检索结果-内蒙古大学图书馆

传染病信息 2002年第3期15卷 111-115页

作者：成军张玲霞解放军第三○二医院传染病研究所基因治疗研究中心北京100039 全军病毒性肝炎防治研究重点实验室北京100039

本文旨在介绍国外相关适应症应用拉米夫定的结果和经验,以供国内同行参考。 1 拉米夫定在儿童患者中的应用成年患者拉米夫定用药剂量100mg/d,研究证明增加剂量并不能显著增加拉米夫定的抗病毒疗效,因此没有必要盲目增加用药剂量以提高... 详细信息

本文旨在介绍国外相关适应症应用拉米夫定的结果和经验,以供国内同行参考。 1 拉米夫定在儿童患者中的应用成年患者拉米夫定用药剂量100mg/d,研究证明增加剂量并不能显著增加拉米夫定的抗病毒疗效,因此没有必要盲目增加用药剂量以提高疗效。关于儿童患者的拉米夫定用药剂量。

关键词：拉米夫定肝脏疾病应用治疗

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丙型肝炎病毒结构基因转基因小鼠引起肝脏脂肪变

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世界华人消化杂志 2002年第9期10卷 1022-1026页

作者：成军任进余李莉陆志檬李克洪源陆荫英王刚刘妍张玲霞陈菊梅中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心全军病毒性肝炎防治研究重点实验室北京市100039 上海第二医科大学瑞金医院临床免疫室上海20004

目的:建立持续表达和诱导表达型丙型肝炎病毒(HCV)结构基因(包括核心蛋白和包膜蛋白E1、E2编码基因)的转基因小鼠动物模型,探讨HCV结构基因表达导致肝脏脂肪变的病理改变.方法:以含有近全长HCVcDNA的质粒为模板,通过多聚酶链反应(PCR)... 详细信息

目的:建立持续表达和诱导表达型丙型肝炎病毒(HCV)结构基因(包括核心蛋白和包膜蛋白E1、E2编码基因)的转基因小鼠动物模型,探讨HCV结构基因表达导致肝脏脂肪变的病理改变.方法:以含有近全长HCVcDNA的质粒为模板,通过多聚酶链反应(PCR)技术扩增HCV结构基因的DNA片段(约2.2kb),克隆到真核表达载体pcDNA4HisMas和pMT/BiP/V5-HisA中,分别构建成持续表达型表达载体pcDNA4HisMas-HCVCore-E2和诱导表达型表达载体pMT/BiP/V5-HisA-HCVCore-E2.以限制性内切酶分析和目的DNA片段的核苷酸序列分析,证实构建HCV结构基因的真核表达载体正确无误.以脂质体体外转染COS-7细胞系,利用抗-HCVE2的多克隆抗体进行Westernblot杂交分析,证实转染细胞中有HCVE2蛋白的表达.利用小鼠受精卵细胞核微注射方法,导入线性化表达载体的DNA,利用假孕小鼠的受精卵植入方法,建立了表达HCV结构基因的转基因小鼠模型.对于持续表达型转基因小鼠的死胎、6月龄以及硫酸铜诱导表达型的转基因小鼠模型的肝脏组织,进行HE染色和病理学特征的分析.结果:构建了持续性表达和可诱导性表达型的HCV结构基因表达载体pcDNA4HisMas-HCVCore-E2和pMT/BiP/V5-HisA-HCVCore-E2,体外转染COS-7细胞证实转染细胞中有HCVE2抗原的表达.对于持续表达型转基因小鼠死胎肝脏病理学特征进行分析,发现肝组织尚未分化发育完成,肝内有大量造血细胞,肝细胞空泡变性,单个核细胞聚集现象.对于持续表达HCV结构基因的6月龄转基因小鼠的肝脏进行病理学分析,发现中央静脉区肝细胞小泡型脂肪变性,中央静脉周围细胞溶解坏死,中央静脉明显扩大,少数组织中亦见大泡型脂肪变性.对于可诱导型转基因小鼠的肝脏进行病理学分析,发现肝小叶内中央静脉周围坏死区累及5-10个小叶,周围无淋巴细胞浸润,交界区可见多数肝细胞核异常,或固化,或呈花环状,或溶解为淡蓝色无定形基质.泡浆内残留大量脂肪小泡,肝脏脂肪变与核异常有一移行过程.结论:建立了表达HCV结构基因的转基因小鼠,发现HCV结构基因的转基因小鼠肝脏有典型的脂肪变病理改变,为进一步研究HCV感染引起的慢性丙型肝炎合并脂肪变的特征和机制研究奠定了基础.

关键词：动物模型丙型肝炎病毒结构基因转基因肝脏脂肪变

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苦参素治疗慢性乙型肝炎的临床研究

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中华肝脏病杂志 2002年第4期10卷 280-282页

作者：于岩岩王勤环朱理珉张清波徐道振郭雁宾王兆荃郭树华周霞秋张玲霞北京大学附属第一医院 100034 天津市传染病院上海第一医科大学北京地坛医院(徐道振) 北京佑安医院沈阳中国医科大学附属第二医院重庆医科大学病毒性肝炎研究所上海第二医科大学附属瑞金医院北京中国人民解放军第三0二医院

目的探讨苦参素治疗慢性乙型肝炎的疗效,寻找治疗慢性乙型肝炎的有效方法。方法采用多中心的开放、对照研究,治疗分4组,分别为苦参素、苦参素联合单磷酸阿糖腺苷、干扰素αlb及葡萄糖组,共治疗慢性乙型肝炎患者196例,观察ALT、AST及... 详细信息

目的探讨苦参素治疗慢性乙型肝炎的疗效,寻找治疗慢性乙型肝炎的有效方法。方法采用多中心的开放、对照研究,治疗分4组,分别为苦参素、苦参素联合单磷酸阿糖腺苷、干扰素αlb及葡萄糖组,共治疗慢性乙型肝炎患者196例,观察ALT、AST及病毒标志物的变化。结果治疗结束时,苦参素组、苦参素与单磷酸阿糖腺苷联合治疗组及干扰素组的HBV DNA、HBeAg阴转率、抗-HBe的阳转率及ALT的复常率均较葡萄糖组高,4组HBV DNA的阴转率分别为42.3％、55.8％、40.7％和 2.1％（P<0.01）,HBeAg阴转率分别为36.5％、39.5％、38.9％和10.6％（P<0.05）;抗-HBe的阳转率分别为25.0％、30.2％、25.9％和 6.4％（P<0.05）。ALT的复常率分别为36.5％、41.9、27.8％和8.5％（P< 0.05）。随访12个月,HBV DNA和HBeAg的阴转率及抗-HBe的阳转率在苦参素组、联合治疗组和干扰素组差异无显著性（P>0.05）。总有效率分别为40.8、60.8％和43.1％。结论苦参素或苦参素联合单磷酸阿糖腺苷治疗慢性乙型肝炎有较好的HBV DNA及HBeAg阴转率和抗-HBe的阳转率,其远期抗病毒疗效与干扰素相似。

关键词：苦参素治疗慢性乙型肝炎临床研究单磷酸阿糖腺苷

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树突状细胞诱导免疫效应细胞对BEL-7402的生长抑制

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肝脏 2002年第3期7卷 159-161页

作者：孙早喜王福生孙诚谊邢利和雷周云施明刘明旭刘敬超张冰贵阳医学院附院外科 550004 中国人民解放军第三○二医院传染病研究所全军艾滋病和病毒性肝炎重点实验室

目的　体内外观察多种细胞因子和 (或 )肿瘤相关抗原 (tumorallogenicantigen ,TAA)刺激的正常人树突状细胞 (DC)诱导免疫效应细胞对BEL 740 2的生长抑制。方法　体外分别用人GM CSF、IL 4、TNFα、BEL 740 2TAA和人IL 2刺激正常人DC和... 详细信息

目的　体内外观察多种细胞因子和 (或 )肿瘤相关抗原 (tumorallogenicantigen ,TAA)刺激的正常人树突状细胞 (DC)诱导免疫效应细胞对BEL 740 2的生长抑制。方法　体外分别用人GM CSF、IL 4、TNFα、BEL 740 2TAA和人IL 2刺激正常人DC和去DC的单个核细胞 (免疫效应细胞 ) ,5～ 6d后混合培养DC和免疫效应细胞 1～ 2d。体外实验时效应细胞分无DC刺激组 (A0组 )、细胞因子培养和DC刺激组 (A1组 )、细胞因子和TAA培养的DC刺激组 (A2组 )。体内实验时 ,裸鼠分为 3组 :预防组 (Ⅱ ) ,于接种BEL 740 2前 1～ 2d天给DC激活的免疫效应细胞 ;治疗组 (Ⅲ ) ,待全部裸鼠移植瘤长出时给DC激活的免疫效应细胞 ;组Ⅱ、Ⅲ于给予DC激活免疫效应细胞后再间断给予DC培养上清液 3～6d。对照组 (Ⅰ )给等量的 164 0培养液。结果　多细胞因子体外可刺激DC发生扩增并高表达B7分子。体外实验中最大杀伤效率 :A2组为 81% ,A1组为 68.1% ,A0组为 3 .5 %。体内实验中 :组Ⅰ和组Ⅲ第 12d时 12例全部发生移植瘤 ;组Ⅱ观察 3 0d时 ,6例有 1例发生移植瘤 ,观察 45d时 ,仍只有 1例发生移植瘤 ,组Ⅰ、Ⅱ相差有非常显著意义 (P =0 .0 0 466) ;在给予DC激活的免疫效应细胞后的第 45d处死所有裸鼠并称瘤体的重量 ,组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ比较相差有非常?

关键词：免疫效应细胞树突状细胞单个核细胞原发性肝癌免疫治疗

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IL-12和IL-18表达质粒与HBcAg核酸疫苗联合接种小鼠的免疫应答观察

IL-12和IL-18表达质粒与HBcAg核酸疫苗联合接种小鼠的免疫应答观察

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中华医学会第十一次全国病毒性肝炎及肝病学术会议

作者：黄祖瑚吴欣成军邢益平董菁李军卢山南京医科大学第一附属医院感染病科解放军第三○二医院传染病研究所基因治疗研究中心美国马萨诸塞大学医学中心基因免疫研究室

特异性细胞免疫功能低下是慢性乙型肝炎的主要致病机制之一.动物实验结果表明,HbsAg和HbcAg核酸疫苗均能刺激宿主产生一定强度的特异性免疫应答.有报道以细胞因子为佐剂可以提高核酸疫苗的免疫应答效能.本文选用同属Th1型细胞因子的IL-1... 详细信息

特异性细胞免疫功能低下是慢性乙型肝炎的主要致病机制之一.动物实验结果表明,HbsAg和HbcAg核酸疫苗均能刺激宿主产生一定强度的特异性免疫应答.有报道以细胞因子为佐剂可以提高核酸疫苗的免疫应答效能.本文选用同属Th1型细胞因子的IL-12和(或)IL-18表达质粒与HbcAg核酸疫苗联合免疫小鼠,IL-12和IL-18表达质粒对HbcAg核酸疫苗所诱导的特异性免疫应答能产生增强效应,尤以对特异性CTL活性的增强作用为著.

关键词：乙型肝炎病毒免疫学 IL-12 IL-18 HBcAg核酸疫苗

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基因芯片技术的原理及其在肝病研究中的应用

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中华肝脏病杂志 2002年第4期10卷 302-302页

作者：成军解放军第三0二医院传染病研究所基因治疗研究中心全军病毒性肝炎防治研究重点实验室

基因芯片(gene chip),即DNA 芯片(DNA chip)代表的微阵列(microar-ray)技术,是集成了成千上万的网络状密集排列的基因探针,能够在同一时间内杂交分析大量的基因,迅速读取生命相关的基因信息的一种高通量分析技术.这种技术在基因诊断、... 详细信息

基因芯片(gene chip),即DNA 芯片(DNA chip)代表的微阵列(microar-ray)技术,是集成了成千上万的网络状密集排列的基因探针,能够在同一时间内杂交分析大量的基因,迅速读取生命相关的基因信息的一种高通量分析技术.这种技术在基因诊断、基因表达、基因组研究、发现新基因及各种病原体的研究中具有广泛的应用前景.在肝脏疾病的研究中也具有十分重要的意义.

关键词：基因芯片技术肝病研究应用 PCR扩增分子生物学

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硕大利什曼原虫激活蛋白激酶C受体的基因克隆与序列分析

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2001年第6期19卷 373-374页

作者：成军夏小兵王刚刘妍钟彦伟王琳杨继珍解放军第三○二医院传染病研究所基因治疗研究中心北京100039

激活蛋白激酶C受体(receptor for activated protem ***)基因家族的成员在目前已知的所有生物类型中普遍存在,在利什曼原虫体内也不例外[1].利什曼原虫表达的RACK蛋白具有很强的抗原性,能够诱导感染机体的免疫系统,产生针对RACK蛋白很... 详细信息

激活蛋白激酶C受体(receptor for activated protem ***)基因家族的成员在目前已知的所有生物类型中普遍存在,在利什曼原虫体内也不例外[1].利什曼原虫表达的RACK蛋白具有很强的抗原性,能够诱导感染机体的免疫系统,产生针对RACK蛋白很强的细胞免疫应答反应[2].为了研究硕大利什曼原虫RACK的基因结构特点,及其作为候选疫苗的应用前景,我们从体外培养的硕大利什曼原虫的基因组DNA中,应用多聚酶链反应(PCR)技术扩增获得了该原虫的RACK基因,并对该基因和编码产物的序列进行了分析.

关键词：利什曼原虫蛋白激酶C受体基因克隆多聚酶链反应 RACK基因

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检测抗HIV1/2型抗体的双抗原夹心方法的建立及其试剂盒的研制

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中华实验和临床病毒学杂志 2001年第1期15卷 43-46页

作者：侯俊何红霞貌盼勇洪世雯胡燕沈宏辉杨松涛北京解放军第三○二医院传染病研究所病毒室 100039 军事医学科学院科技部

目的　建立更敏感的检测人免疫缺陷病毒 (HIV)抗体的方法 ,并研制检测试剂盒。方法　根据HIV 1/2型的基因序列及其所编码氨基酸结构 ,采用固相法合成了HIV 1型的 gp41.1、gp41.2、gp12 0、p2 4和HIV 2型的 gp36五条多肽 ,混合包被酶标... 详细信息

目的　建立更敏感的检测人免疫缺陷病毒 (HIV)抗体的方法 ,并研制检测试剂盒。方法　根据HIV 1/2型的基因序列及其所编码氨基酸结构 ,采用固相法合成了HIV 1型的 gp41.1、gp41.2、gp12 0、p2 4和HIV 2型的 gp36五条多肽 ,混合包被酶标板作为固相抗原。用辣根过氧化物酶标记以上多肽抗原作为标记物 ,建立检测血清中抗HIV 1/2抗体的双抗原夹心ELISA法。同时 ,应用该方法制备检测HIV抗体的试剂盒 ,并检测三批中国卫生部药品和生物制品检定所HIV诊断试剂国家参比品。结果　建立了检测HIV 1/2抗体的双抗原夹心法。用检定所参比品检测 ,该方法特异性、灵敏度均为 10 0 % ,变异系数小于 10 %。与间接法相比较其灵敏度、特异性均高于间接法 (P<0 0 5 )。检测 2 10份其他病种患者血清均为阴性。与GBI公司的HIV抗体诊断试剂比较 ,检测 40份卫生部药品和生物制品检定所提供的质控参比品 (阳性 2 0份 ,阴性 2 0份 ) ,GBI试剂阴、阳性符合率及总符合率分别为 10 0 % (2 0 /2 0 )、85 % (17/2 0 )及 92 5 % (37/4 0 ) ,而应用该方法所研制的诊断试剂盒阴、阳性符合率及总符合率为 10 0 %。该试剂已通过国家卫生部质检。与雅培公司HIV诊断试剂比较检测 90份献血员血清和 88份HIV 1/2型感染者血清 ,符合率为 10 0 %。?

关键词：双抗原夹心法 HIV 合成肽抗原酶联免疫吸附测定试剂盒

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杜氏利什曼原虫蛋白磷酸酶-2C的基因克隆化与序列分析

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中国人兽共患病杂志 2001年第3期17卷 37-39页

作者：成军夏小兵王刚刘妍钟彦伟王琳杨继珍解放军第三○二医院传染病研究所基因治疗研究中心

目的　克隆杜氏利什曼原虫 (Leishmaniadonovani,Ld) 1S株蛋白磷酸酶 2C(PP2C)的编码基因 ,为应用这种编码T细胞抗原的基因进行基因疫苗研究奠定基础。方法　体外培养杜氏利什曼原虫 1S株无鞭毛体 ,常规方法从虫体提取制备基因组DNA。... 详细信息

目的　克隆杜氏利什曼原虫 (Leishmaniadonovani,Ld) 1S株蛋白磷酸酶 2C(PP2C)的编码基因 ,为应用这种编码T细胞抗原的基因进行基因疫苗研究奠定基础。方法　体外培养杜氏利什曼原虫 1S株无鞭毛体 ,常规方法从虫体提取制备基因组DNA。以夏科氏利什曼原虫 (Leishmaniachagasi,Lc)的PP2C基因序列为参照 ,设计并合成利什曼原虫PP2C基因序列特异性的引物。结果　以杜氏利什曼原虫的基因组为模板 ,利用多聚酶链反应 (PCR)技术 ,扩增获得了杜氏利什曼原虫PP2C的全长编码基因。基因序列测定结果表明 ,杜氏利什曼原虫 1S株PP2C基因序列长度为 1317bp ,开放读码框架由 12 2 1bp组成 ,编码产物为 40 6个氨基酸残基。获得的杜氏利什曼原虫 1S株的PP2C基因与来源于夏科氏利什曼原虫的PP2C氨基酸残基序列的同源性为 95 % (387/ 40 6 )。结论　本研究克隆了杜氏利什曼原虫的PP2C基因。

关键词：杜氏利什曼原虫蛋白磷酸酶2C 基因疫苗 T细胞抗原基因克隆化序列分析

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亚马逊利什曼原虫无鞭毛体蛋白基因的克隆化与序列分析

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中国地方病学杂志 2001年第3期20卷 175-177页

作者：成军钟彦伟刘妍杨继珍董菁解放军第三二医院传染病研究所基因治疗研究中心北京100039

目的　克隆亚马逊利什曼原虫 (***)无鞭毛体蛋白 (am astin)的编码基因 ,并对其同源基因序列进行分析。方法　根据我们首次克隆的硕大利什曼原虫 (L.m ajor)无鞭毛体蛋白的编码基因 ,设计并合成核苷酸序列特异性引物 ,以亚马逊利什曼原... 详细信息

目的　克隆亚马逊利什曼原虫 (***)无鞭毛体蛋白 (am astin)的编码基因 ,并对其同源基因序列进行分析。方法　根据我们首次克隆的硕大利什曼原虫 (L.m ajor)无鞭毛体蛋白的编码基因 ,设计并合成核苷酸序列特异性引物 ,以亚马逊利什曼原虫基因组 DNA为模板 ,以多聚酶链反应 (PCR)技术扩增无鞭毛体蛋白的编码基因 DNA片段 ,并进行核苷酸序列测定以及核苷酸序列的同源性分析。结果　克隆了亚马逊利什曼原虫无鞭毛体蛋白的编码基因 ,含有单一开放读框 ,长度为 5 5 2 bp,编码的无鞭毛体蛋白由 183个氨基酸残基 (aa)组成。亚马逊利什曼原虫与硕大利什曼原虫无鞭毛体蛋白编码基因之间高度同源 ,在核苷酸与氨基酸残基序列水平上的同源性分别为 96 %和 94%。

关键词：利什曼原虫无鞭毛体基因克隆化序列分析

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