检索结果-内蒙古大学图书馆

解放军医学杂志 2015年第3期40卷 188-193页

作者：叶晓玲刘妍陈容娟许智慧李晓东叶海燕唐振祥程书权徐东平桂林医学院研究生学院广西桂林541004 解放军302医院全军传染病研究所、肝衰竭诊疗与研究中心病毒性肝炎研究室北京100039 桂林市第三人民医院肝病科广西桂林541002

目的分析乙型肝炎病毒(HBV)反转录酶区rtI233V变异的演变规律及其与阿德福韦酯(ADV)耐药的相关性。方法分析9830例慢性HBV感染者血清样本中HBV rtI233V变异的检出率。选择其中2例代表性患者,动态收集血清样本,扩增HBV RT基因并克隆测序(... 详细信息

目的分析乙型肝炎病毒(HBV)反转录酶区rtI233V变异的演变规律及其与阿德福韦酯(ADV)耐药的相关性。方法分析9830例慢性HBV感染者血清样本中HBV rtI233V变异的检出率。选择其中2例代表性患者,动态收集血清样本,扩增HBV RT基因并克隆测序(>20个克隆/样本),观察rtI233V变异的演变过程。构建pTriEx-HBV(C)1.1倍野生株和3种变异株(rtI233V、rtN236T、rtI233V+rtN236T)复制子,瞬时转染HepG2肝癌细胞,分别加入不同浓度的拉米夫定(LAM)、ADV、恩替卡韦(ETV)和替诺福韦(TDF)。采用实时荧光定量PCR法检测不同浓度药物作用后细胞培养上清中HBV DNA的水平,分析变异病毒复制力与表型耐药的变化特点。结果9830例慢乙肝患者血清样本中共检出rtI233V位点变异28例,检出率0.28%,其中rtI233V单独变异19例,与rtN236T等经典耐药变异联合出现9例。该变异的检出患者均有ADV治疗史,其中16例(57.1%)接受ADV单药治疗6个月以上,12例(42.9%)接受包括ADV的多药序贯联合治疗1年以上。病毒复制力与表型耐药分析显示,rtI233V变异株的复制力与野生株接近,rtN236T变异株的复制力较野生株显著降低;rtI233V变异株对LAM、ADV、ETV和TDF均敏感,rtI233V+rtN236T联合变异对耐药性的影响不大,但rtI233V变异可明显恢复rtN236T变异株受损的复制力。结论rtI233V位点变异与ADV应答不佳相关,虽不直接降低病毒对ADV的敏感程度,但可增加经典ADV耐药病毒株的复制力,是一种复制力补偿变异。

关键词：肝炎病毒乙型阿德福韦酯突变 DNA复制抗药性病毒

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乙型肝炎病毒阿德福韦酯耐药相关变异的研究进展

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实用肝脏病杂志 2015年第3期18卷 312-316页

作者：叶晓玲刘妍徐东平解放军第302医院肝衰竭诊疗与研究中心/传染病研究所病毒性肝炎研究室北京100039

目前口服核苷酸类似物阿德福韦酯(adefovir dipivoxil,ADV)仍是我国临床治疗慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)的主要抗病毒药物之一。但是,长期服用ADV可能导致乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)产生耐药变异。经典的ADV耐药... 详细信息

目前口服核苷酸类似物阿德福韦酯(adefovir dipivoxil,ADV)仍是我国临床治疗慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)的主要抗病毒药物之一。但是,长期服用ADV可能导致乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)产生耐药变异。经典的ADV耐药变异形式为rt A181V和rt N236T,新鉴定的ADV原发耐药变异为rt A181S、rt E218G和rt N236V。此外,rt A181T、rt V214A、rt Q215H/P/S、rt L217R/P、rt I233V和rt N238T/D/H等位点变异与HBV对ADV耐药仍存在争议,尚需进一步明确。

关键词：乙型肝炎病毒阿德福韦酯耐药基因变异抗病毒治疗

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隐匿性乙型肝炎病毒感染研究进展

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实用肝脏病杂志 2015年第2期18卷 205-208页

作者：陈建宏刘妍李进徐东平北京大学解放军第302医院教学医院病毒性肝炎研究室 100039 解放军302医院全军传染病研究所/肝衰竭诊疗与研究中心病毒性肝炎研究室解放军302医院全军传染病研究所/肝衰竭诊疗与研究中心医务部

血清HBs Ag阴性,但肝组织或血清HBV DNA长期存在,这种状态被称为隐匿性HBV感染(OBI)。由于实际HBV流行率和病毒流行株的地域性差异、所选取的研究人群的差异和不同检测方法的敏感性和特异性的差异,不同研究所得到的OBI的流行率有很大的... 详细信息

血清HBs Ag阴性,但肝组织或血清HBV DNA长期存在,这种状态被称为隐匿性HBV感染(OBI)。由于实际HBV流行率和病毒流行株的地域性差异、所选取的研究人群的差异和不同检测方法的敏感性和特异性的差异,不同研究所得到的OBI的流行率有很大的差别。OBI的形成机制尚未完全阐明,可能有多种病毒学因素、宿主因素参与其中。OBI能通过输血、分娩和肝移植等方式进行传播,引起新发感染。当宿主免疫功能下降或应用免疫抑制性药物时,OBI可以复燃,恢复经典的血清学表现。OBI引起的轻微但持续的坏死性炎症可以促进肝脏疾病的进展,并且可以通过直接或者间接的机制增加肿瘤的发生风险。临床上需要建立更敏感的检测方法诊断OBI,以减少OBI相关的潜在威胁,帮助医师合理采取治疗措施,延缓病情进展。

关键词：乙型肝炎隐匿性HBV感染 HBs Ag 肝细胞癌

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转基因表达HBV抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞受体

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细胞与分子免疫学杂志 2013年第5期29卷 453-457页

作者：吴静王琳刘妍叶海燕丁宁刘永明徐东平桂林医学院广西桂林541004 解放军302医院全军传染病研究所肝衰竭研究中心病毒性肝炎研究室北京100039 桂林市第三人民医院肝病科广西桂林541004

目的通过逆转录病毒介导HBV抗原特异性细胞毒性T细胞(CTL)的T细胞受体(TCR)转基因表达,初步观察其结合活性。方法从HLA-A2阳性急性乙肝患者外周血中诱导、分选、克隆和扩增HBV抗原特异性CTL;提取细胞RNA,用RT-PCR、5'-RACE和OVER-LA... 详细信息

目的通过逆转录病毒介导HBV抗原特异性细胞毒性T细胞(CTL)的T细胞受体(TCR)转基因表达,初步观察其结合活性。方法从HLA-A2阳性急性乙肝患者外周血中诱导、分选、克隆和扩增HBV抗原特异性CTL;提取细胞RNA,用RT-PCR、5'-RACE和OVER-LAP PCR等方法获取TCR的α和β链编码基因;构建TCR重组逆转录病毒,介导特异性TCR分别在人Jurkat T细胞和HLA-A2阳性健康人CD8 T淋巴细胞上表达。结果从1例HLA-A2阳性急性乙肝患者样本中分别获得了2组TCR Vα、Vβ配对,分别命名为α21β13、α15β13,包装的重组逆转录病毒滴度为(1.5～5.0)×105IU/mL,用针对目标TCR的特异性Vβ链抗体(抗Vβ13 TCR-PE)和HLA-A2限制性表位特异性五聚体(pentamer)进行免疫荧光染色,重组TCR在T细胞表面获得表达:其中在Jurkat细胞上转入的Vβ13链表达细胞占1.06%～2.25%,在HLA-A2阳性健康人T细胞上Vβ13阳性细胞和pentamer阳性细胞分别占到1.03%～2.06%和1.05%～1.12%,在HLA-A2阴性健康人T细胞上Vβ13阳性细胞和pentamer阳性细胞均低于0.05%。结论通过逆转录病毒介导可以使HBV特异性CTL TCR获得转基因表达,具有结合HLA-A2限制性表位的活性。

关键词：乙型肝炎病毒细胞毒性T淋巴细胞 T细胞受体表位特异性表达

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各种恩替卡韦耐药HBV株鉴定及替诺福韦酯对其抑制力分析

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传染病信息 2013年第2期26卷 96-99,107页

作者：李艳乐刘妍许智慧王晓陈丽戴久增姚增涛江玲张连峰徐东平炎研究室郑州大学第一附属医院消化科 450000 解放军第三○二医院全军传染病研究所/肝衰竭诊疗与研究中心病毒性肝炎研究室北京100039

目的分析临床分离的不同形式恩替卡韦(ETV)耐药HBV株的病毒复制力并探讨替诺福韦酯(TDF)对其的抑制力。方法从4例ETV治疗失败的慢性乙型肝炎患者血清中提取并扩增HBV反转录酶(reverse transcriptase,RT)基因,克隆测序分析其基因型耐药... 详细信息

目的分析临床分离的不同形式恩替卡韦(ETV)耐药HBV株的病毒复制力并探讨替诺福韦酯(TDF)对其的抑制力。方法从4例ETV治疗失败的慢性乙型肝炎患者血清中提取并扩增HBV反转录酶(reverse transcriptase,RT)基因,克隆测序分析其基因型耐药变异特点。选取代表性野生型和ETV耐药型HBV克隆株,构建pTriEx-HBV(C)1.1倍重组表达载体。提纯质粒转染HepG2细胞系,5d后检测上清中HBVDNA产生量,分析不同变异形式ETV耐药变异株体外复制力水平及TDF对其抑制力。结果 4份血清中共得到16种含不同HBVRT区变异形式的克隆株,10种与ETV耐药有关,另有6种与拉米夫定耐药有关。表型分析显示:与野生株相比,ETV耐药变异株复制力水平均有所下降,其中rtT184I+M204I变异株复制力最低,是野生株的19.3%,rtM204I+M250L基础上出现补偿突变(rtL80I、rtV173L和rtL180M)的变异株复制力较高,存在相同补偿突变的前提下,rtM204I基础上的耐药变异较rtM204V基础上的复制力低。TDF对各种类型ETV耐药变异病毒的复制力均有较强抑制作用(96.11%～99.90%)。结论与野生株相比,不同变异形式的ETV耐药变异株体外复制力均下降,TDF可有效抑制ETV耐药变异株复制,将是治疗ETV耐药患者的一种很好的选择。

关键词：乙型肝炎病毒突变抗病毒药抗药性

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结核特异性抗原Rv3615c的T细胞免疫研究及临床诊断应用

结核特异性抗原Rv3615c的T细胞免疫研究及临床诊断应用

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中国防痨协会80周年纪念暨2013年全国学术大会

作者：谭曙光林楠梁建琴陈志刘军刘翠华万康林高福病原微生物与免疫学重点实验室中国科学院微生物研究所中国疾病预防控制中心传染病预防控制所解放军第三○九医院中国疾病预防控制中心病毒病研究所中国科学院北京生命科学研究院

据估计,人群中结核分枝杆菌潜伏性感染率约为1/3,我国结核病年发病例数约为130万,占全球发病例数的14%,位居全球第二位,基于我国庞大的人口基数和较高的人口密度,结核病仍将是未来一段时间内威胁我国公共卫生安全的重要传染病。结核分... 详细信息

据估计,人群中结核分枝杆菌潜伏性感染率约为1/3,我国结核病年发病例数约为130万,占全球发病例数的14%,位居全球第二位,基于我国庞大的人口基数和较高的人口密度,结核病仍将是未来一段时间内威胁我国公共卫生安全的重要传染病。结核分枝杆菌感染的快速诊断对于有效的治疗和干预至关重要,而现有的临床检测方法和手段仍不能满足临床诊断需求。作为一种胞内寄生菌,结核分枝杆菌感染

关键词：临床诊断应用价值 Rv3615c 特异性抗原细胞免疫

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54例慢性乙型肝炎患者肝组织HBV cccDNA与血清HBsAg定量检测结果分析

54例慢性乙型肝炎患者肝组织HBV cccDNA与血清HBsAg定量检测结果...

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2011北京地区肝病·感染学术年会

作者：李韦杰李伯安赵景民韩佳琪刘妍江玲毛远丽辛绍杰徐东平解放军第三○二医院肝衰竭诊疗研究中心全军传染病研究所病毒性肝炎研究室

共价闭合环状DNA(cccDNA)是HBV复制的初始模板，其在肝细胞内的长期存在是导致乙肝病情慢性化及停药后复发的重要因素，因此检测HBV cccDNA具有重要临床意义，是评价HBV复制活跃程度和抗病毒疗效的重要指标。本研究收集了54例慢性乙型... 详细信息

共价闭合环状DNA(cccDNA)是HBV复制的初始模板，其在肝细胞内的长期存在是导致乙肝病情慢性化及停药后复发的重要因素，因此检测HBV cccDNA具有重要临床意义，是评价HBV复制活跃程度和抗病毒疗效的重要指标。本研究收集了54例慢性乙型肝炎患者的肝组织标本和对应的血清，进行了HBV cccDNA定量、血清HBsAg定量，分析了两种定量指标之间及其与血清HBV DNA载量相关性。本研究结果表明，与血清HBV DNA相比，HBsAg与肝组织内cccDNA的相关性更好，支持在慢性乙肝患者中使用血清HBsAg定量评估患者的免疫和肝细胞内病毒的复制状态，帮助临床监测抗病毒治疗疗效、分析预后和选择停药时机。

关键词：慢性乙型肝炎肝组织共价闭合环状DNA 乙肝表面抗原定量检测

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乙型肝炎病毒序列数据库发展现状

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传染病信息 2010年第2期23卷 122-125页

作者：李晓东徐东平张玲霞解放军传染病研究所病毒实验室北京100039 解放军第三0二医院专家组北京100039

乙型肝炎病毒序列数据库是集病毒序列收集和相关信息分析为一体的专用数据共享平台。目前,国际上已建立的数据库包括HBVRegDB、HVDB、SeqHepB和HepSeq。这4个数据库收录样本以国外患者为主,且都不能提供HBV基因组或基因片段克隆实物。因... 详细信息

乙型肝炎病毒序列数据库是集病毒序列收集和相关信息分析为一体的专用数据共享平台。目前,国际上已建立的数据库包括HBVRegDB、HVDB、SeqHepB和HepSeq。这4个数据库收录样本以国外患者为主,且都不能提供HBV基因组或基因片段克隆实物。因此,建立以中国患者为主体,且能提供基因实物的HBV序列数据库,对推动我国乙型肝炎的防治研究十分必要。

关键词：肝炎病毒,乙型序列分析突变数据库

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抗EV71多克隆抗体偶联的靶向磁性纳米颗粒对病毒的特异性富集

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科技导报 2010年第16期28卷 25-30页

作者：霍美俊张长清闫妍赵凌云貌盼勇盛军唐劲天清华大学工程物理系粒子技术与辐射成像教育部重点实验室北京100084 北京中医药大学中药学院生物制药系北京100102 上海医药工业研究院上海200040 中国人民解放军第302医院传染病研究所病毒研究室北京100039 长春生物制品研究所长春130062

手足口病是幼儿和儿童常见的一种传染病,严重时会引起患者死亡。EV71病毒（人肠道病毒71型）是引起手足口病的一种主要病毒。为寻求一条快速诊断EV71病毒感染的新方法,将兔抗EV71多克隆抗体,通过戊二醛交联法偶联在氨基硅烷修饰的磁性... 详细信息

手足口病是幼儿和儿童常见的一种传染病,严重时会引起患者死亡。EV71病毒（人肠道病毒71型）是引起手足口病的一种主要病毒。为寻求一条快速诊断EV71病毒感染的新方法,将兔抗EV71多克隆抗体,通过戊二醛交联法偶联在氨基硅烷修饰的磁性纳米颗粒表面,获得抗EV71多克隆抗体偶联的靶向磁性纳米颗粒用于EV71病毒的检测。通过酶联免疫、免疫荧光方法证实了抗体耦合在磁性纳米颗粒表面,并通过BCA法测得其耦合的效率为94.1%。采用抗体偶联的磁性纳米颗粒对EV71病毒液中的病毒抗原进行吸附,通过ELISA法检测上清液中病毒含量的变化,并对磁性纳米颗粒表面吸附的病毒进行免疫荧光和核酸PCR检测,证明了抗体偶联的磁性纳米颗粒可以与病毒抗原特异性结合。由于该纳米颗粒同时具有抗体的靶向性和磁性颗粒的磁响应性,对病毒抗原有较好的特异性吸附能力,可以用于低浓度大样本的EV71病毒抗原的富集检测。利用抗体偶联的靶向磁性纳米颗粒,同时具有可在病毒感染的细胞周围特异性富集和磁颗粒可在交变磁场下感应升温的双重功能,将其作为磁感应热疗的靶向介质,有望研制出病毒感染性疾病磁感应热疗的靶向介质,为靶向热疗病毒感染性疾病提供新的尝试。

关键词： EV71 抗体偶联磁性纳米颗粒病毒检测磁感应热疗

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HBV前S2蛋白对胰岛素受体基因下调作用的研究

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解放军医学杂志 2009年第6期34卷 679-682页

作者：苏何玲纪冬韩萍刘妍张健陈国凤钟彦伟徐东平解放军第302医院全军传染病研究所病毒性肝炎研究室北京100039 解放军第302医院全军传染病研究所感染7科北京100039

目的探讨乙型肝炎病毒前S2蛋白(pre-S2)对胰岛素受体(INSR)基因的转录调节作用。方法以pGEM-Teasy-65-2质粒为模板,扩增乙型肝炎病毒(HBV)pre-S2基因片段,构建真核表达载体pcDNA3.1-preS2,以不同剂量(1.0、1.5、2.0μg)转染肝癌细胞系He... 详细信息

目的探讨乙型肝炎病毒前S2蛋白(pre-S2)对胰岛素受体(INSR)基因的转录调节作用。方法以pGEM-Teasy-65-2质粒为模板,扩增乙型肝炎病毒(HBV)pre-S2基因片段,构建真核表达载体pcDNA3.1-preS2,以不同剂量(1.0、1.5、2.0μg)转染肝癌细胞系HepG2和Huh7,36h及72h后分别提取转染后细胞总RNA,利用实时荧光定量PCR检测细胞内的INSR mRNA水平,观察HBV的pre-S2蛋白对INSR基因的转录调节作用,同时观察阻断pre-S2蛋白后INSR的表达情况。结果转染不同剂量pcDNA3.1-preS2后,HepG2细胞内INSR基因的表达水平分别为对照的61%、20%、11%(转染后36h)和92%、69%、37%(转染后72h),Huh7细胞内INSR基因的表达水平分别为对照的63%、47%、35%(转染后36h)和83%、73%、34%(转染后72h);细胞INSR mRNA水平随真核表达载体pcDNA3.1-preS2转染剂量的增加而降低。在转染2μgpcDNA3.1-preS2的同时,将抗pre-S2单克隆抗体加入培养上清,可部分阻断pre-S2蛋白对INSRmRNA表达的抑制,HepG2细胞中的INSRmRNA水平分别恢复到转染空质粒对照的65%(转染后36h)和81%(转染后72h),Huh7细胞中的INSRmRNA水平则分别恢复到69%(转染后36h)和96%(转染后72h)。结论HBVpre-S2蛋白对肝癌细胞系HepG2和Huh7细胞的INSR基因有明显下调作用,抗pre-S2抗体能部分阻断这种下调作用,此机制可以在分子水平部分解释肝源性糖尿病的发生。

关键词：肝炎病毒,乙型前S2蛋白受体,胰岛素基因调节

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