检索结果-内蒙古大学图书馆

肝脏 2003年第1期8卷 9-11页

作者：钟彦伟成军张忠东李强洪源王琳李莉张玲霞陈菊梅中国人民解放军第三〇二医院传染病研究所基因治疗研究中心全军病毒性肝炎防治研究重点实验室北京100039

目的　制备丙型肝炎病毒 (HCV )非结构蛋白NS5 (NS5 )的抗独特型单链可变区抗体scFv(抗 IdscFv) ,为研制HCVNS5的抗 IdscFv疫苗奠定基础。方法　采用噬菌体表面展示技术 ,将HCVNS5单克隆抗体固相包被于Nunc板 ,从噬菌体单链可变区抗... 详细信息

目的　制备丙型肝炎病毒 (HCV )非结构蛋白NS5 (NS5 )的抗独特型单链可变区抗体scFv(抗 IdscFv) ,为研制HCVNS5的抗 IdscFv疫苗奠定基础。方法　采用噬菌体表面展示技术 ,将HCVNS5单克隆抗体固相包被于Nunc板 ,从噬菌体单链可变区抗体库中经过 5轮“吸附洗脱扩增”筛选过程 ,随机挑选 80个克隆 ,利用酶联免疫吸附试验 (ELISA)、交叉反应和竞争抑制实验 ,对其进行免疫学检测 ,获得与HCVNS5单克隆抗体结合活性较强的抗 IdscFv阳性克隆 ,并对HCVNS5特异性抗 IdscFv的编码序列进行序列测定分析。结果　筛选得到的HCVNS5抗 IdscFv片段由 786bp组成 ,具有结合HCVNS5单克隆抗体的生物学活性和特异性。结论　用噬菌体抗体库技术能够成功地获得HCVNS5的抗 IdscFv。本实验结果为开展用抗 IdscFv防治丙型肝炎的研究创造了条件。

关键词：丙型肝炎病毒非结构蛋白5 抗独特型抗体单链可变区抗体

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Gilbert综合征的分子遗传学基础

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中华肝脏病杂志 2002年第5期10卷 395-397页

作者：成军李莉解放军第三0二医院传染病研究所基因治疗研究中心全军病毒性肝炎防治研究重点实验室北京100039

Gilbert综合征(Gilbert's syndrome,GS)是一种遗传性结合型胆红素水平升高造成胆红素排泄障碍,而肝脏功能正常的综合征,是人类最为常见的综合征类型之一.尿苷二磷酸葡糖苷酸基转移酶(UGT)基因启动子区的基因多态性是发生GS的分子遗... 详细信息

Gilbert综合征(Gilbert's syndrome,GS)是一种遗传性结合型胆红素水平升高造成胆红素排泄障碍,而肝脏功能正常的综合征,是人类最为常见的综合征类型之一.尿苷二磷酸葡糖苷酸基转移酶(UGT)基因启动子区的基因多态性是发生GS的分子遗传学基础,由于UGT酶蛋白的表达水平下降,导致肝脏内非结合型胆红素向结合型胆红素的转化过程发生障碍,从而引起以血清非结合型胆红素水平升高为主的临床综合征.

关键词：基因多态性分子遗传学 Gilbert综合征

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HCV NS3及其对信号转导途径的影响

引用

国外医学（流行病学．传染病学分册） 2002年第6期29卷 342-345页

作者：牟劲松刘妍解放军第三〇二医院传染病研究所基因治疗研究中心全军病毒性肝炎防治研究重点实验室 100039

丙型肝炎病毒非结构蛋白NS3(HCV NS3)在HCV多聚蛋白的成熟和病毒复制过程中发挥了重要作用,同时通过蛋白质之间的相互作用,对肝细胞的生长、代谢,甚至恶性转化产生影响。本文就HCV NS3及其对信号转导途径的影响作了综述。

关键词：丙型肝炎病毒非结构蛋白NS3 信号转导基因结构

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丙型肝炎病毒结构基因转基因小鼠引起肝脏脂肪变

引用

世界华人消化杂志 2002年第9期10卷 1022-1026页

作者：成军任进余李莉陆志檬李克洪源陆荫英王刚刘妍张玲霞陈菊梅中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心全军病毒性肝炎防治研究重点实验室北京市100039 上海第二医科大学瑞金医院临床免疫室上海20004

目的:建立持续表达和诱导表达型丙型肝炎病毒(HCV)结构基因(包括核心蛋白和包膜蛋白E1、E2编码基因)的转基因小鼠动物模型,探讨HCV结构基因表达导致肝脏脂肪变的病理改变.方法:以含有近全长HCVcDNA的质粒为模板,通过多聚酶链反应(PCR)... 详细信息

目的:建立持续表达和诱导表达型丙型肝炎病毒(HCV)结构基因(包括核心蛋白和包膜蛋白E1、E2编码基因)的转基因小鼠动物模型,探讨HCV结构基因表达导致肝脏脂肪变的病理改变.方法:以含有近全长HCVcDNA的质粒为模板,通过多聚酶链反应(PCR)技术扩增HCV结构基因的DNA片段(约2.2kb),克隆到真核表达载体pcDNA4HisMas和pMT/BiP/V5-HisA中,分别构建成持续表达型表达载体pcDNA4HisMas-HCVCore-E2和诱导表达型表达载体pMT/BiP/V5-HisA-HCVCore-E2.以限制性内切酶分析和目的DNA片段的核苷酸序列分析,证实构建HCV结构基因的真核表达载体正确无误.以脂质体体外转染COS-7细胞系,利用抗-HCVE2的多克隆抗体进行Westernblot杂交分析,证实转染细胞中有HCVE2蛋白的表达.利用小鼠受精卵细胞核微注射方法,导入线性化表达载体的DNA,利用假孕小鼠的受精卵植入方法,建立了表达HCV结构基因的转基因小鼠模型.对于持续表达型转基因小鼠的死胎、6月龄以及硫酸铜诱导表达型的转基因小鼠模型的肝脏组织,进行HE染色和病理学特征的分析.结果:构建了持续性表达和可诱导性表达型的HCV结构基因表达载体pcDNA4HisMas-HCVCore-E2和pMT/BiP/V5-HisA-HCVCore-E2,体外转染COS-7细胞证实转染细胞中有HCVE2抗原的表达.对于持续表达型转基因小鼠死胎肝脏病理学特征进行分析,发现肝组织尚未分化发育完成,肝内有大量造血细胞,肝细胞空泡变性,单个核细胞聚集现象.对于持续表达HCV结构基因的6月龄转基因小鼠的肝脏进行病理学分析,发现中央静脉区肝细胞小泡型脂肪变性,中央静脉周围细胞溶解坏死,中央静脉明显扩大,少数组织中亦见大泡型脂肪变性.对于可诱导型转基因小鼠的肝脏进行病理学分析,发现肝小叶内中央静脉周围坏死区累及5-10个小叶,周围无淋巴细胞浸润,交界区可见多数肝细胞核异常,或固化,或呈花环状,或溶解为淡蓝色无定形基质.泡浆内残留大量脂肪小泡,肝脏脂肪变与核异常有一移行过程.结论:建立了表达HCV结构基因的转基因小鼠,发现HCV结构基因的转基因小鼠肝脏有典型的脂肪变病理改变,为进一步研究HCV感染引起的慢性丙型肝炎合并脂肪变的特征和机制研究奠定了基础.

关键词：动物模型丙型肝炎病毒结构基因转基因肝脏脂肪变

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丙型肝炎病毒感染与脂类代谢的相关性

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肝脏 2002年第1期7卷 56-58页

作者：成军李莉张玲霞陈菊梅北京解放军第三〇二医院传染病研究所基因治疗研究中心全军病毒性肝炎防治研究重点实验室100039

临床上发现慢性丙型肝炎肝脏病理特征十分突出的一点就是脂肪变性。慢性实验性感染丙型肝炎病毒 (ＨＣＶ)的黑猩猩肝脏脂肪变也是常见的一种病理改变。ＨＣＶ核心蛋白编码基因的转基因小鼠 ,其肝脏也有明显的脂肪变性改变 ,所以目前关... 详细信息

临床上发现慢性丙型肝炎肝脏病理特征十分突出的一点就是脂肪变性。慢性实验性感染丙型肝炎病毒 (ＨＣＶ)的黑猩猩肝脏脂肪变也是常见的一种病理改变。ＨＣＶ核心蛋白编码基因的转基因小鼠 ,其肝脏也有明显的脂肪变性改变 ,所以目前关于ＨＣＶ感染与机体脂肪代谢紊乱的问题引起了人们的关注。现有的研究表明 ,ＨＣＶ感染与肝脏的脂类代谢有着十分密切的关系。一、血清ＨＣＶ与血脂成分的结合关于ＨＣＶ与脂类代谢的相互关系 ,首先注意到的是ＨＣＶ病毒颗粒与血清中不同的脂蛋白成分结合的能力。ＨＣＶ病毒颗粒与血清中不同的脂蛋白成分结合 ,可能是干扰脂类代谢 ,形成脂肪肝的重要原因。早在 1992年Ｔｈｏｍｓｓｅｎ等[1] 就发现了含有ＨＣＶＲＮＡ的病毒颗粒密度差别显著 ,且与血清中的脂蛋白有着某种关系。慢性丙型肝炎患者血清中的ＨＣＶＲＮＡ存在于ＨＣＶ的病毒颗粒中。但是 ,含有ＨＣＶＲＮＡ的颗粒 ,其蔗糖密度梯度离心的密度却有很大的差别 ,即 1.0 3～ 1.2 0ｇ/ｃｍ3 之间。在有些血清中ＨＣＶＲＮＡ仅限于低密度颗粒中 ,即 1.0 3～ 1.0 8ｇ/ｃｍ3 的颗粒中 ,而在另一些血清中 ,ＨＣＶＲＮＡ几乎存在于所有的密度颗粒中。...

关键词：丙型肝炎脂类代谢相关性

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拉米夫定在几种特殊肝脏疾病状态下的应用

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传染病信息 2002年第3期15卷 111-115页

作者：成军张玲霞解放军第三○二医院传染病研究所基因治疗研究中心北京100039 全军病毒性肝炎防治研究重点实验室北京100039

本文旨在介绍国外相关适应症应用拉米夫定的结果和经验,以供国内同行参考。 1 拉米夫定在儿童患者中的应用成年患者拉米夫定用药剂量100mg/d,研究证明增加剂量并不能显著增加拉米夫定的抗病毒疗效,因此没有必要盲目增加用药剂量以提高... 详细信息

本文旨在介绍国外相关适应症应用拉米夫定的结果和经验,以供国内同行参考。 1 拉米夫定在儿童患者中的应用成年患者拉米夫定用药剂量100mg/d,研究证明增加剂量并不能显著增加拉米夫定的抗病毒疗效,因此没有必要盲目增加用药剂量以提高疗效。关于儿童患者的拉米夫定用药剂量。

关键词：拉米夫定肝脏疾病应用治疗

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基因芯片技术的原理及其在肝病研究中的应用

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中华肝脏病杂志 2002年第4期10卷 302-302页

作者：成军解放军第三0二医院传染病研究所基因治疗研究中心全军病毒性肝炎防治研究重点实验室

基因芯片(gene chip),即DNA 芯片(DNA chip)代表的微阵列(microar-ray)技术,是集成了成千上万的网络状密集排列的基因探针,能够在同一时间内杂交分析大量的基因,迅速读取生命相关的基因信息的一种高通量分析技术.这种技术在基因诊断、... 详细信息

基因芯片(gene chip),即DNA 芯片(DNA chip)代表的微阵列(microar-ray)技术,是集成了成千上万的网络状密集排列的基因探针,能够在同一时间内杂交分析大量的基因,迅速读取生命相关的基因信息的一种高通量分析技术.这种技术在基因诊断、基因表达、基因组研究、发现新基因及各种病原体的研究中具有广泛的应用前景.在肝脏疾病的研究中也具有十分重要的意义.

关键词：基因芯片技术肝病研究应用 PCR扩增分子生物学

来源：评论

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