检索结果-内蒙古大学图书馆

中华肝脏病杂志 2006年第2期14卷 81-85页

作者：王琳成军李克洪源解放军第三○二医院传染病研究所病毒性肝炎研究室北京100039

目的研究丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白6号结合蛋白基因(Hcbp6)序列表达的调控机制。方法根据软件对启动子的预测,选取翻译起始密码子ATG上游3256bp及下游180bp的DNA序列, 分成5段活性区域,分别以聚合酶链反应技术(PCR),肝母细胞瘤细胞系He... 详细信息

目的研究丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白6号结合蛋白基因(Hcbp6)序列表达的调控机制。方法根据软件对启动子的预测,选取翻译起始密码子ATG上游3256bp及下游180bp的DNA序列, 分成5段活性区域,分别以聚合酶链反应技术(PCR),肝母细胞瘤细胞系HepG2基因组DNA为模板,扩增该启动子DNA片段,将其克隆至pCAT3中,构建pCAT3-Hcbp6-p报告基因表达载体,将该质粒分别转染HepG2、NIH3T3细胞,用酶联免疫吸附法检测报告基因编码产物氯霉素乙酰转移酶(CAT)的表达活性。结果发现质粒pCAT3-Hcbp6-1066p和pCAT3-Hcbp6-240p能够指导CAT的表达,其平均吸光度值(A)是pCAT3-basic对照质粒的3.1倍和6.4倍。结论本研究克隆的启动子DNA序列具有转录活性, 这一结果为研究Hcbp6的调节机制,进一步阐明HCV核心蛋白的作用机制奠定了基础。

关键词：肝炎病毒丙型启动子 Hcbp6

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人类肠道病毒分子生物学分型鉴定方法的建立及应用

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中华实验和临床病毒学杂志 2006年第2期20卷 69-71页

作者：侯文俊杨健洋胡燕孙颖貌盼勇解放军军医进修学院北京100039 解放军第三二医院传染病研究所病毒研究室

目的建立人类肠道病毒(HEV)分子生物学分型鉴定方法,用于临床分离肠道病毒的分型鉴定。方法根据已知各型别人类肠道病毒基因的核苷酸序列和文献资料,分别合成HEV种属特异性和分型鉴定引物;提取病毒RNA,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)... 详细信息

目的建立人类肠道病毒(HEV)分子生物学分型鉴定方法,用于临床分离肠道病毒的分型鉴定。方法根据已知各型别人类肠道病毒基因的核苷酸序列和文献资料,分别合成HEV种属特异性和分型鉴定引物;提取病毒RNA,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增病毒cDNA,通过琼脂糖凝胶电泳和核苷酸序列分析,鉴定病毒并分型,并与血清中和试验相互验证。结果采用种属特异性引物鉴定18株疑似HEV毒株,其中17株阳性;型特异性引物鉴定结果:18株病毒中4株为科萨奇病毒A24型,3株为科萨奇病毒B3型;科萨奇病毒B2、A9、A15型、埃可病毒3、6、7、9、11、14、33型和鼻病毒9型各1株,分型结果与中和试验相符。结论建立的人类肠道病毒分子生物学分型鉴定方法,具有特异性强、敏感性高、快速简便等优点,可以直接鉴定并分型诊断人类肠道病毒感染,适用于人类肠道病毒感染的实验室诊断和流行病学研究。

关键词：肠道病毒属分子诊断技术逆转录聚合酶链反应

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传染性非典型肺炎(SARS)患者CD35基因多态性特点和表达水平与发病进程的相关性研究

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中华医学杂志 2004年第3期84卷 235-236页

作者：褚福亮王福生徐东平金磊解放军第三○二医院传染病研究所北京100039

人体红细胞表面表达的CD35分子是补体C3b受体,又称之为CR1.近年来发现CD35基因中发生L型点突变可使红细胞表达CD35分子减少,尤其是在慢性病毒感染患者(如艾滋病、丙型肝炎等)中,红细胞表面CD35表达水平有不同程度的降低,而且此变化与病... 详细信息

人体红细胞表面表达的CD35分子是补体C3b受体,又称之为CR1.近年来发现CD35基因中发生L型点突变可使红细胞表达CD35分子减少,尤其是在慢性病毒感染患者(如艾滋病、丙型肝炎等)中,红细胞表面CD35表达水平有不同程度的降低,而且此变化与病情的进展相关[1,2].在传染性非典型肺炎(SARS)急性感染和发病过程中,患者CD35基因型有何特征?红细胞表面CD35分子有无变化?与疾病的进展之间有何联系?为了回答这些问题,我们分析了北京地区54例SARS患者CD35的基因多态性、在红细胞上表达水平,并据临床资料进一步分析了CD35水平的改变与病程进展之间的关系。

关键词：传染性非典型肺炎 CD35基因基因多态性发病进程相关性急性感染

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传染性非典型肺炎的病原学鉴定及其意义

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中华流行病学杂志 2003年第5期24卷 344-346页

作者：王福生解放军第三○二医院传染病研究所北京100039

2002年11月份在我国广东省最先发现临床上类似肺炎的病例。2003年1月份，我国专家考虑到此病与我国法定的34种传染病不同，确定此为"非典型肺炎"(atypical pneumonias)。由于该病具有起病急、传播快、人群普遍易感和病死率较... 详细信息

2002年11月份在我国广东省最先发现临床上类似肺炎的病例。2003年1月份，我国专家考虑到此病与我国法定的34种传染病不同，确定此为"非典型肺炎"(atypical pneumonias)。由于该病具有起病急、传播快、人群普遍易感和病死率较高等特点，特别是该病很快在我国香港以及世界上20多个国家和地区流行，加上当时病因尚未完全明确，所以引起全球民众、各国政府和科研人员的高度关注。到3月12日，世界卫生组织（WHO）就非典型肺炎向全球发布了卫生警报，并将此病命名为"严重急性呼吸道综合征"( severe acute respiratory syndrome,SARS) 1'-31。近2个多月以来，由WHO负责牵头，组织全世界13个实验室的科研和医务人员合作攻关，通过应用经典的病毒分离和培养、血清学分析和现代分子遗传学技术，分离并鉴定出SARS的主要病原体为一种新型的冠状病毒，后者既是SARS发病的原因，也是疾病进展的前提［L4-,1。现就SASR流行最主要的特点和病原学研究进展等相关问题简介如下。

关键词：传染性非典型肺炎病原学鉴定

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利用丙酮酸脱氢酶复合物原核表达产物检测原发性胆汁性肝硬变患者血清自身抗体

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中华检验医学杂志 2004年第5期27卷 318-321页

作者：舒翠莉赵军李靖李伯安高蓉郑宇程云解放军第三○二医院传染病研究所免疫室北京100039

目的建立一种利用重组表达的丙酮酸脱氢酶复合物E2亚单位(PDC-E2)和E3结合蛋白(PDC-E3BP)检测原发性胆汁肝硬变(PBC)患者血清的方法。方法以适当的条件诱导PDC-E2和PDC-E3BP表达质粒pExSecI/PDC-E2和pET28/E3BP,利用表达产物通过酶联... 详细信息

目的建立一种利用重组表达的丙酮酸脱氢酶复合物E2亚单位(PDC-E2)和E3结合蛋白(PDC-E3BP)检测原发性胆汁肝硬变(PBC)患者血清的方法。方法以适当的条件诱导PDC-E2和PDC-E3BP表达质粒pExSecI/PDC-E2和pET28/E3BP,利用表达产物通过酶联免疫吸附试验检测PBC、正常人及其他原因肝硬变患者血清,并与欧盟的检测试剂盒比较。结果显示PDC-E2和PDC-E3BP表达产物检测PBC患者血清中的自身抗体阳性率为93.3％,与欧盟试剂盒比较,总符合率为98.03％。结论建立了利用重组表达丙酮酸脱氢酶复合物E2亚单位和E3结合蛋白检测PBC患者血清中自身抗体的方法,且获得PDC-E2和PDC-E3BP的高效表达产物。

关键词：丙酮酸脱氢酶复合物原核表达产物检测原发性胆汁性肝硬变血清自身抗体

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肝脏细胞移植的基础与应用研究现状与展望

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中华医学杂志 2003年第10期83卷 890-893页

作者：张政王福生解放军第三○二医院传染病研究所北京100039

自1963年，Starzl在美国成功实施第一例人体肝脏移植手术以来，肝移植已在世界各地广泛开展并取得了巨大进步。但是，供器官短缺、肝移植后免疫抑制剂带来的巨大毒副作用以及高额的治疗费用严重限制了肝移植医学的发展。肝细胞移植（liv... 详细信息

自1963年，Starzl在美国成功实施第一例人体肝脏移植手术以来，肝移植已在世界各地广泛开展并取得了巨大进步。但是，供器官短缺、肝移植后免疫抑制剂带来的巨大毒副作用以及高额的治疗费用严重限制了肝移植医学的发展。肝细胞移植（liver cell transplantation, LCT）为病损肝脏的细胞重建及衰竭肝脏的功能恢复提供了一种全新的治疗策略。肝细胞移植以其移植技术简单、可重复进行、对受体影响小以及一肝多用、免疫排斥反应弱与价值相对低廉等诸多优点引起了广大学者的关注。

关键词：肝脏细胞移植基础研究现状应用研究

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丙型肝炎病毒非结构蛋白5A反式激活蛋白6的亚细胞定位研究

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中华实验和临床病毒学杂志 2008年第1期22卷 63-64页

作者：王建军赵平靳雪源成军卿松丁宁解放军第三О二医院北京100039 北京市地坛医院传染病研究所

目的研究非结构蛋白5A反式激活蛋白6（Ns5ATP6）基因在细胞内的表达及表达蛋白的亚细胞定位。方法构建HBeAgTP基因的绿色荧光蛋白表达质粒pEGFP-Cl-NS5ATP6，pEGFP-Cl-NSSATP6转染HepG2细胞，24h后荧光显微镜下观察蛋白表达的亚细胞定... 详细信息

目的研究非结构蛋白5A反式激活蛋白6（Ns5ATP6）基因在细胞内的表达及表达蛋白的亚细胞定位。方法构建HBeAgTP基因的绿色荧光蛋白表达质粒pEGFP-Cl-NS5ATP6，pEGFP-Cl-NSSATP6转染HepG2细胞，24h后荧光显微镜下观察蛋白表达的亚细胞定位。结果成功构建出NS5ATP6基因绿色荧光蛋白表达质粒pEGFP-Cl-NS5ATP6，其表达的蛋白亚细胞定位于细胞质。结论NS5ATP6基因可表达蛋白，其表达蛋白亚细胞定位于细胞质。

关键词：丙型肝炎病毒非结构蛋白5A 反式激活蛋白6 亚细胞定位

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乙型肝炎病毒慢性感染的临床免疫学检测和研究的重要性

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中华检验医学杂志 2007年第10期30卷 1085-1089页

作者：王福生陈威巍解放军第三○二医院传染病研究所北京100039

免疫系统在 HBV 慢性感染的病程和转归中发挥着重要作用。慢性乙型肝炎(CHB)患者体内免疫功能异常,主要表现为抗 HBV 的特异性细胞免疫功能低下,同时伴有不同程度的树突状细胞(DC)、CD4辅助性 T 细胞(Th)、CD_8细胞毒性 T 细胞(CTL)功... 详细信息

免疫系统在 HBV 慢性感染的病程和转归中发挥着重要作用。慢性乙型肝炎(CHB)患者体内免疫功能异常,主要表现为抗 HBV 的特异性细胞免疫功能低下,同时伴有不同程度的树突状细胞(DC)、CD4辅助性 T 细胞(Th)、CD_8细胞毒性 T 细胞(CTL)功能损伤,调节性 T 细胞(Treg)细胞数量增加以及 PD-L1/PD-1抑制途径异常活跃等方面。同时,临床免疫学检测和研究对于 CHB 病程各阶段的免疫状态的判断,指导抗病毒治疗和评价疗效以及建立新的免疫治疗策略都有重要意义。

关键词：肝炎病毒乙型树突状细胞调节性T细胞

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严重急性呼吸综合征患者的临床免疫学和病毒学变化特点及其相关致病机制

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中华传染病杂志 2003年第4期21卷 241-245页

作者：李永纲王福生王敏范荣赵敏辛邵杰张政徐东平金磊刘敬超解放军第三○二医院传染病研究所北京100039

目的　研究严重急性呼吸综合征 (SARS)患者临床免疫学和病毒学特点 ,研究SARS发病的免疫学相关的机制 ,并评价其与病程的关系。方法　我们随机选择 3 3例SARS患者 ,对他们临床发病全过程进行了观察 ,并应用流式细胞技术、PCR方法、ELIS... 详细信息

目的　研究严重急性呼吸综合征 (SARS)患者临床免疫学和病毒学特点 ,研究SARS发病的免疫学相关的机制 ,并评价其与病程的关系。方法　我们随机选择 3 3例SARS患者 ,对他们临床发病全过程进行了观察 ,并应用流式细胞技术、PCR方法、ELISA等方法 ,对患者的外周血T细胞亚群、DC细胞亚群、应用RT PCR和ELISA方法对血浆中病毒的基因和抗体进行了动态分析。并分析患者发病过程中上述免疫学指标的动态变化及其与SARS病程进展之间的关系。同时对 2 5名健康志愿者进行检测 ,以分析相关的数据作为对照。结果　与健康人群相比 ,进展期的轻症SARS患者外周血CD4T淋巴细胞、CD8T淋巴细胞和自然杀伤 (NK )细胞水平分别为 0 .3 67± 0 .3 0 5、0 .3 12±0 .2 77、0 .2 0 7± 0 .159。重症患者分别为 0 .2 62± 0 .175、0 .2 3 2± 0 .184、0 .189± 0 .157。特别显著的是SARS发病过程中I型树突状细胞 (DC1)和Ⅱ型树突状细胞 (DC2 )数量降低幅度最大 ,轻症患者DC1和DC2细胞数量分别为 1.3± 0 .5、1.0± 0 .2 ,而重症患者外周血的DC2为 0 .0 56± 0 .0 7。在恢复期 ,外周血中的CD4和CD8淋巴细胞接近正常水平的 80 %～ 85%之间 ,但是NK细胞仅为正常水平的65%左右。而DC1细胞上升的幅度最大 ,到第 7周达到 2 0 .461± 2 .

关键词：严重急性呼吸综合征临床免疫学病毒学 SARS 致病机制流式细胞技术

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乙型肝炎病毒HBeAg与AK026018基因表达产物的结合能力

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中华传染病杂志 2006年第1期24卷 12-14页

作者：李伯安刘岩李靖舒翠莉何卫平戚扬侯俊程云解放军第三○二医院传染病研究所北京100039

目的验证乙型肝炎病毒HBeAg与AK026018基因表达蛋白在细胞内及细胞外的结合作用。方法应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,从HepG2细胞中扩增AK026018基因序列,构建真核表达载体,与HBeAg真核表达载体共转染营养缺陷酵母细胞,观察生长... 详细信息

目的验证乙型肝炎病毒HBeAg与AK026018基因表达蛋白在细胞内及细胞外的结合作用。方法应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,从HepG2细胞中扩增AK026018基因序列,构建真核表达载体,与HBeAg真核表达载体共转染营养缺陷酵母细胞,观察生长情况。同时进一步应用网织红细胞裂解体外翻译及免疫共沉淀系统,验证AK026018蛋白与HBeAg间的确切结合作用。结果经限制性内切酶分析和DNA序列测定构建的AK026018重组表达载体正确。共转染后的酵母细胞在营养缺陷培养基中生长良好。体外免疫共沉淀实验可见特异放射自显影带。结论HBeAg与AK026018基因编码蛋白在细胞内及细胞外均能相互结合,推测该分子在HBV的致病过程中起着重要作用。

关键词：肝炎e抗原,乙型 AK026018基因酵母菌沉淀

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