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法莫替丁口溶片的研制及体外释放特性

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第二军医大学学报 2001年第3期22卷 294-295页

作者：张建春蒋雪涛陈鼎继邓明德贺建昌第二军医大学药学院药剂学教研室上海200433 解放军第一医院兰州730030

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逆转录病毒载体介导的HSVtk基因联合5-FU治疗实验性大肠癌

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世界华人消化杂志 2001年第2期9卷 190-193页

作者：钱伟峰黄黄宗海迟德彪中国人民解放军第一军医大学珠江医院普外科广东省广州市510282 中国人民解放军第一军医大学药理教研室广东省广州市510515

目的研究体内外联合应用HSVtk/GCV系统和5-FU治疗大肠癌的疗效。方法用逆转录病毒转染人大肠癌LoVo细胞,MTT法观察GCV联合5-FU对LoVo细胞的杀伤作用。通过裸鼠皮下注射HSVtk+LoVo细胞建立人大肠癌肿瘤模型,应用GCV和(或)5-FU治疗后测量... 详细信息

目的研究体内外联合应用HSVtk/GCV系统和5-FU治疗大肠癌的疗效。方法用逆转录病毒转染人大肠癌LoVo细胞,MTT法观察GCV联合5-FU对LoVo细胞的杀伤作用。通过裸鼠皮下注射HSVtk+LoVo细胞建立人大肠癌肿瘤模型,应用GCV和(或)5-FU治疗后测量肿瘤体积计算肿瘤生长抑制率,并用HE染色观察有无器官毒副作用。结果体外实验MTT法显示HSVtk/GCV系统联合5-FU对LoVo细胞的杀伤作用较GCV组明显增强(P<0.05),体内实验表明联合治疗组肿瘤体积为(348±68)mm^3大小,明显小于其他各组(P<0.01),HE染色未观察到各器官病理改变。结论联合应用HSVtk/GCV系统和5-FU能提高HSVtk/GCV系统治疗大肠癌的疗效,且没有明显的毒副作用。

关键词：结肠直肠肿瘤基因疗法胸苷激酶遗传学氟尿嘧啶

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HSVtk/GCV体外诱导人大肠癌LoVo细胞凋亡

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世界华人消化杂志 2001年第2期9卷 194-197页

作者：黄宗海钱伟峰迟德彪蒋泽生中国人民解放军第一军医大学珠江医院普外科广东省广州市510282 中国人民解放军第一军医大学药理教研室广东省广州市510515

目的探讨HSVtk/GCV系统在体外诱导LoVo细胞凋亡。方法用逆转录病毒转染LoVo细胞获得阳性克隆,以GCV(10μmol·L^(-1))作用,经光镜、电镜和荧光显微镜观察各组细胞凋亡情况。HSVtk+/LoVo细胞经GCV(10μmol·L^(-1))作用0h～48h不... 详细信息

目的探讨HSVtk/GCV系统在体外诱导LoVo细胞凋亡。方法用逆转录病毒转染LoVo细胞获得阳性克隆,以GCV(10μmol·L^(-1))作用,经光镜、电镜和荧光显微镜观察各组细胞凋亡情况。HSVtk+/LoVo细胞经GCV(10μmol·L^(-1))作用0h～48h不等,荧光显微镜观察计数计算其凋亡率,并用流式细胞仪检测细胞周期。结果通过光镜、电镜和荧光显微镜观察到实验组HSVtk+/LoVo细胞凋亡情况,HSVtk+/LoVo细胞分别经GCV(10μmol·L^(-1))作用0,12,24,36,48h,凋亡率随时间的增加而升高。作用24h后凋亡率低于0.3,48h升至0.925。经流式细胞仪检测GCV作用后的肿瘤细胞,细胞周期变化明显D_0/G_1期细胞从0.31上升到0.42,S期细胞从0.62下降到0.39。结论 HSVtk/GCV系统可诱导LoVo细胞凋亡,且存在时间效应,GCV可抑制细胞DNA的合成,阻止细胞由G_1期向S期转化。

关键词：结肠直肠肿瘤病理学肿瘤细胞胸苷激酶疱疹病毒科更西罗韦

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同种异体骨圈在颈椎前路融合术中的应用

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中华骨科杂志 2001年第6期21卷 375-378页

作者：杨军林孙鸿涛陈立龙彭成宏曾剑平蒋巧艺何广英沈卫华陈菊新邹忠覃昱肖学军李佛保陈立言石瑾解放军第一五七中心医院骨科广州510510 中山医科大学第一附属医院骨科第一军医大学解剖教研室

目的了解同种异体骨圈 (allograft fusion cage, AFC)在颈椎前路椎体融合术中应用的效果。方法从 1995年 9月 ,在 31例颈椎病、 6例颈椎骨折脱位、 2例急性颈椎间盘脱出症患者行颈椎前路手术中 ,将自制 AFC植入到 61个病变椎间隙。术... 详细信息

目的了解同种异体骨圈 (allograft fusion cage, AFC)在颈椎前路椎体融合术中应用的效果。方法从 1995年 9月 ,在 31例颈椎病、 6例颈椎骨折脱位、 2例急性颈椎间盘脱出症患者行颈椎前路手术中 ,将自制 AFC植入到 61个病变椎间隙。术后观察临床效果及手术并发症 ,并行 X线评价。结果 39例患者随访平均 28.6个月 ,临床效果满意，无神经并发症发生，无 AFC移位脱出。术后 3个月摄动态 X线片， 61个椎间隙平均 3.9个月完全骨性愈合。 59个椎间隙无塌陷、成角畸形， 2例 2个椎间隙因过早去除外固定，椎间高度轻度丢失。结论与传统颈椎前路减压椎间融合术相比， AFC植入操作简便、固定稳定、手术创伤小、时间短，椎间骨融合率相近，并因无需取自体髂骨和应用金属支架，消除了取髂骨及金属内固定物永久植入所引起的一些并发症。

关键词：颈椎脊柱融合术内固定器同种移植同种异体骨圈

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3,4′,5-三羟基芪-3-β-单-D-葡萄糖苷对大肠癌细胞系蛋白激酶C的抑制效应

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世界华人消化杂志 2001年第2期9卷 198-201页

作者：李学农丁彦青周军中国人民解放军第一军医大学病理学教研室广东省广州市510515

目的研究3,4’,5-三羟基芪-3-β-单-D-葡萄糖苷(3,4’,5,-trihydroxystibene-3-β-mono-D-glucoside,THMG)对大肠癌细胞粘附性、浸润力及蛋白激酶C活性的影响;探讨THMG抗转移作用的信号转导机制。方法利用Boyden小室法等细胞生物学技术... 详细信息

目的研究3,4’,5-三羟基芪-3-β-单-D-葡萄糖苷(3,4’,5,-trihydroxystibene-3-β-mono-D-glucoside,THMG)对大肠癌细胞粘附性、浸润力及蛋白激酶C活性的影响;探讨THMG抗转移作用的信号转导机制。方法利用Boyden小室法等细胞生物学技术检测4种大肠癌细胞(HR8348,Hce-8693,HT29,LoVo)在0.4,0.8,1.6和3.2mmol·L^(-1)等浓度THMG作用下的粘附率、浸润力。[γ-^(32)P]ATP掺入法测定蛋白激酶C活性。结果在3.2mmol·L^(-1)浓度时THMG对HR-8348,Hce-8693,HT-29和LoVo粘附抑制率分别为75.7％,69.4％,67.6％和78.8％,浸润抑制率分别为82.7％,85.7％,89.7％和92.7％,且随着浓度加大,粘附和浸润抑制率提高。3.2 mmol·L^(-1)THMG对HR-8348,Hce-8693,HT-29和LoVo的蛋白激酶C活性抑制率分别是35.1％,36.8％,41.5％,49.6％,呈剂量依赖性关系,与对照组比较具有统计学显著性(P<0.001)。粘附性及浸润力抑制程度与蛋白激酶C活性的抑制程度呈显著性相关(P<0.05)。结论 THMG可能通过抑制蛋白激酶C活性对信号转导系统具有调变作用,THMG对信号转导系统的影响可能是抗粘附抗侵袭效应的重要机制之一。

关键词：结肠直肠肿瘤葡糖苷类蛋白激酶C 肿瘤转移

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放烧复合伤对小鼠白细胞介素-3的影响

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中华放射医学与防护杂志 2001年第3期21卷 192-194页

作者：何佩丁振华郑莉杨军罗成基解放军第153中心医院核医学科郑州450042 第一军医大学防原医学教研室第三军医大学复合伤研究所

目的　探讨放烧复合伤所致造血功能障碍与内源性IL 3之间的关系。方法　小鼠随机分为正常 (N)、放射损伤 (R)、烧伤 (B)及放烧复合伤 (C)共 4组 ,利用EndogenMouseIL 3ELISA试剂盒 ,检测小鼠致伤后不同时间的血清IL 3水平。结果　R组血... 详细信息

目的　探讨放烧复合伤所致造血功能障碍与内源性IL 3之间的关系。方法　小鼠随机分为正常 (N)、放射损伤 (R)、烧伤 (B)及放烧复合伤 (C)共 4组 ,利用EndogenMouseIL 3ELISA试剂盒 ,检测小鼠致伤后不同时间的血清IL 3水平。结果　R组血清IL 3水平明显降低 ,其中第 3、5天最低 (低于检测灵敏度 ) ,第 15天开始缓慢回升 ,第 2 8天仍未达正常水平 ;B组第 3、5天低于正常 ,第 10天开始回升 ,第 15天达高峰 ,为正常组的 2 10 % ;C组血清IL 3变化介于R、B组之间 ;各观测组外周血白细胞数量的变化与血清IL 3变化呈平行关系。小鼠 15 %Ⅲ度烧伤后 1～ 11d的血清对小鼠骨髓基质细胞 (BMSC)贴壁率和CFU F的形成主要表现为抑制作用 ,13～ 15d的血清主要表现为刺激作用。结论　小鼠烧伤后不同时间的血清对BMSC贴壁率和CFU F集落形成的作用不同以及放烧复合伤所致外周血白细胞数量异常可能与内源性IL 3的变化有关。本实验提示 :内源性IL 3水平不足可能是放烧复合伤所致造血功能障碍形成的原因之一。

关键词：放射损伤烧伤放烧复合伤白细胞介素-3 小鼠造血功能障碍

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冰乙酸性大鼠胃溃疡模型的建立及溃疡胃窦粘膜的光镜和透射电镜观察

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世界华人消化杂志 2001年第2期9卷 135-138页

作者：孙凤蓬宋于刚朱新生汤事能杜江邱庆林赵彤中国人民解放军第一军医大学珠江医院消化科广东省广州市510282 中国人民解放军第一军医大学病理学教研室广东省广州市510515

目的建立冰乙酸性大鼠胃溃疡模型,并对溃疡胃窦的粘膜组织结构进行光镜和电镜观察。方法 31只Wistar大鼠随机分为冰乙酸0.01mL组、冰乙酸0.05mL组、冰乙酸0.01mL组,生理盐水0.01mL组、生理盐水0.05mL组、生理盐水0.01mL组,和正常对照组... 详细信息

目的建立冰乙酸性大鼠胃溃疡模型,并对溃疡胃窦的粘膜组织结构进行光镜和电镜观察。方法 31只Wistar大鼠随机分为冰乙酸0.01mL组、冰乙酸0.05mL组、冰乙酸0.01mL组,生理盐水0.01mL组、生理盐水0.05mL组、生理盐水0.01mL组,和正常对照组。以1mL注射器在各处理组大鼠胃窦前壁注入相应剂量的冰乙酸或生理盐水。对各组大鼠进行大体观察,对发生典型胃溃疡组大鼠和正常对照组大鼠的胃窦组织进行光镜、电镜观察。结果冰乙酸0.05mL组大鼠胃窦前壁粘膜面发生溃疡,冰乙酸0.01mL组鼠胃未见明显溃疡,冰乙酸0.01mL组大鼠胃窦前壁穿孔,生理盐水0.01mL组、生理盐水0.05mL组、生理盐水0.10mL组和正常对照组大鼠胃窦均无溃疡。光镜观察见冰乙酸0.05mL组大鼠胃窦溃疡部位粘膜腺体正常结构消失,溃疡边缘粘膜腺体间质充血水肿和结缔组织增,电镜观察见冰乙酸0.05mL组大鼠溃疡边缘胃窦粘膜粘液细胞、壁细胞、主细胞存在超微结构改变,并见坏死细胞和凋亡细胞等细胞。结论大体、光镜和电镜三水平的观察表明,以大鼠胃窦前壁注入0.05mL冰乙酸所建立的胃溃疡模型最为典型。

关键词：胃溃疡胃粘膜冰乙酸细胞凋亡显微镜检查

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截短的弓形虫P30基因在***中的高效表达及纯化条件的探索

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中国人兽共患病杂志 2001年第2期17卷 14-18页

作者：龚娅陈晓光杨培梁中国人民解放军第157中心医院检验科广州510515 第一军医大学寄生虫学教研室

目的　构建能在E .coli中高效表达的弓形虫主要表面抗原 (P30 )基因的重组表达质粒 ,并对纯化条件进行优化。方法　对已知的弓形虫P30基因序列进行部分取舍 ,用PCR技术从弓形虫ZS1株的基因组DNA中扩增出截短的P30基因片段 ,插入载体pET ... 详细信息

目的　构建能在E .coli中高效表达的弓形虫主要表面抗原 (P30 )基因的重组表达质粒 ,并对纯化条件进行优化。方法　对已知的弓形虫P30基因序列进行部分取舍 ,用PCR技术从弓形虫ZS1株的基因组DNA中扩增出截短的P30基因片段 ,插入载体pET 30 (a)中 ,转化大肠杆菌DH5α,IPTG诱导表达 ,包涵体经洗涤、变性、复性及不同程度的浓缩后 ,进行SDS PAGE及免疫印迹分析。结果　从弓形虫ZS1株基因组DNA中扩增出截短的P30基因片段 ,成功构建重组表达质粒 pET P30 ;SDS -PAGE显示蛋白表达带的分子量约为 31kD ,表达量占菌体总蛋白的 31.5 8% ,经 1M及 2M尿素洗涤后 ,其纯度分别达 6 3.42 %及 75 .74% ;免疫印迹显示 ,该纯化蛋白能被弓形虫病人阳性血清所识别 ,而且当浓缩至初始体积的 1/ 3～ 1/ 6时 ,纯化蛋白与DNA免疫鼠血清的反应最强。结论　成功构建重组质粒 pET P30 ,并以融合蛋白的形式进行了高效表达 ,经变性、复性后 ,该蛋白具有特异的免疫反应性 ,为弓形虫诊断试剂盒的研制打下基础。

关键词：弓形虫 P30基因蛋白表达 E.coli 纯化

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胶质细胞源性神经营养因子对大鼠脊髓损伤后后肢运动功能及其运动诱发电位的影响

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中华创伤杂志 2001年第9期17卷 529-531页

作者：宋海涛贾连顺田万成陈哲宇曹丽路长林解放军第一0七中心医院骨科烟台264002 第二军医大学附属长征医院骨科第二军医大学基础医学部神经生物教研室

目的　探讨胶质细胞源性神经营养因子 (GDNF)对大鼠脊髓损伤后后肢运动功能及其运动诱发电位 (MEP)的影响。　方法　将 30只SD雄性大鼠 (2 0 0～ 2 5 0g)随机分为对照组、等渗盐水 (NS)组和GDNF组 ,每组 10只。改良Allen方法致T13 段脊... 详细信息

目的　探讨胶质细胞源性神经营养因子 (GDNF)对大鼠脊髓损伤后后肢运动功能及其运动诱发电位 (MEP)的影响。　方法　将 30只SD雄性大鼠 (2 0 0～ 2 5 0g)随机分为对照组、等渗盐水 (NS)组和GDNF组 ,每组 10只。改良Allen方法致T13 段脊髓不完全损伤 ,蛛网膜下腔分别给予NS或GDNF 2 0 μl,伤后 1,5h和 1,3,5d评定后肢出现运动功能 (Salzman评分 )和检测MEP。　结果　脊髓损伤后后肢运动障碍 ,MEP波幅 (P1-N1峰峰值 )降低、潜伏期延长 ,对照组无变化。伤后1,5h和 1,3,5d ,NS组波幅分别恢复至伤前的 36 .7%、38.9%、47.1%、74.1%和 92 .3% ,潜伏期恢复至 112 .5 %、111.2 %、111.3%、10 5 .0 %及 10 3.5 % ;伤后 5h和 1,3dGDNF组波幅恢复明显优于NS组 ,伤后 1,3dGDNF组潜伏期恢复优于NS组 (P <0 .0 5 )。伤后 1,5h后肢运动功能无恢复 ,伤后1d开始恢复 ,伤后 3,5d明显恢复 ,其中GDNF组恢复显著优于NS组 (P <0 .0 1)。　结论　GDNF能够早期促进MEP波形的恢复 ,增强后肢运动功能的恢复 ;MEP恢复早于后肢运动功能恢复。

关键词：脊髓损伤运动诱发电位神经营养因子胶质细胞源性神经功能

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生长因子受体反义基因逆转肝癌细胞的恶性表型

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世界华人消化杂志 2001年第2期9卷 175-179页

作者：徐迪雄陈文生叶治家中国人民解放军第三军医大学第一附属医院医教部中国人民解放军第三军医大学第一附属医院消化科中国人民解放军第三军医大学第一附属医院生化教研室重庆市400038

目的应用反义技术原理将生长因子受体反义基因,导入人肝癌SMMC-7721细胞,阻断肝癌细胞生长因子与其受体的相互作用,研究其对肝癌细胞恶性表型的逆转作用。方法构建人胰岛素样生长因子Ⅱ型受体(IGF-ⅡR)正、反义基因重组真核表达质粒,用... 详细信息

目的应用反义技术原理将生长因子受体反义基因,导入人肝癌SMMC-7721细胞,阻断肝癌细胞生长因子与其受体的相互作用,研究其对肝癌细胞恶性表型的逆转作用。方法构建人胰岛素样生长因子Ⅱ型受体(IGF-ⅡR)正、反义基因重组真核表达质粒,用磷酸钙-DNA共沉淀方法转染人肝癌细胞株SMMC-7721,经G418培养基筛选得到稳定的抗性细胞。采用Northern杂交检测反义基因转染细胞内源性IGF-ⅡR基因mRNA转录的抑制,同时观察转染细胞克隆形成率,细胞生长曲线和软琼脂生长能力的变化。结果 IGF-ⅡR反义基因转染后,肝癌细胞的内源性IGF-ⅡR基因mRNA转录受到有效抑制;各组转染细胞克隆形成率分别为:空载体组22.0±3.6,正义组13.3±2.1,反义组4.3±2.1,反义基因转染细胞克隆形成率明显降低;软琼脂培养基细胞集落形成数为:SMMC-7721组254.8±15.9,空载体组196.4±30.4。正义组99.4±23.0,反义组0.0±0.0,说明反义基因转染细胞失去在软琼脂上生长的能力;但细胞生长曲线无明显变化。结论应用反义策略干扰肝癌细胞生长因子受体基因的异常高表达状态,可以有效阻断配体与受体间作用的生长刺激信号环路,一定程度地抑制肝癌细胞的恶性表型。

关键词：肝癌病理学受体生长调节素遗传学转染表型

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