检索结果-内蒙古大学图书馆

中华实验和临床病毒学杂志 2006年第2期20卷 66-68页

作者：孙颖辛绍杰沈宏辉胡燕徐东平朱虹朱雷端青貌盼勇解放军军医进修学院北京100853 解放军第三二医院传染病研究所病毒研究室军事医学科学院微生物流行病研究所

目的随访监测确诊SARS患者,研究SARS-CoV、新型呼肠病毒和脊髓灰质炎病毒在患者体内的存在状况及与SARS的可能相关性。方法采集8例SARS患者痊愈2年后的咽拭子、唾液(或痰液)、尿液、血清及连续3天的粪便标本,用RT-PCR的方法分别扩增SARS... 详细信息

目的随访监测确诊SARS患者,研究SARS-CoV、新型呼肠病毒和脊髓灰质炎病毒在患者体内的存在状况及与SARS的可能相关性。方法采集8例SARS患者痊愈2年后的咽拭子、唾液(或痰液)、尿液、血清及连续3天的粪便标本,用RT-PCR的方法分别扩增SARS-CoV、呼肠病毒和脊髓灰质炎病毒;采用ELISA的方法检测患者血清中的SARS-CoV抗体和脊髓灰质炎病毒IgG抗体。结果8例患者中有4例的粪便中脊髓灰质炎病毒RNA阳性,均为Sabin1毒株,在5′端非编码区的第480nt及VP1蛋白编码区的第2795nt两个重要的减毒位点上均发生了回复突变;SARS-CoV和新型呼肠病毒均阴性。对照组标本中均未检测到上述三种病毒。3例随访患者血清中SARS-CoV抗体阳性;4例患者血清中脊髓灰质炎IgG抗体阳性。25例健康体检者的血清中SARS-CoV抗体均阴性,其中23例的血清中脊髓灰质炎病毒抗体阳性。结论SARS患者痊愈2年后的血清中特异性脊髓灰质炎病毒抗体与健康人有显著差异,其粪便标本中仍有较高的脊髓灰质炎病毒阳性率,而且病毒核酸在两个重要的减毒位点上均发生了回复突变。

关键词：严重急性呼吸综合征脊髓灰质炎病毒基因

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自体细胞因子诱导杀伤细胞治疗HBV感染肝硬变患者的临床疗效分析

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中华实验和临床病毒学杂志 2007年第1期21卷 64-66页

作者：苏海滨李捍卫赵洪兰施明张冰汤紫荣雷周云王慧芬王福生解放军第三0二医院感染十三科北京100039 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所解放军第三0二医院传染病研究所生物治疗研究中心

目的观察自体细胞因子诱导杀伤细胞（CIK细胞）治疗HBV DNA阳性肝硬化患者的近期疗效。方法 33例HBV DNA阳性肝硬化患者给予CIK细胞治疗，在体外培养前后以及回输体内后检测CD3^＋、CD3^＋ CD4^＋、CD3^＋ CD8^＋、CD3^＋ CD56^＋、CD... 详细信息

目的观察自体细胞因子诱导杀伤细胞（CIK细胞）治疗HBV DNA阳性肝硬化患者的近期疗效。方法 33例HBV DNA阳性肝硬化患者给予CIK细胞治疗，在体外培养前后以及回输体内后检测CD3^＋、CD3^＋ CD4^＋、CD3^＋ CD8^＋、CD3^＋ CD56^＋、CD25^＋细胞以及mDC和pDC。比较治疗前后病毒学指标及肝脏功能的变化。结果培养结束以及回输体内后，CD3^＋细胞、CD3^＋ CD8^＋细胞、CD3^＋ CD56^＋细胞较培养前显著升高，mDC和pDC在回输后也明显增高。12例患者HBV DNA阴转，4例患者拷贝数下降大于2个log。在14例HBeAg阳性患者中有10例阴转，2例出现HBeAb转换。肝脏功能较治疗前有所好转。所有患者均能耐受治疗。结论 CIK细胞可明显提高免疫效应细胞数量，具有一定的抗病毒效应作用，毒副作用低。

关键词：细胞系细胞因子类肝硬化肝炎,乙型

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肝脏疾病的导向治疗

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中华肝脏病杂志 2000年第6期8卷 374-375页

作者：成军解放军第三O二医院传染病研究所基因治疗研究中心

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抗炎保肝治疗在肝病临床中的应用与地位

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中华肝脏病杂志 2008年第9期16卷 714-716页

作者：张玲霞高志良扈晓宇范振平曲建慧罗生强解放军第三0二医院传染病研究所病毒性肝炎研究室北京100039 中山大学附属第三医院感染科成都中医药大学附属医院

肝脏炎症坏死及其所致的肝纤维化是疾病进展的主要病理学基础，因此，如能找出病因，在对因治疗的基础上有效控制肝组织炎症，有可能减少肝细胞破坏和延缓肝纤维化的发展。如慢性乙型肝炎在免疫清除期，应用干扰索仅及核苷类似物就能有... 详细信息

肝脏炎症坏死及其所致的肝纤维化是疾病进展的主要病理学基础，因此，如能找出病因，在对因治疗的基础上有效控制肝组织炎症，有可能减少肝细胞破坏和延缓肝纤维化的发展。如慢性乙型肝炎在免疫清除期，应用干扰索仅及核苷类似物就能有效抑制病毒，从病原学控制的角度阻止病毒性肝炎肝组织炎症的发生。而抗炎保肝治疗只是其综合治疗的一部分，须在病原学或特异性治疗的基础上适当选用抗炎保肝药物。

关键词：肝病药物疗法抗炎保肝

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丙型肝炎病毒包膜蛋白E2可溶性单链可变区抗体在大肠杆菌中的表达

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中国病毒学 2001年第3期16卷 220-223页

作者：成军施双双钟彦伟夏小兵王刚王琳刘妍陈菊梅解放军第三○二医院传染病研究所基因治疗研究中心北京100039

利用分子生物学技术 ,构建表达丙型肝炎病毒 (HCV)包膜蛋白E2的人源单链可变区抗体 (ScFv)的原核表达载体 ,并在大肠杆菌JM10 9中表达可溶性的HCV E2 ScFv。以重组的HCVE2蛋白为包被抗原 ,利用噬菌体抗体库的表面展示技术 ,筛选到含有H... 详细信息

利用分子生物学技术 ,构建表达丙型肝炎病毒 (HCV)包膜蛋白E2的人源单链可变区抗体 (ScFv)的原核表达载体 ,并在大肠杆菌JM10 9中表达可溶性的HCV E2 ScFv。以重组的HCVE2蛋白为包被抗原 ,利用噬菌体抗体库的表面展示技术 ,筛选到含有HCV E2 ScFv基因的噬菌体克隆 ,从噬菌体抗体阳性克隆中提取质粒 ,经Ncol/NotI酶切鉴定后 ,该ScFv基因由 75 0bp组成 ,将其亚克隆到pCANTAB5E载体中 ,转化大肠杆菌JM10 9,提取质粒进行DNA序列测定 ,符合ScFv的基因结构特点。IPTG诱导转化的大肠杆菌JM10 9,在其培养上清中获得了可溶性HCVE2单链可变区抗体的表达。酶联免疫吸附法 (ELISA)证实表达的HCV E2 ScFv具有与重组HCVE2蛋白的反应活性和特异性 ,对转化的JM10 9大肠杆菌上清中表述的HCV E2 ScFv进行聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE) ,证实表达的HCV E2 ScFv的分子量为 2 8kD。为应用HCV E2 ScFv进行肝组织免疫组织化学和细胞内免疫基因治疗研究奠定了基础。

关键词：丙型肝炎病毒包膜蛋白单链可变区抗体表达大肠杆菌

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乙型肝炎病毒X蛋白反式激活基因克隆化的研究

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中华肝脏病杂志 2003年第1期11卷 5-7页

作者：刘妍成军陆荫英王刚牟劲松李莉张玲霞陈菊梅中国人民解放军第三○二医院传染病研究所基因治疗研究中心北京100039

目的应用抑制性消减杂交(SSH)技术构建乙型肝炎病毒X蛋白(HBX)反式激活基因差异表达的cDNA消减文库,克隆HBX反式激活相关基因。方法以HBX表达质粒pcDNA3.1(-)-X转染HepG2细胞,以空载体pcDNA3.1(-)转染的HepG2细胞为对照;制备转染后的... 详细信息

目的应用抑制性消减杂交(SSH)技术构建乙型肝炎病毒X蛋白(HBX)反式激活基因差异表达的cDNA消减文库,克隆HBX反式激活相关基因。方法以HBX表达质粒pcDNA3.1(-)-X转染HepG2细胞,以空载体pcDNA3.1(-)转染的HepG2细胞为对照;制备转染后的细胞裂解液,提取mRNA并逆转录为cDNA,经Rsa I酶切后,将实验组cDNA分成两组,分别与两种不同的接头衔接,再与对照组cDNA进行两次消减杂交及两次抑制聚合酶链反应(PCR),将产物与T/A载体连接,构建cDNA消减文库,并转染大肠杆菌进行文库扩增,随机挑选克隆PCR扩增后进行测序及同源性分析。结果成功构建人HBX反式激活基因差异表达的cDNA消减文库。文库扩增后得到85个白色克降,进行菌落PCR分析,均得到200～1000bp插入片段。挑取含有插入片段的65个克隆进行测序,并通过生物信息学分析获得19种已知基因序列,和15个未知基因。结论应用SSH技术成功构建了HBX反式激活基因差异表达的cDNA消减文库。该文库的建立为进一步阐明HBX反式调节的靶基因及致肝细胞癌发生的分子生物学机制提供理论依据。

关键词：乙型肝炎病毒X蛋白反式激活基因克隆化研究

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Gilbert综合征的分子遗传学基础

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中华肝脏病杂志 2002年第5期10卷 395-397页

作者：成军李莉解放军第三0二医院传染病研究所基因治疗研究中心全军病毒性肝炎防治研究重点实验室北京100039

Gilbert综合征(Gilbert's syndrome,GS)是一种遗传性结合型胆红素水平升高造成胆红素排泄障碍,而肝脏功能正常的综合征,是人类最为常见的综合征类型之一.尿苷二磷酸葡糖苷酸基转移酶(UGT)基因启动子区的基因多态性是发生GS的分子遗... 详细信息

Gilbert综合征(Gilbert's syndrome,GS)是一种遗传性结合型胆红素水平升高造成胆红素排泄障碍,而肝脏功能正常的综合征,是人类最为常见的综合征类型之一.尿苷二磷酸葡糖苷酸基转移酶(UGT)基因启动子区的基因多态性是发生GS的分子遗传学基础,由于UGT酶蛋白的表达水平下降,导致肝脏内非结合型胆红素向结合型胆红素的转化过程发生障碍,从而引起以血清非结合型胆红素水平升高为主的临床综合征.

关键词：基因多态性分子遗传学 Gilbert综合征

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应用酵母双杂交技术筛选干扰素β结合蛋白的研究

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中华实验和临床病毒学杂志 2006年第4期20卷 343-345页

作者：钟彦伟成军郭风劲曲建慧纪冬程勇前李晓东郭江戴久增王琳徐东平解放军第三○二医院传染病研究所病毒性肝炎研究室北京100039 北京地坛医院传染病研究所重庆医科大学细胞生物学与遗传学教研室

目的应用酵母双杂交技术筛选干扰素β(IFNβ)结合蛋白。方法用多聚酶链反应(PCR)技术扩增IFNβ基因,连接酵母表达载体pGBKT7构建诱饵质粒,转化酵母细胞AH109,与含人肝细胞cDNA文库质粒的酵母细胞Y187进行配合,在营养缺陷型培养基(SD/-Tr... 详细信息

目的应用酵母双杂交技术筛选干扰素β(IFNβ)结合蛋白。方法用多聚酶链反应(PCR)技术扩增IFNβ基因,连接酵母表达载体pGBKT7构建诱饵质粒,转化酵母细胞AH109,与含人肝细胞cDNA文库质粒的酵母细胞Y187进行配合,在营养缺陷型培养基(SD/-Trp-Leu-His-Ade)和X-α-半乳糖(X-α-gal)上进行双重筛选阳性克隆,提取酵母质粒后转化大肠埃希菌(DH5α)并经氨苄西林抗性筛选,提取单克隆菌落质粒,进行酶切鉴定及序列测定,并进行生物信息学分析。结果应用酵母双杂交技术筛选出阳性克隆29个,经生物信息学分析,排除读码框架不正确者,最后得到19个克隆基因,编码14种已知蛋白和一种未知功能蛋白。初步发现铁蛋白与IFNβ具有结合作用。结论应用酵母双杂交技术筛选出多种与IFNβ具有结合作用的蛋白。

关键词：酵母菌杂交干扰素β 结合蛋白

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肝再生增强因子的作用机制

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临床肝胆病杂志 2002年第3期18卷 146-148页

作者：成军李莉张玲霞陈菊梅解放军第三○二医院传染病研究所基因治疗研究中心感染四科

人和动物血清中存在着促进肝再生的蛋白质因子,早期的研究中统称为肝刺激物质(HSS)[1,2].研究表明,肝再生增强因子(ALR)是HSS的主要成分[1].有关HSS主要功能性成分及其作用机制的研究,不仅有助于了解肝脏再生的生物学机制,而且有助于新... 详细信息

人和动物血清中存在着促进肝再生的蛋白质因子,早期的研究中统称为肝刺激物质(HSS)[1,2].研究表明,肝再生增强因子(ALR)是HSS的主要成分[1].有关HSS主要功能性成分及其作用机制的研究,不仅有助于了解肝脏再生的生物学机制,而且有助于新型治疗方法的探索.

关键词：肝脏再生肝再生增强因子作用机制 ALR 生物学功能线粒体干扰素γ

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慢性乙型肝炎患者体内乙型肝炎病毒DNA序列异质性及准种特点的研究

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中华医学杂志 2002年第2期82卷 81-85页

作者：董菁成军王勤环皇甫竞坤施双双张国庆洪源李莉斯崇文解放军第三○二医院传染病研究所基因治疗研究中心北京100039 北京大学第一医院感染疾病科

目的　以乙型肝炎病毒 (HBV)基因异质性来探讨HBV准种群在慢性感染者中的存在状态。方法　应用聚合酶链反应 (PCR)法 ,自 18例慢性患者血清中分别扩增前C/C基因、P基因逆转录酶区 (RT)、HBV全S区、X基因和全基因组序列 ,克隆入pGEMTeas... 详细信息

目的　以乙型肝炎病毒 (HBV)基因异质性来探讨HBV准种群在慢性感染者中的存在状态。方法　应用聚合酶链反应 (PCR)法 ,自 18例慢性患者血清中分别扩增前C/C基因、P基因逆转录酶区 (RT)、HBV全S区、X基因和全基因组序列 ,克隆入pGEMTeasy质粒 ,挑选 81克隆进行DNA测序以确定病毒的变异程度。结果　除外大段缺失突变的克隆 ,来源于同一患者前C/C区、RT区、全S区、X区和全基因组不同克隆之间的碱基序列同源性分别为 98 0 %～ 99 1%、98 7%～ 99 3%、97 5 %～ 10 0 %、93 0 %～ 98 2 %和 96 6 %～ 97 5 %。前C区A83点突变、C抗原内部缺失较为常见 ,缺失突变、终止替换突变、短序列的插入或缺失突变造成的移框突变在各个区域中均可检出 ,X基因 (核心蛋白启动子区 ,CP)内部缺失突变不仅导致X蛋白羧基端的多样性 ,而且调控HBeAg的表达。编码截短型表面抗原中蛋白和缺陷病毒基因亦在患者外周血中。结论　多区域测序结果提示HBV慢性患者体内HBV呈现准种群共存 ,X区 (CP区 )内存在热点缺失突变区 ,CP区的变异可能影响前C蛋白的表达 ,这些变异可能与患者不良预后有关。

关键词：患者缺失突变体内准种 HBV CP 乙型肝炎病毒DNA 变异种群全基因组序列

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