检索结果-内蒙古大学图书馆

中华医学杂志 2003年第10期83卷 890-893页

作者：张政王福生解放军第三○二医院传染病研究所北京100039

自1963年，Starzl在美国成功实施第一例人体肝脏移植手术以来，肝移植已在世界各地广泛开展并取得了巨大进步。但是，供器官短缺、肝移植后免疫抑制剂带来的巨大毒副作用以及高额的治疗费用严重限制了肝移植医学的发展。肝细胞移植（liv... 详细信息

自1963年，Starzl在美国成功实施第一例人体肝脏移植手术以来，肝移植已在世界各地广泛开展并取得了巨大进步。但是，供器官短缺、肝移植后免疫抑制剂带来的巨大毒副作用以及高额的治疗费用严重限制了肝移植医学的发展。肝细胞移植（liver cell transplantation, LCT）为病损肝脏的细胞重建及衰竭肝脏的功能恢复提供了一种全新的治疗策略。肝细胞移植以其移植技术简单、可重复进行、对受体影响小以及一肝多用、免疫排斥反应弱与价值相对低廉等诸多优点引起了广大学者的关注。

关键词：肝脏细胞移植基础研究现状应用研究

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严重急性呼吸综合征患者的临床免疫学和病毒学变化特点及其相关致病机制

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中华传染病杂志 2003年第4期21卷 241-245页

作者：李永纲王福生王敏范荣赵敏辛邵杰张政徐东平金磊刘敬超解放军第三○二医院传染病研究所北京100039

目的　研究严重急性呼吸综合征 (SARS)患者临床免疫学和病毒学特点 ,研究SARS发病的免疫学相关的机制 ,并评价其与病程的关系。方法　我们随机选择 3 3例SARS患者 ,对他们临床发病全过程进行了观察 ,并应用流式细胞技术、PCR方法、ELIS... 详细信息

目的　研究严重急性呼吸综合征 (SARS)患者临床免疫学和病毒学特点 ,研究SARS发病的免疫学相关的机制 ,并评价其与病程的关系。方法　我们随机选择 3 3例SARS患者 ,对他们临床发病全过程进行了观察 ,并应用流式细胞技术、PCR方法、ELISA等方法 ,对患者的外周血T细胞亚群、DC细胞亚群、应用RT PCR和ELISA方法对血浆中病毒的基因和抗体进行了动态分析。并分析患者发病过程中上述免疫学指标的动态变化及其与SARS病程进展之间的关系。同时对 2 5名健康志愿者进行检测 ,以分析相关的数据作为对照。结果　与健康人群相比 ,进展期的轻症SARS患者外周血CD4T淋巴细胞、CD8T淋巴细胞和自然杀伤 (NK )细胞水平分别为 0 .3 67± 0 .3 0 5、0 .3 12±0 .2 77、0 .2 0 7± 0 .159。重症患者分别为 0 .2 62± 0 .175、0 .2 3 2± 0 .184、0 .189± 0 .157。特别显著的是SARS发病过程中I型树突状细胞 (DC1)和Ⅱ型树突状细胞 (DC2 )数量降低幅度最大 ,轻症患者DC1和DC2细胞数量分别为 1.3± 0 .5、1.0± 0 .2 ,而重症患者外周血的DC2为 0 .0 56± 0 .0 7。在恢复期 ,外周血中的CD4和CD8淋巴细胞接近正常水平的 80 %～ 85%之间 ,但是NK细胞仅为正常水平的65%左右。而DC1细胞上升的幅度最大 ,到第 7周达到 2 0 .461± 2 .

关键词：严重急性呼吸综合征临床免疫学病毒学 SARS 致病机制流式细胞技术

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HCV核心蛋白与HBV X蛋白协同反式激活作用的研究

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中华实验和临床病毒学杂志 2003年第1期17卷 70-72页

作者：刘妍成军邵得志王琳钟彦伟董菁李克李莉解放军第三○二医院传染病研究所基因治疗研究中心北京100039

目的　探讨HCV核心蛋白与HBVX蛋白的协同反式激活作用。方法　构建表达HCV核心蛋白的重组质粒pcDNA3 .1( )core和表达HBVX蛋白的重组质粒pcDNA3 .1( )X ;转染HepG2 细胞 ,从转录和翻译水平鉴定病毒基因的瞬时表达 ;与报告质粒pSV lacZ... 详细信息

目的　探讨HCV核心蛋白与HBVX蛋白的协同反式激活作用。方法　构建表达HCV核心蛋白的重组质粒pcDNA3 .1( )core和表达HBVX蛋白的重组质粒pcDNA3 .1( )X ;转染HepG2 细胞 ,从转录和翻译水平鉴定病毒基因的瞬时表达 ;与报告质粒pSV lacZ共转染HepG2 细胞 ,检测 β 半乳糖苷酶表达活性 ,酶的活性反映了表达的肝炎病毒蛋白对SV40病毒早期启动子增强子功能的影响。结果　构建成HCV核心蛋白及HBVX蛋白的重组表达载体pcDNA3 .1( )core、pcDNA3 .1( )X ;在HepG2 细胞均能瞬时表达相应的肝炎病毒蛋白 ;单独共转染试验中pcDNA3 .1( )core、pcDNA3 .1( )X组的 β 半乳糖苷酶的表达分别是对照的 4.9、3 .5倍 ,两种质粒共同转染时酶的表达是对照的 9倍 ;表达质粒对 β 半乳糖苷酶表达的激活作用呈剂量依赖性。结论　HepG2 细胞中表达的HCV核心蛋白和HBVX蛋白均具有反式激活SV40早期启动子增强子的功能 ,并且两种蛋白的反式激活功能具有协同特性。本试验有助于解释HCV、HBV感染 ,尤其是共同感染的致病

关键词：丙型肝炎病毒病毒核心蛋白类乙型肝炎病毒反式激活启动区

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与麻风病相关的人体易感基因多态性及研究进展

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中华流行病学杂志 2003年第10期24卷 944-946页

作者：翁小满王福生北京热带医学研究所 100050 解放军第三○二医院传染病研究所

麻风病是由细胞内寄生的麻风分支杆菌引起的慢性传染病。现认为，除了环境因素之外，麻风病的发病和临床结局主要取决于机体免疫反应能力及个体的遗传易感性。国内外已经对病菌本身和宿主免疫反应等方面开展了较多的研究，但对宿主遗传... 详细信息

麻风病是由细胞内寄生的麻风分支杆菌引起的慢性传染病。现认为，除了环境因素之外，麻风病的发病和临床结局主要取决于机体免疫反应能力及个体的遗传易感性。国内外已经对病菌本身和宿主免疫反应等方面开展了较多的研究，但对宿主遗传易感性方面的研究刚开始。早已观察到下列现象与宿主的遗传易感性有密切的关系。

关键词：麻风病人体易感基因基因多态性慢性传染病遗传易感性

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抗乙型肝炎病毒联合治疗方案的研究进展

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中华传染病杂志 2003年第2期21卷 157-160页

作者：成军李莉解放军第三○二医院传染病研究所基因治疗研究中心北京100039

干扰素α(IFNα),以拉米夫定、阿地福韦、恩替卡韦为代表的核苷类似物和以胸腺素α1为代表的具有免疫调节作用的细胞因子是目前临床上进行抗乙型肝炎病毒(HBV)治疗的主要药物.这些药物单独用药时在25%-40%患者中取得了不同程度的抗病毒... 详细信息

干扰素α(IFNα),以拉米夫定、阿地福韦、恩替卡韦为代表的核苷类似物和以胸腺素α1为代表的具有免疫调节作用的细胞因子是目前临床上进行抗乙型肝炎病毒(HBV)治疗的主要药物.这些药物单独用药时在25%-40%患者中取得了不同程度的抗病毒治疗效果,但不满意.目前IFNα仍然是慢性乙型肝炎抗病毒治疗的首选药物.鉴于HBV与人免疫缺陷病毒(HIV)在分子生物学特性上有诸多相似之处,不同作用机制的抗HIV药物组成的所谓的"鸡尾酒"疗法在抗HIV治疗中已经发挥了重要作用,而且目前使用的抗HBV的不同药物一起使用的联合治疗和不同药物先后使用的序贯疗法的新型抗病毒治疗方案,将是抗HBV治疗研究的方向.

关键词：抗乙型肝炎病毒联合治疗方案研究进展乙型肝炎干扰素拉米夫定阿地福韦

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乙型肝炎病毒X蛋白反式激活基因克隆化的研究

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中华肝脏病杂志 2003年第1期11卷 5-7页

作者：刘妍成军陆荫英王刚牟劲松李莉张玲霞陈菊梅中国人民解放军第三○二医院传染病研究所基因治疗研究中心北京100039

目的应用抑制性消减杂交(SSH)技术构建乙型肝炎病毒X蛋白(HBX)反式激活基因差异表达的cDNA消减文库,克隆HBX反式激活相关基因。方法以HBX表达质粒pcDNA3.1(-)-X转染HepG2细胞,以空载体pcDNA3.1(-)转染的HepG2细胞为对照;制备转染后的... 详细信息

目的应用抑制性消减杂交(SSH)技术构建乙型肝炎病毒X蛋白(HBX)反式激活基因差异表达的cDNA消减文库,克隆HBX反式激活相关基因。方法以HBX表达质粒pcDNA3.1(-)-X转染HepG2细胞,以空载体pcDNA3.1(-)转染的HepG2细胞为对照;制备转染后的细胞裂解液,提取mRNA并逆转录为cDNA,经Rsa I酶切后,将实验组cDNA分成两组,分别与两种不同的接头衔接,再与对照组cDNA进行两次消减杂交及两次抑制聚合酶链反应(PCR),将产物与T/A载体连接,构建cDNA消减文库,并转染大肠杆菌进行文库扩增,随机挑选克隆PCR扩增后进行测序及同源性分析。结果成功构建人HBX反式激活基因差异表达的cDNA消减文库。文库扩增后得到85个白色克降,进行菌落PCR分析,均得到200～1000bp插入片段。挑取含有插入片段的65个克隆进行测序,并通过生物信息学分析获得19种已知基因序列,和15个未知基因。结论应用SSH技术成功构建了HBX反式激活基因差异表达的cDNA消减文库。该文库的建立为进一步阐明HBX反式调节的靶基因及致肝细胞癌发生的分子生物学机制提供理论依据。

关键词：乙型肝炎病毒X蛋白反式激活基因克隆化研究

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低密度脂蛋白受体的研究进展

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中华肝脏病杂志 2003年第3期11卷 190-192页

作者：成军李莉中国人民解放军第三0二医院传染病研究所基因治疗研究中心北京100039

丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)受体的研究,主要集中在CD81分子和低密度脂蛋白受体(low density li-poprotein-receptor,LDL-R)两种穿膜蛋白分子上[1].最近的研究表明,LDL-R可能是H CV感染肝细胞的受体候选分子[2].

关键词：低密度脂蛋白受体研究进展丙型肝炎病毒

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CCR5-894ΔC等位基因在普通人群和艾滋病病毒亚型感染者中的分布

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中华流行病学杂志 2003年第2期24卷 161-162页

作者：洪卫国徐安龙刘明旭王福生侯静金磊雷周云中山大学生命科学院广州510275 解放军第三○二医院传染病研究所

CCR5既是一种重要趋势化因子受体，也是艾滋病病毒1亚型（HIV-1）CD~（+）_（4）T细胞的协同受体。在粒细胞发育、分化以及艾滋病发生过程中均起重要作用。研究发现CCR5△32等位基因与多种疾病相关。但中国人群CCR5△32等位基因的频率很... 详细信息

CCR5既是一种重要趋势化因子受体，也是艾滋病病毒1亚型（HIV-1）CD~（+）_（4）T细胞的协同受体。在粒细胞发育、分化以及艾滋病发生过程中均起重要作用。研究发现CCR5△32等位基因与多种疾病相关。但中国人群CCR5△32等位基因的频率很低~（[1]）。本研究进一步分析新近发现的CCR5编码区893～894位一个C缺失的等位基因(CCR5-894△C）在我国汉、藏、蒙、回族普通人群和HIV-1感染者中的分布。

关键词： CCR5-894△C 等位基因普通人群艾滋病病毒亚型感染

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SARS与SARS冠状病毒

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现代科学仪器 2003年第4期 26-30页

作者：貌盼勇洪世雯解放军第三O二医院传染病研究所解放军第三O二医院传染病研究所北京100039

严重急性呼吸综合症是一种新的人类急性呼吸道传染病。病原学鉴定表明 ,该病由一种全新的病毒—SARS冠状病毒引起 ,以往在人血清中未发现有相关抗体。呼吸道传染、聚集发病是SARS的流行病学特征。SARS是一种全身损伤性疾病 ,主要靶器官... 详细信息

严重急性呼吸综合症是一种新的人类急性呼吸道传染病。病原学鉴定表明 ,该病由一种全新的病毒—SARS冠状病毒引起 ,以往在人血清中未发现有相关抗体。呼吸道传染、聚集发病是SARS的流行病学特征。SARS是一种全身损伤性疾病 ,主要靶器官为肺、免疫器官和小静脉。大量脱落的肺泡上皮细胞、渗出的炎症细胞及蛋白性渗出物充满肺泡腔内是致死的主要原因。SARS冠状病毒在体外对Vero细胞敏感 ,实验感染猴能引起与人相似的器官病理改变和症状。SARS冠状病毒属于冠状病毒科、冠状病毒属 ,为正链RNA病毒 ,具有与其它冠状病毒相似的形态、理化性质和基因结构。病毒颗粒直径约 70～ 14 0nm ,病毒包膜上有冠状的刺突 ,刺突直径约 2 0～ 4 0nm。基因组含约30 0 0 0个核苷酸 ,序列高度稳定 ,与已知冠状病毒核苷酸序列同源性为 5 0 %～ 6 0 %。并包含一些有生物学意义的独有特征 ,如较短的S蛋白锚定区、一些特定大小和位置的小ORF、单一拷贝的木瓜蛋白酶样蛋白酶等。

关键词： SARS 冠状病毒鉴定特性

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乙型肝炎病毒前S2蛋白结合蛋白基因的筛选

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中华肝脏病杂志 2003年第1期11卷 8-10页

作者：陆荫英李克王琳刘妍王业东成军张玲霞中国人民解放军第三○二医院传染病研究所基因治疗研究中心全军病毒性肝炎防治研究重点实验室北京100039

目的筛选并克隆人肝细胞中与乙型肝炎病毒前S2蛋白(HBV PreS2)相互作用的蛋白质基因。方法用聚合酶链反应(PCR)技术扩增HBV PreS2基因,连接入酵母表达载体pGBKT-7中构建诱饵质粒,转化酵母细胞AH109并在其内表达,然后与转化了人肝cDNA... 详细信息

目的筛选并克隆人肝细胞中与乙型肝炎病毒前S2蛋白(HBV PreS2)相互作用的蛋白质基因。方法用聚合酶链反应(PCR)技术扩增HBV PreS2基因,连接入酵母表达载体pGBKT-7中构建诱饵质粒,转化酵母细胞AH109并在其内表达,然后与转化了人肝cDNA文库质粒的酵母细胞Y187进行配合,在营养缺陷型培养基上进行双重筛选阳性菌落,PCR从中扩增出目的片段并测序,进行生物信息学分析。结果成功克隆出HBVPreS2基因并在酵母细胞中表达,配合后选出既能在4缺(SD/-Trp-Leu-Ade-His)培养基又能在铺有X-α-半乳糖(X-α-gal)的4缺培养基上生长并变成蓝色的真阳性菌落26个,其中含金属硫蛋白A2基因的菌落有12个,细胞色素C氧化酶Ⅱ有1个,细胞色素:P450 IVF亚基2个,细胞色素C氧化酶Ⅳ亚基同功酶1有2个,人血白蛋白3个,。Na+-K+ATP酶β1亚基1个,前清蛋白2个,植物血凝素半乳糖苷结合亚基1个,未知基因2个。结论成功克隆出HBV PreS2蛋白的结合蛋白,为进一步研究HBV PreS2的作用提供了新线索。

关键词：乙型肝炎病毒前S2蛋白结合蛋白基因筛选

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