检索结果-内蒙古大学图书馆

世界华人消化杂志 2004年第4期12卷 847-850页

作者：党晓燕成军邓红王建军杨倩刘妍纪冬王春花陕西西安交通大学第二医院感染科陕西省西安市710004 中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心全军病毒性肝炎防治研究重点实验室北京市100039

目的:应用抑制性消减杂交(SSH)技术构建丙型肝炎病毒(HCV)NS3蛋白反式激活相关基因差异表达的cDNA消文库,克隆HCV NS3蛋白反式激活相关基因. 方法:以HCV NS3表达质粒pcDNA3.1(-)-NS3转染HepG2 细胞,以空载体pcDNA3.1(-)为对照;制备转染... 详细信息

目的:应用抑制性消减杂交(SSH)技术构建丙型肝炎病毒(HCV)NS3蛋白反式激活相关基因差异表达的cDNA消文库,克隆HCV NS3蛋白反式激活相关基因. 方法:以HCV NS3表达质粒pcDNA3.1(-)-NS3转染HepG2 细胞,以空载体pcDNA3.1(-)为对照;制备转染后的细胞裂解液,从中提取mRNA并合成cDNA,经RsaI酶切后将实验组cDNA分成两组,分别与两种不同的接头衔接,再与对照组cDNA进行两次消减杂交及两次抑制性PCR,将产物与T/A载体连接,构建cDNA消减文库,并转染大肠杆菌进行文库扩增,随机挑选克隆PCR后进行测序及同源性分析. 结果:成功构建人HCV NS3蛋白反式激活相关基因差异表达的cDNA消减文库.文库扩增后得到61个白色克隆,进行菌落PCR分析,均得到100-1000 bp插入片段.挑取30 个插入片段测序分析,得到30个已知功能基因序列. 结论:筛选到的cDNA全长序列,包括一些与细胞生长调节、物质代谢、免疫及细胞凋亡密切相关的蛋白编码基因,推测了NS3TP2可能存在的调控机制的线索.

关键词：抑制性消减杂交技术克隆 HCV NS3蛋白反式激活基因2 上调基因细胞凋亡

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

应用表达谱芯片技术筛选HBcAg反式调节基因

引用

世界华人消化杂志 2004年第12期12卷 2886-2890页

作者：徐志强成军张鸿飞王建军刘妍纪冬中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心全军病毒性肝炎防治研究重点实验室感染三科北京市100039

目的:筛选与克隆HBcAg激活基因,了解其在体内的调节功能线索及机制. 方法:以分子生物学技术构建HBcAg的真核表达载体pcDNA3.1(-)-HBcAg,以表达质粒pcDNA3.1(-)-HBcAg 转染HepG2细胞,以空载体pcDNA3.1(-)为平行对照,制备转染后的细胞裂解... 详细信息

目的:筛选与克隆HBcAg激活基因,了解其在体内的调节功能线索及机制. 方法:以分子生物学技术构建HBcAg的真核表达载体pcDNA3.1(-)-HBcAg,以表达质粒pcDNA3.1(-)-HBcAg 转染HepG2细胞,以空载体pcDNA3.1(-)为平行对照,制备转染后的细胞裂解液,提取mRNA.应用基因表达谱芯片技术对差异表达mRNA进行检测和分析. 结果:HBcAg表达质粒pcDNA3.1(-)-HBcAg经酶切鉴定和DNA测序鉴定正确.经基因表达谱芯片分析,29种基因的表达水平上调,17种基因的表达水平下调. 结论:筛选到一些与细胞内信号传导、免疫调节、细胞凋亡、蛋白质翻译合成、肿瘤发生相关的HBcAg反式调节的靶基因.

关键词：表达谱芯片技术筛选 HBcAg 反式调节基因分子生物学技术

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

乙型肝炎病毒对c-fos基因表达调节的影响

引用

世界华人消化杂志 2004年第4期12卷 938-940页

作者：党晓燕成军邓红中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心全军病毒性肝炎防治研究重点实验室北京市100039 西安交通大学第二医院传染科陕西省西安市710004

癌基因(oncogene)是一类编码关键性调控蛋白的正常细胞基因，在正常情况下，不表达或只有有限表达，又称原癌基因(proto-oncogene)，当受到理化等因素刺激时，他们可以异常表达，导致细胞的增生、分化或癌变，众所周知，乙型肝炎病毒(H... 详细信息

癌基因(oncogene)是一类编码关键性调控蛋白的正常细胞基因，在正常情况下，不表达或只有有限表达，又称原癌基因(proto-oncogene)，当受到理化等因素刺激时，他们可以异常表达，导致细胞的增生、分化或癌变，众所周知，乙型肝炎病毒(HBV)不仅可引起急慢性病毒性肝炎，而且与肝纤维化和肝细胞癌(HCC)的发生及发展密切相关，许多实验已证实肝细胞癌变过程涉及多种原癌基因的激活和突变，其中HBV对原癌基因c-fos的激活及表达调节也越来越受到关注。通过对HBV与c-fos之间表达调节的阐述，有助于进一步了解HBV导致HCC的分子学机制。

关键词：乙型肝炎病毒 C-fos基因基因表达癌基因肿瘤

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

应用噬菌体展示技术筛选HBsAg启动子I的DNA结合蛋白

引用

世界华人消化杂志 2004年第11期12卷 2737-2739页

作者：杨艳杰成军陈东风王春花黄燕萍吴煜刘敏王建军钟彦伟刘妍张黎颖中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心全军病毒性肝炎防治研究重点实验室北京市100038 中国人民解放军第三军医大学大坪医院消化内科重庆市400038

目的:通过筛选HBsAg基因启动子Ⅰ(SP Ⅰ,surface promoter Ⅰ)结合蛋白,为HBV复制机制的研究探索新的途径. 方法:应用噬菌体展示技术,以HBsAg基因启动子Ⅰ的聚合酶链反应(PCR)产物DNA作为固相筛选分子,对噬菌体人肝细胞cDNA文库进行4轮... 详细信息

目的:通过筛选HBsAg基因启动子Ⅰ(SP Ⅰ,surface promoter Ⅰ)结合蛋白,为HBV复制机制的研究探索新的途径. 方法:应用噬菌体展示技术,以HBsAg基因启动子Ⅰ的聚合酶链反应(PCR)产物DNA作为固相筛选分子,对噬菌体人肝细胞cDNA文库进行4轮“黏附-洗脱-扩增”筛选过程,经噬斑的PCR扩增后,构建克隆载体,最后对所筛选克隆进行DNA序列分析和同源性搜索. 结果:噬菌体经富集后,从随机筛选的14个克隆中得到8 个阳性克隆,成功构建了克隆载体.序列测定后经过同源性搜索,确定了和HBV表面抗原基因启动子Ⅰ特异结合的肝细胞蛋白,共编码7种蛋白.其中3个克隆编码未知功能蛋白;其余的克隆分别编码4-氨基丁酸氨基转移酶、触珠蛋白、复制蛋白等蛋白. 结论:用噬菌体人肝cDNA文库筛选得到HBsAg基因启动子Ⅰ的结合蛋白,分析了该蛋白的编码基因.

关键词：噬菌体展示技术筛选 HBsAg 启动子I DNA结合蛋白聚合酶链反应乙型肝炎病毒

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

应用表达谱芯片技术研究NS5ATP13的反式调节基因

引用

世界华人消化杂志 2004年第11期12卷 2757-2761页

作者：张黎颖邓红成军党晓燕刘妍蔺淑梅黄燕萍纪冬吴顺华纪泛扑邵清西安交通大学第二医院感染科陕西省西安市710004 中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心全军病毒性肝炎防治研究重点实验室北京市100039

目的:应用基因表达谱芯片研究HCV非结构蛋白NS5A反式激活基因NS5ATP13的反式调节基因. 方法:构建NS5ATP13基因的真核表达载体pcDNA3.1(-)- NS5ATP13,应用基因表达谱芯片技术对pcDNA3.1(-)- NS5ATP13转染的人肝母细胞瘤细胞系HepG2细胞... 详细信息

目的:应用基因表达谱芯片研究HCV非结构蛋白NS5A反式激活基因NS5ATP13的反式调节基因. 方法:构建NS5ATP13基因的真核表达载体pcDNA3.1(-)- NS5ATP13,应用基因表达谱芯片技术对pcDNA3.1(-)- NS5ATP13转染的人肝母细胞瘤细胞系HepG2细胞和转染空载体的相同细胞的差异表达mRNA进行检测和分析. 结果:HepG2细胞经转染NS5ATP13后,有86条差异基因表达,其中46条基因表达增强,40条基因表达降低.这些差异表达的基因与细胞的增生、分化及细胞的信号转导、代谢、凋亡密切相关. 结论:应用基因表达谱芯片成功筛选了NS5ATP13的反式调节基因,为进一步阐明NS5ATP13的反式激活作用及免疫调节机制提供了新的依据.

关键词：表达谱芯片技术 NS5ATP13 反式调节基因丙型肝炎病毒外膜蛋白

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

β_2-微球蛋白对乙型肝炎病毒核心启动子转录活性的调节作用

引用

世界华人消化杂志 2004年第10期12卷 2491-2494页

作者：高学松成军甄真杨艳杰黄燕萍郭江刘妍戴久增中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心全军病毒性肝炎防治研究重点实验室北京市100039 河北医科大学第三医院感染科河北省石家庄市050051

目的:研究β2-m对核心启动子表达的调节作用方法:根据HBV核心启动子及β2-微球蛋白的序列设计引物,用聚合酶链反应(PCR)的方法分别扩增HBV核心启动子和β2-微球蛋白基因,分别构建HBV核心启动子的报告载体及β2-微球蛋白的真核表达载体,... 详细信息

目的:研究β2-m对核心启动子表达的调节作用方法:根据HBV核心启动子及β2-微球蛋白的序列设计引物,用聚合酶链反应(PCR)的方法分别扩增HBV核心启动子和β2-微球蛋白基因,分别构建HBV核心启动子的报告载体及β2-微球蛋白的真核表达载体,脂质体法瞬时转染HepG2细胞.结果:成功构建HBV核心启动子的报告载体及β2-微球蛋白(β2-m)的真核表达载体.脂质体法瞬时转染HepG2细胞48h后,核心启动子在β2-微球蛋白(β2-m)的影响下,其启动子活性降底2倍.结论:β2-微球蛋白(β2-m)

关键词： β2-微球蛋乙型肝炎病毒核心启动子转录活性调节作用

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

核孔复合体相互作用蛋白(NPIP)对乙型肝炎病毒核心启动子转录活性的调节作用

引用

世界华人消化杂志 2004年第10期12卷 2488-2491页

作者：高学松成军甄真黄燕萍郭江刘妍戴久增中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心全军病毒性肝炎防治研究重点实验室北京市100039 河北医科大学第三医院感染科河北省石家庄市050051

目的:构建HBV核心启动子及NPIP的重组载体,研究NPIP对核心启动子表达的调节作用.方法:根据HBV核心启动子及NPIP的序列设计引物,用聚合酶链反应(PCR)的方法分别扩增HBV核心启动子和NPIP基因,分别构建HBV核心启动子的报告载体及NPIP的真... 详细信息

目的:构建HBV核心启动子及NPIP的重组载体,研究NPIP对核心启动子表达的调节作用.方法:根据HBV核心启动子及NPIP的序列设计引物,用聚合酶链反应(PCR)的方法分别扩增HBV核心启动子和NPIP基因,分别构建HBV核心启动子的报告载体及NPIP的真核表达载体,脂质体法瞬时转染HepG2细胞.结果:成功构建HBV核心启动子的报告载体及NPIP的真核表达载体.脂质体法瞬时转染HepG2细胞48h后,用ELISA法检测β-gal的表达,显示核心启动子在NPIP的影响下,其活性有降低3-4倍.通过体内实验证明NPIP可以下调HBV核心启动子的表达.结论:NPIP明显降低HBV核心启动子的表达,为进一步研究HBV复制的分子生物学机制提供了新的线索.

关键词：核孔复合体相互作用蛋白 NPIP 乙型肝炎病毒核心启动子转录活性调节作用

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

乙型肝炎病毒基因分型的临床意义

引用

世界华人消化杂志 2004年第7期12卷 1670-1673页

作者：杨艳杰成军陈东风吴煜黄燕萍钟彦伟王春花刘敏中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗中心全军病毒性肝炎防治研究重点实验室北京市100039 中国人民解放军第三军医大学大坪医院消化内科重庆市400038

虽然近年来对乙型肝炎病毒(HBV)基因组变异已边行了较为系统的研究,但仍有许多问题尚未解决.目前研究的热点集中在HBV基因型的特点及临床意义和HBV聚合酶基因变异与核苷类似物耐药性的研究.根据聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-R... 详细信息

虽然近年来对乙型肝炎病毒(HBV)基因组变异已边行了较为系统的研究,但仍有许多问题尚未解决.目前研究的热点集中在HBV基因型的特点及临床意义和HBV聚合酶基因变异与核苷类似物耐药性的研究.根据聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)基因型分型法,目前已将前-S基因分为A,B,C,D,E,F,G,H八种基因型.现就HBV基因型分型方法,基因型与肝炎疾病的关系、预后以及与干扰素、拉米夫定等抗病毒疗效相关性的研究作一综述.

关键词：乙型肝炎病毒基因分型聚合酶链反应 PCR-RFLP

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

乙型肝炎病毒前S2蛋白结合蛋白基因的筛选

引用

中华肝脏病杂志 2003年第1期11卷 8-10页

作者：陆荫英李克王琳刘妍王业东成军张玲霞中国人民解放军第三○二医院传染病研究所基因治疗研究中心全军病毒性肝炎防治研究重点实验室北京100039

目的筛选并克隆人肝细胞中与乙型肝炎病毒前S2蛋白(HBV PreS2)相互作用的蛋白质基因。方法用聚合酶链反应(PCR)技术扩增HBV PreS2基因,连接入酵母表达载体pGBKT-7中构建诱饵质粒,转化酵母细胞AH109并在其内表达,然后与转化了人肝cDNA... 详细信息

目的筛选并克隆人肝细胞中与乙型肝炎病毒前S2蛋白(HBV PreS2)相互作用的蛋白质基因。方法用聚合酶链反应(PCR)技术扩增HBV PreS2基因,连接入酵母表达载体pGBKT-7中构建诱饵质粒,转化酵母细胞AH109并在其内表达,然后与转化了人肝cDNA文库质粒的酵母细胞Y187进行配合,在营养缺陷型培养基上进行双重筛选阳性菌落,PCR从中扩增出目的片段并测序,进行生物信息学分析。结果成功克隆出HBVPreS2基因并在酵母细胞中表达,配合后选出既能在4缺(SD/-Trp-Leu-Ade-His)培养基又能在铺有X-α-半乳糖(X-α-gal)的4缺培养基上生长并变成蓝色的真阳性菌落26个,其中含金属硫蛋白A2基因的菌落有12个,细胞色素C氧化酶Ⅱ有1个,细胞色素:P450 IVF亚基2个,细胞色素C氧化酶Ⅳ亚基同功酶1有2个,人血白蛋白3个,。Na+-K+ATP酶β1亚基1个,前清蛋白2个,植物血凝素半乳糖苷结合亚基1个,未知基因2个。结论成功克隆出HBV PreS2蛋白的结合蛋白,为进一步研究HBV PreS2的作用提供了新线索。

关键词：乙型肝炎病毒前S2蛋白结合蛋白基因筛选

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

乙型肝炎病毒核心启动子的结构及调节研究

引用

世界华人消化杂志 2003年第7期11卷 1006-1008页

作者：杨艳杰成军陈东风刘妍杨倩王建军中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心、全军病毒性肝炎防治研究重点实验室北京市100039 中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心、全军病毒性肝炎防治研究重点实验室北京市100039 中国人民解放军第三军医大学大坪医院消化内科重庆市400038

0引言乙型肝炎是一种严重威胁人类健康的疾病,呈全球性分布,目前全世界有3.5亿人感染乙型肝炎病毒(HBV),其中相当一部分感染者发展为慢性肝炎,少数还发展为肝硬化甚至肝癌,至今仍缺乏有效控制[1-5].造成这一局面的原因很多,其中关于HBV... 详细信息

0引言乙型肝炎是一种严重威胁人类健康的疾病,呈全球性分布,目前全世界有3.5亿人感染乙型肝炎病毒(HBV),其中相当一部分感染者发展为慢性肝炎,少数还发展为肝硬化甚至肝癌,至今仍缺乏有效控制[1-5].造成这一局面的原因很多,其中关于HBV与肝细胞之间相互作用的分子生物学机制的研究进展相对滞后是严重影响新型治疗技术和新型药物开发与研究的重要原因之一.进一步弄清HBV DNA的复制、转录及调节的过程,对于我们研究乙型肝炎的发病机制具有重要意义.本文仅就乙型肝炎病毒核心启动子(CP)结构及调节近几年的研究进展作一综述.

关键词：乙型肝炎病毒核心启动子结构调节基因突变生物学病毒复制

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：