检索结果-内蒙古大学图书馆

世界华人消化杂志 2004年第7期12卷 1670-1673页

作者：杨艳杰成军陈东风吴煜黄燕萍钟彦伟王春花刘敏中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗中心全军病毒性肝炎防治研究重点实验室北京市100039 中国人民解放军第三军医大学大坪医院消化内科重庆市400038

虽然近年来对乙型肝炎病毒(HBV)基因组变异已边行了较为系统的研究,但仍有许多问题尚未解决.目前研究的热点集中在HBV基因型的特点及临床意义和HBV聚合酶基因变异与核苷类似物耐药性的研究.根据聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-R... 详细信息

虽然近年来对乙型肝炎病毒(HBV)基因组变异已边行了较为系统的研究,但仍有许多问题尚未解决.目前研究的热点集中在HBV基因型的特点及临床意义和HBV聚合酶基因变异与核苷类似物耐药性的研究.根据聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)基因型分型法,目前已将前-S基因分为A,B,C,D,E,F,G,H八种基因型.现就HBV基因型分型方法,基因型与肝炎疾病的关系、预后以及与干扰素、拉米夫定等抗病毒疗效相关性的研究作一综述.

关键词：乙型肝炎病毒基因分型聚合酶链反应 PCR-RFLP

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β_2-微球蛋白对乙型肝炎病毒核心启动子转录活性的调节作用

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世界华人消化杂志 2004年第10期12卷 2491-2494页

作者：高学松成军甄真杨艳杰黄燕萍郭江刘妍戴久增中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心全军病毒性肝炎防治研究重点实验室北京市100039 河北医科大学第三医院感染科河北省石家庄市050051

目的:研究β2-m对核心启动子表达的调节作用方法:根据HBV核心启动子及β2-微球蛋白的序列设计引物,用聚合酶链反应(PCR)的方法分别扩增HBV核心启动子和β2-微球蛋白基因,分别构建HBV核心启动子的报告载体及β2-微球蛋白的真核表达载体,... 详细信息

目的:研究β2-m对核心启动子表达的调节作用方法:根据HBV核心启动子及β2-微球蛋白的序列设计引物,用聚合酶链反应(PCR)的方法分别扩增HBV核心启动子和β2-微球蛋白基因,分别构建HBV核心启动子的报告载体及β2-微球蛋白的真核表达载体,脂质体法瞬时转染HepG2细胞.结果:成功构建HBV核心启动子的报告载体及β2-微球蛋白(β2-m)的真核表达载体.脂质体法瞬时转染HepG2细胞48h后,核心启动子在β2-微球蛋白(β2-m)的影响下,其启动子活性降底2倍.结论:β2-微球蛋白(β2-m)

关键词： β2-微球蛋乙型肝炎病毒核心启动子转录活性调节作用

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核孔复合体相互作用蛋白(NPIP)对乙型肝炎病毒核心启动子转录活性的调节作用

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世界华人消化杂志 2004年第10期12卷 2488-2491页

作者：高学松成军甄真黄燕萍郭江刘妍戴久增中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心全军病毒性肝炎防治研究重点实验室北京市100039 河北医科大学第三医院感染科河北省石家庄市050051

目的:构建HBV核心启动子及NPIP的重组载体,研究NPIP对核心启动子表达的调节作用.方法:根据HBV核心启动子及NPIP的序列设计引物,用聚合酶链反应(PCR)的方法分别扩增HBV核心启动子和NPIP基因,分别构建HBV核心启动子的报告载体及NPIP的真... 详细信息

目的:构建HBV核心启动子及NPIP的重组载体,研究NPIP对核心启动子表达的调节作用.方法:根据HBV核心启动子及NPIP的序列设计引物,用聚合酶链反应(PCR)的方法分别扩增HBV核心启动子和NPIP基因,分别构建HBV核心启动子的报告载体及NPIP的真核表达载体,脂质体法瞬时转染HepG2细胞.结果:成功构建HBV核心启动子的报告载体及NPIP的真核表达载体.脂质体法瞬时转染HepG2细胞48h后,用ELISA法检测β-gal的表达,显示核心启动子在NPIP的影响下,其活性有降低3-4倍.通过体内实验证明NPIP可以下调HBV核心启动子的表达.结论:NPIP明显降低HBV核心启动子的表达,为进一步研究HBV复制的分子生物学机制提供了新的线索.

关键词：核孔复合体相互作用蛋白 NPIP 乙型肝炎病毒核心启动子转录活性调节作用

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乙型肝炎病毒前S2蛋白结合蛋白基因的筛选

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中华肝脏病杂志 2003年第1期11卷 8-10页

作者：陆荫英李克王琳刘妍王业东成军张玲霞中国人民解放军第三○二医院传染病研究所基因治疗研究中心全军病毒性肝炎防治研究重点实验室北京100039

目的筛选并克隆人肝细胞中与乙型肝炎病毒前S2蛋白(HBV PreS2)相互作用的蛋白质基因。方法用聚合酶链反应(PCR)技术扩增HBV PreS2基因,连接入酵母表达载体pGBKT-7中构建诱饵质粒,转化酵母细胞AH109并在其内表达,然后与转化了人肝cDNA... 详细信息

目的筛选并克隆人肝细胞中与乙型肝炎病毒前S2蛋白(HBV PreS2)相互作用的蛋白质基因。方法用聚合酶链反应(PCR)技术扩增HBV PreS2基因,连接入酵母表达载体pGBKT-7中构建诱饵质粒,转化酵母细胞AH109并在其内表达,然后与转化了人肝cDNA文库质粒的酵母细胞Y187进行配合,在营养缺陷型培养基上进行双重筛选阳性菌落,PCR从中扩增出目的片段并测序,进行生物信息学分析。结果成功克隆出HBVPreS2基因并在酵母细胞中表达,配合后选出既能在4缺(SD/-Trp-Leu-Ade-His)培养基又能在铺有X-α-半乳糖(X-α-gal)的4缺培养基上生长并变成蓝色的真阳性菌落26个,其中含金属硫蛋白A2基因的菌落有12个,细胞色素C氧化酶Ⅱ有1个,细胞色素:P450 IVF亚基2个,细胞色素C氧化酶Ⅳ亚基同功酶1有2个,人血白蛋白3个,。Na+-K+ATP酶β1亚基1个,前清蛋白2个,植物血凝素半乳糖苷结合亚基1个,未知基因2个。结论成功克隆出HBV PreS2蛋白的结合蛋白,为进一步研究HBV PreS2的作用提供了新线索。

关键词：乙型肝炎病毒前S2蛋白结合蛋白基因筛选

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病毒载量动态检测在乙型肝炎治疗和研究中的意义

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中华肝脏病杂志 2003年第1期11卷 54-56页

作者：洪卫国王福生陈菊梅中国人民解放军第三○二医院传染病研究所全军艾滋病和病毒性肝炎防治重点实验室北京100039

目前对乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)与人体基因作用动态过程的具体细节还不清楚.但随着核酸定量技术的发展,已经有可能同时监测病毒在体内复制、表达的过程和人体基因表达谱的变化[1].

关键词：病毒载量动态检测乙型肝炎治疗研究

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乙型肝炎病毒核心启动子的结构及调节研究

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世界华人消化杂志 2003年第7期11卷 1006-1008页

作者：杨艳杰成军陈东风刘妍杨倩王建军中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心、全军病毒性肝炎防治研究重点实验室北京市100039 中国人民解放军第302医院传染病研究所基因治疗研究中心、全军病毒性肝炎防治研究重点实验室北京市100039 中国人民解放军第三军医大学大坪医院消化内科重庆市400038

0引言乙型肝炎是一种严重威胁人类健康的疾病,呈全球性分布,目前全世界有3.5亿人感染乙型肝炎病毒(HBV),其中相当一部分感染者发展为慢性肝炎,少数还发展为肝硬化甚至肝癌,至今仍缺乏有效控制[1-5].造成这一局面的原因很多,其中关于HBV... 详细信息

0引言乙型肝炎是一种严重威胁人类健康的疾病,呈全球性分布,目前全世界有3.5亿人感染乙型肝炎病毒(HBV),其中相当一部分感染者发展为慢性肝炎,少数还发展为肝硬化甚至肝癌,至今仍缺乏有效控制[1-5].造成这一局面的原因很多,其中关于HBV与肝细胞之间相互作用的分子生物学机制的研究进展相对滞后是严重影响新型治疗技术和新型药物开发与研究的重要原因之一.进一步弄清HBV DNA的复制、转录及调节的过程,对于我们研究乙型肝炎的发病机制具有重要意义.本文仅就乙型肝炎病毒核心启动子(CP)结构及调节近几年的研究进展作一综述.

关键词：乙型肝炎病毒核心启动子结构调节基因突变生物学病毒复制

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丙型肝炎病毒非结构蛋白NS5抗独特型人源单链可变区抗体的筛选与鉴定

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肝脏 2003年第1期8卷 9-11页

作者：钟彦伟成军张忠东李强洪源王琳李莉张玲霞陈菊梅中国人民解放军第三〇二医院传染病研究所基因治疗研究中心全军病毒性肝炎防治研究重点实验室北京100039

目的　制备丙型肝炎病毒 (HCV )非结构蛋白NS5 (NS5 )的抗独特型单链可变区抗体scFv(抗 IdscFv) ,为研制HCVNS5的抗 IdscFv疫苗奠定基础。方法　采用噬菌体表面展示技术 ,将HCVNS5单克隆抗体固相包被于Nunc板 ,从噬菌体单链可变区抗... 详细信息

目的　制备丙型肝炎病毒 (HCV )非结构蛋白NS5 (NS5 )的抗独特型单链可变区抗体scFv(抗 IdscFv) ,为研制HCVNS5的抗 IdscFv疫苗奠定基础。方法　采用噬菌体表面展示技术 ,将HCVNS5单克隆抗体固相包被于Nunc板 ,从噬菌体单链可变区抗体库中经过 5轮“吸附洗脱扩增”筛选过程 ,随机挑选 80个克隆 ,利用酶联免疫吸附试验 (ELISA)、交叉反应和竞争抑制实验 ,对其进行免疫学检测 ,获得与HCVNS5单克隆抗体结合活性较强的抗 IdscFv阳性克隆 ,并对HCVNS5特异性抗 IdscFv的编码序列进行序列测定分析。结果　筛选得到的HCVNS5抗 IdscFv片段由 786bp组成 ,具有结合HCVNS5单克隆抗体的生物学活性和特异性。结论　用噬菌体抗体库技术能够成功地获得HCVNS5的抗 IdscFv。本实验结果为开展用抗 IdscFv防治丙型肝炎的研究创造了条件。

关键词：丙型肝炎病毒非结构蛋白5 抗独特型抗体单链可变区抗体

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Gilbert综合征的分子遗传学基础

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中华肝脏病杂志 2002年第5期10卷 395-397页

作者：成军李莉解放军第三0二医院传染病研究所基因治疗研究中心全军病毒性肝炎防治研究重点实验室北京100039

Gilbert综合征(Gilbert's syndrome,GS)是一种遗传性结合型胆红素水平升高造成胆红素排泄障碍,而肝脏功能正常的综合征,是人类最为常见的综合征类型之一.尿苷二磷酸葡糖苷酸基转移酶(UGT)基因启动子区的基因多态性是发生GS的分子遗... 详细信息

Gilbert综合征(Gilbert's syndrome,GS)是一种遗传性结合型胆红素水平升高造成胆红素排泄障碍,而肝脏功能正常的综合征,是人类最为常见的综合征类型之一.尿苷二磷酸葡糖苷酸基转移酶(UGT)基因启动子区的基因多态性是发生GS的分子遗传学基础,由于UGT酶蛋白的表达水平下降,导致肝脏内非结合型胆红素向结合型胆红素的转化过程发生障碍,从而引起以血清非结合型胆红素水平升高为主的临床综合征.

关键词：基因多态性分子遗传学 Gilbert综合征

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HCV NS3及其对信号转导途径的影响

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国外医学（流行病学．传染病学分册） 2002年第6期29卷 342-345页

作者：牟劲松刘妍解放军第三〇二医院传染病研究所基因治疗研究中心全军病毒性肝炎防治研究重点实验室 100039

丙型肝炎病毒非结构蛋白NS3(HCV NS3)在HCV多聚蛋白的成熟和病毒复制过程中发挥了重要作用,同时通过蛋白质之间的相互作用,对肝细胞的生长、代谢,甚至恶性转化产生影响。本文就HCV NS3及其对信号转导途径的影响作了综述。

关键词：丙型肝炎病毒非结构蛋白NS3 信号转导基因结构

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丙型肝炎病毒感染与脂类代谢的相关性

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肝脏 2002年第1期7卷 56-58页

作者：成军李莉张玲霞陈菊梅北京解放军第三〇二医院传染病研究所基因治疗研究中心全军病毒性肝炎防治研究重点实验室100039

临床上发现慢性丙型肝炎肝脏病理特征十分突出的一点就是脂肪变性。慢性实验性感染丙型肝炎病毒 (ＨＣＶ)的黑猩猩肝脏脂肪变也是常见的一种病理改变。ＨＣＶ核心蛋白编码基因的转基因小鼠 ,其肝脏也有明显的脂肪变性改变 ,所以目前关... 详细信息

临床上发现慢性丙型肝炎肝脏病理特征十分突出的一点就是脂肪变性。慢性实验性感染丙型肝炎病毒 (ＨＣＶ)的黑猩猩肝脏脂肪变也是常见的一种病理改变。ＨＣＶ核心蛋白编码基因的转基因小鼠 ,其肝脏也有明显的脂肪变性改变 ,所以目前关于ＨＣＶ感染与机体脂肪代谢紊乱的问题引起了人们的关注。现有的研究表明 ,ＨＣＶ感染与肝脏的脂类代谢有着十分密切的关系。一、血清ＨＣＶ与血脂成分的结合关于ＨＣＶ与脂类代谢的相互关系 ,首先注意到的是ＨＣＶ病毒颗粒与血清中不同的脂蛋白成分结合的能力。ＨＣＶ病毒颗粒与血清中不同的脂蛋白成分结合 ,可能是干扰脂类代谢 ,形成脂肪肝的重要原因。早在 1992年Ｔｈｏｍｓｓｅｎ等[1] 就发现了含有ＨＣＶＲＮＡ的病毒颗粒密度差别显著 ,且与血清中的脂蛋白有着某种关系。慢性丙型肝炎患者血清中的ＨＣＶＲＮＡ存在于ＨＣＶ的病毒颗粒中。但是 ,含有ＨＣＶＲＮＡ的颗粒 ,其蔗糖密度梯度离心的密度却有很大的差别 ,即 1.0 3～ 1.2 0ｇ/ｃｍ3 之间。在有些血清中ＨＣＶＲＮＡ仅限于低密度颗粒中 ,即 1.0 3～ 1.0 8ｇ/ｃｍ3 的颗粒中 ,而在另一些血清中 ,ＨＣＶＲＮＡ几乎存在于所有的密度颗粒中。...

关键词：丙型肝炎脂类代谢相关性

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