高达95%±1.67%,均明显高于对照组(12%±0.58%和19.3%±2.03%)及DC(16.3%±0.88%和52.0%±1.73%)组(P<0.01)。PUVA-SPDC组大鼠移植心存活时间为(27.3±0.98)d,与Control组(6.7±0.29)d及DC组(11.0±0.32)d相比,明显延长(P<0.01)。过继转移实验显示,接受PUVA-SPDC组受者T细胞的正常LEW大鼠对DA大鼠抗原的刺激呈特异性免疫低应答状态。结论:PUVA-SPDC能够在移植受者体内诱生CD4+CD25+Foxp3+Treg,同时诱导抗原特异性免疫低反应,进而延长异基因移植物的存活时间。

关键词：树突状细胞 PUVA 心脏移植调节性T细胞大鼠

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下尿路异常肾移植4例随访(英文)

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中国组织工程研究与临床康复 2008年第31期12卷 6158-6160页

作者：裴向克蔡明石炳毅解放军总医院第二附属医院全军器官移植中心

背景:下尿路异常能够导致终末期肾病,但是在国内这部分患者没有得到足够的重视,并且因为移植物无功能及脓毒性并发症的高发生率,下尿路异常患者通常被认为不适合进行肾移植。目的:回顾性分析4例下尿路异常患者的肾移植特点及术后随访情... 详细信息

背景:下尿路异常能够导致终末期肾病,但是在国内这部分患者没有得到足够的重视,并且因为移植物无功能及脓毒性并发症的高发生率,下尿路异常患者通常被认为不适合进行肾移植。目的:回顾性分析4例下尿路异常患者的肾移植特点及术后随访情况。设计、时间及地点:回顾性病例分析,于2002-07/2006-06在解放军总医院第二附属医院全军器官移植中心完成。对象:接受同种异体肾移植的4例下尿路异常终末期肾病患者。方法:4例患者在肾移植术前接受了详细评估,术中将移植肾输尿管再植入原来膀胱中,尿液引流方式均采取膀胱造瘘方法。主要观察指标:监测肾移植术后患者及移植物存活率、移植肾功能、尿路感染、排斥反应情况,并对患者的生活质量满意度进行评价。结果:①2例患者术后肾功能恢复良好,未发生排斥反应,有轻度但容易控制的尿路感染,患者能够处理尿液引流并对生活质量满意度良好。②1例患者术后17d发生急性排斥反应,治疗后逆转,带有功能移植肾存活至今。③1例患者术后因血管吻合部位反复出血导致移植肾丢失,恢复血液透析治疗。结论:下尿路异常患者可以进行肾移植,但具有特殊性,仔细的术前评估、适当的尿液引流方式以及严密的术后随访是此类患者肾移植成功的关键。

关键词：肾移植尿道疾病器官移植

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大鼠脐带源间充质干细胞的分离及生物学性状

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中国组织工程研究与临床康复 2010年第10期14卷 1743-1748页

作者：刘奎利石炳毅刘德忠金建刚李海斌史迎昌冯凯肖漓解放军总医院第二附属医院器官移植中心北京市100091

背景:关于大鼠骨髓来源的间充质干细胞用于移植免疫耐受及进行组织修复的研究很多,但尚无脐带来源间充质干细胞的相关研究。目的:建立从大鼠脐带分离间充质干细胞的方法,并观察其生物学性状。方法:大鼠脐带经酶消化和组织块培养两种方... 详细信息

背景:关于大鼠骨髓来源的间充质干细胞用于移植免疫耐受及进行组织修复的研究很多,但尚无脐带来源间充质干细胞的相关研究。目的:建立从大鼠脐带分离间充质干细胞的方法,并观察其生物学性状。方法:大鼠脐带经酶消化和组织块培养两种方法进行分离培养,于DMEM-LG培养基中培养,倒置显微镜观察细胞形态,细胞计数绘制生长曲线,流式细胞仪测定细胞周期及细胞表型,免疫组织化学染色检测其体外诱导成脂肪和成骨分化的能力。结果与结论:两种方法均能成功地从大鼠脐带中获得大量的间充质干细胞:原代培养显示,胶原酶消化法比组织块培养法的效率更高,大约10d就可以进行传代,而组织块培养法要14d才能传代;传代扩增两者之间没有差别。免疫表型分析显示,大鼠脐带源细胞表达黏附分子和基质细胞标记CD90、CD106,不表达造血细胞标记CD34、CD45。体外诱导实验证实,大鼠脐带间充质干细胞具有成脂肪和成骨分化的能力。

关键词：脐带间充质干细胞大鼠生物学性状分离脐带干细胞

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移植肾组织中C4d沉积、浆细胞聚集性浸润及其与体液性排斥反应的关系

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中华器官移植杂志 2008年第5期29卷 290-293页

作者：许晓光石炳毅蔡明王强韩永周文强许亮肖漓解放军总医院第二附属医院器官移植中心北京100091

目的检测因排斥反应而丧失功能的移植。肾组织中浆细胞的浸润情况及补体（34裂解产物CAd的沉积情况，分析浆细胞浸润、CAd沉积与体液性排斥反应的相关性。方法切取4o例因排斥反应而丧失功能的移植。肾，取其组织，进行HE染色和免疫组织... 详细信息

目的检测因排斥反应而丧失功能的移植。肾组织中浆细胞的浸润情况及补体（34裂解产物CAd的沉积情况，分析浆细胞浸润、CAd沉积与体液性排斥反应的相关性。方法切取4o例因排斥反应而丧失功能的移植。肾，取其组织，进行HE染色和免疫组织化学染色，依据Banff 97标准对排斥反应进行病理分型，检测。肾组织中CAd、CD38和CDl38的表达，分析三者之间的相关性。同时以10例非排斥因素导致移植。肾功能丧失者为对照。结果40例排斥反应中，超急性排斥反应5例，急性排斥反应9例，慢性排斥反应26例；40例中，CAd阳性17例（42．5‰），CD38阳性25例（62．5％），CDl38阳性23例（57．5％）；有9例（22．5％）的CAd、CD38和CDl38同时阳性，其中超急性排斥反应1例，急性排斥反应3例，慢性排斥反应5例。经Spearman等级相关分析，CAd的沉积与CD38和CDl38的表达存在相关性（P〈0．05，P〈0．01）。10例对照者中，C4d和CD38染色阳性各1例，无CAd、CD38和CDl38均阳性的病例。结论CD38和CDl38与CAd的沉积存在相关性，提示移植肾中聚集性浸润的浆细胞可能通过局部分泌抗体的方式参与移植肾的体液排斥机制。

关键词：移植肾浆细胞补体4 抗体生成

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同种异体肾移植患者血清细胞因子与亚临床排斥反应的相关性研究

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细胞与分子免疫学杂志 2009年第5期25卷 440-442页

作者：韦星蔡明石炳毅李州利詹胜利解放军总医院第二附属医院器官移植中心北京100091

目的:探讨同种异体肾移植术后患者血清细胞因子(IL-2、IL-6、IL-8、IL-10)表达与亚临床排斥反应的关系。方法:采用ELISA检测15例亚临床排斥反应患者(亚临床排斥反应组)血清细胞因子,并与23例无排斥反应患者(无排斥反应组)和20例健康体检... 详细信息

目的:探讨同种异体肾移植术后患者血清细胞因子(IL-2、IL-6、IL-8、IL-10)表达与亚临床排斥反应的关系。方法:采用ELISA检测15例亚临床排斥反应患者(亚临床排斥反应组)血清细胞因子,并与23例无排斥反应患者(无排斥反应组)和20例健康体检者(正常对照组)进行比较。结果:肾移植患者术后4个月肾移植患者血清IL-2、IL-6、IL-8、IL-10水平高于正常对照组,其中IL-6、IL-8、IL-10与正常对照组和无排斥组相比有统计学差异(P<0.05);亚临床排斥反应组干预后血清细胞因子水平明显降低,均达到正常值,其中IL-6、IL-8、IL-10与干预前比较有统计学差异(P<0.05)。结论:术后IL-10与IL-6、IL-8的动态检测,对于及早发现亚临床排斥反应和干预疗效的评估具有重要意义。

关键词：细胞因子肾移植亚临床排斥反应同种异体

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肾移植术后早期外周血淋巴细胞因子mRNA表达研究

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中华泌尿外科杂志 2007年第5期28卷 328-331页

作者：石炳毅王科王晓雄钱叶勇贾金风常京元柏宏伟解放军总医院第二附属医院全军器官移植中心北京100091 烟台毓璜顶医院器官移植中心解放军总医院泌尿外科

目的研究肾移植受者术后早期免疫功能状态。方法采用实时荧光定量PCR检测32例肾移植受者术前当天、术后第3、7、14、28天外周血淋巴细胞有关细胞因子mRNA表达;对2例急性排斥反应（AR）患者予以附加时间点检测。结果手术前当天IL-2、IL-1... 详细信息

目的研究肾移植受者术后早期免疫功能状态。方法采用实时荧光定量PCR检测32例肾移植受者术前当天、术后第3、7、14、28天外周血淋巴细胞有关细胞因子mRNA表达;对2例急性排斥反应（AR）患者予以附加时间点检测。结果手术前当天IL-2、IL-10、IFN-γ和TGF-β1 mRNA分别为0．171、0．121、0．062和0．128;术后第3天分别为0．161、0．165、0．059和0．134;术后第7天分别为0．149、0．148、0．054和0．129;术后第14天分别为0．153、0．135、0．056和0．136;术后第28天分别为0．188、0．165、0．060和0．146。术后第3天,IL-10、TGF-β1 mRNA表达均较术前增强,IL-10表达增强更为明显（P〈0．01）,至第7天两者表达逐渐减弱至正常水平;术后IL-2、IFN-γmRNA表达减弱,第7天降至最低水平,此后逐渐回升直至正常。2例早期AR患者IL-2、IL-10、IFN-γ、TGF-β1 mRNA表达于AR发生前后均增强,以IL-2 mRNA表达增强最为明显。结论实时荧光定量PCR检测肾移植术后早期外周血淋巴细胞因子mRNA表达,可以了解肾移植受者术后早期免疫功能状态。Th1和Th2类细胞因子均可能在AR的发生发展中发挥重要作用。

关键词：肾移植细胞因子急性排斥

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外周血淋巴细胞转化生长因子β1 mRNA表达与慢性移植物肾病的关系

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中华泌尿外科杂志 2007年第7期28卷 475-477页

作者：石炳毅王科刘庆祚王晓雄钱叶勇贾金风常京元柏宏伟解放军总医院第二附属医院全军器官移植中心北京100091 烟台毓璜顶医院器官移植中心解放军总医院泌尿外科

目的研究转化生长因子β1（TGF-β1）在慢性移植物肾病（CAN）发生发展中的作用以及免疫抑制剂对TGF-β1的影响。方法采用实时荧光定量PCR检测15例CAN和22例非CAN患者外周血淋巴细胞TGF-β1 mRNA表达,分析CAN、免疫抑制剂和TGF-β1 mRN... 详细信息

目的研究转化生长因子β1（TGF-β1）在慢性移植物肾病（CAN）发生发展中的作用以及免疫抑制剂对TGF-β1的影响。方法采用实时荧光定量PCR检测15例CAN和22例非CAN患者外周血淋巴细胞TGF-β1 mRNA表达,分析CAN、免疫抑制剂和TGF-β1 mRNA表达3者之间的关系。结果CAN组TGF-β1 mRNA表达明显高于非CAN组,分别为0．1 55±0．027和0．123±0．028（P〈0．01）。服用环孢素（CsA）的患者TGF-β1 mRNA表达明显高于服用他克莫司（FK506）者,CAN组分别为0．170和0．137（P〈0．01）,非CAN组分别为0．135和0．106（P〈0．01）。TGF-β1 mRNA表达与肾移植受者血肌酐（r2=0．77,P〈0．01）和血尿素氮（r2=0．63,P〈0．01）呈良好线性关系。结论CsA能引起肾移植受者外周血淋巴细胞TGF-β1 mRNA高表达,后者可诱发和促进CAN的发生与发展。

关键词：慢性移植物肾病转移生长因子β1 免疫抑制剂

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异体脐带间充质干细胞对大鼠心脏移植的免疫调节

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中国组织工程研究与临床康复 2010年第6期14卷 1048-1052页

作者：刘奎利刘德忠金建刚李海斌史迎昌黎立韩勇许晓光石炳毅解放军总医院第二附属医院器官移植中心北京市100091

背景:有资料表明骨髓间充质干细胞可延长小鼠和狒狒异体皮肤移植存活时间,降低造血干细胞移植后急性和慢性移植物抗宿主病的发生,但目前尚未见关于大鼠脐带间充质干细胞用于心脏移植减少排斥反应的报道。目的:观察异体脐带间充质干细胞... 详细信息

背景:有资料表明骨髓间充质干细胞可延长小鼠和狒狒异体皮肤移植存活时间,降低造血干细胞移植后急性和慢性移植物抗宿主病的发生,但目前尚未见关于大鼠脐带间充质干细胞用于心脏移植减少排斥反应的报道。目的:观察异体脐带间充质干细胞对大鼠心脏移植的免疫调节作用。方法:DA大鼠20只作为供体,Lewis大鼠20只作为受体,均随机分为2组,即药物干预组、对照组,每组供受体大鼠各10只。采用双套管法将供体大鼠的左肺动脉和无名动脉分别与受体大鼠心脏的颈外静脉和颈总动脉在显微镜下行端端吻合,建立异位心脏移植模型。Wistar孕鼠1只,采用胶原酶消化法分离培养脐带间充质干细胞。造模后,细胞移植组经尾静脉注射脐带间充质干细胞,对照组同法注射氯化钠注射液。检测移植心脏的存活时间,采用心脏移植急性排斥反应诊断标准对移植心脏进行组织病理学评分,苏木精-伊红染色观察移植心脏淋巴细胞浸润程度。结果与结论:与对照组比较,细胞移植组移植心脏存活时间显著延长(P=0.001),急性排斥反应病理学评分显著降低(P=0.0004)。对照组心肌组织内有大量淋巴细胞和单核细胞浸润,细胞移植组心肌组织内有少量淋巴细胞浸润,心肌间质轻度水肿。结果证实大鼠脐带间充质干细胞可诱导心脏移植免疫耐受,减轻免疫排斥反应,延长心脏存活时间。

关键词：免疫调节心脏移植大鼠脐带间充质干细胞

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